萘降解菌的分离、鉴定及降解特性的研究

该研究对乌梁素海水中高效萘降解菌进行筛选并分析了降解特性。筛选出8株以萘为唯一碳源和能源的萘降解菌,对其进行了形态观察、生理生化试验和16S rRNA基因序列分析。结果表明,这8株菌分别属于细杆菌属（Microbacterium）、短波单胞菌属（Brevundimonas）、红球菌属（Rhodococcus）、迪茨氏菌属（Dietzia）和假单胞菌属（Pseudomonas）。其中,菌株S2、S8、C4和C8在培养10 d内可降解88%、64%、65%和76%的质量浓度为3.5 g/L的萘。当以硝态氮为唯一氮源时,可不同程度地增加萘的降解率,微量元素和混合维生素对萘降解菌的生长及萘降解有一定的促进作用,在最适pH条件下萘降解效果较好。     

一株甲醇利用菌的分离、鉴定及特性研究

为了筛选高效利用甲醇的功能性微生物,从气化厂甲醇车间附近的土壤中分离筛选菌株,结合形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列对其进行鉴定,并对菌株生长及甲醇降解条件进行研究。结果表明,分离得到一株细菌,编号为4311,经鉴定为甲基球形菌属（Methylopila sp.）。该菌株最适生长条件为初始甲醇体积分数1.0%,初始pH值5.0,氯化钠添加量0.05%,氮源为蛋白胨,其添加量为2 g/L。在此优化条件下,菌株4311对1.0%（V/V）甲醇的降解率达到85%。     

机油降解菌的分离、筛选和鉴定

采用驯化、富集、平板划线等方法从厦门污水处理厂、福州祥坂污水处理厂的活性污泥和石油污染的土壤中分离、筛选到了3株机油降解菌。它们能够在以机油为唯一碳源的培养基中生长，对机油都有较强的降解能力。经形态观察和生理生化实验的初步鉴定，3株机油降解菌株分别为不动细菌属（Acinetobacter sp．）、假单胞菌属（Pseudomonas sp．）、动胶菌属（Zoogloea sp．）     

台湾乳白蚁纤维素降解菌的分离和鉴定

该研究从广西柳州本地的台湾乳白蚁（Coptotermes formosanus）体内筛选一株纤维素降解菌,通过形态观察、生理生化试验以及分子生物学对其进行鉴定,并采用滤纸片法及3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测定该菌株的纤维素酶活力。结果表明,筛选获得一株可在以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基上生长的菌株,命名为BW,并鉴定其为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）;菌株BW的纤维素酶活力最高,为（93.73±0.22）U/mL。     

血红蛋白降解菌的分离筛选与鉴定

为了从环境中筛选高效降解血红蛋白的菌株,采用鲜血琼脂平板,以产生溶血圈比值大小为判定标准,从南京某屠宰场下水道中分离到一株具有较强降解血红蛋白能力的菌株NJM4.经形态学观察、生理生化测定和16S rRNA基因分析(GenBank登陆号为EU234500),初步认为该菌株为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus).该菌株在血红蛋白溶液中可将其逐渐降解为小分子的多肽.在血红蛋白发酵培养基中于37℃、120 r/min培养24 h,降解率达53.64 %.     

一株新的尼古丁降解菌的分离鉴定及降解特性

针对降解高毒、高危害的尼古丁微生物种类较少的实际情况筛选出具有高尼古丁降解活性的菌株,探究其降解条件及降解特性,为尼古丁的生物降解提供新的微生物资源。从烟草种植大田土壤分离纯化得到一株具有高尼古丁降解能力的菌株,对其形态学、生理生化特征、16S rRNA基因序列同源性进行了分析鉴定,探究了不同条件下尼古丁降解特性并对其动态降解过程进行了HPLC分析。经鉴定命名为Stenotrophomonas sp.ZUC-3,适宜的发酵条件为：温度30℃、起始pH 7.0、接种量10%、培养转速180 r/min,此条件下尼古丁降解率可达到91.53%,HPLC分析显示了ZUC-3降解尼古丁过程的动态变化及其高效性。研究结果为尼古丁生物降解提供了新的微生物资源,对烟草行业可持续发展具有理论意义与实际应用价值。     

椰纤果发酵液中降解细菌纤维素酵母菌株的分离及鉴定

从被微生物污染的椰纤果发酵液中分离筛选出13株能够降解细菌纤维素的酵母菌株,并对这些菌株产生的纤维素酶粗酶液进行了酶活测定。选择羧甲基纤维素酶活(CMCA)和滤纸酶活(FPA)较高的酵母菌株3-1进行了鉴定,鉴定酵母菌株3-1为东方伊萨酵母(Issatchenkiaorientalis),菌株培养液CMCA为71.48IU,FPA为81.07IU。     

高活性纤维素降解菌的分离鉴定

从土壤中分离到6株产纤维素酶的细菌，进一步筛选培养获得1株酶活较高的菌株，定名为S3。对S3的初步分类学鉴定初步将其归为纤维单胞菌属（Cellulomonas）。     

一株中性内切纤维素酶产生菌的分离及鉴定

利用刚果红染色法从偏碱性土壤中分离产内切纤维素酶的菌株,通过内切纤维素酶(CMC酶)的发酵液酶活和酶促反应最适pH,复筛得到1株中性内切纤维素酶产生菌A8。经形态学观察、生理生化特征分析及分子生物学鉴定,A8菌株属于蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。其在50℃、pH7.0发酵96h条件下发酵液的中性内切纤维素酶酶活为141.70U/mL,是一株在食品加工中具有开发潜力的产中性内切纤维素酶菌株。      

纤维素分解菌BSX5的分离、鉴定及产酶条件

利用透明圈法从袋装降解的笋干中分离到一株分解纤维素的细菌菌株. 该菌株呈长杆状、革兰氏染色为阳性、产芽孢,命名为BSX5.其生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析,发现该菌株与Bacillus subtilis的同源性为99%,系统发育树分析与Bacillus subtilis遗传关系最近,确定该菌株为Bacillus subtilis. 采用以3,5-二硝基水杨酸（DNS）为显色剂、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）为底物,测定不同培养条件下BSX5菌株的酶活力,结果最适产酶时间为8-12 h,最适产酶温度为50 ℃,最适产酶pH值为5.5～6.5.     

Removal of Cd(II) ions by oxidized coconut coir

Biosorption potential of oxidized coconut coir (OCC) for removal of Cd(II) from aqueous medium at batch and column level was studied. Lignin and cellulose groups of coir were modified to acidic groups. Optimum biosorption was observed at pH 6. Isotherm data revealed that Langmuir gives best fit for experimental results with maximum adsorption capacity of 12.35 mg/g compared to unmodified coconut coir (5.29 mg/g). The column experiments were conducted as a function of flow rate, bed height, and influent Cd(II) concentration. Biosorption has best performance at 10 mg/L inlet concentration, 5 ml/min flow rate and 7 cm bed height.     

一种新型产纤维素酶菌种的分离鉴定

从江西生产豆渣菌的作坊采样,检测到一株分解纤维素的真菌(MC1),分离纯化后,再利用以纤维素为唯一碳源的选择性培养基培养,根据形态特征可鉴定为面包串珠霉(MoniliasitophilaMont.)。摇床发酵产酶实验表明,在30℃、160r/min的条件下摇瓶培养6d后,其所产纤维素酶系中的以羧甲基纤维素钠为底物的CMC酶活为4119U/mL,以微晶纤维素为底物的C1酶活为6833U/mL,以水杨素为底物的βG酶活为451U/mL。     

一株葡聚糖酶产生菌的分离选育及鉴定

利用葡聚糖平板初筛,三角摇瓶复筛,从土壤样品中中分离得到一株葡聚糖酶高产菌株P5,发酵酶活力可以达到2.5U/mL。菌株呈长杆状、革兰氏染色阳性、产芽孢;生理生化实验结果表明该菌株与枯草芽孢杆菌最为相近;16S rDNA基因序列包含1510个碱基对,同源性分析显示该菌株与枯草芽孢杆菌菌株最为相近,最高相似性为99%,基于16S rDNA基因序列的系统发育分析显示,该菌株与枯草芽孢杆菌菌株CD-6及YPM8的亲缘关系最近,根据以上多相分类结果鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌。     

发酵醋醅细菌菌株DX-2的分离、鉴定及生长特性研究

从取自山西的发酵醋醅中分离得到一株优势产酸细菌菌株,编号为DX-2,经革兰氏染色为阳性,杆菌,产芽孢。采用细菌通用引物对DX-2的16S rRNA基因进行序列扩增,通过克隆,测序及序列分析最终得到长度为1516bp的DNA片段。利用Clustalx1.8软件和MEGA4.0软件对DX-2及相近物种进行同源性比较和系统发育学分析,表明DX-2属于芽孢杆菌属(Bacillus),与蜡状芽孢杆菌Bacilluscereus YC-16聚为一支,序列相似性为99.8%,初步确定该菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。在培养温度为35℃,摇床转速为150r/min条件下,采用单因素试验方法,研究了不同碳源、氮源与pH值对菌株DX-2生长特性的影响,结果表明最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母膏,pH值为4.5时菌株生长最佳。最后对该菌株耐受乙醇浓度的能力进行了研究,结果表明该菌株耐受乙醇的最大浓度为10%vol。     

异养硝化-好氧反硝化菌株的分离、鉴定及其氨氮降解过程初探

该研究采用选择性培养基从汾河底泥中分离筛选异养硝化-好氧反硝化菌,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,并对其氨氮（NH4+-N）降解过程进行动态监测,测定NH4+-N降解过程中关键酶的基因及酶活。结果表明,分离筛选得到一株异养硝化-好氧反硝化菌,编号为ZH-2,其被鉴定为醋酸钙不动杆菌（Acinetobacter calcoaceticus）。该菌在NH4+-N降解过程中存在NO3--N和NO2--N两种中心代谢产物,其基因组中含有3种关键酶（氨单加氧酶（Amo）、硝酸盐还原酶（Nap）和亚硝酸盐还原酶（Nir））基因,在NH4+-N降解过程,这3种关键酶的比酶活分别为45.69 mU/mg、3.54 mU/mg和6.91 mU/mg。综上,初步确定A. calcoaceticus ZH-2的NH4+-N降解过程是NH4+-N→NH2OH→NO2--N→NO3--N→NO2--N→NO→N2O→N2的经典降解途径,为该菌的进一步推广应用提供了理论依据。     

一株植物乳杆菌的分离鉴定及应用

从湖南自然发酵的酸豇豆中分离出一株疑似乳酸菌菌株L4,提取其16S rDNA,并经测序、同源性分析和系统发育树构建等,对其属种进行鉴定。结果表明,菌株L4为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。通过耐盐、耐酸和降解亚硝酸盐实验发现,菌株L4可在10%食盐含量条件下生长,耐受pH 2.5,对亚硝酸盐的降解率高达99%。接种菌株L4发酵萝卜干,以自然发酵萝卜干为对照,对发酵萝卜干进行感官评定初步探究该菌株发酵萝卜干的特性。结果表明,菌株L4可以缩短萝卜干发酵周期,提高发酵萝卜干感官评分。     

1株酸浆豆腐中产蛋白酶菌种的分离与鉴定

以市售酸浆豆腐为样品,首先筛选样液适宜的稀释倍数,将样品稀释液接种于马铃薯葡萄糖平板和MRS平板进行纯培养,然后接种于脱脂牛奶培养基,以产透明圈为指标,再以酪蛋白为底物测定酶活,筛选分离产蛋白酶菌种,继而通过肉眼观察菌落形态、光学显微镜和电镜、显微镜观察菌体形态,进一步通过各种生理生化反应、ITS测序方法进行菌种鉴定。结果表明:25 g样品稀释至10^-5浓度适宜,在脱脂牛奶培养基中,温度28 ℃、有氧培养72 h后产生透明圈,酶活为9.6 U/mL;肉眼观察菌落为乳白色,呈绒毛状,有同心圈并呈放射线状,显微镜下节孢子呈单个或链状,扫描电镜观察菌丝体宽4~5.5 μm,孢子大小多数为(3.3~5.7) μm×(7.0~17.1) μm;根据生理生化反应结果,查阅《真菌鉴定手册》,鉴定为白地霉(Geotrichum candidum);ITS测序显示与白地霉同源性达100%。根据生长曲线可知,0~8 h,菌株处于延迟期;8~40 h,菌株处于对数期;40~68 h,菌株处于稳定期;68 h以后,菌株处于衰亡期。     

赊店老酒酒醅中高产纤维素酶菌种的分离鉴定及产酶条件优化

从赊店老酒酒醅中采用透明圈法筛选产纤维素酶的菌株,经过酶活力测定筛选出产纤维素酶能力最强的菌株,对其进行了形态学观察、生理生化试验和分子生物学鉴定,并通过单因素和响应面试验考察了不同条件对该菌株产纤维素酶能力的影响。结果表明,筛选得到产纤维素酶能力最强的菌株4-2,并被鉴定为特基拉芽孢杆菌（Bacillus tequilensis）。在液体发酵培养基中,该菌株最优产纤维素酶的条件为淀粉添加量3.5%,酵母粉添加量0.6%,初始pH 5.8,培养时间5 d,培养温度34 ℃。此优化条件下,该菌株产纤维素酶活力达3 101.83 U/mL,是优化前的20.69倍。     

玉米赤霉烯酮的分离鉴定及其降解特性研究

采用富集培养的方法从麦粒中筛选到一株玉米赤霉烯酮(ZEN)降解菌7D3-2,该菌株对ZEN的降解能力高达95%;通过对7D3-2形态、生理生化特性及16S r DNA、gyr A基因系统进化发育地位分析,该菌株被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。研究了初始p H、培养温度、接种量及ZEN初始质量浓度等环境条件对7D3-2降解ZEN的影响,结果表明:7D3-2降解ZEN的最适温度为30℃,最适p H为7.0;当接种量小于10%时,7D3-2对ZEN的降解率与接种量成正比;ZEN质量浓度在1.0~25.0 mg/L范围内,7D3-2对ZEN的降解差异不显著,当ZEN质量浓度大于25.0 mg/L时,ZEN降解率与ZEN初始质量浓度成反比,但是ZEN被降解的绝对量与其ZEN初始质量浓度呈正相关;降解物质的定域实验结果显示:7D3-2中降解ZEN的物质主要位于细胞外。7D3-2不仅对培养液中的ZEN具有降解效果,也能很好地降解玉米粉中的ZEN。本研究结果不仅可以丰富ZEN降解菌种质资源库,在粮食和饲料的ZEN生物脱毒方面还具有广阔的应用前景。