枇杷叶多糖的分离纯化及组分鉴定

提取纯化枇杷叶多糖,并对其组分进行研究。枇杷叶多糖提取液经大孔树脂除杂,醇沉后干燥即得枇杷叶可溶性总多糖。经DEAE-52纤维素柱层析及Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析,得到纯化后多糖,并采用Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱测定多糖的分子量,水解多糖后采用薄层层析对枇杷叶多糖进行组分鉴定及单糖的组成比例测定。通过DEAE-52柱层析得3个枇杷叶多糖酸性组分,分别经过Sephadex G-200柱层析得到3个乳白色组分,分别为PSL-1、PSL-2、PSL-3。3个组分的洗脱曲线均为单一对称峰,初步判断3个组分含有单一成分的多糖。PSL-1、PSL-2、PSL-3分子量分别约为700、500、400 k Da。经过薄层层析初步推断出PSL-1含有鼠李糖和葡萄糖,含量之比为1∶0.602;PSL-2含有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖,含量之比为1∶1.415∶1.408;PSL-3含有半乳糖和鼠李糖,含量之比为1∶1.03。     

枇杷多糖的提取纯化及理化性质初步研究

本文建立了枇杷多糖的提取纯化方法,并对提取的枇杷多糖进行了理化性质分析。枇杷多糖经40％乙醇分级得到的组分Lens 5,用Sephadex G-150凝胶柱层析得到单一峰,Lens 5的酸性水解液经纸层析和薄层层析分析,其单糖组成为葡萄糖和木糖,用Sephadex G-150凝胶柱层析法测得其相对分子量为43000道尔顿。     

枇杷多糖的提取纯化及理化性质初步研究

建立了枇杷多糖的提取纯化方法，并对提取的枇杷多糖进行了理化性质分析。枇杷多糖经40％乙醇分级得到的组分kns5，用Sephadex G-150凝胶柱层析得到单一峰，Lens5的酸性水解液经纸层析和薄层层析分析，其单糖组成为葡萄糖和木糖，用Sephadex G-150凝胶柱层析法测得其分子量为43000Da。     

香蕉多糖的分离纯化及其性质研究

本文建立了香蕉多糖的提取纯化方法,并对提取的香蕉多糖进行了理化性质分析。香蕉多糖经40%乙醇分级得到的组分Len5,用Seohadex G-150凝胶柱层析得到单一峰,Len5 的酸性水解液经纸层析和薄层层析分析,其单糖组成为葡萄糖和木糖,用Sephadex G-150 凝胶柱层析法测得其分子量为43000道尔顿。     

冬枣多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的：分离纯化冬枣多糖,并研究其组分、结构特征和抗氧化活性。方法：采用水提醇沉、脱蛋白脱色、DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化冬枣多糖;利用Sephadex G-100凝胶色谱柱进行纯度鉴定和分子质量的测定;通过紫外光谱、红外光谱、气相色谱法进行了初步结构分析;采用邻二氮菲法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）体系对纯化多糖进行抗氧化活性的研究。结果：冬枣多糖经DEAE-52分离和Sephadex G-100纯化得到2 个组分DPA和DPB,经Sephadex G-100鉴定均为均一组分,DPA和DPB分子质量分别为1.04×104、3.02×105 D,不含蛋白质和核酸,为吡喃型糖苷环骨架,DPA的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为6.66∶1.00∶6.75∶2.09;DPB的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为4.33∶10.90∶1.00∶3.25∶4.78;DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性,随着多糖质量浓度的增加,其抗氧化活性增强,在质量浓度为8 mg/mL时对羟自由基清除率分别为28.52%、78.79%,在质量浓度为0.4 mg/mL时对DPPH自由基清除率分别为9.97%、24.54%。结论：DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性。     

山药糖蛋白的分离纯化与鉴定

山药粗糖蛋白用DEAE-52纤维素层析纯化,得到了一种中性糖蛋白组分(GLP),用Sephadex G-75进一步进行层析;用薄层层析鉴定了GLP的纯度.用Sephadex G-75柱层析测定了GLP的分子量为89381D;薄层层析法测定了GLP的单糖组成,结果表明,GLP的单糖组成主要有: L-半乳糖、D-葡萄糖、D-甘露糖;对GLP进行了红外光谱扫描,其特征吸收峰再次表明该组分为一种糖蛋白.     

菜籽水解蛋白不同组分的体外功能性质研究

初步分析了水酶法工艺得到的菜籽水解蛋白的组成、体外抗氧化活性和抑制ACE活性,并用凝胶过滤色谱法分离水解蛋白得到不同组分,探讨了不同组分的体外抗氧化活性和抑制ACE活性与组分氨基酸组成、分子量分布的关系。结果表明,水解蛋白具有良好的体外功能性质,经Sephadex G-25分离后的9个峰中,峰2、峰4和峰5具有较好的体外功能性质,它们的分子量分布中90%以上低于1000,且含有较高量的疏水性氨基酸。     

谷朊粉活性肽的分离及其抗氧化性研究

为制备具有抗氧化活性的生物活性肽,采用中性蛋白酶和胰蛋白酶同时处理谷朊粉,对酶解产物进行超滤和葡聚糖Sephadex G-25凝胶柱层析分离,并对其各组分的抗氧化性进行研究,对抗氧化活性高的肽段进行分子量测定和氨基酸组成分析。结果显示,分子量小于3000Da的组分经葡聚糖Sephadex G-25凝胶柱层析以后得到2个肽段,其中WG-1具有最佳的DPPH.清除作用,清除率达到93%,氨基酸组成分析该组分中谷氨酸的含量较高。     

海洋枝顶孢霉BH0531代谢物对松材线虫形态和酶活的影响

使用海洋枝顶孢霉（Acremoniumsp.BH0531）活性代谢物处理松材线虫,通过线虫的形态、运动和酶活的变化对BH0531杀线虫机理进行初步探讨。结果表明,经BH0531代谢物处理后的线虫虫体严重扭曲,扭动频率显著提升,并随时间推移而趋缓,最终呈C形、新月形或直形死亡。酶活性测试表明,该菌代谢物对松材线虫体内的乙酰胆碱酯酶AChE具较强抑制作用,酶比活力由0.417 U/mg降至0.089 U/mg;ATP酶活力先升高后下降,处理2h酶比活力由0.447U/mg升至0.501U/mg,随着时间的持续又急剧下降至0.18 U/mg左右。这两种酶活力的变化情况与线虫处理后运动频率变化的观察结果相一致。     

兽疫链球菌荚膜多糖PCP-I的制备、特性分析及其体外抗氧化活性

从兽疫链球菌C55129菌株发酵液中提取到荚膜多糖粗品(CCP),通过DEAE-52纤维素阴离子交换柱和Sephadex G-100凝胶柱层析,从CCP中分离到中性糖组分PCP-I,得率为5.989%,分子质量为0.029 2×103k Da。气相色谱法结果表明PCP-I单糖组成及摩尔比为阿拉伯糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=0.99∶27.03∶11.84∶1.00。体外抗氧化实验结果显示,PCP-I有较强的螯合金属离子能力、还原力和抑制脂质过氧化作用,适度的清除DPPH·、超氧阴离子自由基(O-2·)和羟自由基(·OH)活性的能力。     

海洋枝顶孢霉BH0531发酵液对根结线虫卵及二龄幼虫的影响

实验以根结线虫的卵、卵囊和二龄幼虫（J2）为研究对象,对海洋枝顶孢霉（Acremonium sp.）BH0531发酵液处理根结线虫不同发育阶段的杀线作用进行了效果评价,并以J2幼虫为靶标,与市面上的灭线磷及阿维菌素的药效进行了初步对比。结果显示,在实验条件下,海洋枝顶孢霉BH0531发酵液对根结线虫卵囊和分散卵的孵化以及J2幼虫的活力均具有明显抑制作用,其对卵囊孵化的抑制作用达40.18%;对分散卵孵化的抑制作用可达84.28%;而对J2幼虫的杀线作用最为显著,校正死亡率高达97.41%,高于实验条件下灭线磷及阿维菌素的测定值,在根结线虫的生物防控方面显现出潜在的研究价值。     

海洋真菌BH0531对黄瓜促生长作用的研究

通过室内盆栽试验研究了海洋枝顶孢霉（Acremonium sp.）BH0531次生代谢产物对黄瓜根结线虫病的防治效果及对黄瓜植株生长的促进作用。实验以根结线虫（Meloidogyne incognita）侵染后的黄瓜为材料,在土壤中加入质量浓度为5 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL、40 mg/mL菌株BH0531发酵液40 mL,用等体积清水作为对照,测定黄瓜的株高、茎粗、叶片的可溶性蛋白及可溶性糖含量、叶绿素含量和根系活力。结果表明,在试验浓度范围内施入发酵液,对根结线虫病的防效最高达72.7%,同时施入发酵液显著增加叶片可溶性糖和叶绿素含量,提高黄瓜的根系活力。因此,海洋枝顶孢霉BH0531的代谢物不仅对黄瓜根结线虫病有显著的控制效果,而且对黄瓜生长有一定的促进作用。     

海洋枝顶孢霉BH0531对黄瓜根结线虫防治的微生态效应

测定了海洋枝顶孢霉BH0531发酵液在室内离体条件下对根结线虫的杀线效果,分析了盆栽试验条件下对黄瓜根结线虫指数、减退率及对土壤中微生物数量的影响。结果表明,发酵原液浓缩1倍时,其对根结线虫的校正死亡率高达96.2%;虫口减退率达到71.21%;发酵液对土壤中细菌和放线菌数量均有促进作用,细菌和放线菌数量分别最高达到1.24×108 CFU/mL及1.56×106 CFU/mL,而对真菌则表现出高浓度时的抑制作用,高浓度组真菌由原来的3.12×104 CFU/mL减少至8.67×103 CFU/mL;随着时间的延长,促进作用减弱,但对真菌的抑制作用未减弱。菌株BH0531发酵液可通过杀线作用、促进细菌和放线菌生长、以及降低土壤真菌化程度等微生态效应来实现对黄瓜根结线虫病的防治作用。     

杀线虫海洋枝顶孢霉BH0531发酵条件的响应面优化

以自主筛选出的杀线虫海洋枝顶孢霉BH0531为对象,对其发酵条件进行了响应面分析和优化研究。在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman试验筛选出影响杀线虫效果的因素为NaNO3、K2HPO4、发酵时间。通过Box-Behnken设计和响应面分析法优化以上影响因素并对其结果进行分析,最终得到最优发酵条件为NaNO3 3.4 g/L、K2HPO4 1.5 g/L、发酵时间130 h。在此优化条件下,经摇瓶发酵验证,优化后发酵液的杀线活性为88.00%,比优化前提高了22.77%。     

一株杀线虫活性海洋真菌BH-0531的培养特性及种属鉴定

从渤海湾底水中分离得到的一株具有杀线虫活性海洋真菌BH-0531,考察该菌株的培养特性并进行种属鉴定。结果表明,菌株BH-0531最适海水浓度为20%,最适培养基为20%海水琼脂培养基,最适氮源为硝酸钠,最适pH值为6～7,最适温度为26 ℃。根据菌株BH-0531的形态学观察结果和5.8S rDNA-ITS序列对比发现,菌株BH-0531与Acremonium potronii isolate 35（JX535064.1）高度同源（100%）,被鉴定为波氏枝顶孢霉（A. potronii）的海栖型变种：Acremonium potronii var. marine BH-0531。     

薤白多糖的分离纯化及组成分析

采用DEAE-纤维素离子交换柱层析和SephadexG-150凝胶柱层析,对薤白粗多糖(PAM)进行了分离纯化;利用醋酸纤维素薄膜电泳和凝胶过滤法鉴定精制薤白多糖纯度;硅胶薄层层析分析精制多糖的单糖组成。结果表明:DEAE-纤维素柱分别用水、0.1mol.L-1NaCl、0.5mol.L-1Na0H洗脱分得三种级分,即水洗级分(PAM-I)、盐洗级分(PAM-II)和碱洗级分(PAM-III);这三种级分再经过SephadexG-150柱进一步分离纯化,得三个主要级分PAM-Ib、PAM-IIa及PAM-III’;经醋酸纤维素薄膜电泳和凝胶过滤法鉴定,它们为均一的多糖;硅胶薄层层析分析显示,PAM-Ib主要由半乳糖和葡萄糖组成,PAM-IIa主要由半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖和鼠李糖组成,PAM-III’主要由半乳糖、葡萄糖和木糖组成。     

海洋胶红酵母菌CD-008产超氧化物歧化酶发酵条件优化及酶分离纯化

在单因素试验基础上,结合Plackett-Burman、Box-Behnken设计及响应面分析法进行回归分析以确定海洋胶红酵母菌Rhodotorula sp. CD-008产超氧化物歧化酶最佳发酵条件,并通过盐析、超滤离心、Sephadex G-100凝胶过滤层析研究了酶的分离纯化条件。结果表明,pH、转速、温度对酶活力有显著影响,最优发酵条件为pH 5.34、转速150 r/min、温度21.40 ℃,优化后发酵液酶活力达到6 430.52 U/g湿菌体,比优化前提高了1.53倍。粗酶液经65%饱和度的硫酸铵盐析、超滤离心、Sephadex G-100凝胶过滤层析后获得的SOD比酶活达到419.90 U/mg,纯化倍数为9.60倍,蛋白回收率为8.2%。SDS-PAGE凝胶电泳显示,纯化后的SOD的分子质量约为37.5 ku。     

抗白色念珠菌海洋真菌的筛选及抑菌活性初探

实验以白色念珠菌为对象,对从渤海湾不同站位分离获得的55株海洋丝状真菌进行了抗真菌活性菌株的筛选。从中筛选得到了BH431、BH515、BH531和BH09721 4株抑菌活性较高的菌株,并进一步对不同浓度发酵液的抑菌活性及代谢物性质进行了检测。结果显示,4株海洋真菌对野生型白色念珠菌SC5314均具有较强抑菌活性,其最小抑菌浓度分别为 65 g/mL、19 g/mL、54 g/mL、23 g/mL;其中BH431和BH515菌株还显示出对基因敲除型菌株RM1000的抑菌活性,最小抑菌浓度分别为 32 g/mL、39 g/mL。4株海洋真菌所产生的活性代谢物具有较好的酸碱适应性,活性物质分子质量＜6 000 u;其中BH431菌株的活性代谢物还具有良好的热稳定性。     

肌酐水解酶菌株S-09发酵条件优化及酶的分离纯化

该实验以海洋来源的微小杆菌（Exiguobacterium sp.）S-09为出发菌株,对其发酵培养基和产酶条件进行优化。并将粗酶液经硫酸铵盐析、透析、超滤离心和Sephadex G-100凝胶过滤层析进行分离纯化。结果表明,其最佳发酵培养基为0.5%的肌酐作为碳源、0.3%胰蛋白胨和0.2%玉米浆作为复合氮源,诱导物肌酸含量为0.3%;其最佳发酵条件为作用pH值7.5、温度25 ℃、装液量50 mL/250 mL、接种量3%。Fe2+和Mn2+能显著促进产酶。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）凝胶电泳结果显示,纯化后的肌酐水解酶分子质量为24.3 ku。