动物双歧杆菌乳亚种BZ25的安全性评价

从贵州特色香猪里筛选出耐酸、耐胆盐和降胆固醇能力较高的动物双歧杆菌乳亚种BZ25,对其进行安全性评价,包括急性毒性试验、药物敏感性试验、质粒提取、氨基酸脱羧酶活性检测和溶血试验。结果表明,该菌株无急性毒性,无质粒,对青霉素类抗生素普遍敏感,氨基糖苷类抗生素除新霉素外,均表现耐药,对四环素抗生素、大环内酯类抗生素和头孢类抗生素均表现敏感,不产生物胺,没有溶血现象。初步确定了菌株的安全性,对开发相应益生菌产品具有一定参考价值。     

具有降解胆固醇能力的益生菌菌株筛选

益生菌是通过多种作用机制来提供功效作用,其中包括提供胃肠道保护屏障,改变肠道内环境p H来提供非致病菌的增殖,从而增强宿主的免疫应答能力,产生抗菌物质与其在受体肠道中进行竞争。乳酸菌对于宿主肠道上皮细胞的黏附性具有菌株特异性而并非宿主特异性,由此可以采用体外模型来筛选所诉求的益生菌。双歧杆菌的黏附过程首先是通过非特异性接触,之后与受体结合,实验过程主要是通过菌株对胞外机制的黏附能力进行筛选具有高黏附特性的Bifidobacterium lactis。采用20株分离自健康人体肠道的Bifidobacterium lactis进行筛选,并进一步从具有功能性的菌株进行了高黏附性筛选、耐酸耐胆盐等筛选,其中筛选出1株各方面均具有良好抗逆性的Bifidobacterium lactis BLa80,对肠道上皮细胞的黏附率达到1.1%,胆固醇降解能力达到34.56%;非外源性保护条件下胃酸p H环境下的存活率达到21.47%,胆盐耐受性达到29.3%。所筛选出的菌株经过中国微生物研究所鉴定为乳双歧杆菌Bifidobacterium lactis,并命名为BLa80。     

降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定与益生特性评价

目的：从婴儿粪便和发酵食品中筛选具有高效降胆固醇能力且益生特性优异的乳酸菌。方法：从20份婴儿粪便、8份传统发酵泡菜和4份金华火腿样品中初步筛选到乳酸菌102株,采用气相色谱法测定供试菌株的降胆固醇能力,菌株ZY08和I631的降胆固醇能力显著高于（P<0.05）标准菌株（ATCC 43121）;采用16S rDNA测序对这2株乳酸菌进行鉴定,评价菌株的酸耐受性、胆盐耐受能力、抗生素敏感性及抗菌活性。结果：筛选得到2株高效降胆固醇乳酸菌：植物乳杆菌ZY08和发酵乳杆菌I631,胆固醇降低率分别为67.45%和63.19%。在pH 1.5和pH 3.0的条件下培养6 h,菌株ZY08和I631的活菌数均大于6 lg（CFU/mL）。2株菌对3,5及1.0 g/L胆盐具有一定的耐受性,胆盐耐受能力均在80%以上（胆盐含量为3 g/L）;对常见的8种抗生素（青霉素、氨苄青霉素、头孢唑林、丁胺卡那、庆大霉素、红霉素、复方新诺明、氯霉素）都不具备耐药性,对人体健康不存在潜在威胁;2株菌的代谢产物对4种肠道致病菌（金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠杆菌O157∶H7、鼠伤寒沙门氏菌）具有一定的抑制作用。结论：获得具有高效降胆固醇能力的植物乳杆菌ZY08和发酵乳杆菌I631,为功能性乳制品的开发提供菌株来源。     

动物双歧杆菌乳亚种BZ11的耐氧驯化及降胆固醇性能的研究

为了提高动物双歧杆菌乳亚种BZ11对有氧环境的耐受性,采用逐渐增加培养基中的氧分压和有氧、厌氧条件下交替培养两种方案对其进行了耐氧驯化。通过对驯化前后菌株的生长特性进行分析得出逐渐增加培养基中的氧分压的驯化方案取得了更好的效果。经最优方案驯化后的菌株在有氧条件下培养20 h后,活菌数可达到6.30×10~8CFU/m L,是初始菌株的2.24倍。驯化后菌株的降胆固醇率为27.31%±0.80%,与初始菌株相比没有显著性差异(P0.05)。通过鉴定得出,动物双歧杆菌乳亚种BZ11在耐氧驯化前后保持了相似的形态及生理生化特征。因此,驯化后的菌株有望作为1株潜在益生菌被开发利用。     

体外筛选降胆固醇双歧杆菌实验

测定了实验室保藏9株食品级双歧杆菌体外降胆固醇的能力以及耐酸、耐胆盐和细胞粘附的益生特性.结果表明,9株受试菌株具有良好的耐酸、耐胆盐和细胞粘附特性,且5株菌降胆固醇均达到50%以上.从中选择6#菌株作为今后益生菌制剂和功能性乳制品开发的潜在菌种.     

高效降胆固醇乳酸菌的筛选

研究了25株嗜酸乳杆菌在MRS-CHOL培养基中对胆固醇的降解量,降胆固醇的能力,以及对酸、胆盐的耐受性。实验表明:所有实验菌株均有降解培养物中胆固醇的能力,其中有6株实验菌对培养物中胆固醇的降解率大于40%,这6株菌对胆固醇的脱除效力也较高,同时对这6株菌的耐酸、耐胆盐,以及对胆固醇的脱除能力进行了比较,筛选出降胆固醇能力较强同时对酸和胆盐耐受性较强的嗜酸乳杆菌1株。     

母乳来源益生菌的筛选及潜在益生特性研究

益生菌能够维护肠道健康,为宿主提供多种健康益处。为了筛选出具有益生特性的优良菌株,该研究从母乳中分离筛选出22株乳杆菌和3株双歧杆菌。通过耐酸耐胆盐能力测试,筛选出7株菌株,并对其进行抗生素耐药性和致病菌抑制能力的测定。结果显示,除菌株M33外其余菌株都有较好的耐酸能力;鼠李糖乳杆菌M53和M60,副干酪乳杆菌M71,植物乳杆菌M113和3株双歧杆菌耐胆盐能力较好,其中M53和短双歧杆菌grx05耐胆盐能力较高,达到45.72%和75.54%;菌株M71和grx05对8种抗生素敏感,菌株M53,M118和S18对6种抗生素敏感,具有较高的安全性;菌株M53对3株革兰氏阳性菌和2株革兰氏阴性菌有明显的抑制效果,菌株grx05对3株革兰氏阳性菌和1株革兰氏阴性菌有明显的抑制效果。综合分析,鼠李糖乳杆菌M53和短双歧杆菌grx05有希望作为具有益生特性的菌株应用到发酵食品或益生菌制剂开发。     

高效降胆固醇降甘油三酯乳酸菌的分离鉴定和功能分析

筛选出高效降胆固醇降甘油三酯(Triglyceride,TG)菌株,为新型药物、保健食品的研制提供优良菌株。从6种西北特有样品中筛选分离出乳酸菌,采用磷硫铁比色法测定菌株降胆固醇能力,并测定菌株降甘油三酯能力,通过抑菌实验、耐酸、耐胆盐及小鼠体内毒性试验研究菌株各项性能,利用生理生化及16S rDNA法对菌株进行鉴定。结果表明,本试验筛选出3株高效降胆固醇降甘油三酯乳酸菌,其中菌株ZL010降胆固醇、降甘油三酯效果最强,蛋黄中胆固醇的降解率为73.65%,高纯度胆固醇降解率为40.06%,甘油三酯降解率为5.10%。3株菌都具有很好的抑菌、耐酸、耐胆盐能力,菌株经生理生化及16S rDNA鉴定ZL005为耐久肠球菌(Enterococcus durans),ZL010为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),ZL016为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)。小鼠毒性试验表明,菌株无毒副作用,小鼠各脏器一切正常,菌株可用于降脂降胆固醇保健药品及功能食品的制备。     

具有降胆固醇功能的罗伊氏乳杆菌的筛选及其益生作用

为获得具有较强降胆固醇功能的益生菌株,试验从内蒙古呼伦贝尔满洲里通达牧场制作的奶豆腐中筛选分离菌株,并采用邻苯二甲醛法测定菌株降胆固醇的能力,从中选出降胆固醇能力强的菌株,通过形态学鉴定、生理生化及16S rDNA对菌株进行鉴定,并测定了其耐受酸、胆盐和胃肠液的能力。结果筛选分离出5株具有降胆固醇功能的菌株,其中一株菌对胆固醇降解能力最强,降解率达50.60%,经鉴定此株菌为罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）,将其命名为HCS02-001（CGMCC No. 19746）;经对酸、胆盐及胃肠液的耐受试验,该株菌在pH 3.0和pH 2.0的环境中培养17 h后存活率分别为86.80%和85.52%;在0.30%、0.50%的胆盐浓度环境中培养17 h后存活率分别为97.42%和95.17%;在人工胃液中作用3 h,存活率为96.74%;在人工肠液中作用4 h,存活率高达98.41%。该研究筛选出了一株具有较好降胆固醇功能的罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）,其具有较强的耐受酸、胆盐环境和胃肠液的能力,对关于降胆固醇功能方面的产品研究开发具有重要意义。     

降胆固醇双歧杆菌的研究进展

双歧杆菌是人体中最有益的益生菌,尤其是降胆固醇双歧杆菌对降低心脑血管疾病具有重要意义。所以综述了降胆固醇双歧杆菌的研究进展。重点探讨了如何有效筛选到降胆固醇双歧杆菌,如何获得耐氧的双歧杆菌,如何对双歧杆菌进行高密度发酵,以及双歧杆菌如何降胆固醇,以期能给从事这方面研究的学者有所启示。可以通过选择合适样品后利用选择性培养基进行培养并结合双歧杆菌形态学特征和降胆固醇试验筛选到降胆固醇双歧杆菌。对于筛选到的降胆固醇双歧杆菌可通过耐氧驯化、微胶囊化技术和双层包埋技术而获得耐氧双歧杆菌。而且,可通过培养基优化和发酵方式控制来获得高浓度的降胆固醇双歧杆菌。关于双歧杆菌的降胆固醇机制主要有共沉淀作用、吸附与结合作用和同化作用等。     

传统酵素源高效降胆固醇菌株的筛选、鉴定及胆盐水解酶活性分析

目的:从传统酵素中分离出具有高效降胆固醇能力的菌株,并进行鉴定和降脂作用分析.方法:采用MRS、M17和PDA培养基筛选菌株,测定菌株胆盐耐受性、耐酸性、疏水性、自凝聚力、胆盐水解酶活性及降胆固醇能力,分析筛选菌株的降脂作用.结果:分离出51株菌,其中S-8、M-7、M-16菌的降胆固醇性能较好,胆固醇降低率分别为25...     

Characterisation of a Bifidobacterium strain with acquired resistance to cholate--a preliminary study

The susceptibility levels against bile salts (ox gall) and sodium cholate of 19 Bifidobacterium strains from different origins ranged between 0.125% and 2.0% and 0.05% and 0.4%, respectively. Seven of these strains were subsequently selected for the isolation of sodium cholate resistant derivatives by exposure to gradually increasing concentrations of this compound. Derivatives resistant to at least 1.2% of cholate were obtained from Bifidobacterium bifidum CECT 4549 and B. bifidum M6. Further analysis of the CECT 4549 derivative indicated that the phenotype induced was stable; the enzymatic activities analysed remained unchanged and no major rearrangements of chromosomal DNA were produced. However, the cells of the resistant derivative were smaller and more regular in average size than those of the original strain. In addition, the derivative had lost the ability to use lactose, fructose and galactose, and showed reduced expression levels of two membrane proteins of 78 and 114 kDa. Finally, the resistant strain displayed higher survival and lower growth inhibition in the presence of cholate than the original strain.     

Selection of acid tolerant bifidobacteria and evidence for a low-pH-inducible acid tolerance response in Bifidobacterium longum

Acidity is an environmental condition commonly encountered by lactic acid bacteria and bifidobacteria in the gastrointestinal tract and fermented foods. In the present study, 22 strains of Bifidobacterium were screened for acid tolerance in artificial gastric juice (AGJ, pH 3.0) and fermented milk. AGJ tolerance was found to be strain-specific, with a pronounced variation among the strains. Several strains with a high survival rate in AGJ that belonged to Bifid. longum, Bifid. breve and Bifid. adolescentis were selected. Among them, only strain BL1 of Bifid longum was found to possess a high survival rate in fermented milk during refrigerated storage. Strain BL1 exhibited a survival rate of more than 25% in AGJ at pH 3.0 for 2 h and maintained a viable cfu level of more than 10(8) per gram of product in fermented milk (pH 4.6) under refrigerated conditions for 2 weeks. The acid tolerance of strain BL1 was found to depend on the final growth pH (<4.5). Rapid loss of acid tolerance was observed when the cells were shifted from acid to neutral conditions by addition of NaOH. Strain BL1 cells were able to maintain much higher intracellular pH under acid conditions, in comparison with those of AGJ sensitive mutant (BL1-S) or cells that lost acid tolerance following pH shifting from acid to neutral conditions. These results suggested that a cytoplasmic pH homeostasis system may function in the acid tolerance response in this strain.     

高产γ-氨基丁酸的双歧杆菌的筛选及对抑郁细胞模型的改善作用

为了筛选出具有缓解抑郁作用的菌株,本研究以94株双歧杆菌为研究对象,以胆盐水解酶活性、抗生素耐性、抗逆性、粘附性作为益生菌评价的基本指标;以高产γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)作为潜在抗抑郁症菌株的筛选指标;最后通过体外抑郁细胞模型试验,研究菌株对抑郁细胞模型的改善作用,进而评价菌株改善抑郁的潜力。结果显示:13株双歧杆菌的胆盐水解酶活性较高,且都不具有种属特异性耐性之外的抗生素耐性。耐酸耐胆盐实验证明:双歧杆菌ZT3、84和95都具有较高的抗逆性能;粘附结果表明:双歧杆菌91、92、95和98具有较强的粘附能力,粘附能力分别为:19.34、33.77、23.23、20.46 CFU/Cell。13株双歧杆菌产GABA能力检测结果显示,双歧杆菌98和95的GABA的产量较高,分别为285.0和232.8 mg/L。抑郁细胞模型试验结果显示:高、中、低剂量高产GABA的双歧杆菌98都具有缓解CORT诱导的细胞损伤的能力,而只有高剂量的双岐杆菌95可以缓解CORT诱导的细胞损伤。由于双歧杆菌98、95具有安全的抗生素耐受范围,较高的酸、胆盐耐受性和粘附能力以及高产GABA和缓解细胞模型损伤的能力,因此,其可以作为潜在的改善抑郁症状的菌株。     

一株强吸附胆固醇乳酸菌的分离鉴定及益生特性研究

以健康黔北黑猪肠道黏膜内容物、健康成年人粪便和自然发酵泡菜为原料,分离筛选筛选出具有强降胆固醇效果的乳酸菌,并对其进行形态学观察及分子生物学鉴定。结果表明,从猪肠道黏膜中分离得到1株具有强胆固醇吸附能力的菌株,编号为R-15,其被鉴定为植物乳杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）。菌株R-15的胆固醇降解率与其生长量（OD600 nm值）正呈相关,主要机制是吸附作用。当吸附时间为4.0 h时,活菌与死菌的胆固醇吸附率相近（70%）。对抗生素敏感性存在差异,对诺氟沙星、环丙沙星、庆大霉素等抗生素耐药,存在多重耐药机制;可耐受30～45 ℃的温度,60 ℃热处理30 min其存活率在40%以上;经pH2、0.3%牛胆盐、人工胃肠液处理6 h后活菌数对数值分别减少1.34、2.05、1.54、1.05,表明该菌株具有一定益生特性。     

来宾酒糟酸菜中降胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及发酵工艺研究

该研究采用钙溶圈法及MRS-胆固醇培养基从来宾酒糟酸菜汁中分离筛选具有降胆固醇能力的乳酸菌,通过形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,同时对其耐酸性、耐胆盐性能进行研究,并以胆固醇去除率为考察指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选得1株具有去除胆固醇能力的乳酸菌,编号为XL-02,经鉴定,菌株XL-02为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,其具有较好的耐酸能力和胆盐耐受性。在pH2.0的酸性环境下培养24 h,菌株存活率为3.14%;在胆盐含量为0.3%条件下培养24 h,菌株存活率为12.17%。菌株XL-02去除胆固醇的最优发酵条件为以MRS液体培养基为发酵培养基,初始pH值6.0,接种量4%,发酵温度39 ℃,发酵时间72 h。在此优化条件下,胆固醇去除率为（61.56±0.08）%。     

降胆固醇乳酸菌的筛选及其益生元干预生长作用分析

本研究从传统自然发酵的酵素饮品中分离筛选出一株高效降胆固醇菌株,该菌株具有较好的胆盐耐受性和耐酸能力。在pH3的酸性环境下,耐酸率为71.53%,该菌株能够长时间耐受胆盐环境,培养16h的胆盐耐受率为42.09%。以二甲苯为吸附剂,疏水率为35.91%,有较好的黏附特性;益生元不仅能够促进菌株生长,而且可显著提高降胆固醇能力。4种益生元中乳果糖促进生物量增加幅度最大,培养至16 h时生物量达到最高。乳果糖对菌株产酸性能影响最显著,pH值可降至3.56,胆固醇去除率达41.10%。该菌株对菊粉的利用率低,说明菌株对不同益生元具有选择性代谢。菌株经形态学观察和16S rDNA鉴定为副干酪乳杆菌,并命名为Lactobacillus paracasei S0940。本研究为进一步研究体内降脂能力以及开发功能性乳酸菌食品提供理论依据。     

牦牛曲拉源乳酸菌的耐受性与抑菌性能比较

以源于牦牛曲拉的6株益生乳酸菌为研究对象,比较了耐酸能力、耐胆盐能力、耐渗透压能力和抑菌性能。结果表明:6株乳酸菌菌株的耐酸能力、耐胆盐能力、耐渗透压能力和抑菌性能各不相同。菌株G2、G4、Q1对酸性环境的耐受性最好,G2和G4的耐胆酸盐的能力最强,G2、G4、Q1对高渗透压的耐受性较强,所有菌株在模拟胃肠液环境下的存活率均在90%以上;菌株Q2对大肠杆菌的抑菌效果最强,菌株Q1次之;菌株Q1和Q2对金黄色葡萄球菌的抑制效果较好,其次是菌株G2;对沙门氏菌抑菌作用最强的为菌株Q2,抑菌能力最差为G3;对单增李斯特菌抑菌作用最强的为菌株G4。研究结果可为牦牛曲拉源益生乳酸菌的应用提供理论依据。