肉桂酸抑制酪氨酸酶催化反应的动力学研究

在30℃,pH=6.8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中,采用酶动力学方法研究了肉桂酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制动力学.实验结果表明,肉桂酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有良好抑制作用,对单酚酶和二酚酶活力的相对抑制率达到50%的肉桂酸浓度(IC50)约分别为0.37 mmol.L-1和0.61 mmol.L-1,比熊果苷抑制二酚酶活性的IC50值5.3 mmol.L-1小得多.肉桂酸能明显延长单酚酶的迟滞时间,0.4 mmol.L-1肉桂酸能使迟滞时间由1.1 min延长至2.3 min.Lineweaver-Burk图显示肉桂酸对二酚酶的抑制作用表现为非竞争性抑制,表观米氏常数(Km)为0.68 mmol.L-1,抑制常数(Kl)为058 mmol.L-1.     

桑叶黄酮抑制酪氨酸酶活性的动力学研究

采用超声波辅助法,以体积分数为60%的乙醇水溶液从新疆桑叶粉末中提取桑叶黄酮。以L-多巴为底物,采用酶动力学方法研究该提取物对酪氨酸酶的抑制作用。实验结果表明,桑叶黄酮提取物对酪氨酸酶有较强的抑制作用,其IC50为0.2 g·L-1。其对酪氨酸酶的抑制作用表现为可逆效应,抑制类型为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为366和873 mg·L-1。DPPH实验显示新疆桑叶黄酮提取物具有一定的抗氧化作用,对DPPH自由基氧化作用相对活性的IC50为25 mg·L-1,与VC效果相当。     

鹰嘴豆异黄酮对酪氨酸酶的抑制动力学

采用酶动力学方法研究了鹰嘴豆异黄酮对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制动力学效应.结果表明,鹰嘴豆异黄酮对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,使单酚酶和二酚酶活力下降50%的鹰嘴豆异黄酮质量浓度(IC50)分别为0.07 mg/mL和0.03 mg/mL.在降低酪氨酸酶酶活的同时,鹰嘴豆异黄酮能明显延长单酚酶的迟滞时间,质量浓度为0.08 mg/mL的鹰嘴豆异黄酮能使其迟滞时间由1.26 min延长至2.62 min.Lineweaver-Burk图显示鹰嘴豆异黄酮对二酚酶的抑制作用表现为可逆的竞争性抑制.     

中药降香对酪氨酸酶激活作用的动力学研究

酪氨酸酶是生物合成黑素的主要酶。降香有促进酪氨酸酶活性的作用。通过对中药降香的水提取液和乙醇提取液促进酪氨酸酶活性作用的观察研究及降香提高酪氨酸酶活性的动力学观察研究，得到Lineweaver-Burk曲线、动力学回归方程及米氏常数Km值。为研究中药有效成分激活黑素细胞的机理奠定了基础。     

甘草有效成分抑制酪氨酸酶活性的研究

乌拉尔甘草的甲醇提取物经萃取、聚酰胺和硅胶柱层析等分离，测定了每一分离组分对酪氨酸酶活性的抑制率：其中，苯萃取物对酪氨酸酶活性的抑制率为0；水不溶物对酪氨酸酶活性的抑制率为-98．3％；甘草素和异甘草素对酪氨酸酶活性的最大抑制率分别为62．2％和988％，ICmax分别为1．28g/L和2．57g/L，IC50分别为0．84g/L和0．45g/L.     

绿原酸对酪氨酸酶活性影响及动力学研究

测试了绿原酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的影响。实验结果表明,绿原酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有激活作用,使单酚酶和二酚酶相对酶活力增加50%的绿原酸质量浓度(IC50)分别为10.5 mg/L和1.1 g/L。绿原酸能消除单酚酶的迟滞时间,对二酚酶的激活作用表现为竞争性激活,激活常数KI=1.91 g/L。     

对羟基肉桂酸合成新工艺

以对羟基苯甲醛和丙二酸为原料,环己烷为溶剂,吡啶和苯胺为催化剂,经Knoevenagel缩合反应合成对羟基肉桂酸,收率可达93.6％.最佳工艺条件为:n(对羟基苯甲醛):n(丙二酸):n(吡啶):n(苯胺)=1∶1.1∶1.6∶0.1,分水回流反应lh.本工艺的显著优点是产物易分离且母液无需处理就能循环使用,循环使用5次,平均收率为93.4％,新工艺符合低成本绿色环保的要求.     

对羟基肉桂酸的合成及工艺条件优化

研究了标题化合物的合成并对工艺条件进行了优化,以对羟基苯甲醛和丙二酸为原料,甲苯、吡啶作为溶剂,苯胺和哌啶作催化剂,通过Knoevenagel缩合反应合成了标题化合物.同时通过正交实验探讨了反应物的物质的量比、吡啶与对羟基苯甲醛的物质的量比、反应温度、反应时间等影响因素对对羟基肉桂酸产率及纯度的影响,确定了最佳工艺条件为:反应温度为85℃,反应时间为1.0 h,丙二酸、吡啶、甲苯、苯胺、哌啶与对羟基苯甲醛的物质的量比为1.5:2.73:1.72:0.094:O.025:1.O,产率可达93.24%(以对羟基苯甲醛计),产品的纯度可达99.O%.与传统合成方法比较,优化后的合成方法具有反应时间短、产率高等优点.     

姜黄素多酚类似物对酪氨酸酶抑制活性的研究

酪氨酸酶抑制剂广泛应用于皮肤美白化妆品中.通过芳香醛分别与丙酮和环戊酮在酸性条件下催化缩合,合成了两个系列共10个姜黄素多酚类似物(A1-5和B1-5),并研究了其对酪氨酸酶的抑制活性.结果表明,含邻二酚羟基的姜黄素多酚类似物(A4和B4)对酪氰酸酶具有很强的抑制作用,半抑制浓度(IC50)分别为1.19,1.24 μmol/L,比曲酸(IC50为28.59μmoL/L)的活性强20多倍.抑制动力学研究表明,该类姜黄素多酚类似物对酪氨酸酶的抑制属于非竞争性抑制类型.     

茶皂素的纯化及抑制酪氨酸酶活性的研究

研究了茶皂素的纯化及纯化产物体外对马铃薯酪氨酸酶催化L-DOPA合成多巴醌的抑制作用及其机理。结果表明质量浓度为100 g/L时,市售茶皂素、经大孔树脂纯化的茶皂素TS及2种层析分离得到的茶皂素TS1和TS2对酪氨酸酶的抑制率分别为51.29%,90.06%,94.13%和82.47%;TS和TS1对酪氨酸酶IC50分别为48和40 g/L,抑制作用表现为可逆竞争性抑制,对酪氨酸酶的抑制常数分别为137和101 g/L。     

当归提取物对酪氨酸酶的抑制作用

以乙醇为提取剂,用高压均质技术提取当归,采用酶动力学方法研究了当归提取物对酪氨酸酶活力的抑制效应。结果表明,当归提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,相对抑制率达到50%的当归提取物质量浓度(IC50)分别约为0.32 g/L和0.58 g/L,比熊果苷抑制二酚酶活性的IC50值1.44 g/L有效得多。Lineweaver-Burk图显示当归提取物对二酚酶的抑制作用表现为竞争性抑制,对酪氨酸酶的抑制常数(KI)为0.24 g/L。     

Synthesis and characterization of novel biodegradable polymers composed of hydroxycinnamic acid and D,L-lactic acid

D,L -Lactic acid (DLLA) was polycondensed with 4-hydroxycinnamic acid (4HCA), a derivative of cinnamic acid, to prepare a novel functional biodegradable polymer. The polymer was prepared using two different methods, the solvent method, which used acetic anhydride as the solvent, and the direct method. White and brown-colored copolymers were obtained by these two methods, respectively. ¹H-NMR spectroscopy and UV-visible spectroscopy revealed that the double bond of 4HCA was almost completely destroyed when the copolymer was prepared by the direct method. On the other hand, copolymers in which the double bond was preserved in the 4HCA–DLLA copolymer were successfully obtained using the solvent method. The solubility of the copolymers obtained by the solvent method in organic solvent was poor. When the copolymer was prepared under a 4HCA:DLLA ratio of 20:80 using the solvent method, the resulting copolymer had high solubility in organic solvents and the double bond was preserved. Moreover, it was confirmed that the 4HCA–DLLA copolymer synthesized by the solvent method was both photoreactive and biodegradable. The 4HCA–DLLA copolymer is expected to be used as basic material for tissue engineering and drug delivery systems, in addition to applications as an orthopedic matrix and a degradable plastic. © 2001 John Wiley & Sons, Inc. J Appl Polym Sci 82: 2357–2364, 2001     

羟基甲氧基苯甲醛在化妆品中起增白作用的研究

采用酶学动力学方法研究2-羟基-4-甲氧基苯甲醛(HMB)对酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力的抑制效应.结果表明,HMB对酪氨酸酶单酚酶的效应只表现对稳态活力有明显的抑制作用,但对酶作用的迟滞时间没有影响;随着抑制剂浓度增大,单酚酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)为0.352 mmol·L-1.HMB对二酚酶的抑制作用表现为可逆过程,IC50为0.164 mmol·L-1;抑制作用机理研究表明HMB是一种混合型抑制剂,其抑制常数KI和KIS分别为0.131 mmol·L-1和0.253 mmol·L-1.通过对HMB抑制酪氨酸酶机理的研究,阐明HMB作为化妆品添加剂的增白作用机理.     

香草酸对酪氨酸酶催化活性的抑制作用

采用酶动力学方法研究了香草酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制效应。结果表明,香草酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的香草酸浓度(IC50)约分别为1.3 mmol/L和2.6 mmol/L。香草酸能明显延长单酚酶的迟滞时间,2 mmol/L香草酸能使迟滞时间由1.1 m in延长至4.7 m in。香草酸对二酚酶的抑制作用表现为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为1.76 mmol/L和8.57 mmol/L。     

中药白芨提取物对酪氨酸酶的抑制作用

通过从水和乙醇中选取一种有效的提取剂,用回流法和超声波提取法提取中药白芨中的有效成分,分别以左旋多巴(L-DOPA)、邻苯二酚为底物,研究了白芨提取物对酪氨酸酶活性的影响。结果表明,白芨提取物对酪氨酸酶活性有抑制作用,66.7 mg/mL的超声波水提取物比醇提取物对酪氨酸酶有更为明显的抑制作用,其对酪氨酸酶的抑制率为62%,IC50值为28 mg/mL。     

荔枝壳提取物对酪氨酸酶的抑制作用

通过对酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率的测定,研究了荔枝壳粉的乙醇萃取液对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,酶抑制率达到50%(酪氨酸酶活力下降50%)时所需的澄清液中多酚的质量浓度为0.052 mg/mL。复合抑制剂的酶抑制作用的Lineweaver-Burk线特点的分析结果显示,荔枝壳粉提取物对酪氨酸酶的抑制作用不是单一成分的抑制作用,而可能是多种抑制成分共同作用的结果。     

臭氧与2，4-二氯苯氧乙酸的直接反应动力学

随着现代农业的发展,农药大量研制及施用,农药污染日益严重,对农药污染的控制成为环境研究领域努力探索的课题．2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）是使用较广的除草剂,具有非挥发性和可溶性,自然降解较慢,施用后易淋溶迁移导致地下水或地表水污染．2,4-D及其代谢产物如2,4-二氯苯酚等不仅有生物毒性,还能导致基因伤害,已对人类健康和自然环境构成了明显威胁．     

天然产物对酪氨酸酶的抑制及抑制机理的研究进展

介绍了酪氨酸酶的结构及酶促褐变机制；重点阐述了对酪氨酸酶抑制的特征及抑制机理。酪氨酸酶的抑制特征为可逆抑制，分为竞争性、非竞争性、混合型及缓慢结合型4种。其抑制的主要机理分别为：底物类似物结合酶的活性中心从而抑制酶活性；抑制剂与酶活性中心以外的氨基酸残基结合及抑制剂对过氧自由基的清除作用；抑制剂对酶活性中心的内源桥基的影响；抑制剂与酶快速形成复合物，此后经历一个缓慢的可逆异构化过程。