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混合非淀粉多糖水解酶酶活测定方法的改进 总被引:2,自引:0,他引:2
用分光光度法分别准确测定了混合非淀粉多糖水解酶预混样中木聚糖酶、果胶酶、β-葡聚糖酶和纤维素酶的酶活。将酶以0.1%的比例添加到饲料中后,除木聚糖酶外,其余三种酶的酶活无法准确测定出来,于是对酶活测定方法进行了改进,利用凝胶过滤色谱法对酶液进行预处理,排除了体系中还原糖等小分子量杂质的干扰;采用琼脂放射扩散法测定纤维素酶或β-葡聚糖酶酶活,提高了测定的特异性和灵敏度;利用专一性的酸性醋酸铜法测定果胶酶酶活,提高了特异性;采用硫酸铵沉淀法处理木聚糖酶,可排除另的酶对木聚糖酶酶活测定的干扰。 相似文献
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混合非淀粉多糖水解酶酶活测定方法的改进 总被引:1,自引:0,他引:1
用分光光度法分别准确地测定了混合非淀粉多糖水解酶水木聚糖酶,果胶酶,β-葡聚糖酶和纤维素酶的酶活,但将酶添加到物料中后,酶活测定变得非常困难,于是对酶活测定方法进行了改进。利用凝胶过滤色谱法对酶液进行预处理,排除了体系中还原糖等小分子量杂质的干扰,采用琼脂放射扩散法测定纤维素酶或β-葡聚糖酶酶活,提高了测定的特异性和灵敏度。利用专一性的酸性醋酸铜法测定果胶酶酶活,提高了特异性,采用硫酸铵沉淀法处理木聚糖酶,可排了作别的酶对木聚糖酶酶活测定的干扰。 相似文献
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木聚糖酶酶活影响因素的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
研究了两种耐温耐碱的商业木聚糖酶酶活的影响因素:木聚糖酶A和木聚糖酶B酶反应的最适pH值为7.0,酶反应的最适温度分别为65℃和70℃.Fe3 在低浓时对这两种酶有激活作用,Fe3 在高浓时则有抑制作用.Al3 对木聚糖酶A有抑制作用,对木聚糖酶B有激活作用.Cu2 对木聚糖酶A和木聚糖酶B都表现为抑制作用.Mn2 对木聚糖酶A有激活作用,对木聚糖酶B有抑制作用. 相似文献
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研究培养基组分与发酵工艺条件对试验菌株Gh-5产木聚糖酶的发酵影响,并对木聚糖酶的酶学性质进行初步研究。结果表明,该菌最适发酵产酶培养基组分为甘露糖15 g/L,氯化铵10 g/L,ZnSO4 0.3 g/L,KH2PO4 0.5 g/L;最适发酵条件为温度37 ℃;pH值为8.0;接种量14 %;发酵培养生长周期36 h。木聚糖酶产生菌株Gh-5发酵优化后的酶活力为114.64 U/mL,较优化前38.02 U/mL提高了201.53%。木聚糖酶酶学性质研究结果表明,木聚糖酶酶活最适pH值为8.0;最适温度为65 ℃;Zn2+对木聚糖酶酶活有较好促进作用。 相似文献
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采用体外酶活检测的方法,针对不同料型、存放时间和饲料制粒的加工过程导致的酶活损失进行了研究。结果表明:不同料型极显著影响木聚糖酶的活性(P<0.01),在预混合饲料、浓缩饲料、全价饲料中24h木聚糖酶的剩余活性分别为:15.41%、23.22%和26.97%,随着存放时间的延长,木聚糖酶的活性逐渐降低(P<0.01),存放45d后木聚糖酶在预混合饲料、浓缩饲料、全价饲料中的活性又可降低42.83%、31.93%和19.85%。加工过程极显著影响嗜热毛壳菌纤维酶中木聚糖酶的活性(P<0.01),经过混合、调质、制粒和冷却工艺后,木聚糖酶的活性分别降至56.68%、32.48%、24.00%和27.42%。 相似文献
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对大肠杆菌工程菌产木聚糖酶的工艺进行优化,并对木聚糖酶的酶学性质进行研究。确定了提取工艺路线,即依次经过细胞破碎(高速珠磨法)、固液分离及除菌(中空纤维膜过滤)、超滤浓缩及烘干包衣步骤后得到肠溶木聚糖酶产品。该产品热稳定性好,在pH 2.5磷酸盐缓冲液中释放度为5.0%,在pH 5.5磷酸盐缓冲液中释放度为98.5%,产品外观光泽性好,能够很好地满足饲料酶市场要求。该木聚糖酶的最适pH值为6.4,最适温度为55℃。该酶具有较好的热稳定性,含水分17%的酶在90℃条件下2.5min仅失活13.6%。对木聚糖酶降解产物进行检测表明该木聚糖酶是一种内切酶。 相似文献
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以生鲜羊肉、猪肉、鸡肉、牛肉、鸭肉为实验材料,采用SDS法、异硫氰酸胍法、试剂盒法提取动物肌肉组织基因组DNA,对提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳和实时荧光定量PCR检测。结果表明,试剂盒法提取的基因组DNA在浓度和纯度方面均优于SDS法和异硫氰酸胍法。通过对三种提取方法建立的标准曲线进行比较,回归系数(R2)按照质量排序为:试剂盒法≥异硫氰酸胍法>SDS法,扩增效率按照质量排序为:试剂盒法>异硫氰酸胍法>SDS法。三种提取方法的羊源性成分灵敏度检测,最低检出限均为80 pg/μL,但在低浓度检测时试剂盒法的相对标准偏差RSD为0.684%,小于异硫氰酸胍法0.734%和SDS法1.075%;猪源性成分灵敏度检测,SDS法的最低检出限为80 pg/μL,异硫氰酸胍法和试剂盒法的最低检出限均为16 pg/μL,但在低浓度检测时试剂盒法的相对标准偏差RSD为0.092%,小于异硫氰酸胍法4.640%;鸡源性成分灵敏度检测,SDS法和异硫氰酸胍法的最低检出限均为3.2 pg/μL,试剂盒法的最低检出限为640 fg/μL,明显高于SDS法和异硫氰酸胍法。综上所述,试剂盒法提取的基因组DNA更有利于运用实时荧光定量PCR技术进行食物掺假和物种鉴别工作。 相似文献
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配制酒的沉淀成分分析方法 总被引:1,自引:2,他引:1
配制酒产生沉淀的因素很多,沉淀成分复杂,可采用不同分析方法分析不同沉淀成分。生物碱可采用硅钨酸试法、碘化汞钾试法、碘化钍钾试法分析;氨基酸、蛋白质可采用茚三酮试法、双缩脲反应法、溴百里蓝钠盐法分析;有机酸可用pH试纸、溴酚蓝法和吖啶试法分析;酚类化合物和鞣质可用1%三氯化铁试法、香草醛-盐酸试法、三氯化铁—铁氰化钾试法分析;糖、多糖和配糖体可用α萘酚试法、氨性硝酸银试剂分析;皂甙和甾体可用醋酐浓硫酸法分析;黄酮体可用三氯化铝乙醇试法、盐酸镁粉法分析;蒽醌类用硼酸水溶液、氢氧化钾水溶液法分析;强心甙用kedde法或legal法分析:挥发油和油脂用荧光素水溶液法等分析. 相似文献
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金属氧化物纳米微粒的制备研究进展 总被引:6,自引:1,他引:6
综述了制备金属氧化物纳米微粒的主要方法,即固相法(固相热分解法、高温固相化学反应法、室温固相化学反应法)、液相法(沉淀法、水解法、溶胶-凝胶法、微乳液法、水热法、溶剂热法、辐射合成法)、气相法等.讨论了各种制备方法的优缺点及研究进展,指出了金属氧化物纳米微粒制备研究中存在的问题及研究方向. 相似文献
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本文采用湿磨法、碱法、中性蛋白酶法提取面包果淀粉,研究三种不同提取方法对面包果淀粉性质的影响。结果表明:湿磨法、碱法、中性蛋白酶法的提取率分别为23.90%、66.25%、66.05%,而碱法、中性蛋白酶法无显著性差异(P>0.05);面包果淀粉提取破损情况:碱法(4.20%)>中性蛋白酶法(2.28%)>湿磨法(1.92%);湿磨法提取面包果淀粉中蛋白质和脂肪残留量最多,碱法和中性蛋白酶法的残留量相差较小;不同方法提取的面包果淀粉溶解度和膨胀度均随温度的升高而升高,湿磨法提取的面包果淀粉溶解度和膨胀度均最大,碱法和中性蛋白酶法相差较小。经综合评价得出,中性蛋白酶法为面包果淀粉的最佳提取方法。本研究为面包果淀粉提供了一种新型绿色提取工艺,以期为面包果淀粉获得更加经济环保的工业化生产提供理论依据。 相似文献
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目的:建立一种以水稻种子为原料,简便、快速、有效的基因组DNA 提取方法,作为转基因稻米的PCR 检测基础。方法:选择传统的CTAB 法、改良的碱处理法、高温水煮法,以转基因糙米、非转基因糙米、转基因精米为材料提取DNA,并对提取物进行检测。结果:改良的碱处理法提取的DNA 模板的完整性、纯度和PCR 反应方面与传统CTAB 法相近,且比CTAB 法的产率高、耗时短、成本低。结论:改良的碱处理法可以代替传统的CTAB 法用于转基因稻米检测中DNA 模板的制备。 相似文献
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本实验利用酸水解-斐林试剂滴定法测定不同地区大米淀粉含量,并与DNS比色法及GB/T 5009.9-2008酸水解法的测定结果进行对比,对该方法的测定准确性进行研究。结果表明,酸水解-斐林试剂滴定法与国标法测定结果相近,滴定法的标准差与相对标准偏差均小于0.1,DNS比色法测定结果较低,且标准差与相对标准偏差均远远高于国标法与本法。显著性比较中,本法与国标法间差别不显著,DNS比色法与国标法和本法差异均显著。回收率实验中,国标法、滴定法和DNS比色法平均回收率分别是99.68%、99.14%、100.06%。说明本法具有较高的稳定性和准确性,且测定结果精密度好,是大米淀粉含量测定的一种简单有效的方法。 相似文献