鮰鱼皮胶原蛋白肽酶解法制备工艺条件研究

以鮰鱼鱼皮为原料,选用多肽水解酶,分别从酶解时间、加酶量、酶解温度和酶解pH值等因素来研究多肽水解酶对鮰鱼皮酶解所形成肽含量的影响,并通过正交试验优化了酶解条件,其最佳酶解条件为加酶量0.5%,酶解pH值为8.0,酶解温度55℃和酶解时间3.5h,所得的水解液中多肽含量为18.84mg/mL,且鱼皮胶原蛋白肽中分子量在180Da~5000Da的占94.89%。     

黄粉虫幼虫降血压肽酶解液脱色工艺的优化

采用粉末活性炭对脱脂黄粉虫幼虫降血压肽酶解液进行脱色处理。通过单因素和正交实验,考察了活性炭用量、pH、温度和吸附时间等因素对脱色率(DE)、肽损失率(LP)和溶液对血管紧张素酶(ACE)的活性抑制率(IP)的影响。结果表明,粉末活性炭用量3%,pH3,脱色温度40℃,吸附时间50min的条件下,黄粉虫幼虫降血压肽酶解液脱色效果明显,脱色率为85·3%,ACE抑制活性为70·8%。      

林蛙皮胶原蛋白肽酶解工艺数学建模及抗氧化作用的研究

采用数理统计和数据拟合分析方法对林蛙皮胶原蛋白肽(LWT)酶解过程中的影响因素进行优化,建立了LWT酶解过程中影响因素与水解度关系的数学模型,验证了水解度的最佳值(峰值)。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法证明LWT的相对分子质量在3 500以下,HPLC表明其纯度较高。研究了LWT对溴代苯小鼠肝损伤的抗氧化作用,结果表明:LWT具有显著降低小鼠肝组织中MDA质量分数和显著升高小鼠肝组织中SOD活力的作用,具有抗氧化作用。     

凤尾鱼酶解产物脱腥脱色工艺优化

凤尾鱼酶解物(AFH)通过大孔树脂吸附处理后,发现DA201-C型大孔树脂为最佳吸附材料。在单因素实验基础上,以腥味、色泽和回收率为评价指标,运用正交实验L₉(3⁴)优化了DA201-C型大孔树脂对凤尾鱼酶解产物脱腥脱色工艺,得到最佳条件为:pH6,大孔树脂量5%,脱腥脱色时间1.5 h,以及温度25℃,该条件下感官评定综合评分为84.36。同时,研究表明脱腥脱色后,凤尾鱼酶解产物中牛磺酸、丙氨酸、甲硫氨酸和异亮氨酸呈显著性降低(P<0.01),挥发性物质成分中醛和含氮类化合物相对含量呈显著性降低。     

鳕鱼皮胶原蛋白肽对小鼠急性肝损伤的保护作用研究

本文对鳕鱼皮胶原蛋白肽(CSCP)在小鼠急性肝损伤中的保护作用进行研究。测定CSCP的急性毒性作用及最大给药剂量;建立CCl4致小鼠急性肝损伤模型,检测小鼠血清ALT、AST活性以及肝组织匀浆GSH-Px、SOD活性以及MDA含量;HE染色观察肝脏病理学改变;透射电镜观察肝脏微观结构;蛋白印迹法测定肝组织Bax、Bcl-2、Cleavage Caspase-3、TNF-α蛋白表达量。结果表明CSCP最大给药量达到8.0 g/kg,无小鼠死亡;CSCP组与模型组比较,血清中ALT、AST的活性显著降低,最高降幅达到60%以上;肝组织匀浆中SOD和GSH-Px活性显著增高,分别增加23%和29%;MDA含量显著降低,最高降幅达到38%;HE染色观察肝组织结构明显好转;透射电镜表明肝脏微观结构得到明显改善;Bcl-2蛋白表达量增加,Bax、Cleavage Caspase-3、TNF-α蛋白表达量降低。因此,CSCP对CCl4小鼠急性肝损伤有较明显的保护作用。     

蛋黄降压肽酶解液脱色工艺的优化

采用单因素和正交实验法,用粉末活性炭对含蛋黄降压肽的酶解液进行脱色处理,考察了活性炭用量、pH、脱色温度和吸附时间等因素对脱色率、肽损失率和溶液活性损失率的影响。结果表明,粉末活性炭用量3%,pH4.5,脱色温度40℃,吸附时间30min的条件下,蛋黄降压肽酶解液脱色效果明显,肽损失率(LP)可控制在20%以下,脱色率(DE)可达到86.3%,而酶解液对血管紧张素酶(ACE)的抑制率(IP)为77.89%,活性损失率为6.39%。      

蛋黄降压肽酶解液脱色工艺的优化

采用单因素和正交实验法,用粉末活性炭对含蛋黄降压肽的酶解液进行脱色处理,考察了活性炭用量、pH、脱色温度和吸附时间等因素对脱色率、肽损失率和溶液活性损失率的影响。结果表明,粉末活性炭用量3%,pH4.5,脱色温度40℃,吸附时间30min的条件下,蛋黄降压肽酶解液脱色效果明显,肽损失率(LP)可控制在20%以下,脱色率(DE)可达到86.3%,而酶解液对血管紧张素酶(ACE)的抑制率(IP)为77.89%,活性损失率为6.39%。     

鳕鱼皮胶原蛋白的提取与应用

鳕鱼加工过程中鱼皮约占鳕鱼总重量的十分之一,其富含丰富的胶原蛋白。胶原蛋白具有支撑机体器官、保护组织等功能,同时也是组成细胞间质的重要功能蛋白质。从鳕鱼皮中提取胶原蛋白,不仅避免资源浪费,同时也减少环境污染。本文总结了近几年从鳕鱼皮中提取胶原蛋白常见的方法:热水法、碱法、盐法和酶法,并分析了各方法的特点。热水提取法破坏胶原蛋白结构使其隔膜作用、稳定作用及协助传输等作用减少;碱法提取由于产生消旋混合物,故较少使用此方法;盐法提取所得产物缺乏稳定性,不宜大规模生产;酶法提取成本低、效率高,使用广泛。由于胶原蛋白具有独特的三重螺旋结构、低免疫原性、生产成本低、可大规模生产和优良的生物降解性等优点,使得其在医药、食品、化妆品等领域应用广泛,具有极大的发展前景。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽酶解液的制备及其抗氧化特性研究

以罗非鱼皮为原料,采用直接酶法提取胶原蛋白肽,用正交试验对罗非鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺进行优化,并测定了罗非鱼皮的基本组成成分和鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸组成。结果表明,碱性蛋白酶添加量为0．5％,固液比1：3,酶解时间为3h,酶解温度50℃时鱼皮胶原蛋白肽的提取率最高为13．5％。并对产品胶原蛋白肽的抗氧化特性进行了分析。     

黄鳍金枪鱼皮胶原肽酶解工艺及抗氧化活性研究

以金枪鱼皮为原料,以肽得率、水解度和感官评价为指标,确定金枪鱼皮胶原肽酶解的最优工艺条件是:中性蛋白酶,酶解时间4 h,酶添加量1 000 U/g,此时肽得率29.03%。体外抗氧化能力测定结果:金枪鱼皮胶原蛋白酶解物具有一定的抗氧化活性,总还原力是VC总还原力的60%;与VC相比,DPPH·清除率(IC50=0.43 mg/m L)、O22-清除率(IC50=3.67 mg/m L)、卵磷脂过氧化物清除率(IC50=14.67 mg/m L)较低,·OH清除率(IC50=0.39 mg/m L)、H2O2清除率(IC50=0.05 g/m L)较高。该酶解物能显著降低油脂的过氧化值,然而降低幅度略低于VC。     

鳕鱼皮活性胶原的提取及酶解动力学研究

采用低温酸酶结合法提取鳕鱼鱼皮胶原,通过考察不同提取条件,优化了鳕鱼皮胶原的提取工艺,并对所提胶原进行特性分析。以经典的米氏方程理论为基础,研究胃蛋白酶酶促水解鳕鱼皮制备胶原的酶解反应特性,通过鳕鱼皮的酶解曲线,建立数学方程,表征胶原提取过程的水解动力学行为。结果表明:鳕鱼皮胶原提取的最佳工艺条件为:胃蛋白酶添加量为1.0%,料液比为1∶40,处理时间为24h,酸介质为柠檬酸,其浓度为0.20mol/L。在此条件下胶原提取率达到48.67%。胃蛋白酶水解鳕鱼皮制备胶原的动力学模型为:-rs=(2.9004E-3[S])/([S]+0.2156),其中米氏常数Km=0.2156。     

罗非鱼皮胶原肽的制备及抗氧化活性研究

采用酶法从罗非鱼皮中制取胶原肽,选用动物蛋白水解酶,当酶的添加量为0.5%,61℃,pH 6.7下水解3 h时,蛋白质的回收率为92.97%,水解度为9.37%.水解产物90%以上相对分子质量低于10 kD的胶原肽.胶原肽对由Fe^2＋引发的卵磷脂脂质体过氧化有一定抑制作用,同时对·OH具备一定的清除作用.     

微波酸处理对骨胶原蛋白酶解效果的影响研究

以骨胶原蛋白为原料,采用微波酸处理辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度及抗氧化能力为指标确定最佳水解条件。通过比较实验确定最佳微波酸处理条件为:微波功率510W作用270s;通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及碱性蛋白酶水解结果比较,确定中性蛋白酶水解产物的水解度及ABTS、DPPH自由基清除率最高;通过单因素实验及正交实验优化中性酶最佳酶解条件为:酶与底物比10%,底物浓度4%,反应温度55℃,pH7.0。结果表明,与单独酶解相比,微波酸处理能够使骨胶原蛋白酶解时间缩短1/2,水解度上升3.2%,产物的ABTS、DPPH自由基清除率分别提高8.7%和3.1%。     

猪股骨酶解液中降血压肽的活性及其体外稳定性研究

采用0.22、0.45μm两种孔径滤膜过滤猪股骨酶解液,再利用截留分子量为5、3、2ku的超滤离心管对过滤后的酶解液进行超滤,比较两种滤膜过滤的酶解液超滤分离后的各分子量段滤液的色值、澄清度、蛋白损失率及ACE(血管紧张素转换酶)抑制活性,并将ACE抑制活性最高的分子量段进行模拟胃肠道及耐热、耐酸碱实验。研究显示:0.22μm微孔滤膜处理的酶解液超滤后的色值、澄清度效果好于0.45μm微孔滤膜,两者超滤后各个分子量段的ACE抑制率差异不显著,蛋白回收率前者较低,分子量<2ku的滤液活性最高,其IC50值为0.83mg/m L。分子量<2ku经胃蛋白酶、胰蛋白酶作用后,ACE抑制活性仍然保持原来的95%以上,该分子量段的滤液有良好的胃肠道耐受性、热稳定性及耐酸碱性。      

猪股骨酶解液中降血压肽的活性及其体外稳定性研究

采用0.22、0.45μm两种孔径滤膜过滤猪股骨酶解液,再利用截留分子量为5、3、2ku的超滤离心管对过滤后的酶解液进行超滤,比较两种滤膜过滤的酶解液超滤分离后的各分子量段滤液的色值、澄清度、蛋白损失率及ACE(血管紧张素转换酶)抑制活性,并将ACE抑制活性最高的分子量段进行模拟胃肠道及耐热、耐酸碱实验。研究显示:0.22μm微孔滤膜处理的酶解液超滤后的色值、澄清度效果好于0.45μm微孔滤膜,两者超滤后各个分子量段的ACE抑制率差异不显著,蛋白回收率前者较低,分子量2ku的滤液活性最高,其IC50值为0.83mg/m L。分子量2ku经胃蛋白酶、胰蛋白酶作用后,ACE抑制活性仍然保持原来的95%以上,该分子量段的滤液有良好的胃肠道耐受性、热稳定性及耐酸碱性。     

海参肠胶原蛋白酶解工艺及抗氧化性研究

目的 研究木瓜蛋白酶加酶量、pH值、酶解时间、温度对海参肠胶原蛋白水解度的影响。 方法 分别探讨4种蛋白酶对海参肠胶原蛋白水解能力, 确定以木瓜蛋白酶为最佳用酶。采用木瓜蛋白酶对海参肠进行酶解, 通过分析酶解液对Fe3 还原力、清除羟自由基及DPPH能力来研究其抗氧化活性。结果 酶解的最佳条件: 木瓜蛋白酶添加量1.0%、pH 7.0、时间4.0 h、温度65 ℃, 水解度达42.20%。结论 酶解液对Fe3 有较好的还原作用, 对羟自由基和DPPH都有很好的清除作用。     

林蛙皮胶原蛋白肽的制备工艺

以长白山林蛙皮为原料,选用碱性蛋白酶,对酶解温度、酶解时间、加酶量、pH、料液比五个因素来研究,经实验确定最佳酶解条件为:酶解温度50℃,加酶量0.5%,酶解时间3h,pH9.0,料液比1∶3(g/mL),脱色脱腥处理后,喷雾干燥制得微黄色粉末状林蛙皮胶原蛋白肽。结果表明,羟脯氨酸含量为20.69μg/mL,分子量分布在3.5ku以下。     

猪皮胶原多肽的体外抗氧化特性研究

以猪皮胶原多肽为原料,研究其羟自由基清除能力、还原能力、对Fe2+诱导的脂质过氧化抑制能力以及对猪油氧化的抑制效果,考察其体外抗氧化特性.结果表明:在10mg/mL～50mg/mL浓度范围内,猪皮胶原多肽具有一定的羟自由基清除能力、还原能力和对Fe2+诱导的脂质过氧化抑制能力,且随着浓度的增加抗氧化作用也增强,当浓度为50mg/mL时,对羟自由基的清除率为56.38％,还原力为0.909,对Fe2+诱导的脂质过氧化抑制率为43.34％;不同添加量的猪皮胶原多肽对猪油氧化均有明显的抑制作用,当添加量为2％时,抗氧化效果优于0.02％的叔丁基羟基茴香醚(BHA).猪皮胶原多肽具有一定的体外抗氧化作用.