双水相纯化淀粉糖化酶的影响因素研究

以四种不同的淀粉糖化酶发酵液为研究对象,用纯化倍数作为参考指标。在单因素实验基础上,选取四种分子量的聚乙二醇(PEG600、PEG800、PEG1000、PEG2000)、三种盐(MgSO4、(NH4)2SO4、KH2PO4)和四种发酵的淀粉糖化酶酶液(米根霉、根霉、酒精酵母、酯化酵母)为自变量。得到最佳的提取条件为:米根霉在PEG1000浓度为15%(均为质量浓度),MgSO4浓度为22.86%,纯化倍数可达3.35;其酒精酵母和酯化酵母在PEG1000浓度均为15%,(NH4)2SO4浓度分别为15.73%和13.33%,得到纯化倍数为1.82、1.50;根霉在PEG2000浓度为15%,盐(NH4)2SO4添加14.37%,纯化倍数达2.07。该方法在淀粉糖化酶含量有差异的情况下,能保存酶活去除杂蛋白,分离出淀粉糖化酶。     

微流控双水相技术萃取糖化酶实验研究

设计了萃取分离的微流控装置,研究了微通道内的雷诺层流条件,选用糖化酶为待萃物进行了微流控和烧杯中的双水相萃取对比实验,双水相体系选取聚乙二醇4000/硫酸铵,两相体积比为1∶1。实验结果表明:微流控萃取的传质速率是烧杯中的2.8倍,单位双水相体积单位时间的传质量,微通道中为127.15g·m-3·s-1,烧杯中为2.96g·m-3·s-1,前者是后者的42倍,可见微流控萃取效果远优于烧杯中萃取。原因是微流控装置提供了两相较快的环隙流动速度和较大的传质比表面积。      

微流控双水相技术萃取糖化酶实验研究

设计了萃取分离的微流控装置,研究了微通道内的雷诺层流条件,选用糖化酶为待萃物进行了微流控和烧杯中的双水相萃取对比实验,双水相体系选取聚乙二醇4000/硫酸铵,两相体积比为1∶1。实验结果表明:微流控萃取的传质速率是烧杯中的2.8倍,单位双水相体积单位时间的传质量,微通道中为127.15g·m-3·s-1,烧杯中为2.96g·m-3·s-1,前者是后者的42倍,可见微流控萃取效果远优于烧杯中萃取。原因是微流控装置提供了两相较快的环隙流动速度和较大的传质比表面积。     

PEG/(NH4)2SO4双水相体系提取和纯化糖化酶

用PEG／（NH4）2SO4双水相体系提取，纯化糖化酶，研究了影响体系分配系数，回收率和纯化因子的因素从而确定了萃取糖化酶的最佳条件。在WPEG为0．24，W（NH4）2SO4为0．08条件下，分配系数最小，达0．022，回收率为95．6％。     

双水相萃取法提取果胶酶的研究

对PEG/(NH4)2SO4双水相提取果胶酶进行了研究,考察了PEG分子量、pH值、成相物质浓度、NaCl浓度、温度等对果胶酶分配系数的影响,结果表明,双水相最佳提取条件为PEG1000 27%,(NH42)SO4 19%,NaCl 0.002%,pH 5.0,温度50℃,在此条件下果胶酶分配系数(K)可达14.0。     

双水相萃取法提取米糠脂肪酶研究

该实验采用双水相萃取法提取米糠脂肪酶,通过确定米糠脂肪酶最佳提取条件,为日后大规模生产提供理论依据。用蒸馏水对米糠脂肪酶粗提取实验,通过单因素实验确定最佳提取工艺参数:料液比1∶15,提取温度40℃,提取pH 7.0,提取时间1 h。双水相萃取对粗酶液纯化实验,对影响双水相萃取各种因素进行探讨,并通过正交实验优化提取条件,于PEG浓度22.5%,硫酸铵浓度20%,pH 7.0条件下进行双水相萃取,脂肪酶纯化倍数最高。     

双水相体系提取SOD的研究

研究了聚乙二醇（PEG-4000）/磷酸钾双水相体系中,PEG浓度、磷酸钾浓度和pH对双水相萃取法从黄粉虫中提取超氧化物歧化酶（SOD）的影响。采用改良的邻苯三酚自氧化法测定SOD活性,并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定SOD的分子量。结果表明:双水相体系的质量组成为PEG12%,磷酸钾24%,pH7.1时,SOD的萃取效果最好,SOD纯化倍数达3.74,活性回收率达71.2%。      

双水相体系提取SOD的研究

研究了聚乙二醇(PEG-4000)/磷酸钾双水相体系中,PEG浓度、磷酸钾浓度和pH对双水相萃取法从黄粉虫中提取超氧化物歧化酶(SOD)的影响.采用改良的邻苯三酚自氧化法测定SOD活性,并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定SOD的分子量.结果表明:双水相体系的质量组成为PEG 12%,磷酸钾24%,pH7.1时,SOD的萃取效果最好,SOD纯化倍数达3.74,活性回收率达71.2%.     

双水相法提取木聚糖酶的初步研究

采用双水相法从黑曲霉AS3.4309 的发酵液中提取木聚糖酶,通过正交试验对双水相的组成进行优化。结果表明,双水箱体系最佳组成为：选用PEG4000,其浓度为19%(W/W),磷酸氢二钾浓度为10%(W/W),氯化钠浓度为0(W/W)。此条件下,木聚糖酶的提取效果较好,分离系数(K)和上相产率(Yt)分别为6.23 和88.67%。     

双水相萃取法提取木瓜蛋白酶的研究

对以PEG(聚乙二醇)/(NH4)2SO4为双水相系统提取的木瓜蛋白酶进行了研究。实验考察了不同分子量PEG对木瓜蛋白酶活性的影响以及PEG浓度、(NH4)2SO4浓度、pH和温度对木瓜蛋白酶分配系数的影响。结果表明:双水相体系最佳条件为PEG60027%,(NH4)2SO421%,pH7·0和温度60℃。在上述条件下,木瓜蛋白酶的分配系数可达9·28。      

双水相萃取法提取虫草发酵液中甘露醇的研究

探索采用正丙醇/(NH4)2SO4双水相系统从拟黑虫草发酵液中提取甘露醇的方法。实验研究了正丙醇、(NH4)2SO4、溶液浓度和pH值对甘露醇分配系数、萃取率的影响,确定提取甘露醇的最佳条件,即正丙醇溶液浓度为20%、(NH4)2SO4溶液浓度为25%、pH7.4时分配系数为0.028,甘露醇萃取率最高为73.79%。     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取大豆脂肪氧合酶的研究

采用聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH4)2SO4]双水相体系对大豆中脂肪氧合酶进行分离萃取研究;通过综合考察酶分配系数、相比和回收率,探讨了(NH4)2SO4、PEG2000、Na Cl浓度以及p H对脂肪氧合酶萃取的影响,并通过正交实验进一步优化实验条件,结果表明在单一因素下的最佳工艺条件为:(NH4)2SO415%(wt%)、PEG2000 13%(wt%)、Na Cl 1%(wt%)、p H5.8;正交实验优选出的最佳工艺条件为:(NH4)2SO417%(wt%)、PEG2000 13%(wt%)、p H5.2,可获得酶的分配系数最高可达9.710,萃取率为87.6%。      

浓缩脱镁母液冷却过程析盐规律的试验研究

利用氨法制取Mg(OH)2后的脱镁母液经蒸发浓缩并分离部分NaCl后所获得的高温澄清液,对其从120 ℃自然冷却至20℃过程的析盐规律进行研究.研究证明,冷却过程中(NH4)2SO4和NH4Cl为主要析出盐类,其最终析出率分别为76.32%和54.59%,冷却过程中可能有少量光卤石析出.     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取葡萄糖氧化酶的研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/(NH4)2SO4]双水相体系对葡萄糖氧化酶的萃取进行了研究。以双水相系统的上、下相的酶活、比酶活、相比R、分配系数K和萃取率Y等为参数,探讨了PEG质量分数、不同PEG浓度和不同硫酸铵浓度对葡萄糖氧化酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中分配行为的影响。实验结果表明:葡萄糖氧化酶在25%的PEG4000和10%硫酸铵的双水相体系中可获得较高的萃取率达81.11%,分配系数为0.134。     

(NH4)2SO4存在下乙醇对番茄红素的提取

利用(NH4)2SO4的脱水作用,用乙醇从番茄中提取番茄红素.考察了影响番茄红素提取的因素,包括预处理、提取溶剂用量、提取时间等.确定了最佳的提取条件番茄用量为5g时,用1.5g(NH4)2SO4及适量乙醇预处理后,用4mL乙醇在pH9的条件下浸提20min.     

双水相体系萃取分离L-组氨酸的研究

采用PEG-(NH4)2SO4双水相体系萃取分离L-组氨酸。实验考察了pH、温度、聚乙二醇加入量、L-组氨酸初始浓度、硫酸钠及L-赖氨酸的存在对萃取分离的影响。结果表明:L-组氨酸在该双水相体系的分配系数K随体系pH和聚乙二醇加入量的增大而减小,随着L-组氨酸初始浓度和L-赖氨酸加入量的增大而增大,而温度和Na2SO4的影响不明显;L-组氨酸在该双水相体系的萃取率η随体系pH和聚乙二醇加入量的增大而增大,随着L-组氨酸和L-赖氨酸加入量的增大而减小,而温度和Na2SO4的影响同样不明显。     

超滤膜法提取水相中茶皂素的研究

本文以乙醇水提法提取油茶籽油后产生的水相副产物为原料,利用超滤膜法对其中丰富的茶皂素进行分离提纯。主要探索了超滤膜材料、膜孔径、茶皂素浓度、水相p H以及超滤后期加水量对茶皂素透过率以及纯度的影响。结果表明:采用截留分子量为10 k的改良纤维素复合膜(PLCGC)进行超滤,同时将水相稀释4倍至茶皂素浓度为13.13 mg/m L,p H调节至7.0,超滤后期加3倍体积的水恒容超滤,茶皂素透过率可达64.39%,纯度达84.16%。对纯化后的茶皂素进行红外光谱及液质分析,证明超滤法可以有效分离提取水相中茶皂素,实现提油后水相副产物的回收利用。      

双水相萃取生姜中姜油树脂的研究

以β-环糊精、碳酸钠、氯化钠作为双水相萃取剂,构成双水相萃取体系,进行萃取生姜中姜油树脂的研究.结果显示,溶液分相清晰,姜油树脂的代表成分姜辣素的分配系数在0.21-0.32,姜辣素的萃取率可达71.6%.β-环糊精是萃取相的主要组成成分,碱和盐有助于提高姜辣素在萃取相中的分配比例并提高萃取率.β-环糊精为主要材料构成的双水相萃取系统萃取生姜中姜油树脂的技术可行,工艺的实用性强.