紫外分光光度法快速测定葡萄糖

应用紫外分光光度法分析技术建立了快速测定葡萄糖的检测方法。利用样品中葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下生成的过氧化氢具有强氧化性,可以将还原性的草酸钛钾氧化生成稳定的黄色络合物。该络合物在最大吸收波长382nm处的吸光值与样品中葡萄糖的质量浓度成比例。结果显示葡萄糖质量浓度在0.05～0.75mg/mL的范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.996,相对标准偏差为1.67%,加标回收率为99.87%～100.39%。方法操作简便、可靠,可以用于样品中葡萄糖的快速测定。     

微生物葡萄糖氧化酶的研究进展

葡萄糖氧化酶是一种能够专一性催化β-D-葡萄糖氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢的需氧脱氢酶,在食品、医药、化工、纺织、生物技术等领域具有重大应用价值。微生物是产葡萄糖氧化酶的主要来源,具有生长繁殖快、产酶效率高、纯化过程简单、适合商业化生产等特点。该文从产葡萄糖氧化酶的微生物来源、产酶菌株的基因工程改造及葡萄糖氧化酶的应用等方面对微生物葡萄糖氧化酶进行综述,为产葡萄糖氧化酶微生物的开发及基因工程技术在菌种选育上的应用提供理论参考。     

基于DNA-银纳米颗粒比色法高灵敏度检测过氧化氢和葡萄糖

建立一种基于DNA-银纳米颗粒(DNA-AgNPs)高灵敏比色传感器检测过氧化氢和葡萄糖的方法。在DNA保护下,用硼氢化钠还原硝酸银合成DNA-AgNPs,加入过氧化氢后其溶液颜色由黄褐色变为无色,从而实现过氧化氢的比色法检测。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成过氧化氢,利用此方法可间接测定葡萄糖的含量。在优化试验条件下,对过氧化氢和葡萄糖的检测限为分别为0.36μmol/L和1.13μmol/L。以梨汁为实际样品,通过标准加入法测定葡萄糖含量,加标样品的回收率范围在87.00%～96.02%。该方法实现了食品中过氧化氢和葡萄糖的快速、可视化检测,提高了检测的精确性和灵敏度,为构建食品中目标物的检测方法提供了参考。     

一种检测葡萄糖氧化酶活力的新方法

在葡萄糖氧化酶研发生产过程中,需要对发酵液进行酶活力检测。目前常用的方法有滴定法、电化学法和连续分光光度法,但这些方法均因其独立重复实验误差较大而缺乏实用性。因此建立一种操作简单、快速、重现性好、成本低的检测方法,是葡萄糖氧化酶研发生产中亟待解决的问题。该项研究在生产实践中,开发建立了一种新的葡萄糖氧化酶活性测定方法:碘-淀粉分光光度法。以β-D-葡萄糖为底物,利用葡萄糖氧化酶特异性催化作用,生成中间产物过氧化氢,再通过碘-淀粉分光光度法定量测定过氧化氢含量,进而计算葡萄糖氧化酶活力。结果表明:反应体系在葡萄糖氧化酶浓度为0.1～0.5 U/mL范围时,检测平行性良好,独立重复实验酶活力计算结果相对偏差小于5%,在统计学分析误差范围内。     

生物传感器法检测葡萄汁中葡萄糖含量

采用葡萄糖氧化酶与过氧化氢电极,在0.2 mol/L的磷酸盐缓冲液（pH 7.2）和1‰的葡萄糖标准溶液反应体系中,建立葡萄汁中葡萄糖含量检测的生物传感器分析方法。结果表明,在葡萄糖质量浓度为0～1 000 mg/L的范围内生物传感器法测定葡萄糖含量的线性良好;线性回归方程为y=0.994 8x-3.081,相关系数R2=0.999 9;稳定性好,相对标准偏差（RSD）=1.63%;加标回收率为96.0%～102.4%;专一性强,只对葡萄糖进行专一性测定。     

葡萄糖酸钠的双酶催化制备法

利用生物酶的特异性,采用葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶进行葡萄糖酸钠的双酶催化法制备研究。首先分析了葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶的理化性质,测试不同温度和不同pH时两支酶的相对活力,得到葡萄糖氧化酶的最适温度范围为20～50℃,最适pH范围为4.0～6.5,过氧化氢酶的最适温度范围为20～50℃,最适pH范围为4.0～8.0。结合酶的理化性质,从催化反应机理出发,以20h时的糖转化率和体系中H2O2量为指标,分析了通风和搅拌、温度、pH、葡萄糖氧化酶的用量、葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶的用量比等不同因素的影响,获得了最佳的双酶催化制备工艺:罐压0.05MPa、风量1.5m3/h、转速400r/min、40℃、pH5.5、300g/L的葡萄糖液、30U/g糖量的GOD、GOD:CAT=1∶85。在此条件下,葡萄糖在20h时的糖转化率为99.96%。     

一种快速测定酶活性的方法

目的探讨快速测定酶活性的方法。方法直接用生物传感分析仪测相对的酶活性,并与测定绝对酶活性的方法相对照,探讨它们之间的关系。结果直接用生物传感分析仪测相对酶活性可判断乳酸氧化酶的活性,与测定绝对酶活性的方法相比,它们存在着线性关系。结论直接用生物传感分析仪测相对酶活性是一种快速判断酶活性值的方法。它还可以测定谷氨酸氧化酶、葡萄糖氧化酶等的酶活性。     

适用于食品工业中的蔗糖-葡萄糖双功能生物传感分析仪的研究

由固定化蔗糖转化酶（INV），葡萄糖变旋酶（MUT）及葡萄糖氧化酶（GOD）的复合酶膜组成的过氧化氢双电极系统，可同时测定样品中蔗糖和葡萄糖的含量，蔗糖电极的葡萄糖干扰用差分法消除。每次进样量25μl，响应时间30s，蔗糖在0－400mg/dl，葡萄糖在0－200mg/dl范围内具有良了的线性关系，连续测定20次蔗糖和葡萄糖的变异系统分别为1．13％和1．05％。蔗糖测定回收率为99．62％－100．97％，蔗糖酶膜使用寿命半个月。     

核微孔膜为基础的乳糖-葡萄糖双功能酶电极的研制

利用酵母破碎液改性后的核微孔膜作为固定载体,戊二醛为交联剂,通过固定葡萄糖氧化酶(GOD)和β-半乳糖苷酶(GAL)构建出过氧化氢双电极系统。研究了该酶电极的性质,以及不同来源GAL抗干扰性的差异。乳糖电极在0.2%～2%和4%～10%内有良好的线性关系,响应时间40s,半衰期15～20d。葡萄糖电极的线性范围0～1%,分辨率达到0.001%,响应时间20s,半衰期大于60d。该系统可同时测定样品中乳糖和葡萄糖的含量,乳糖电极的葡萄糖干扰用差分法消除。     

生物传感分析仪测定葡萄糖和L-乳酸的影响因素研究

生物传感分析仪广泛应用于食品发酵工业和实验室研究中.为了使其更好地应用于发酵工业和实验室检测.考察了pH、无机盐的种类和浓度对SBα-40C型生物传感分析仪测定葡萄糖和L-乳酸准确性的影响,同时还考察了葡萄糖和乳酸测定的重复性及二者对测定是否存在相互干扰.结果表明,pH影响测定葡萄糖结果,L-乳酸测定的准确性爱影响严重;另外,当样品中的NaCI和NH4CI浓度≥0.06mol/L时,会使葡萄糖和L-乳酸测定值明显偏低.