郑州地区植物上冰核活性细菌的分离和鉴定

从郑州地区的９种植物上分离到１０株冰核活性细菌，经鉴定后，确定属于２个属６个种或变种，即：１．ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓｂｉｏｖａｖⅡ；２．Ｐｓｓｙｒｉｎｇａｅ；３．Ｐｓｓｔｕｔｚｅｒｉ；４．Ｐｓｃｅｐａｃｉａ；５．Ｐｓｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ；６．Ｅｒｗｉｎａｈｅｒｂｉｃｏｌａ．这６个种在国内均有报道。在这１０株ＩＮＡ细菌中，Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ群占７０％，为优势种群。不同株间的冰核活性强弱存在差异     

冰核活性细菌的培养条件研究

通过正交试验的方法研究了３种常用的ＩＮＡ细菌的培养条件。结果表明：培养条件中各种因素对不同菌种的菌体收获量、成冰核活性有不同的影响，其中培养基的种类对３种ＩＮＡ细菌的影响最显著。最后得到了３种ＩＮＡ细菌的最适培养条件。     

冰核活性细菌的培养条件研究

通过正交试验的方法研究了３种常用的ＩＮＡ细菌的培养条件，结果表明，培养条件中各各因素对不同菌种的菌体收获量，成冰核活性有不同的影响，其中培养基的种类对３种ＩＮＡ细菌的影响最显著，最后得到了３种ＩＮＡ细菌的最适培养条件。     

冰核活性细菌对储粮害虫耐冻性的影响

介绍了冰核活性细菌对３种储粮害虫耐冻性的影响。结果表明３种ＩＮＡ细菌中丁香假单胞力香单胞杆菌处理的赤拟谷盗成虫死亡率明显比用荧光假单孢力和草生文氏菌处理的高。说明３＾＃菌冰核活性最强。在－３．２℃，４８ｈ和－６．７℃，１２ｈ条件征，用１０００ｍｇ／ｋｇ的３菌株处理的赤拟谷盗死亡率分别是６１．７％和９３．４％，与对照组相差异极显著。同样条件一谷蠹和玉米象的死亡率很低，与对照组死亡率相比无明显的增加，     

冰核活性细菌对储粮害虫耐冻性的影响

介绍了冰核活性细菌对３种储粮害虫耐冻性的影响。结果表明用３种ＩＮＡ细菌中丁香假单胞杆菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅ）（３＃菌株）处理的赤拟谷盗（Ｔｒｉ－ｂｏｌｉｕｍｃａｔａｎｅｕｍ）成虫死亡率明显比用荧光假单孢杆菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｅｎａｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）和草生欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉｓｈｅｒｂｉｃｌａ）处理的高（Ｐ＜０．０１）。说明３＃菌株的冰核活性最强。在－３．２℃,４８ｈ和－６．７℃,１２ｈ条件下,用１０００ｍｇ／ｋｇ的３＃菌株处理的赤拟谷盗死亡率分别是６１．７％和９３．４％,与对照组相比差异极显著（Ｐ＜０．０１）。同样条件下谷蠹和玉米象的死亡率很低（＜１５％）,与对照组死亡率相比无明显的增加（Ｐ＞０．０５）。对用３＃菌株处理的谷蠹和玉米象进行了延长冷冻时间试验,在－６．７℃,冷冻时间延长至２４ｈ,谷蠹的死亡率高达７５．８％,玉米象死亡率无明显增加。冷冻时间是影响ＩＮＡ细菌处理昆虫死亡率的重要因素之一。ＩＮＡ细菌有希望成为一种利用寒冬冻杀越冬储粮害虫的生物杀虫剂,从而降低越冬虫口密度,达到防治储粮害虫的目的。     

冰核细菌防治技术初步研究

通过Ｖａｌｉ法和抑菌圈法测定了化学药物和生防拮抗菌对冰核活性 的杀灭，抑制和对冰核活性的破坏作用，并用生测方法测定了药剂活体植株上的冰核活性细菌的杀灭作用，又 应用人工模拟霜 地试验检测了药剂和生防菌的实际防御霜冻的效果，结果表明药剂和生防菌对产细菌都有一定作用，其中药剂作用快，对冰蛋白有破坏作用，生防菌作用持久，但对冰蛋白无明显破坏作用。     

米糠中植物脂多糖和细菌脂多糖的分离鉴定

对米糠中细菌的计量和革兰氏阴性菌的分离，培养及其脂多糖的提取等研究表明：尽管米糠含有众多革兰氏阴性菌，但细菌脂多糖占米糠脂多糖总量的比例不足１‰，证实了米糠脂多糖为植物脂多糖而非细菌脂多糖。     

抗菌活性粘细菌的筛选及鉴定

采用兔粪诱导法和酵母划线法,从淮安市采集的10份土壤样品中筛选次级代谢产物具有抗菌活性的粘细菌,并分离纯化。通过观察所筛选到菌株的营养细胞、粘孢子、子实体和菌落形态等特征,并对其进行生理生化试验,进行鉴定归属。共分离到13株粘细菌,经鉴定为粘球菌属、原囊菌属、孢囊杆菌属、多囊菌属和标桩菌属5个属。采用牛津杯法,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门氏菌、黑曲霉和酵母菌作为指示菌进行抗菌试验,13株菌的次级代谢产物均表现出不同程度的抗菌活性。     

乳酸杆菌肽聚糖的分离鉴定及其免疫活性

研究了乳酸杆菌细胞壁肽聚糖的分离、鉴定及其对肽聚糖生物活性的影响，实验获得了SDS处理粗细胞壁的适宜条件为SDS质量浓度8g／dL，处理时间为沸水浴10min，SDS结合胰蛋白酶和TCA处理，可有效去除乳酸杆菌中的非共价结合蛋白质及共价结合蛋白质，经化学分析鉴定，所提取的乳酸杆菌成分为肽聚糖，肽聚糖中丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸和赖氨酸浓度分别为1．181，0．943，0．770和0．456mmol／g，是肽聚糖中的组分氨基酸，SDS结合TCA处理，方能较有效地去除DNA，TCA处理是去除细胞壁磷壁酸、脂磷壁酸的有效方法。此外，小白鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验、C3b受体实验以及血清溶菌酶活力实验证实，所分离纯化肽聚糖的免疫学活性未受影响。     

冰核活性细菌Xanthomonas ampelinaTS206的两种固定化方法的比较

冰核活性细菌固定在食品冷冻浓缩中具有重要意义，冰核活性和抗渗漏能力是衡量其性能的两个重要技术指标。研究采用共固定化和海藻酸盐直接固定化两种方法，建立了冰核活性细菌Xanthomonas ampelinaTS206的包埋技术。结果表明包埋量对冰核活性有较大影响，利用海藻酸盐直接固定化冰核活性较高，但渗漏量较大；利用共固定化冰核活性较低，但渗漏量很低。两种固定化方法的凝胶珠添加量与综合评分相关不大；海藻酸盐固定化综合评分与固化时间正相关，共固定化综合评分与固化时间略呈负相关。     

两株具有杀松材线虫活性海洋细菌的筛选和鉴定

为对松材线虫病进行生物防治,利用海洋微生物资源,对采自青岛近海域的海水、海泥、海藻和海洋动物样品进行了细菌分离,共得到14株细菌,并采用浸渍法对这些菌株进行杀线活性的测定,从中筛选出对松材线虫具有较强杀线活性的2株海洋细菌PX3-1和PX3-2,用它们的培养滤液处理松材线虫8h,实验结果表明,松材线虫的校正死亡率分别达89．1％和91．6％。通过形态特征观察、生理生化特征测定、16SrDNA序列及其系统发育分析,鉴定菌株PX3-1和PX3-1同属于巨大芽孢杆菌（BacillusMegaterium）。此二菌株对松材线虫具有较强的杀线活性,该研究为海洋微生物资源的利用及对松材线虫病的防治提供了生物材料和理论基础。     

仙鹤草内生真菌的分离鉴定与抗菌活性

植物内生真菌代谢产物丰富, 作为一种寻找开发药物的重要资源已受到人们的日益关注.本 实验对中药仙鹤草内生真菌进行分离, 获得30 株内生真菌, 其中由根中分离得到17 株, 茎中分离 得到7 株, 叶中分离得到6 株.并采用形态学观察方法, 对分离得到的内生真菌菌株进行初步鉴定, 其分别归属于青霉属, 顶孢霉属, 镰孢霉属, 根霉属, 酵母属, 珠网霉属, 毛霉属和核盘菌属等8 个真 菌属.采用平板对峙法, 研究各菌株对金黄色葡萄球菌的抗菌作用, 通过初步筛选, 共计9 株表现抑 菌活性.再进一步用内生真菌发酵萃取液做抑菌活性, 发现仅3 株菌株有抗菌活性, 都属于镰孢霉 属.为后续的活性物质分离奠定了基础.     

双歧杆菌分离,鉴定及其营养的研究

对从母乳和婴儿粪便中分离出的厌氧性杆菌进行双岐杆菌属、种鉴定，得到四株双歧杆菌，它们是：长双歧杆菌，表春双歧杆菌、短双歧杆菌和两歧双歧杆菌。用十一种不同培养基培养青春双歧杆菌，从中选一种适宜做发酵用的种子培养基－ＢＳ培养基。     

浓香型白酒窖泥中一株细菌的分离鉴定

为了探讨Biolog微生物自动鉴定系统在窖泥微生物鉴定中的应用,试验从泸州老窖浓香型白酒发酵窖池窖泥中分离纯化得到l株细菌。经菌落特征观察和镜检后,由Biolog微生物自动鉴定系统鉴定为Bacilluscereus／thuringiensisB（蜡状芽孢杆菌／苏云金芽孢杆菌B）。     

茶叶儿茶素单体的分离纯化及鉴定

将茶提取物（茶多酚）先经SephadexLH-20柱层析分离,脱除咖啡因和色素,并将其中7种儿茶素分成2个流分,再用半制备型HPLC分离纯化,得到7种儿茶素的单体化合物。用UV、 IR、NMR及MS等方法鉴定和验证了其化学结构,7种单体儿茶素化合物的纯度均大于99％,总得率为66.7%,总回收率为82.1%.     

一株脱色细菌的分离和鉴定

从活性污泥中分离到一株脱色细菌,对Ｘ－３Ｂ活性艳红有较高活性。定名为反硝化产碱菌反硝化亚种     

石榴叶抗植物病原菌的活性成分

石榴叶60%乙醇提取物用硅胶、sephadexLH-20柱色谱等分离纯化,以理化性质和光谱分析鉴定结构。抑菌活性测定采用滤纸片扩散法。石榴叶粗提物对11种植物病原真菌和4种细菌的体外抗菌效果很好,并从中分离纯化得到6种单体化合物,经鉴定结构分别为β-谷甾醇(1)、胡萝卜苷(2)、槲皮素3-O-β-D葡萄糖苷(3)、木犀草素3′-O-β-D葡萄糖苷(4)、没食子酸(5)、鞣花酸(6)。化合物(1)~(3)在石榴叶中为首次发现。     

一株高产乳酸细菌的分离鉴定与发酵性能研究

从食物垃圾中分离到1株乳酸高产菌株TD175,该菌株在含100 g/L葡萄糖的发酵培养基中,经72 h发酵,可产生78.56 g/L的乳酸.根据形态和生理生化特征,将菌株TD175初步鉴定为乳杆菌属(Lactobacillussp.)的细菌,其16S rDNA序列与乳杆菌MR2菌株、植物乳杆菌(L.plan tarum)和戊糖乳杆菌(L.pen tosus)的相似性最高,均达到99%.菌株TD175经过耐酸选育得到的新菌株TD175-1的乳酸产量提高了10.7%.菌株TD175-1能促进食物垃圾的乳酸发酵,厌氧发酵48 h,产生29.65 g/L的乳酸,比不接种的自然发酵高34.3%.     

信阳民间传统米酒微生物的分离及鉴定

通过对信阳民间传统米酒微生物的分离、纯化、培养特性、菌体形态及生理生化检测，查明信阳民间传统米酒发酵的优势菌是酵母菌和根霉菌，其次尚有少量细菌。     

富含多种生物活性物质的桑黄菌筛选、纯种分离及鉴定

桑黄是一种具有悠久使用历史的药用真菌,含有的多糖、黄酮、三萜、多酚等活性物质,有很高的药用价值,现代药理学证实其所含的某些活性物质在抗肿瘤方面具有良好的效果。首先测定了11个不同来源的桑黄样品(SH-11、SH-12、SH-13、SH-14、SH-15、SH-16、SH-17、SH-18、SH-19、SH-20、SH-21)中的多糖、黄酮、三萜、多酚的含量,综合对比不同样品中的活性成分含量,筛选出一株富含上述活性成分的菌株SH-18,多酚、多糖、黄酮含量最高,三萜含量较高,分别达到了(19.58±1.044)、(96.35±9.01)、(17.08±0.29)、(9.1±0.14) mg/g,且该菌为野生来源。之后对其进行了分离纯化及分子鉴定,经鉴定SH-18为一株粗毛纤孔菌(Inonotus hispidus)。同时优化了活性物质的浸提方法,发现体积分数为70%乙醇对上述活性成分浸提效率较高。