番茄SlWDR141基因的克隆及功能研究

为研究番茄WD40蛋白基因(SlWDR141)的功能,对SlWDR141蛋白进行生物信息学分析,发现SlWDR141蛋白在进化过程中高度保守,与土豆的同源性最高。在克隆SlWDR141基因全长序列的基础上,构建了亚细胞定位和酵母双杂交表达载体,证实SlWDR141蛋白主要定位在细胞核中,与DDB1具有相互作用。实时荧光定量PCR(real-time PCR)分析SlWDR141基因在组织中的表达谱,发现它在各个组织中均有表达,但在根中的表达量最高。为研究该基因的生物学功能,进一步构建了SlWDR141基因的干涉载体,用农杆菌介导法转化番茄得到转基因阳性番茄,荧光定量PCR鉴定出3个表达量下调的独立转基因株系。NaCl胁迫和Pst DC3000侵染野生型和转基因植株发现,转基因植株相对于野生型植株抗盐性和抗病性均下降,表明SlWDR141基因对盐胁迫和细菌侵染均起正调控作用。     

野油菜黄单胞菌效应蛋白AvrXccC抑制鞭毛蛋白诱导的植物免疫反应

野油菜黄单胞菌III型分泌效应蛋白AvrXccC在拟南芥rar1突变体上发挥毒性功能,然而,AvrXccC是如何发挥毒性功能的,目前还不清楚。本研究构建了A6vrXccC在rar1突变体上的转基因植株,通过接种DC3000 hrcC突变体,发现AvrXccC/rar1转基因植株可以促进hrcC的毒性功能。进一步研究发现,AvrXccC/rar1转基因植株抑制细菌鞭毛蛋白激发的活性氧爆发、胼胝体沉积及下游NHO1和FRK1基因的表达;但AvrXccC不抑制鞭毛蛋白诱导的MAPK激酶活性。研究表明,AvrXccC抑制植物先天免疫反应可能独立于MAPK信号通路之外,为将来分离AvrXccC在植物体内的毒性靶标奠定了基础。     

植物表达载体pCAMBIA2300-35S-GUS-CaMVterm的构建及验证

为拓宽pCAMBIA2300表达载体的使用范围,进一步方便植物基因工程科研工作者在构建表达载体时的需要,利用SacⅠ和XhoⅠ双酶切pJIT166载体获取"35S-GUS-CaMVterm"片段,将该片段插入到pCAMBIA2300表达载体的多克隆位点区,构建完成了pCAMBIA2300-35S-GUS-CaMVterm表达载体。所构建的表达载体通过农杆菌介导转化拟南芥,获得拟南芥转基因植株,转基因植株的GUS染色结果进一步验证了本文所构建表达载体的正确性和实用性。该表达载体的成功构建,方便了构建基因超表达载体,以及使得研究启动子的活性及GUS组织化学定位成为可能,还可以通过GUS染色对转基因植物进行鉴定,为植物基因工程科研工作提供了一个较好的备选植物表达载体。     

异源表达CkLEA1基因增强了拟南芥对非生物胁迫的耐受性

植物在生长过程中会受到各种非生物胁迫的伤害,导致生长发育和产量受到严重影响,胚胎晚期丰富蛋白(late embryogenesis abundant proteins,LEA蛋白)在植物抵抗非生物胁迫过程中起着重要的保护作用。在前期的研究基础上,将受多种胁迫诱导的柠条锦鸡儿Ck LEA1(Gen Bank登录号KC309408)基因转入野生型拟南芥,通过实时荧光定量PCR从7株T_3代纯合体中筛选出3个转基因株系做进一步研究。种子萌发率实验发现,在200 mmol/L NaCl和400 mmol/L甘露醇处理下,转基因株系萌发率均高于野生型拟南芥。干旱处理2周大的幼苗后,转基因株系明显比野生型更抗旱,存活率高于野生型,并且失水率低于野生型。同时,转基因株系积累了较少的丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽(GSH)含量也高于野生型。这些结果表明,柠条锦鸡儿Ck LEA1基因在种子萌发阶段提高了拟南芥对盐和渗透胁迫的耐受性,并且提高了转基因拟南芥幼苗生长阶段对干旱胁迫的抵抗能力。     

关于我国转基因食品安全法律制度的缺陷分析及完善探讨

所谓的转基因食品就是将外源性基因植入到动物、植物或者微生物体内,使外源性基因的特性得到表达,转基因食品出现在人们的视野中后,受到社会大众的广泛关注,针对转基因食品技术进行不断研究,为有效解决全球粮食危机提供了出路。也有人认为转基因食品会存在潜在的威胁,严重影响人的身体健康,但是到目前为止还没有明确的证据证明转基因食品对人体有危害,因此学术界一直存在模棱两可的情形,对转基因食品也存在着谨慎的态度,我国政府对转基因食品也给予了足够的重视。我国对于转基因食品方面的相关法律,还远远无法达到社会实际需求。确切需要我们进一步去完善,从而保证转基因食品能够在科学安全可靠的立法状态下,为广大人民的健康生活提供帮助。     

拟南芥SCBP60g蛋白的亚细胞定位及其功能研究

为了研究SCBP60g的功能,研究利用Gateway克隆技术构建了GFP报告基因与拟南芥SCBP60g基因融合表达载体和基因功能互补表达载体并获得了转基因植物,通过激光共聚焦显微镜观察了SCBP60g蛋白的亚细胞定位情况,利用活体细菌生长量检测实验研究了SCBP60g蛋白在抗病中的功能;同时构建了SCBP60g过表达载体并检测了转基因植物对ABA的响应情况。结果显示,SCBP60g定位于细胞核;SCBP60g基因不能恢复CBP60g基因突变体对丁香假单胞菌的敏感性;过量表达SCBP60g基因不影响拟南芥对ABA的敏感性。表明SCBP60g没有参与拟南芥的抗病防御反应以及对ABA的响应。     

转基因食品检测技术研究进展浅析

随着社会经济的飞速发展和科学技术的不断创新,转基因食品检测技术在我国农业中的应用范围不断扩大。同时转基因食品的生产也为我国带来了巨大的经济效益,扩大了农业的发展空间。近些年来,虽然我国的转基因食品检测技术已经趋向成熟,但是也有越来越多的人开始对转基因食品的安全问题提出了担忧。本研究通过对转基因食品检测技术的进展进行深入研究,以期为我国未来转基因食品检测技术的创新发展提供相应的借鉴。     

框轻结构轻质墙板裂缝的探讨

20世纪90年代,广州市全面推广轻质墙体材料,框轻结构体系也广泛应用,进一步推动了墙体材料的更新换代。在新体系、新材料、新工艺发展的过程中,轻质墙体材料的适用性尚存在进一步改进与完善的问题。本文结合部分工程案例,参考砖石结构理论和规范,为轻质墙板裂缝课题研究提供参考性的建议。     

武汉地区多肉植物产业发展报告

为了研究多肉植物在武汉地区未来发展的趋势,综述了多肉植物产业2012—2017年在中国的发展现状及在武汉地区发展多肉植物产业的优势与风险,发现中国多肉植物产业出现了种植规模与产量激增、商品苗价格下跌的问题,武汉地区有交通、市场优势,但存在气候、技术等风险。研究为武汉地区多肉植物产业的可持续发展提供了参考,但对多肉植物在国外发展情况的调查还不充分,今后需进一步研究多肉植物产业在国外的发展情况。     

转基因树木研究现状及发展趋势

通过基因工程技术将外源基因到树木基因组弥补了其传统育种手段周期长、过程繁琐、性状难以人为控制的缺点。在过去20年,树木转基因研究取得了令人鼓舞的成果,选育出多种携带外源基因的树木,并经过了限制性田间试验。国外开展树木转基因研究先于国内,在抗除草剂、抗虫、降低木质素等方面取得了显著进展,同时开展了转基因表达稳定性和安全性方面的研究。本文综合论述了近年来国内外树木转基因工作研究进展。就各国转基因树木种植概况、遗传性状改良方向、田间试验情况进行了介绍和总结,分析了存在的问题和未来发展的趋势。以期为我国从事林木基因工程研究的科研工作者以及政府决策部门提供借鉴,以促进我国树木基因工程的研究和发展。