A群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离糖含量测定方法的建立及其验证

目的建立A群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离糖含量测定的方法,并进行验证。方法采用脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,DOC)法,分别取1 ml 10、50、100、150、200、250、294μg/ml载体蛋白破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT),与100μl 1%DOC溶液(pH 7.3)混匀,离心收集上清,检测蛋白含量,确定DOC沉淀载体蛋白范围;用不同离子强度梯度的缓冲液(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mol/L氯化钠)稀释游离多糖与载体蛋白混合物溶液,收集上清,检测多糖含量,确定游离多糖分离条件;以1%DOC溶液作为稀释剂绘制参考品磷含量测定标准曲线,确定DOC存在对磷含量测定结果的影响,建立DOC沉淀蛋白结合磷含量测定方法测定A群脑膜炎球菌多糖结合物中游离糖含量的方法,并对建立的方法进行精密度、准确性及重复性验证。结果 DOC沉淀载体蛋白浓度控制在250μg/ml以下;将0.8 mol/L氯化钠溶液作为A群脑膜炎球菌多糖结合物中游离糖含量测定所需最佳稀释液;以1%DOC溶液作为稀释剂绘制的磷含量标准曲线线性范围在0~4μg/ml时,r2为0.999 9。A群脑膜炎球菌多糖结合物原液及游离糖对照品与载体蛋白混合物沉淀中蛋白回收率在95%~110%之间;游离糖添加试验回收率均在95%以上;4批A群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物游离糖含量平均值均在规定范围内。结论建立的DOC沉淀蛋白结合磷含量测定方法可有效分离结合物与游离多糖,并准确测定结合物含量。     

煤中磷含量的测定及影响因素

煤中的磷是有害元素之一,在炼焦时煤中磷会影响钢铁产的冷脆性,作为动力燃料时,煤中磷会影响锅炉效率,因此,磷含量是煤质的重要指标和参数。国际标准和我国现行标准都采用磷钼蓝比色法。灵敏度高,结果可靠,但分析周期较长,有许多因素会影响磷的准确测定。本文从煤中磷测定的各环节入手,阐述了用磷钼蓝分光光度法检测时的原理及影响因素。     

循环冷却水中磷含量的测定

提出用钼酸铵分光光度法测定循环冷却水中的磷酸盐含量,严格控制好硫酸,各试剂的加入量,以及显色时间.相对于用钼酸铵目视比色法,更省时间,且测定范围更宽.     

A群脑膜炎球菌多糖-重组蛋白Pep10结合物的制备及其免疫原性

目的制备A群脑膜炎球菌多糖(GAMP)-重组蛋白Pep10结合物,并检测其免疫原性,探讨重组蛋白Pep10作为一种候选载体蛋白的可行性。方法GAMP经溴化氰(CNBr)活化后,共价接合己二酰肼(ADH)手臂,在碳二亚胺(EDAC)催化下与重组蛋白Pep10偶联,制备结合物GAMP-ADH-Pep10。纯化后免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA法检测小鼠血清中抗GAMP IgG抗体水平,并分析载体诱导的免疫抑制率。结果所制备的多糖衍生物GAMP-ADH及多糖-蛋白结合物GAMP-ADH-Pep10均具有GAMP抗原特异活性,免疫小鼠后可诱生比多糖单独免疫更高水平的GAMP血清IgG抗体,且接近GAMP-ADH-TT疫苗诱生的抗体水平,并能形成免疫记忆。重组蛋白Pep10诱导的免疫抑制率远低于TT诱导的免疫抑制率。结论制备的重组蛋白Pep10与A群脑膜炎球菌多糖偶联能发挥较强的载体效应,为研究理想载体蛋白提供了新的思路。     

对粒化电炉磷渣中五氧化二磷测定方法的改进

对JC/T 1088-2008中五氧化二磷的测定方法进行了改进。该法的灵敏度比JC/T 1088-2008中的方法提高了一倍多,五氧化二磷含量为3.30%~4.87%时相对标准偏差（n=6）为0.35%~0.52%,测定结果与原方法测定结果基本一致,回收率在99.67%~102.00%之间。该法相对简单快速,易于推广,尤其适合批量试样的测定     

磷酸锌中磷含量的快速测定

采用磷钒钼黄比色法测定磷酸锌中磷含量。当磷含量为0 ~10mg/L时,直线方程线性关系良好,符合郎伯-比尔定律,吸光系数为1. 7×104 L/(mol·cm)。对比测定结果表明,磷钒钼黄比色法对实际样品测定结果与磷钼酸喹啉重量法相近,变异系数RSD<5. 00%,可作为磷酸锌产品磷的简洁、快速测定。     

磷钼蓝分光光度法测定乐果含磷量方法的研究

研究了将有机磷转化成无机磷酸盐,进而用磷钼蓝分光光度法测定乐果含磷量的方法。研究结果表明:该方法具有较高的灵敏度最低检出限为0.0051mg/L,其λmax=720nm,乐果的含磷量在0.0637～3.1454mg/L范围内完全符合比尔定律。这种方法所需药品普通,仪器为721型分光先度计,具有成本低、简便、易行、快速的优点,特别适宜于有机磷农药含磷量的测定以及实际水样中含磷量的测定。     

毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白含量

目的建立毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)含量,并对方法进行验证及初步应用。方法采用胶束电动毛细管电泳法测定TT含量,使用内径50μm未涂层熔融石英毛细管柱(有效柱长为104 cm),以40 mmol/L硼酸盐-SDS缓冲液(p H 9.30)为电泳介质,电压为30 k V,在200 nm紫外波长条件下进行检测。对方法的专属性、线性、精密度、重复性、稳定性、准确性、定量限进行验证,并用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量。结果该方法专属性、精密度、重复性、稳定性、准确性良好,TT在10~35μg/ml范围内与色谱峰相对内标峰面积比值呈良好的线性关系,r~2=0.995,游离蛋白的定量限为7μg/ml。用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量均小于10μg/ml。结论建立的毛细管电泳法操作简便、准确,可用于检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中的游离蛋白含量。     

硫铁矿中砷和磷含量的联合测定

本文利用砷和磷可以同时与铋盐、钼酸铵形成各自的杂多酸络合物的特点,用铋钼蓝分光光度法联合测定硫铁矿石中的砷和磷。反应最佳吸收波长为700nm,最佳显色时间为15min,实验表明该方法线性关系良好,精密度与加标回收率均满足质量要求。     

铋磷钼蓝分光光度法测定硅铁中磷的研究

研究用抗坏血酸还原,磷与钼酸铵、硝酸铋形成蓝色的显色反应。分析了酸度、显色时间的影响,确定了最佳测定条件。结果表明,加标回收率达97．88％。此方法简单、快速且稳定,能获得满意的分析结果。     

铁含量测定方法比较研究

依次以2,2’-联吡啶和1,10-菲啰啉为显色剂,研究了对应的测定铁含量的光度法的灵敏度、线性范围及常见阳离子的干扰倍数。结果显示,对干扰离子Cu2+、Ni2+及Zn2+而言,2,2’-联吡啶分光光度法的抗干扰能力较强;在回归方程线性相关系数相同的前提下,1,10-菲啰啉光度法灵敏度较高,2,2’-联吡啶分光光度法的线性范围较宽。研究结果对在一定条件下,更合理地选用测定方法,有一定的指导意义。     

3种支原体检测方法的比较

目的比较PCR法、酶法和DNA荧光染色法3种支原体检测方法的灵敏度。方法支原体阳性的BSR细胞培养上清10倍系列稀释后(10-1~10-8),接种至支原体阴性的Vero细胞上,盲传培养5代,每代每个稀释度的样品分别采用PCR法、酶法和DNA荧光染色法检测支原体,并以支原体阴性的Vero细胞作为阴性对照。结果 10倍系列稀释的阳性样品盲传1代,PCR法能检测到10-4,酶法和DNA荧光染色法能检测到10-3;盲传2代,3种方法均能检测到10-4;盲传3代后,3种方法均能检测到10-5,且检测的支原体滴度不随盲传代次的增加而增加。结论待检样本盲传3代后的支原体用3种方法均可检出,检测灵敏度一致。PCR法与酶法检测支原体准确、快速、简便易行,可作为DNA荧光染色法(支原体检测的金标准)的补充手段。     

腈纶含油率检验方法对比

使用索氏萃取法、红外光谱分析法、紫外分光光度法对腈纶短纤维含油率进行了测定,对其结果进行了假设检验分析,并比较了3种方法。结果表明:3种方法测定3．20 dtex×102 mm,6．00 dtex×102 mm, 2．78 dtex×64 mm腈纶短纤维的含油率分别为0．358％-0．365％,0．534％～0．550％,0．401％～0．410％; 假设检验分析表明,3种方法均接受假设,其检验水平一致;3种方法各有特点,在进行含油率测试时,可根据条件和需要,合理选择分析方法。     

三种灰分测定方法比较研究

用单一因素三水平方差分析方法,对三种不同测定方法测定的煤灰分实验数据进行统计分析,比较了三种灰分测定方法存在的差异;研究表明快速灰分测定法A更接近于仲裁方法,而快速灰分测定法B有一定的局限性。     

凝血酶原复合物中肝素含量测定的两种方法的比较

目的对凝血酶原复合物(prothrombin complex concentrate,PCC)中肝素含量测定的发色底物法和经典的硫酸鱼精蛋白中和肝素凝固法进行比较。方法对本公司制备的8批PCC实验样品,分别采用发色底物法和凝固法测定肝素含量,比较两种方法检测结果的差异和测定重复性。结果凝固法、发色底物法重复性均良好,凝固法检测有20%的误差,发色底物法CV在3.5%~9.2%之间;两种方法样品检测值的差值与均值比在4.4%~29.2%之间,检测值的相关系数为0.407,而仅选取用组分Ⅲ沉淀制备样品时,检测值的相关系数为0.938。结论凝血酶原复合物中肝素含量测定的两种方法中,发色底物法与经典的硫酸鱼精蛋白中和肝素凝固法相比,定量更精确,适用性更强。     

Comparison of different methods for the determination of the oil content in oilseeds

The investigation and assessment of the oil content of oilseeds are important criteria, especially for the oil milling trade. Standard methods for the determination of the oil content of oilseeds are very time consuming, with extraction periods of 4 to 8 h. Three different oilseeds—rapeseed, sunflower, and soybean—are extracted by supercritical fluid extraction (SFE), accelerated solvent extraction, microwave-assisted extraction, solid fluid vortex extraction, and Soxtherm, and the results are compared with the result of the German Fat Science Society (DGF) standard method B-I 5 (87). Besides, the extracts are analyzed regarding the content of tocopherols as a parameter for mild extraction conditions and the content of diglycerides and free fatty acids as parameters for the content of more polar lipids. The results of the determination of the oil content under optimal conditions are comparable with the results of the DGF standard method B-I 5 (87). There are no significant differences between the different methods. The content of tocopherols is dependent upon the extraction method and the type of oilseed. The highest content is obtained by SFE. The content of diglycerides and free fatty acids varied according to the oilseed.     

两种Lowry法检测百日咳疫苗原液蛋白含量的比较

目的比较《中国药典》三部(2015版)收录的两种Lowry法测定百日咳疫苗原液蛋白定量的差异,为原液蛋白准确定量和新版药典Lowry法的适用性确认提供依据。方法 9个实验室分别按照现行药典收录的两种Lowry法,对4家15批百日咳疫苗原液蛋白含量进行测定。并与凯氏定氮法检测结果进行比较。结果方法 1(未经酸沉淀Lowry法)实验室内测定结果的变异系数(CV)均值在1.7%~8.9%之间,实验室间测定结果的CV值在3.9%~9.3%之间;方法 2(酸沉淀Lowry法)实验室内测定结果的CV均值在3.6%~7.4%之间,实验室间测定结果的CV值在3.9%~18.1%之间。同一样品两种方法测定结果差异有统计学意义(P0.001),结果呈相关性(R2=0.944 9)。在与部分样品测得的凯氏定氮法结果的比较中,方法 1差异有统计学意义(P0.001),方法 2差异无统计学意义(P0.05)。结论所有样品采用同一种Lowry方法测定时所得结果实验室内和实验室间一致性较好,采用方法 2测定结果明显低于方法 1,更接近凯氏定氮法结果真实值,表明酸沉淀对Lowry法百日咳原液蛋白定量有显著影响。与Lowry方法 1相比,Lowry方法 2更能准确反映百日咳疫苗原液的真实蛋白含量,且精密度、适用性均符合要求。     

内标法与外标法测定餐具洗涤剂中甲醇含量的分析比较

对GB 9985—2000中内标法测定餐具洗涤剂中甲醇含量的方法进行了改进,并比较了内标法和外标法在测定洗涤剂中甲醇含量的差异。通过向洗涤剂样品中加入异丁醇内标液,用75%乙醇定容到一定体积,经0.45μm针式微孔滤膜过滤,DB-FFAP色谱柱分离,火焰离子化检测器(FID)检测,内标法和外标法分别计算洗涤剂中甲醇的含量。实验得到方法的检出限为0.5 mg/L,内标法和外标法的相对标准偏差(RSD)分别为0.4%~0.9%和0.6%~1.2%,平均回收率分别为100%~102%和95%~99%。结果表明,采用内标法和外标法的定量方式获得的结果均能满足检测要求,但内标法的精密度和回收率优于外标法。     

离子选择电极法测定净化湿法磷酸中氟含量的方法比较

分别采用标准曲线法和标准加入法测定净化湿法磷酸中氟含量,考察两种方法测定结果的差异。实验结果表明,标准曲线法的相关系数(R2)均在0.999 5以上;当加入氟标准溶液体积不小于0.5 m L,标准加入法可替代标准曲线法对湿法精制磷酸中氟含量进行测定。该方法简便、快速、可靠,可推广至生产应用中。     

头皮水分含量测试方法比较研究

采用两种仪器Derma Lab和Corneometer,研究了不同处理方式下头皮水分含量,得到了直接使用Derma Lab测量头皮水分含量的简便方法。结果表明,Derma Lab和Corneometer对无毛发皮肤的测量值具有显著相关性;剃发和非剃发处理对Corneometer的影响较大,而对Derma Lab的影响较小;并且Derma Lab能够有效的对香波使用前后的头皮水分含量进行评价。