免疫亲和柱HPLC快速测定蜂蜜中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2

本文采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提纯黄曲霉毒素的特效手段 ,提取液挥干后 ,经衍生用HPLC荧光检测器测定。本法在样品添加 5μg/Kg黄曲霉毒素时进行十次测定 ,平均回收率分别为G173 .1 %、B191 .6%、G2 90 .2 %、B2 76.6% ,2 .5μg/Kg样品 1 0次测定的精密度分别为 :G11 1 84 %、B14 .2 8%、G2 1 3 .4 1 %、B2 1 4 .2 0 % ,本方法在 2 5pg～ 1 2 50pg范围内成线性 ,相关系数分别为 :G1:r=0 9990、B1:r=0 .9994、G2 :r=0 .9995、B2 :r=0 .9992。测定的最低检出量为 6.2 5pg。     

ELISA法检测红曲中的黄曲霉毒素B1

探讨了红曲中黄曲霉毒素B1的提取方法，发现在传统提取方法甲醇／水溶液(体积比1：1)直接提取的基础上加氯仿进行液液萃取后，进行ELISA法测定其含量，可以消除假阳性，同时提高了检测灵敏度。在加标质量分数分别为2．5，5，10／μg／kg时，加标回收率达到101%～146．8%，方法的重复性较好，变异系数小于13％，样品最低检测限达2．5μg／kg。     

免疫层析试纸法快速检测粮食中黄曲霉毒素B1的验证研究

4个国家粮食质量监测机构,会同两家免疫层析试纸开发厂商,使用稻谷、玉米两种受黄曲霉毒素B1污染的原始样本,用高效液相色谱法和免疫层析试纸法对粮食中黄曲霉毒素B1测定方法进行了对照研究,对免疫层析试纸法进行了可行性验证.结果表明:免疫层析试纸法和高效液相色谱法的相符率可达90.5%以上;免疫层析试纸法操作简单,检测准确、方便、快速,可用于现场快速检测和初筛粮食中的黄曲霉毒素B1.     

免疫亲和柱HPLC快速测定蜂蜜中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、

本文采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提纯黄曲霉毒素的特效手段，提取液挥干后，经衍生用HPLC荧光检测器测定。本法在样品添加5μg/Kg黄曲霉毒素时进行十次测定，平均回收分别为G73．1％、B191．6％、G290．2％、B276．6％、2．5μg/Kg样品10次测定的精密度分别为G111．84％、B14．28％、G213．41％、B214．20％，本方法在25pg-1250pg范围内成线性，相关系数分别为：G1：r=0.9990、 B1:r=0.9994、B2:r=0.9992.测定的最低检出量为6．25pg。     

采用免疫亲和柱高效液相色谱法检测稻米中的黄曲霉毒素B1

采用免疫亲和柱净化高效液相色谱法检测稻米中的黄曲霉毒素B1(AFB1)。稻米样品经甲醇/水(80/20, V/V)粗提取,再经免疫亲和柱净化和三氟乙酸衍生化,最后经高效液相色谱法测定。经检测,AFB1含量在0.01~2.50 ng范围内,所得到的AFB1标准曲线呈良好的线性关系,回归方程为Y=60.355x +0.054 3,相关系数为0.999 7。该方法检出限为0.1 μg/kg,加标回收率为89.26%~99.45%,SD为2.48%~3.74%。由于该方法操作的选择性高、灵敏度高、检测效果好,因此适于较大批量粮油作物中黄曲霉毒素的检测,便于示范推广。       

柠檬酸处理对花生粕中黄曲霉毒素B1脱毒效果的研究

研究了柠檬酸不同处理条件(液料比、浓度、时间)对花生粕中黄曲霉毒素B(1AFB1)脱毒效果的影响.结果表明,花生粕中黄曲霉毒素B1含量在一定的范围内随液料比的增加、浓度的增大及时间的延长而显著降低.当柠檬酸溶液在液料比为5∶1、浓度为80 g/L、处理时间为30 min时具有很好的脱毒效果,可将花生粕中的毒素由25.75μg/kg降低至5.0μg/kg以下.     

HPLC测定玉米中黄曲霉毒素B1前处理提取方法的探讨

HPLC测定玉米中黄曲霉毒素B1,通过加标回收和精密度试验,对超声、振荡、高速均质3种样品前处理提取方法的提取效果进行了比较分析,结果表明:采用高速均质法处理样品,有较高的回收率和较好的稳定性.     

谷物中伏马菌素B1残留的直接竞争ELISA检测方法研究

以抗伏马菌素B(1Fumonisin B1,FB1)单抗作为包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP-FB1)作为标记抗原,建立检测谷物中FB1的直接竞争酶联免疫吸附法(dc-ELISA);并与国家标准方法(HPLC,GB/T 255228—2010)进行比较,选取真菌毒素呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1考察方法的特异性.结果显示:该dc-ELISA方法线性范围在200~800 ng/mL之间,回归方程为Y=-0.000 8X+0.978 9,决定系数R2为0.997 4,检出限为182.4 ng/mL,6份样品的批内和批间变异系数分别为7.4%和7.7%,平均加标回收率为98.5%(n=6).样品检测显示dc-ELISA与HPLC方法具有良好的相关性(r=0.999 6),与其他真菌毒素无交叉反应.因此,dc-ELISA法可应用检测玉米等谷物中FB1的含量,适合大批量筛选样品.     

气质联用法测定生食水产品中的挥发性N-亚硝胺

利用二氯甲烷提取腌制生食水产品中的挥发性N-亚硝胺,即:N-二甲基亚硝胺(ND-MA)、N-二乙基亚硝胺(NDEA)、N-亚硝基吡咯烷(NPYR)、N-二丙基亚硝胺(NDPA).利用气质联用仪采用选择离子法(SIM)进行定性定量检测.本检测方法前处理简单快捷,易于操作,线性相关系数分别可达0.999 1、0.999 1、0.999 0、0.999 5;线性范围分别可达0～250μg/mL;方法重现性良好,其RSD可达1.49%～1.94%;回收率可达90%～105%;灵敏度高,检测限分别为0.04μg/kg、0.025μg/kg、0.05μg/kg、0.01μg/kg.     

固相萃取-高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B1

研究了固相萃取-高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B1的方法.玉米样品经乙腈-0.1 mol/ml磷酸二氢钠(1+1)提取,提取液通过固相萃取柱净化,净化液经柱前衍生,Shimadzu STRODS色谱柱分离,荧光检测器检测,外标法定量.对添加不同含量水平的伏马毒素B1,5次重复实验的平均回收率为82.1%～87.8%,变异系数(CV)为4.7%～7.8%,检测低限为0.020 mg/kg.     

益津降糖颗粒质量标准改进研究

为改进益津降糖颗粒中甘草、仙人掌的定性鉴别和人参皂苷Re含量的测定方法,采用薄层层析色谱(thin layer chromatography, TLC)对甘草、仙人掌进行了定性鉴别优化,采用高效液相色谱(high -performance liquid chromatography, HPLC)对人参皂苷Re含量进行了测定,并对分析条件进行了优化.色谱条件: Sepax Bio - C18(4.6 mm×250 mm, 5.0 μm)为色谱柱, 0.05%磷酸溶液-乙腈(体积比为80:20)为流动相,流速为1.0 mL/min, 检测波长为203 nm.实验结果显示,TLC谱图中甘草和仙人掌的相邻斑点均呈现规则的圆形,且分离度良好; 人参皂苷Re在0.05～10 μg范围内呈良好线性关系(R2=0.999 7),且精密度、重复性、稳定性实验的RSD值均小于2.48%,同时阴性对照无明显干扰.因此,本文方法可为提高益津降糖颗粒的质量检测标准提供参考.     

银耳多糖超声波提取工艺优化及抗BV2细胞炎症的作用研究

以银耳为原料, 采用超声波辅助热水浸提法提取银耳多糖, 以多糖提取率为指标, 以超声波功率、提取料液比、提取温度和提取时间为影响因素, 设计单因素试验, 并通过正交试验得到较佳提取工艺。通过用TRPV1(Transient Receptor Potential Vanilloid1)试剂盒检测了小胶质细胞TRPV1的释放水平, 与脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)对照组相比, 不同质量浓度的银耳多糖组(62.5, 250, 1000 μg/mL)均能不同程度地抑制TRPV1的释放量。说明了银耳多糖对于BV2小胶质细胞炎症具有良好的抑制作用。     

离子液体超声辅助提取黑果腺肋花楸果中花青素的工艺研究

优化离子液体超声辅助提取黑果腺肋花楸果中花青素的工艺条件。以花青素的提取率为指标,通过单因素与正交试验相结合的方式探索离子液体超声辅助提取黑果腺肋花楸果中花青素的工艺参数。试验结果表明：提取溶剂乙醇的体积分数为80%,料液比为1:25,提取温度为65 ℃,提取时间为3 h,超声波功率70 W,离子液体为溴化-1-丁基-3-甲基咪唑,离子液体浓度为0.5 mol/L,在优化的提取工艺条件下,花青素的提取率可以达到8.8242 mg/g。优化的离子液体超声辅助提取黑果腺肋花楸果中花青素的提取率高,为黑果腺肋花楸果的开发利用提供了依据。     

超声提取茯苓中三萜类成分的工艺研究

实验采用超声法提取茯苓中三萜类化合物,采用L9（34）正交试验优化提取工艺,考察了溶剂种类、料液比、提取次数、提取时间四个因素对茯苓中三萜类化合物的提取率的影响。薄层色谱法定性鉴别,紫外—分光光度法定量测定三萜类化合物的含量,以提取得率为评价指标,确定了茯苓中三萜类成分的最佳提取工艺。结果显示在温度为25℃,频率为25 kHZ,确定茯苓中三萜类化合物的最佳提取工艺为：用20倍量的乙酸乙酯提取3次,每次30 min。优化设计后的提取工艺合理,可为茯苓中三萜类化合物的提取以及进一步研究奠定基础。     

超声辅助碱醇法提取青麦仁麸皮中阿魏酸的工艺研究

以青麦仁麸皮为原料,采用HPLC-DAD检测方法,研究超声辅助碱醇法提取青麦仁麸皮中阿魏酸的最佳工艺。建立了阿魏酸的液相色谱标准曲线,回归方程为Y=25159X+97.026(R^2=0.9994,n=5);通过单因素试验,考察了碱醇体积比、碱液质量分数、超声功率和超声温度对阿魏酸提取率的影响,并采用响应面法进行工艺优化。建立了青麦仁麸皮阿魏酸提取率与各影响因素的回归方程,确定了最佳提取工艺为:料液比1∶12(g/mL)、碱液质量分数4.56%、碱醇体积比2.3∶1、超声时间30 min、超声温度57℃、超声功率240 W。在最佳工艺条件下,青麦仁麸皮阿魏酸提取率达85.68%,与模型预测结果基本相符。     

海带生长素IAA分离纯化及高效液相色谱分析

对海带(Laminaria japonica Aresch.)中的生长素IAA的分离纯化条件进行优化,结果以超声法破碎细胞、采用体积分数95%乙醇浸提,乙醚萃取,硅胶脱色,然后通过Sephadex LH20柱层析为最佳条件,利用反向高效液相色谱(RP-HPLC)方法对IAA进行了定性和定量分析.实验表明:该方法操作简便、准确,重现性好,毒性较低,通过RP-HPLC结果可初步确定纯化产物中含有IAA,产量可达65～95μg/kg(鲜重).研究结果为进一步生物活性的研究和海带生长素及其他植物生长促进剂的开发和利用奠定了基础.     

超声辅助乙醇提取龙葵生物总碱的研究

通过正交试验确定传统乙醇溶液提取龙葵生物总碱的最佳提取条件,在此基础上,研究超声辅助乙醇提取龙葵生物总碱的工艺条件,并对提取物龙葵生物总碱进行了定性、定量分析.实验表明:超声辅助乙醇提取龙葵生物总碱,提取率略高于传统提取技术,可节省提取时间和外加能源.     

正交设计法优选木瓜叶总黄酮超声提取工艺

为了充分利用木瓜叶资源,优化木瓜叶总黄酮提取工艺,采用超声波辅助提取法,通过单因素和正交试验设计法考察了乙醇浓度、固液比、提取温度和提取时间对木瓜叶总黄酮提取率的影响．优化得到的提取工艺为：当乙醇质量分数70％,固液比1：40（g／mL）,提取温度70℃,提取时间70min时,提取的总黄酮提取率达2．50％,此法提取率高,可为木瓜叶资源综合利用提供参考．     

蚕豆中黄曲霉毒素B_1提取方法的研究

主要探讨了高效液相色谱法快速检测蚕豆中黄曲霉素B1的提取条件;分别考察了在不同超声波提取时间、不同超声波提取功率下、不同浓度的甲醇对黄曲霉素B1分离检测效果的影响;并用响应面设计探讨了不同条件的交互作用;找出了最佳工艺参数的范围：甲醇浓度为49.90%～50.35%,提取时间为6.09～6.22 min,超声波提取功率为95.2%～97.1%。可为黄曲霉素B1的检测提供简便、准确、可靠、重复性好的分析方法。     

蚕豆中黄曲霉毒素B1提取方法的研究

主要探讨了高效液相色谱法快速检测蚕豆中黄曲霉素B1的提取条件;分别考察了在不同超声波提取时间、不同超声波提取功率下、不同浓度的甲醇对黄曲霉素B1分离检测效果的影响;并用响应面设计探讨了不同条件的交互作用;找出了最佳工艺参数的范围:甲醇浓度为49.90%～50.35%,提取时间为6.09～6.22 min,超声波提取功率为95.2%～97.1%。可为黄曲霉素B1的检测提供简便、准确、可靠、重复性好的分析方法。