树蝴蝶多糖LKY-I的结构和抗氧化、抗肿瘤活性评价

采用超声波辅助水提、乙醇沉淀、DEAE-52阴离子交换层析法从树蝴蝶(Lobaria koorkauae Yoshim)中分离纯化得到多糖LKY-I。采用凝胶渗透色谱法(gel permeation chromatography,GPC)结合葡聚糖凝胶Sephadex G-100分离,测定其分子质量分布及纯度;利用傅里叶变换红外光谱、气相色谱和核磁共振对其结构进行解析;通过体外清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)free radical,ABTS+·)以及对铁离子还原力(ferric-reducing antioxidant power,FRAP)测定结果,评价LKY-I的抗氧化能力;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)测定LKY-I对肿瘤细胞Hep G-2、HCC827、MCF-7增殖的抑制作用。结果显示:LKY-I的总糖含量为88.91%,重均分子质量为61 598 D,是组分均一的多糖,由鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,其物质的量比为1.1∶2.0∶46.5∶28.5∶20.5。傅里叶变换红外光谱分析结果显示,LKY-I具有一般多糖类物质的特征吸收峰,单糖残基以吡喃环的形式存在。高碘酸氧化、Smith降解以及核磁共振分析表明,LKY-I是含有甘露糖的D-吡喃糖环,包括α和β两种构型,由24.68%的(1→6)或(1→)连接的糖苷键组成。在250~10000μg/m L的质量浓度范围内,随着多糖质量浓度的升高,LKY-I对DPPH自由基、ABTS+·的清除率逐渐增大,当质量浓度为10000μg/m L时,清除率分别达44.12%、24.74%,FRAP值可达0.071 17 mmol/L,与100μg/m L VC(0.072 31 mmol/L)相当。在125~2000μg/m L范围内,随着多糖质量浓度的增加,LKY-I对癌细胞的增殖抑制率逐渐增大。当质量浓度为2000μg/m L时,LKY-I对肿瘤细胞Hep G-2、HCC827、MCF-7增殖的抑制率达到半抑制浓度,说明树蝴蝶水洗多糖LKY-I具有一定的抗肿瘤活性。     

正红菇多糖的抗癌和免疫调节活性研究

本文选用人宫颈鳞癌细胞SiHa进行体外抗肿瘤活性试验,并通过划痕实验对其抗肿瘤活性进行验证;同时选用昆明小鼠脾脏细胞的体外增殖试验和小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红以及刺激巨噬细胞产生NO和IL-6的试验,探讨正红菇子实体多糖(HAP-I)的抗癌和免调节疫活性。结果显示,正红菇多糖在125~2000μg/mL的范围内对SiHa细胞的增殖抑制作用随着浓度的增大而增大,并有一定的剂量依赖性;通过癌细胞划痕实验,证实其对癌细胞SiHa增殖有抑制作用。多糖浓度在10~500μg/mL范围内能够促进淋巴细胞的增殖,且能协同LPS和ConA显著促进淋巴细胞的增殖,HAP-I协同LPS在50μg/mL和100μg/mL浓度时增殖作用显著(p0.05),HAP-I协同ConA在100μg/mL浓度时协同效果最佳。HAP-I能增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,并且促进巨噬细胞分泌NO和IL-6,表明正红菇多糖有较好的免疫活性。     

活性多糖增强免疫调节功能的研究进展

免疫调节功能是维护机体健康的重要功能,多糖的免疫调节功能是其生产活性的重要方面,近年来在这方面也有较快的进展.本文就活性多糖的增强免疫调节功能的最新研究进行全面概述.     

白首乌多糖的免疫活性研究

目的:研究了白首乌多糖(RCBPs)体外对兔子淋巴细胞转化及体内对正常小鼠免疫功能的影响.方法:将RCBPs分为2、4、6g几三个剂量组,分别加入含有兔血的营养瓶内,通过观察T淋巴细胞的转化情况,研究多糖体外免疫功能状况;另将RCBPs分为高、中、低三个剂量组(150、100、50mg/kg·d),连续给小鼠灌胃7d,并进行小鼠体内免疫功能测试.结果:RCBPs各剂量组,均能极显著地(p<0.01)促进PHA诱导的家兔T淋巴细胞在体外的增殖能力;RCBPs能提高小鼠的胸腺和脾脏指数、巨噬细胞的吞噬功能、增强小鼠迟发型超敏反应、加速碳粒的清除.结论: 自首乌多糖具有免疫调节活性.     

龙须菜多糖的提取及其免疫调节活性研究

本文采用水提法、酸提法和酶提法提取龙须菜多糖,比较了不同方法对提取率的影响,并测定了酸提法制备的龙须菜多糖的化学组成及免疫活性。结果发现:采用柠檬酸提取龙须菜多糖的提取率最高,为27.66±0.49%,为水提法的1.86倍;其产物多糖的总糖含量、蛋白质含量、糖醛酸含量以及硫酸基含量分别为62.24±1.09%、1.54±0.15%、6.25±0.72%和16.74±0.11%,未检出多酚类物质。此外,龙须菜多糖对RAW 264.7细胞具有显著的促增殖作用,并且能够显著地提高RAW 264.7细胞吞噬中性红的能力;且龙须菜多糖不仅能够提高光老化小鼠的胸腺指数和脾脏指数,还能降低小鼠血清白介素-10的含量,提高小鼠血清肿瘤坏死因子-α的含量,这些研究表明龙须菜多糖具有较强的提高小鼠免疫功能的能力,能够缓解光老化过程中的免疫抑制现象。     

鼎湖鳞伞多糖的提取工艺及体内免疫调节活性的研究

采用三因素三水平正交实验方法,研究了液料比、提取温度、提取时间这三个因素对鼎湖鳞伞多糖(Polysaccharide from Pholiota dinghuensis Bi,PFPD)提取工艺的影响。以雌性小白鼠作为模型实验,对其免疫器官指数、耳肿胀度、血清溶血素、血清和脾脏中溶菌酶的活性进行了研究。结果表明:PFPD最佳的提取工艺条件为:提取温度为90℃,提取时间为6h,液料比为20mL/g,PFPD的得率为8.95%。小鼠腹腔注射PFPD能使因环磷酰胺诱导产生的脾脏指数下降得以恢复,在一定程度上提高了机体的免疫力,三组不同剂量的PFPD可以显著地提高脾脏指数、迟发型超敏反应的右耳肿胀度、血清溶血素水平、脾脏和血清中溶菌酶的活性,且这种变化与鼎湖鳞伞粗多糖呈现剂量依赖关系。本实验表明鼎湖鳞伞多糖具有一定的体内免疫调节活性。      

龙须菜酸性多糖的非特异性免疫调节活性研究

本文从体外和体内两方面研究了龙须菜酸性多糖(GLSPs)对小鼠非特异性免疫的调节作用。结果显示,GLSPs在体外能够增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用且呈剂量依赖性,但是对小鼠脾NK细胞的杀伤活性未见显著影响;将GLSPs分别以200mg/kg·d和600mg/kg·d连续灌胃管理小鼠14 d,GLSPs能够显著提高小鼠脾NK细胞的杀伤活性,其中最大杀伤率近90%;能够增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用且与多糖剂量正相关,同时使小鼠白细胞和淋巴细胞略有增加但较空白组小鼠无显著差异,表明GLSPs对非特异性免疫具有显著的调节作用。     

树蝴蝶多糖的免疫调节活性研究（英文）

本文采用超声波辅助水提、乙醇沉淀、DEAE-52纤维素阴离子交换层析法分离纯化得到从树蝴蝶原料中提取的中性多糖LKY-I。以不同浓度的多糖为原料,研究了LKY-I的体外免疫调节活性。结果表明,LKY-I在125~500μg/mL浓度范围内对RAW 264.7细胞无明显毒性。LKY-I可显著增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,当多糖浓度为500μg/mL时,吸光度值可达到1.39,显著高于阳性对照组LPS。LKY-I可促进巨噬细胞RAW 264.7分泌NO,最大分泌量可达55.42±1.79μM;与正常对照组相比,LKY-I促进巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α细胞因子,分泌量分别增加了102.3%和289.5%。在125~500μg/mL浓度范围内,LKY-I可显著提高i NOS、IL-6及TNF-α基因的表达。LKY-I协同LPS和Con A能显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。研究结果表明,LKY-I多糖具有良好的体外免疫调节活性,可以作为一种有益健康的成分应用到食品工业中。     

超声波对密花石斛多糖理化性质及免疫调节活性的影响

本文从超声波处理前后密花石斛多糖的分子量分布、特性黏度、荧光辅助糖电泳、溶液构象及免疫调节活性的变化角度,探讨超声波对多糖理化性质及与生物活性的改变。结果表明:超声波处理不仅降低密花石斛多糖高分子量组分的分子量和特性黏度,使多糖的溶液空间构象由大的纺锤体状聚集体解聚分散成小的结构紧密的聚集体,而且可显著提高多糖促进脾细胞增殖的活性,提示超声处理可改变多糖的理化性质并影响其生物活性。     

复合食用菌多糖的免疫活性研究

研究了香菇、灵芝、平菇多糖按一定的比例混合得到的复合食用菌多糖对小鼠免疫活性的影响。小鼠脾淋巴细胞增殖试验结果表明,复合食用菌多糖在低剂量下即对小鼠细胞免疫功能有显著提高作用;非特异性免疫试验结果表明,对小鼠的非特异性免疫功能只有在中剂量组和高剂量组才显示出增强作用;体液免疫试验结果表明,复合多糖在低剂量下即对小鼠体液免疫功能有显著提高作用。动物体外试验和体内试验结果表明,在适当的剂量范围内,与单一食用菌多糖相比,食用菌复合多糖具有较好的免疫调节功能。     

总状蕨藻Caulerpa racemosa多糖抗肿瘤和免疫增强活性

以荷S180实体瘤的昆明小鼠为模型,研究了总状蕨藻粗多糖(CRP)的抗瘤作用及其对免疫器官等的影响,采用细胞培养法研究了CRP及其两个主要级分(CRPF1和CRPF2)对正常小鼠免疫细胞功能的影响。实验结果显示:总状蕨藻粗多糖对S180实体瘤具有显著的抑制作用,其抑瘤率和免疫活性与给药方式、剂量等因素有关,在注射和灌胃给药条件下,当CRP剂量分别为25mg/(kg.d)和100mg/(kg.d)时,其抑瘤率达到最大值,分别为46.2%和58.2%,且在注射给药时能显著地增加小鼠的脾脏指数。在50~200mg/(kg.d)范围内,灌胃给药时能升高小鼠碳廓清指数;细胞培养结果显示:CRP能提高正常小鼠的免疫功能,不过,其对静止淋巴细胞增殖的促进作用和对小鼠腹腔巨噬细胞MФ分泌NO的促进作用均小于CRPF1和CRPF2。以上事实表明,总状蕨藻多糖具有较强的抗肿瘤和增强小鼠免疫力的作用。     

黑木耳多糖的结构组成及其免疫活性研究

目的:对高温蒸汽浸提法提取得到的黑木耳多糖进行结构解析,并探究其在免疫功能方面的活性。方法:通过气相色谱(GC)、红外光谱(FT-IR)、刚果红实验等对其结构进行分析,建立RAW264.7巨噬细胞的免疫模型以探究其免疫刺激活性。结果:黑木耳多糖主要由鼠李糖、甘露糖和葡萄糖组成,其具有和免疫活性相关的β-构型糖苷键和三股螺旋构象。黑木耳多糖可以促进巨噬细胞的增殖,增强巨噬细胞的吞噬作用,显著诱导RAW264.7细胞中一氧化氮的分泌及细胞因子IL-6、TNF-α的释放。结论:黑木耳多糖具有与免疫相关的多种结构,对巨噬细胞具有强烈的刺激作用,在用作潜在的免疫刺激剂方面具有广阔的前景,黑木耳也可作为调节人类免疫力的功能性食品发挥巨大的应用价值。     

紫芝菌丝体多糖的结构鉴定及免疫活性研究

本采用热水浸提紫芝菌丝体得到粗多糖后经DEAE-sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200 HR分离纯化出一种新型的灵芝多糖LZ1。通过采用凝胶渗透色谱法、电镜、紫外、红外光谱、气相色谱、核磁共振、高碘酸氧化和Smith降解方法等方法对LZ1进行结构鉴定和解析,结果表明LZ1是不含核酸、蛋白质的均一多糖,其分子量为7498 u;其是由鼠李糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖以0.94:0.50:1.68:26.91:4.80:17.12的摩尔比组成的酸性杂多糖,其糖苷键为1→4、1→2或1→6、1→3;刚果红实验表明LZ1没有三螺旋结构;通过小鼠巨噬细胞RAW264.7体外免疫模型,研究LZ1对TNF-α、IL-6、NO三种细胞因子的分泌情况的影响发现LZ1对这三种细胞因子的分泌有明显的促进作用,且呈现浓度相关性,表现出明显的免疫活性;通过AAPH诱导的红细胞氧化性溶血模型对LZ1的抗氧化活性进行评价,发现LZ1有很好的抑制AAPH诱导的红细胞氧化溶血的特性。     

白玉菇多糖对免疫抑制型小鼠的免疫调节作用

目的:研究白玉菇多糖对免疫抑制型小鼠脾脏、胸腺的免疫调节作用。方法:经超声波辅助热水浸提及Sevage法去蛋白得到白玉菇精多糖(RPHM)。将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、RPHM低剂量组(30 mg/kg bw/d)、RPHM中剂量组(60 mg/kg bw/d)、RPHM高剂量组(120 mg/kg bw/d),每天同时间段进行灌胃,灌胃15 d,建立环磷酰胺(CPA)免疫抑制型小鼠模型。取小鼠脾脏、胸腺,测定其体重、脏器指数;血清细胞因子、单核-巨噬细胞吞噬能力;外周白细胞、红细胞和血小板计数并观察脾脏、胸腺的形态学。结果:与模型组相比,RPHM中剂量组(60 mg/kg bw/d)、高剂量组(120 mg/kg bw/d)可明显提升免疫抑制型小鼠的毛色、活动情况、身体状况、食欲、体重、脾脏指数和胸腺指数、单核-巨噬细胞吞噬功能、骨髓造血功能等指标;也可在一定程度上提高免疫抑制型小鼠IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α的水平,并改善IL-6的分泌异常情况;还可明显改善免疫抑制型小鼠脾脏、胸腺的病变,改善结构完整度。结论:RPHM对免疫抑制型小鼠的脾脏和胸腺有明显的免疫调节作用。     

桑叶多糖对小鼠免疫调节作用的影响

目的:研究桑叶多糖对正常小鼠免疫功能的调节作用。方法:桑叶多糖分别以125、250、500mg/(kg.d)小鼠灌胃,空白对照组予以等量生理盐水,连续给药30d后,通过小鼠碳廓清实验、血清溶血素测定、脾淋巴细胞转化实验、脏器指数来观察桑叶多糖的免疫调节作用。结果:在125～500mg/(kg.d)剂量范围内,桑叶多糖可显著提高小鼠碳廓清指数和血清溶血素水平及ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力;低剂量组可显著提高小鼠胸腺指数。结论:桑叶多糖对正常小鼠具有一定的免疫增强作用。     

高良姜多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

通过Box-Behnken试验设计,获得了热水浸提高良姜多糖的最佳工艺;以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基能力、还原力、清除羟自由基能力、螯合铁离子能力为指标,评价了高良姜多糖的抗氧化活性。结果表明,热水浸提高良姜多糖的最佳工艺条件为液料比43∶1（mL/g）、浸提温度95 ℃、浸提时间3 h,在此条件下多糖得率实测值为11.81%。高良姜多糖具有较好的抗氧化活性,清除自由基能力、还原力和螯合铁离子能力均表现出一定的质量浓度依赖性;高良姜多糖清除DPPH自由基、清除羟自由基和螯合铁离子能力的半数有效质量浓度（EC50）分别为（0.59±0.01）、（0.05±0.003）g/L和（2.75±0.2）g/L。     

花脸香蘑菌丝体多糖提取条件优化及其体外免疫活性

为探讨花脸香蘑菌丝体多糖提取工艺及其免疫活性,以花脸香蘑菌丝体为原料,在单因素试验的基础上采用正交试验优化多糖提取条件;将不同质量浓度的花脸香蘑菌丝体多糖溶液作用于小鼠巨噬细胞Ana-1,通过对其细胞存活率、细胞因子TNF-α和IL-6分泌量、中性红吞噬能力以及膜表面蛋白Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)TLR2和TLR4表达量能力的测定,研究花脸香蘑菌丝体多糖的免疫活性。结果表明,花脸香蘑菌丝体多糖最佳提取条件为浸提温度65℃、浸提时间2.5 h、液料比40∶1(m L/g),提取率最高为15.88%;在0.05~1.6 mg/m L的有效剂量范围内,花脸香蘑菌丝体多糖能够不同程度地促进小鼠巨噬细胞Ana-1的增殖,提高细胞因子TNF-α和IL-6分泌量,增强中性红吞噬能力、膜表面蛋白TLR2和TLR4表达量能力,其中以1.6 mg/m L效果最佳。表明花脸香蘑菌丝体多糖具有优良的免疫活性。     

3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力比较分析

目的：研究玉木耳、黑木耳与毛木耳3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力。方法：利用水提醇沉法获得了3 种木耳的多糖,并测定了其多糖含量;采用分光光度法分别测定了3 种木耳多糖的总抗氧化能力,羟自由基、超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和亚硝酸根离子清除能力;同时进行了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌实验。结果：相同提取条件下,玉木耳、黑木耳与毛木耳的粗多糖提取率分别为13.87%、11.26%、7.91%,其中3 种木耳多糖质量分数分别为49.22%、41.50%和37.97%;总抗氧化活性检测结果显示毛木耳多糖的总抗氧化能力最高,黑木耳多糖与玉木耳多糖抗氧化能力相当;其中玉木耳多糖对羟自由基清除能力略强于黑木耳多糖,且二者的超氧阴离子自由基清除能力相当,均强于毛木耳多糖;3 种木耳多糖对DPPH自由基的清除作用较明显,其中玉木耳多糖相对较优,可达80%;此外,黑木耳多糖对亚硝酸根离子的清除能力最好,略优于其他两种木耳多糖。对常见细菌的抑制作用而言,3 种木耳多糖均对大肠杆菌有一定的抑制作用,但黑木耳多糖和毛木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑制作用较弱;仅玉木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有较好的抑制作用。结论：3 种木耳多糖具备各自不同的抗氧化活性与抑菌能力,且差异较为明显。     

蔓三七叶多糖的理化性质及免疫调节活性研究

以蔓三七叶为实验材料,采用水提醇沉法获得蔓三七叶多糖(GPLP),测定了其总糖、糖醛酸、硫酸根以及蛋白质的含量和单糖组成,并对其抗氧化活性和免疫调节活性进行了研究。采用苯酚-硫酸法测定总糖含量,硫酸-间羟基苯酚法测定糖醛酸含量,Ba Cl2-明胶法测定硫酸根含量,气相色谱法测定单糖组分和红外光谱测定多糖的结构。通过总抗氧化能力、DPPH自由基、OH自由基的清除能力评价GPLP的体外抗氧化能力,并探讨其对脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7巨噬细胞免疫调节活性。结果表明,所得GPLP的得率为15.56%,粗多糖中的总糖含量为52.32±1.56 g/100 g;单糖组成为阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为1.39:8.70:3.17:1。体外抗氧化实验结果表明GPLP的总抗氧化能力、DPPH和OH自由基清除效果明显。GPLP可显著提高RAW 264.7细胞内一氧化氮(NO)的浓度,在给药浓度为25.0μg/mL时,NO的分泌量达到最大,为31.24±2.30μM。GPLP可以提高免疫力,在功能食品的开发中,可以作为一个潜在的免疫调节剂。