苦瓜碱提多糖调节HepG2细胞胰岛素抵抗的途径

为研究苦瓜碱提多糖(AEMP)调节胰岛素抵抗的作用途径,采用0.25 mmol/L棕榈酸诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗细胞模型,并测定AEMP和二甲双胍对胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗量、糖原、甘油三酯(TG)及胰岛素抵抗信号通路相关基因m RNA表达水平的影响。结果表明,250,500,750μg/m L AEMP均可显著增加胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗量(从78.58%分别增至93.31%、94.57%和97.07%);750μg/m L AEMP能显著增加糖原含量(从70.78%增至95.51%),降低TG含量(从132.97%降至115.93%);AEMP还可显著提高胰岛素抵抗细胞中PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)、AKT(蛋白激酶B)和PGC-1α(过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子-1α)m RNA的表达水平,降低PEPCK(磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶)m RNA的表达水平。AEMP主要通过激活胰岛素抵抗细胞的PI3K-AKT和PGC-1α信号通路改善胰岛素抵抗;而二甲双胍则主要通过激活AMPK-ACC2(腺苷酸活化蛋白激酶-乙酰辅酶A羟化酶2)和PGC-1α信号通路,调节胰岛素抵抗细胞的糖脂代谢,二者的作用途径有所不同。     

D-松醇复配Mn2+对HepG2细胞胰岛素抵抗的调节及其作用机制

采用胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型(IR),研究D-松醇复配Mn2+对细胞葡萄糖消耗量和糖原合成量的影响。实时荧光全定量分析(RT-PCR)实验检测AMPK信号通路相关基因mRNA表达水平。结果表明当胰岛素浓度为1×10-3 mmol/L,作用时间为36 h时,细胞葡萄糖消耗量达到最低,产生最大的胰岛素抵抗效应。与模型对照组相比,当D-松醇浓度为100 mg/L,复配MnSO₄为10 mg/L时,葡萄糖消耗量和糖原含量均极显著升高(p<0.01)。此外,复配组AMPKα-1、AMPKα-2和GLUT4基因表达水平均显著上调(p<0.05),G6Pase基因mRNA表达水平显著下调(p<0.05)。D松醇复配Mn2+可显著促进胰岛素抵抗细胞葡萄糖的利用,增加糖原合成,其作用机制可能涉及AMPK参与的抑制糖异生等生化调控过程起到降血糖作用。     

灵芝醇提物对改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用

研究讨论灵芝醇提物对地塞米松诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响。采用地塞米松诱导脂肪细胞胰岛素抵抗模型,将细胞分成正常组、模型组、灵芝醇提物组、二甲双胍（阳性对照）组,检测各组的葡萄糖消耗量和甘油三酯含量,分析灵芝醇提物对胰岛素抵抗的影响。建立模型的地塞米松处理组与正常组相比,1 μmoL/L地塞米松处理72 h显著降低了3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖消耗量（P＜0.05）,且胰岛素抵抗状态在24 h内维持稳定,脂肪细胞胰岛素抵抗模型构建成功。10、50、100 mg/L灵芝醇提物对细胞活力均无显著影响,灵芝醇提物处理细胞24 h能显著提高脂肪细胞的葡萄糖消耗量和细胞内甘油三酯的含量且呈剂量依赖性。同时灵芝醇提物处理后显著增加了胰岛素受体底物1、葡萄糖转运体-4、磷脂酰肌醇-3-激酶p110亚基、磷脂酰肌醇-3-激酶p85亚基、磷酸化蛋白激酶、磷酸化糖原合酶激酶3β蛋白的表达。结果表明灵芝醇提物通过IRS1/PI3K/AKT信号途径改善地塞米松诱导的脂肪细胞胰岛素抵抗。     

豌豆肽缓解胰岛素抵抗形成效果探究

目的:探究豌豆肽对缓解人肝癌细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)形成的作用。方法:体外采用高浓度胰岛素诱导人肝癌细胞HepG2建立IR细胞模型,利用葡萄糖氢化酶过氧化氢酶法(GOP-POD)测定不同浓度豌豆肽对胰岛素诱导前后HepG2/IR细胞的葡萄糖含量及消耗量变化;MTT比色法检测豌豆肽对发生胰岛素抵抗细胞的毒性影响;采用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)手段检测细胞中胰岛素受体(InsR)及凋亡促进蛋白Caspase-3的表达。结果:胰岛素诱导48 h建立的HepG2/IR抵抗模型最为稳定,其葡萄糖消耗量与正常HepG2细胞相比降低10%。利用不同浓度豌豆肽对胰岛素诱导的HepG2细胞进行作用时,其葡萄糖消耗量提高1.31~1.68倍,InsR的表达水平提高1.19~1.34倍,凋亡蛋白Caspase-3阳性率表达增加。结论:豌豆肽对肝细胞内胰岛素抵抗的形成具有一定缓解作用。     

滇结香花提取物组分1（Fr.1）对C2C12肌细胞胰岛素抵抗的改善作用

探讨滇结香花正己烷提取物组分1(Fr.1)改善棕榈酸(Palmitic acid,PA)诱导C2C12肌细胞产生胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)的效果及其作用机制。方法:本文采用PA诱导C2C12肌细胞建立稳定的胰岛素抵抗细胞模型,通过检测Fr.1对胰岛素抵抗细胞(C2C12/IR)葡萄糖消耗量、葡萄糖摄取量的变化,研究其对PA介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)、胞内磷脂酰肌醇激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路中相关基因及蛋白表达的影响。结果:0.75mmol/L PA作用C2C12肌细胞16 h作为最佳建模条件;Fr.1在无细胞毒性范围内(12.5～100μg/mL)可显著增加C2C12/IR对葡萄糖的消耗量及摄取量;Fr.1可明显上调胰岛素受体(Insulin receptors,IRs)、胰岛素受体底物(Insulin receptor substrate-1,IRS-1)、葡萄糖转运蛋白4(Glut4)、PI3K、AMPKα基因的表达水平,并上调p-IRs、p-IRS-1、Glut4、p-AMPKα、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)、p-AKT蛋白质的表达水平,表明滇结香花提取物Fr.1可通过调控多个信号通路改善IR。     

藻蓝色素对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢的影响

为探究藻蓝色素(phycocyanin, PC)体外改善胰岛素抵抗的作用机制,采用胰岛素体外诱导方式,分别设置5个胰岛素浓度梯度(10-9、10-8、10-7、10-6 、10-5μmol/L)以及6个时间梯度(0、12、24、36、48、72h)处理HepG2细胞,以葡萄糖消耗量和细胞存活率为指标,确定建立胰岛素抵抗型HepG2细胞模型的较佳作用浓度及时间。检测PC干预后HepG2细胞葡萄糖消耗量、糖原合成和存活率,利用RT-qPCR和Western blot探讨PC可能的作用机制。实验结果表明:胰岛素抵抗型HepG2细胞模型最佳诱导时间和浓度为36h、10-7μmol/L;不同浓度的PC可以提升胰岛素抵抗型HepG2细胞的葡萄糖消耗量;PC能够上调正常HepG2和胰岛素抵抗型HepG2细胞中IRS1、IRS2、GLUT1、GLUT4基因的转录水平,并且增加细胞中IRS1、AMPK、GSK-3β以及AKT蛋白的磷酸化水平。研究结果表明,PC能够显著提升胰岛素抵抗型HepG2细胞的葡萄糖消耗量,通过激活胰岛素调节相关的IRS1/AKT信号通路,增加AMPK的磷酸化和葡萄糖转运蛋白GLUT1、GLUT4基因表达,加速HepG2细胞对葡萄糖的利用和改善细胞胰岛素抵抗。研究结果显示,PC在预防或改善2型糖尿病肝脏胰岛素抵抗方面有潜在作用。     

苦瓜皂苷对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响

采用高浓度的胰岛素诱导HepG2细胞出现葡萄糖代谢异常,从胰岛素的添加量和作用时间角度探讨建立胰岛素抵抗细胞(HepG2/IR)模型的最佳条件;分别设立阴性对照组、胰岛素抵抗模型组、盐酸吡格列酮阳性对照组以及苦瓜皂苷干预组(100、300、500、700μg/mL),利用葡萄糖测定试剂盒检测各组葡萄糖消耗量,同时MTT法评价苦瓜皂苷对HepG2/IR细胞活性的影响。结果表明,30μg/mL胰岛素诱导处理HepG2细胞36h是产生胰岛素抵抗的最适条件。与HepG2/IR模型组相比,300μg/mL的苦瓜皂苷不仅可以显著改善HepG2/IR细胞的葡萄糖消耗量,还能提高其细胞活性。     

壳寡糖改善HepG2细胞胰岛素抵抗作用及机制研究

壳寡糖(chitooligosaccharides, COS)是一种具有多种生物活性的低聚寡糖,该文探究了COS对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响作用。通过胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,评估COS及其单体组分(聚合度2～4)对其缓解作用。结果显示,COS显著提高产生胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量,促进其葡萄糖代谢。进一步评估不同聚合度的COS单体发现,壳二糖和壳四糖对胰岛素抵抗的肝细胞无显著改善效果,而壳三糖显著提高胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量。另外,COS及壳三糖显著提高胰岛素受体(insulin receptor, IR)、胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1, IRS-1)、葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4, GLUT4)蛋白水平,活化蛋白激酶B(protein kinase B, PKB/Akt)以及改善相关基因转录水平。综上,COS通过介导Akt/GLUT4通路改善HepG2细胞的胰岛素抵抗,壳三糖在促进糖代谢中表现最优。     

虫草头孢提取物Fr.8组分对HepG-2胰岛素抵抗的改善作用

为探讨虫草头孢正己烷分离组分Fr.8对高胰岛素诱导的HepG-2细胞胰岛素抵抗的改善作用,作者建立了稳定的胰岛素抵抗细胞模型,并检测了Fr.8组分对胰岛素抵抗细胞(HepG-2/IR)的葡萄糖消耗、葡萄糖摄取及相关基因转录和蛋白质表达的影响。结果显示,5μmol/L胰岛素是诱导细胞成为HepG-2/IR的最佳作用浓度;Fr.8组分在无细胞毒性范围内可显著增加HepG-2/IR对葡萄糖的消耗及摄取;Fr.8(25μg/mL)可明显上调IR、IRS1、IRS2、Glut2、AMPKαmRNA的表达水平,并上调IR、IRS、Glut2、p-AMPKα、p-AKT蛋白质的表达。研究表明,虫草头孢Fr.8可改善HepG-2胰岛素抵抗,其机制可能与胰岛素受体及底物、葡萄糖转运蛋白2、pAMPKα和p-AKT蛋白的激活有关。     

异鼠李素调控AKT-FOXO1通路改善胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢作用机制

目的:研究异鼠李素通过AKT-FOXO1信号通路改善Hepg2细胞胰岛素抵抗机制。方法:使用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法筛选异鼠李素安全剂量;通过高浓度胰岛素处理诱导Hepg2细胞胰岛素抵抗(IR)模型;使用葡萄糖氧化酶法测得培养基中葡萄糖含量,衡量异鼠李素对胰岛素抵抗Hepg2细胞葡萄糖代谢水平影响;通过Western blot 检测细胞中AKT(蛋白激酶B),p-AKT(磷酸化的蛋白激酶B),FOXO1(叉头转录因子O亚家族1),p-FOXO1(磷酸化的叉头转录因子亚家族1),G6pase(六磷酸葡萄糖酶),PEPCK(磷酸烯醇式丙酮酸激酶)这六个蛋白表达水平的变化。结果:异鼠李素对Hepg2细胞的安全剂量为1~3.8 μg/mL;与模型组相比,低浓度异鼠李素显著的增加了胰岛素抵抗Hepg2葡萄糖消耗量(P<0.05),显著促进了胰岛素抵抗Hepg2细胞的AKT、FOXO1蛋白磷酸化(P<0.05),从而显著抑制了G6pase和PEPCK的蛋白表达(P<0.05),其作用效果与二甲双胍相当。结论:异鼠李素可有效改善胰岛素抵抗Hepg2细胞,并通过调节AKT-FOXO1信号通路达到这一作用效果。     

苦瓜水提物抗幽门螺杆菌作用及其浸提工艺研究

为研究苦瓜水提物对幽门螺杆菌的抑制作用,以纸片扩散法的抑菌圈大小为指标,设计正交试验优化苦瓜水提物抗幽门螺杆菌活性的最佳浸提工艺,并进一步探究苦瓜水提物的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和杀菌动力学。结果表明:苦瓜水提物抗幽门螺杆菌的最佳浸提工艺为浸提温度80℃、料液比1:50(g/mL)、浸提时间1.5h。MIC为32 mg/mL;MBC为128 mg/mL;在4倍MIC下杀菌动力学时间为30min。     

Total Phenolic Contents and Phenolic Acid Constituents in 4 Varieties of Bitter Melons (Momordica charantia) and Antioxidant Activities of their Extracts

ABSTRACT: Four varieties of bitter melon ( Momordica charantia ), India green (IG), India white (IW), China green (CG), and China white (CW) were analyzed for total phenolics, phenolic acid constituents, and antioxidant activities of their methanolic extracts. Phenolic contents of the oven-dried and freeze-dried tissues ranged from 5.39 to 8.94 and 4.64 to 8.90 mg chlorogenic acid equivalent (CAE)/g on dry weight basis, respectively. Phenolic contents of bitter melon seed, inner tissues, and flesh ranged from 4.67 to 8.02, 4.64 to 8.94, and 5.36 to 8.90 mg CAE/g, respectively. The total phenolic contents of IG, IW, CG, and CW were 4.64 to 6.84, 6.03 to 8.94, 5.39 to 7.81, and 6.07 to 8.90 mg CAE/g, respectively. The main phenolic acids in flesh were gallic acid, gentisic acid, catechin, chlorogenic acid, and epicatechin, which ranged from 8.04 to 39.76, 16.99 to 32.39, 23.06 to 82.45, 4.55 to 15.83, and 16.14 to 44.28 mg/100 g on dry weight basis, respectively, while in inner tissues were gallic acid, gentisic acid, catechin, and epicatechin, which ranged from 2.57 to 18.05, 5.39 to 32.61, 13.54 to 39.74, and 2.96 to 40.91 mg/100 g, respectively. The main phenolic acids contained in seeds were gallic acid, catechin, and epicatechin, which ranged from 4.61 to 18.9, 13.2 to 57.61, and 6.00 to 40.08 mg/100 g, respectively. There was no significant difference in the antioxidant activities of the extracts among varieties ( P = 0.2556) and between drying methods ( P = 0.1444). The antioxidant activities of flesh, inner tissue, and seed ranged from 81.7% to 86.5%, 78.8% to 88.4%, and 78.5% to 85.4% inhibition, respectively. Bitter melon is a rich source of phenolic compounds. These natural plant phenolics can be a good source of antioxidants for application in food system.     

苦瓜提取物抑制3T3-L1脂肪细胞脂肪沉积研究

研究表明苦瓜具有一定减肥效果,但其确切分子机理尚未阐明,因此本实验研究苦瓜正丁醇提取物抑制脂肪沉积活性及其作用机制。针对3T3-L1脂肪细胞,利用噻唑蓝法检测苦瓜正丁醇提取物对细胞活性影响;采用油红O染色检测苦瓜正丁醇提取物对细胞脂肪沉积的影响;利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测苦瓜提取物对脂肪沉积转录因子和脂肪酸代谢关键基因mRNA转录水平调控作用。结果表明：相对空白对照组,苦瓜提取物能明显减少3T3-L1细胞脂肪沉积,抑制转录因子C/EBPα、PPARγ和SREBP-1c的mRNA表达,对脂肪酸代谢基因GLUT4、ACC1、Fasn、AP2和LPL的mRNA表达抑制明显（P＜0.05）。总之,苦瓜正丁醇提取物对脂肪沉积具有一定抑制作用,可能通过下调脂肪沉积相关基因mRNA转录水平表达起作用。     

高效液相色谱法检测苦瓜啤酒中的苦瓜皂苷

建立了高效液相色谱法对苦瓜啤酒中功效成分--苦瓜皂苷检测的方法。以70%乙醇超声辅助提取苦瓜皂苷,大孔树脂纯化,得苦瓜皂苷纯品。以自制的苦瓜皂苷为标准品与苦瓜啤酒中的苦瓜皂苷进行比较,用ODS-3柱,在205nm下,乙腈和水(55:45,V/V)为流动相,流速1.0ml/min,经反相液相色谱分析,以保留时间定性、峰面积定量。结果得出苦瓜啤酒中苦瓜皂苷的总含量为22.16μg/ml,相对标准偏差<4%,回收率在97.53%～100.32%之间。此方法重现性好且操作简单,是比较理想的检测方法。     

苦瓜汁加工工艺对皂甙的影响研究

对影响苦瓜汁中皂甙含量和稳定性的主要加工工艺(漂烫、调配和杀菌)进行了研究。结果表明,苦瓜在70℃漂烫4min,汁中皂甙含量较高,同时可以去除苦瓜汁中的涩味。酸度调节为4的苦瓜汁在85℃杀菌15min,汁中皂甙的损失较小。     

苦瓜抑菌作用的研究

以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、酵母菌、青霉和黑曲霉为指示菌,采用滤纸片法研究了预处理温度、苦瓜提取物浓度对不同苦瓜品种(桂农科三号、碧珠六号、碧特111号)提取物的抑菌活性的影响,并与牛津杯法进行比较。结果表明:苦瓜预处理温度为60℃,以70%乙醇为提取溶剂,采用超声波辅助提取法获得的提取物抑菌效果最佳;苦瓜对革兰氏阳性菌的抑菌活性明显优于革兰氏阴性菌、酵母和霉菌,其中对金黄色葡萄球菌的抑制效果最强,枯草芽孢杆菌次之,对大肠杆菌和酵母抑制作用较弱,对青霉和黑曲霉无抑制作用;不同苦瓜品种中碧特111号提取物的抑菌能力最强;采用牛津杯法评价抑菌活性比滤纸片法更灵敏,稳定性更好。      

苦瓜系列产品的研制

苦瓜具有良好的食用和药用价值,但由于其带有明显的苦味,而不容易被消费者所接受。采用新鲜苦瓜为原料,通过控制苦瓜成熟度及采用酶处理、调配、热烫等加工方法,解决了苦瓜明显苦味所带来的口感缺陷,保持了苦瓜特有的清香,研制出多种风味独特的苦瓜系列产品。     

豆芽凉瓜复合饮料的研制

以豆芽和凉瓜为主要原料开发了一种新型豆芽凉瓜复合饮料。通过单因素试验和正交优化试验得到该饮料的最优配方为：豆芽汁与凉瓜汁比例5∶1、复合液22%、白砂糖10%、柠檬酸0.20%、稳定剂黄原胶0.15%。该饮料呈棕黄色,质地均匀,不分层,无涩味,口感细腻爽口,具有凉瓜和豆芽特有的风味。     

Bitter melon (Momordica charantia L.) bioactive composition and health benefits: A review

Bitter melon (Momordica charantia L.) has traditionally been used as a medicinal food in many developing countries. It is a tropical fruit claimed to have therapeutic effects due to its content of bioactive compounds. The present review is an attempt to highlight the bitter melon varieties, bioactive composition that is linked to its therapeutic effects, especially antidiabetic effect, in vitro and in vivo models, and understanding of the mechanisms of actions of bitter melon that are associated with epidemiological evidences. This paper also outlines a proposed processing scheme aiming to fully utilize bitter melon and add further value to this fruit.     

微波消解ICP-AES法测定苦瓜中常量及微量元素

采用美国利曼公司生产的PS Ⅰ型中阶梯光栅光谱仪测定苦瓜中的常量及微量元素 ,为苦瓜的科学利用提供了理论依据。该方法简便、快速、可靠 ,适用于植物中多种元素的测定。其相对标准偏差为 0 86%～ 6 3 % ,回收率为 92 %～ 1 0 5 %。