液相色谱串联质谱法检测鲍鱼汁中的酸性橙Ⅱ

目的建立了液相色谱/串联质谱(HPLC-MS/MS)测定鲍鱼汁中酸性橙Ⅱ的方法,并用于实际样品的分析。方法样品经甲醇+乙酸铵溶液(体积比为1+1)振荡提取后用OASISWAXSPE柱净化,以乙腈-乙酸铵缓冲溶液为流动相,在C18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm)上经梯度洗脱分离后以多反应监测质谱测定(m/z326.9→170.8,326.9→155.8)。结果方法的最低定量浓度(LOQ)为0.1mg/kg,5和50mg/kg两个水平加标样的平均回收率分别为87.0%和101.0%,线性相关系数为0.999,线性范围为10～5000μg/L。对14份食品专项整治抽检样品进行分析检测,其中7份检出酸性橙Ⅱ,其含量范围为1.2～73.8mg/kg。结论该方法能够满足鲍鱼汁中酸性橙Ⅱ的测定要求。     

HPLC法同时测定辣椒面中碱性橙2,21,22和酸性橙Ⅱ的含量

建立辣椒面中碱性橙2,21,22和酸性橙Ⅱ的高效液相色谱(HPLC)同时测定的方法。样品经70%乙腈超声提取后离心,采用C18色谱柱分离,以乙腈和10mmol/L乙酸铵水溶液(乙酸0.12%)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,紫外检测器进行检测。结果表明:碱性橙2,21,22在1~9μg/mL和酸性橙Ⅱ在0.1~0.9μg/mL浓度范围内呈现良好的线性关系,样品在添加水平为0.1~0.6mg/kg时,平均回收率为91%~107%,相对标准偏差(RSD)为1.1%~7.8%。该方法具有操作简单、重复性好和准确度高等优点,适用于辣椒面中碱性橙2,21,22和酸性橙Ⅱ的测定。     

酱卤肉制品中酸性橙Ⅱ检测方法的优化

优化了固相萃取-高效液相色谱检测酱卤肉制品中酸性橙Ⅱ的方法。样品经过石油醚去油后,用氨水-乙醇-水溶液(体积比20∶70∶10)提取,70℃水浴浓缩,调节pH至5~6,通过Cleanert PWAX弱阴离子交换柱净化和富集,60℃水浴挥干洗脱液后用水溶解定容,借助Thermo Hypersil Gold C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,20 mmol/L乙酸铵溶液-甲醇(体积比35∶65)为流动相,以1 m L/min的流速等度洗脱。结果表明:酸性橙Ⅱ在0.1~5μg/m L内线性良好,相关系数(r)大于0.99995,检出限为0.01 mg/kg。对鸭翅空白样品分别进行0.5、1.0、1.5、2.0 mg/kg四种水平的加标回收实验,酸性橙Ⅱ的加标回收率为80.8%~86.3%,相对标准偏差为2.1%~4.7%(n=6)。该方法去除了样品中的基质干扰,较好地提取了酸性橙Ⅱ,选用的固相萃取柱净化和富集效果理想,具有灵敏度高、可操作性强、重复性好、适用于批量检测等特点。     

建立同时测定调味品中非法添加的4种工业染料的SPE-UPLC-MS/MS法研究

目的建立SPE-UPLC-MS/MS检测方法测定调味品中非法添加的碱性橙、碱性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性金黄等工业染料。方法以含50%甲醇、1%甲酸的50mmol/L乙酸铵水溶液作为提取溶液,利用WAX弱阴离子交换固相萃取柱对样品进行净化,UPLC-MS/MS测定碱性橙、碱性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性金黄含量。结果方法的线性范围:碱性橙、酸性橙Ⅱ及酸性金黄0.0～500.0ng/ml;碱性玫瑰精0.0～25.0ng/ml,r≥0.9922。方法的定性检出限为:碱性橙、酸性橙Ⅱ及酸性金黄7.0μg/kg;碱性玫瑰精0.1μg/kg。定量检出限为:碱性橙、酸性橙Ⅱ及酸性金黄20.0μg/kg;碱性玫瑰精0.3μg/kg。高、低两个浓度水平的加标回收率89.5%～120.9%,相对标准偏差6.4%～27.1%。结论本方法灵敏、准确,可用于调味品中碱性橙、碱性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性金黄等非法添加的工业染料的同时测定及确证。     

高效液相色谱法测定食品中非食用色素

建立食品中的酸性橙Ⅱ、碱性橙2和碱性嫩黄O染料残留的高效液相色谱同时测定的方法,样品通过提取之后,采用基质固相分散法净化,然后分别用乙醇和乙醇-氨水-水(7:2:1)分步洗脱,最后进行HPLC分离、检测.此方法的回收率平均为79%.酸性橙Ⅱ的检出限为0.01 mg/kg、碱性橙2的检出限为0.02 mg/kg,碱性嫩黄O染料的检出限为0.01 mg/kg,相对标准偏差平均为3.53%.     

高效液相色谱法测定肉制品中酸性橙Ⅱ含量

为建立一种前处理过程简单、萃取效率高、灵敏度高和分析快速的高效液相色谱测定肉制品中酸性橙Ⅱ的分析方法。以甲醇-乙酸铵水溶液为流动相,采用等度洗脱方式,经紫外检测器在波长484nm下检测,可在10min内完成分析。酸性橙Ⅱ在0.3125～10μg/mL的范围内具有良好的线性关系(r=0.99997)。该方法的检出限为0.02mg/kg,定量限为0.06mg/kg,加标回收率均在95%以上,相对标准偏差均在5%以内。该方法可适用于肉制品中酸性橙Ⅱ的快速准确检测,具有一定的实际应用价值。     

固相萃取-反相高效液相色谱法同时测定葡萄干中5种工业染料

目的建立快速、准确、灵敏的固相萃取-反相高效液相色谱法同时测定葡萄干中酸性红2G、酸性红14、酸性黄73、酸性橙2和酸性蓝62等5种工业染料残留的检测方法。方法样品以氨水-甲醇-水(2∶80∶18,V/V)作为提取液,利用HLB固相萃取柱进行净化,采用0.1%甲酸水溶液淋洗,含2%氨水的甲醇溶液洗脱,氮吹挥干后用初始流动相定容,在ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱上,以乙腈-0.02 mol/L醋酸铵溶液(10∶90,V/V)为流动相,采用梯度洗脱分离,紫外检测器变波长检测,外标法定量。结果酸性红2G、酸性红14、酸性黄73、酸性橙2、酸性蓝62等5种工业染料在0.50~50 mg/L范围内均具有良好的线性,5种待测物的回收率在86.0%~110.2%,RSD均小于6%,最低定量检出限为0.5 mg/kg。结论本方法简便、灵敏、重现性好,能满足葡萄干中工业染料残留的实际检测工作需要。     

HPLC法同时测定食品中酸性橙Ⅱ和碱性嫩黄O的含量

建立了同时检测食品中酸性橙Ⅱ和碱性嫩黄O两种非食用色素HPLC方法。样品经V(甲醇):V(水)=70:30超声提取,经C_(18)小柱净化后上样。色谱条件采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为V(甲醇):V(50 mmol/L乙酸铵)=50:50溶液,流速1.0 m L/min,检测波长450 nm,柱温35℃。结果表明:酸性橙Ⅱ和碱性嫩黄O在进样浓度2.5~12.5μg/m L内呈良好的线性关系,线性方程分别为Y=2×10~6X-1 240.1(r=0.999 9),Y=7×10~6X-5 284.2(r=0.999 6),二者检出限分别为0.120和0.032 mg/kg,在5类食品中的加标回收率分别为80.33%~90.47%和80.17%~102.64%。经方法学评价和抽样分析,该方法简便准确,重复性好,可作为食品安全检测中同时检测酸性橙Ⅱ和碱性嫩黄O参考方法。     

印染废水中酸性橙染料的固相萃取-HPLC法测定

建立了印染废水中酸性橙I、酸性橙II、酸性橙IV和酸性橙G的固相萃取-高效液相色谱测试方法。样品经固相萃取小柱净化、浓缩,在Zorbax SB-C18柱上,以甲醇/乙酸铵(20 mmol/L)溶液为流动相进行梯度洗脱分离,在470 nm波长处进行检测,外标法定量。4种酸性橙染料在0.5~50.0 mg/L范围内均具有良好的线性关系,相关系数大于0.999,最低定量检出限为0.05~0.10 mg/L,回收率在88.7%~102.8%,RSD在1.5%~6.4%。     

高效液相色谱法测定食品中的酸性橙Ⅱ

建立食品中非食用色素酸性橙Ⅱ的高效液相色谱快速检测方法。样品用饱和乙腈提取,经饱和正己烷萃取除去油溶性色素及杂质,采用高效液相色谱柱分离,二极管阵列检测器(DAD)检测,结合标准物质保留时间和DAD光谱图进行定性分析,外标法定量。色谱柱为AgilentZORBAXSB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数0.3%醋酸溶液进行梯度洗脱,检测波长为484nm,线性范围为0.01～1.0μg/mL,相关系数R2=0.9997。采用本方法对乳制品、辣椒粉、辣椒酱、卤肉制品、卤蛋、卤豆腐干6种常见基质进行验证,结果表明,HPLC-DAD测定食品中的酸性橙Ⅱ,对于1.0g样品定容至5mL、进样量为20μL时,检出限为0.05mg/kg;添加标准回收实验表明,本方法在添加水平分别为0.05、0.1、0.2mg/kg时的样品平均回收率在74.9%～100.0%之间,相对标准偏差(RSD)在1.41%～8.64%之间(n=6)。本方法准确、可靠。     

15种提取液对辣椒粉中3种碱性橙染料提取效果比较

通过15种提取液对辣椒粉中3种碱性橙染料即碱性橙2(CDG)、碱性橙21(AOG)、碱性橙22(AOR)提取效果的比较,建立了基于高效液相色谱法(HPLC)的前处理方法。以体积分数1%甲酸甲醇为辣椒粉中碱性橙提取液,以甲醇和20mmol/L乙酸铵(57:43)流动相,STPAKC18-ES(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,CDG检测波长419nm,AOG、AOR检测波长485nm,流速1.0mL/min,柱温40℃为HPLC条件,该方法的检出限为CDG、AOR:0.01mg/kg,AOG:0.005mg/kg。方法回收率60%以上,相对标准偏差小于4%。结果表明,以体积分数1%甲酸甲醇为提取液时,在阳性样品提取率、阴性样品加标回收以及色谱峰形等方面,与现有国家标准相比,均具有显著优势。     

超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法同时测定调味品与熟肉制品中6种工业染料

建立了超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定调味品与熟肉制品中碱性橙Ⅱ、碱性橙21、碱性橙22、酸性橙Ⅱ、酸性红1号和碱性玫瑰精6种工业染料分析方法。样品用V(乙腈)∶V(水)7∶3的溶液提取,取上清液过滤,以BEH C18柱(1.7μm,2.1×50 mm)为分离柱,甲醇和10mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸)梯度洗脱,在优化的实验条件下,碱性橙Ⅱ、碱性橙21、碱性橙22、酸性橙Ⅱ和碱性玫瑰精的检出限均为0.5μg/kg,定量限为1μg/kg;酸性红1号检出限为50μg/kg,定量限为100μg/kg;碱性橙Ⅱ、碱性橙21、碱性橙22、酸性橙Ⅱ和碱性玫瑰精的线性范围为1~50μg/kg,相关系数均大于0.99。酸性红1号的线性范围为50~1000μg/kg,相关系数大于0.99。样品在三个添加水平下平均回收率在75.6%~99.7%之间,相对标准偏差在0.9%~10.7%。可用于调味品与熟肉制品中6种工业染料的检测。     

HPLC同时测定豆制品中3种碱性橙染料

建立腐竹等固体豆制品中碱性橙2、碱性橙21和碱性橙22染料含量的高效液相色谱检测方法。样品经无水乙醇提取,超声波辅助萃取,离心合并上清液,经旋转蒸发仪浓缩至近干,定容液溶解残渣,离心吸取上清液,过0.45μm膜经高效液相色谱分离、检测。所用色谱柱为C18,检测波长碱性橙2为449 nm,碱性橙21、碱性橙22为485 nm;流动相为甲醇-乙酸铵水溶液。本方法检测限为0.02 mg/kg;定量限为0.08 mg/kg。腐竹样品加标回收率试验所得回收率为83.1%~116.7%,相对标准偏差(RSD)为1.02%~9.65%(n=6),3种染料在0.1μg/m L~20μg/m L浓度范围内均呈良好的线性关系,线性回归系数(r)均大于0.999 9。     

免疫亲和柱-高效液相色谱法检测红曲米中的桔霉素

制备抗桔霉素(citrinin,CIT)单克隆抗体免疫亲和柱(IAC),建立了检测红曲米中CIT的免疫亲和柱-高效液相色谱检测方法。采用甲醇-水提取红曲米样品,将提取液用PBS稀释后过免疫亲和柱,甲醇洗脱后以高效液相色谱法检测,激发波长为331 nm,发射波长为500nm,流动相采用乙腈-磷酸溶液(体积比为45:55,pH2.0)。每根抗CIT单克隆抗体免疫亲和柱使用0.5 mL溴化氰活化的4FF琼脂糖凝胶,0.5mg桔霉素单克隆抗体,柱容量为0.35μg。红曲米样品添加CIT标品0.1～0.6 mg/kg,平均回收率为74.2%～87.14%,相对标准偏差为2.85%～13.12%。最低检出限为0.1mg/kg(S/N=3)。     

高效液相色谱法测定食品中的碱性橙染料

目的采用高效液相色谱法测定食品中非法色素添加剂的碱性橙染料即碱性橙2(chrysoidine G,CDG)、碱性橙21(orange G,AOG)及碱性橙22(astrazon orange R,AOR)。方法样品经乙腈:水:氨水(60:40:0.5,V:V:V)在25℃下超声提取30 min,以0.02 mol/L的乙酸铵溶液(pH为5)和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,采用Agilent XDB C_(18)色谱柱进行分离,用二极管阵列检测器在449 nm波长处检测CDG,在485 nm波长处检测AOG及AOR,以外标峰面积法定量。结果 3种碱性橙染料在0.01~0.2 mg/L浓度范围内线性关系良好,方法回收率为80.0%~94.0%,相对标准偏差均小于2%(n=6),方法的检出限为0.1 mg/kg。结论本方法操作简便准确,可适用于腐竹、干辣椒和辣椒油等不同基质样品中碱性橙的检测。     

HPLC测定辣椒面中柠檬黄、罗丹明B和酸性橙Ⅱ

建立了一种同时测定辣椒制品中柠檬黄、罗丹明B和酸性橙Ⅱ的高效液相色谱方法。样品经50%的甲醇水溶液超声处理提取,以甲醇-乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,采用紫外检测器,保留时间定性,峰面积外标法定量检测。结果表明:上述3种色素在0.006~0.128mg/mL的浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数≥0.9997,加标回收率为98.60%~102.58%,相对标准偏差为1.6%~4.2%,检出限为0.11~0.25mg/kg。该方法具有灵敏度高、重现性好、快速、简便的优点,适用于辣椒制品中柠檬黄、罗丹明B和酸性橙Ⅱ的同时测定。     

固相萃取-液质联用同时检测豆制品中4种红黄色系工业染料

目的 以WAX固相萃取柱净化处理, 建立豆制品中违禁添加色素碱性橙Ⅱ、碱性嫩黄O、酸性橙Ⅱ和罗丹明B的前处理方法。方法 利用电喷雾离子源(ESI), 碱性橙、碱性嫩黄和罗丹明B采用正离子模式, 酸性橙采用负离子模式, 建立正负离子切换的多反应监测(MRM)的检测方法。结果 碱性橙Ⅱ、碱性嫩黄O的检出限为1.0 ?g/kg, 酸性橙Ⅱ和罗丹明B的检出限为0.5 ?g/kg, 方法回收率为84.2~95.1%, 相对标准偏差(RSD)小于4.5%。结论 建立的液质联用方法具有快速、灵敏、准确等优点, 可用于豆制品中上述4 种非法添加的红黄色系工业染料的同时测定及确证。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定腐竹中酸性橙Ⅱ和碱性橙

建立了同时检测腐竹中酸性橙Ⅱ和碱性橙2两种非食用色素的高效液相色谱-质谱/质谱测定方法。样品经乙腈-乙酸铵溶液超声提取,经弱阳离子交换固相萃取柱净化后上样。色谱条件采用Waters XBridge C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸-5 mmol/L乙酸铵水溶液:乙腈梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温40℃,酸性橙Ⅱ和碱性橙2分别采用电喷雾负离子和正离子扫描模式。该方法2种物质检出限均为1.0μg/kg,定量限均为3.0μg/kg,线性范围:0-20ng/mL。加标回收率:酸性橙Ⅱ为92.4-95.9%;碱性橙2为90.2-96.9%。该方法操作简单高效,重现性较好,适用于腐竹中2种非食用色素的含量测定。     

HPLC波长程序法同时检测非发酵豆制品中碱性橙和碱性嫩黄O的含量

目的:建立非发酵豆制品中的碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22和碱性嫩黄O的HPLC波长程序法同时检测的方法。方法:样品采用不同溶剂超声提取,提取液离心,上清液旋转蒸发浓缩。样液以甲醇-乙酸铵溶液为流动相,流速1.0 m L/min,经C18反相色谱柱分离,设定波长程序实现四种染料的同时检测,并进行了方法学评价。结果:选择乙醇为超声提取的溶剂。碱性橙2、碱性橙21和碱性橙22和碱性嫩黄O的线性范围为0.0~10.0μg/m L,相关系数R~2≥0.9990。检出限在0.01~0.05 mg/kg之间,定量限在0.046~0.098 mg/kg之间。三个浓度(5.00、10.00、20.00 mg/kg)的加标回收率的范围为90.38%~102.16%,相对标准偏差(RSD)范围为1.37%~6.93%。结论:四种碱性染料的HPLC波长程序检测方法满足方法评价的要求,具有灵敏、准确、快速的特点。     

高效液相色谱法测定巧克力中胭脂树橙的含量

目的建立高效液相色谱法测定巧克力中胭脂树橙含量的分析方法。方法采用氨水乙醇提取样品中的色素,石油醚除脂后,在酸性条件下采用二氯甲烷反提取目标物,选用C_(18)色谱柱分离,以乙腈:2%乙酸(75:25,V:V)作为流动相进行等度洗脱,用紫外检测器在458 nm波长检测,外标法定量。结果降红木素的定量限为1.0 mg/kg,红木素的定量限为2.0 mg/kg,线性范围为1～50 mg/kg。降红木素和红木素回收率分别为87.8%～92.0%和88.7%～92.1%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为1.1%～5.0%和1.7%～5.2%。结论本方法简单、便捷,适用于巧克力中胭脂树橙含量的测定。