喷雾干燥法制备牡蛎肽粉的体内抗氧化活性研究

研究喷雾干燥制备牡蛎肽粉对体内抗氧化活性的影响。以新鲜葡萄牙牡蛎为原料,通过选择性复合酶解后喷雾干燥制备牡蛎肽粉,分别测定小鼠丙二醛(MDA)、蛋白质羰基、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量等指标考察牡蛎肽粉对小鼠抗氧化活性的影响。结果显示,与模型对照组相比,经过喷雾干燥后的牡蛎肽粉不同剂量组均可极显著地降低小鼠血清丙二醛含量和蛋白质羰基含量(p<0.01),并显著提高超氧化物歧化酶和还原型谷胱甘肽的含量(p<0.01)。结果表明喷雾干燥制备的牡蛎肽粉具有良好的体内抗氧化作用。      

基于BP神经网络的牡蛎抗氧化活性肽制备工艺优化

以牡蛎为原料,通过响应面和BP神经网络模型对牡蛎蛋白酶解过程、工艺条件进行优化研究,实现酶解过程中可控制备牡蛎抗氧化活性肽。结果表明:采用胰酶水解牡蛎,经响应面优化得到最佳酶解条件为:加酶量0.28%,温度55℃,时间3.4 h,此条件下酶解产物·OH清除率可达到78.4%。在此基础上,以酶解过程中的响应因子-游离谷氨酸含量来监控牡蛎蛋白水解过程,运用BP神经网络数学模型拟合蛋白水解过程与产物活性之间的关系。构建出以加酶量、料水比和酶解体系游离谷氨酸浓度为神经网络输入,酶解产物·OH清除率为输出的BP神经网络模型,以实现在预期时间内通过实时监测游离谷氨酸含量即可得出产物活性变化情况,并定点终止反应的目的。模型预测值与实验值相关性系数r为0.9943,平均相对误差值为2.1%。该模型拟合性能良好,与牡蛎蛋白酶解过程具有高度相关性,可应用于牡蛎抗氧化活性肽的在线监控与可控制备。      

超滤法浓缩富集牡蛎蛋白抗氧化活性肽

为研究牡蛎蛋白酶解产物中发挥抗氧化活性的肽片段,采用超滤的方法对其进行初步分离富集,测定了各级组分的体外抗氧化能力和氨基酸组成。结果表明:<4000u超滤液对羟自由基、DPPH自由基和超氧自由基清除活性的IC50值分别为17.29、2.82、7.02mg/mL,对肝脂质过氧化抑制作用的IC50值为14.40mg/mL,均低于原液和其他超滤组分;<4000u超滤液的还原力均高于同浓度的原液和其他超滤组分。经氨基酸分析,超滤后组氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸的含量得到了富集。<4000u的超滤液经凝胶层析后,活性部分主要集中在550～3890u。      

高大鹿药喷雾干燥粉制备工艺及抗氧化研究

以高大鹿药为原料,采用超声波辅助法提取高大鹿药中可溶性物质,研究喷雾干燥过程中助干剂的添加量、浓缩液浓度、进料速度和进风温度等对出粉率的影响,并通过正交试验对最佳喷雾干燥工艺条件进行优化,并对喷雾干燥粉进行抗氧化活性分析。研究表明,当助干剂添加量7 g/100 mL、浓缩液浓度10%、进风温度220℃和进料速度14 mL/min时,喷雾干燥粉的出粉率高达29.87%。抗氧化活性分析中,发现其具有较好的自由基清除作用,并且DPPH自由基、羟基自由基及ABTS+自由基的清除率均随样品浓度的增加而呈现上升的趋势。     

模拟胃肠消化对牡蛎低聚肽抗氧化活性的影响

以去壳牡蛎肉为原料通过酶解法制备牡蛎低聚肽,并通过体外模拟消化试验,对比消化前后牡蛎低聚肽分子量分布、DPPH自由基清除能力、羟自由基(·OH)清除能力、ABTS自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)变化,探究牡蛎低聚肽经模拟胃、肠道消化后抗氧化活性的变化。试验结果显示,牡蛎低聚肽的相对分子量主要在1 000 Da以下,胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后重均分子量下降不超过8.2%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率降低分别不超过7.9%,8.7%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,·OH清除率降低分别不超过9.3%,3.8%;胃蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率降低9.2%,胰蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率提高3.6%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,ORAC值分别提高11.5%,1.3%。胃肠消化对牡蛎低聚肽的抗氧化活性评价各指标均无显著性影响(P＞0.05)。说明牡蛎低聚肽具有较好的综合抗氧化活性和稳定性。     

牡蛎活性多肽的抑菌作用与抗氧化性能研究

使用Alcalase碱性蛋白酶和菠萝蛋白酶分步酶解牡蛎蛋白,获得含牡蛎活性多肽的酶解产物,并测定了酶解产物对几种陆生致病菌和海洋病原细菌的抑菌活性和体外抗氧化能力.结果表明,牡蛎活性多肽对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)和副溶血弧菌(Vibrio prarhaemolyticus)具有一定的抑制作用,并具有一定的还原能力和对超氧阴离子自由基的清除作用.     

牡蛎蛋白酶解物的制备及其抗氧化活性研究

选用中性蛋白酶,研究了前处理方法、E/S、pH、温度和时间对酶解牡蛎蛋白效果的影响,制备牡蛎蛋白酶解物,分析其游离氨基酸含量及分子量分布,体外实验测定其抗氧化活性。结果表明,酶解前100℃热处理10min能够提高酶解物中蛋白肽的含量,E/S为2.0%、pH7.0、温度50℃、时间3.0h为酶解的适宜条件,其DH达到14.95%;所制备的EHOP的主要成分为小分子肽类物质,分子量主要集中在500～3091u,EHOP的还原性较强,且对羟基自由基和超氧阴离子均有较好的清除能力,EHOP浓度为25mg/mL时,其还原力A700为0.44,超氧自由基清除率和·OH清除率分别为68.86%和21.20%。      

南瓜粉喷雾干燥法制备研究

采用喷雾干燥法制备南瓜粉,通过对均质压力、料液温度、喷雾干燥进风温度3个因素进行单因素和正交实验分析,得出料液温度为40℃、均质压力为25MPa、喷雾干燥进风温度为160℃时制得的南瓜粉质量最佳,该南瓜粉的复水性、冲调稳定性及分散性较好。     

鳕鱼皮复合肽螯合钙的制备及抗氧化活性研究

利用木瓜蛋白酶与风味酶组合成的复合酶对鳕鱼皮蛋白进行酶解,制得酶解液,以氯化钙为钙源,与多肽酶解液反应制备多肽螯合钙,并对其抗氧化性进行了研究。结果表明,制备多肽螯合钙的最佳条件是:氯化钙与多肽的质量比为0.3:3,pH值为7.0,反应温度为25℃,反应时间为20min,在此条件下钙离子的螯合率为58.85%,产物对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)均有较强的清除作用。     

核桃抗氧化多肽喷雾干燥的工艺优化

针对多肽干燥活性难以控制、成本高等问题,以脱脂核桃粉为原料,利用超声波辅助提取制备核桃蛋白;木瓜蛋白酶与胰蛋白酶双酶组合水解核桃蛋白,制备核桃抗氧化多肽,应用喷雾干燥技术制备核桃抗氧化多肽干粉。研究了喷雾干燥的进风温度,出风温度,进料浓度对多肽收集率和对DPPH·抑制率的影响。在单因素实验基础上,利用响应面法建立了二次回归数学模型,分析了各因素及其交互作用对指标影响的显著性,确定了最佳工艺条件为:进风温度172℃,出风温度88℃,进料浓度23%。在此条件下获得的多肽干粉的收集率为91.28%,抑制率为76.33%,多肽粉末的溶解性和抑制率俱佳,为工业化生产抗氧化多肽干粉提供了一定的理论依据。      

牡蛎血浆及其纯化蛋白抗氧化活性研究

用配有针头的注射器从牡蛎的闭壳肌静脉窦抽取血液,低温条件下离心所得上清液即为牡蛎血浆。上清液经95%硫酸铵沉淀后通过凝胶过滤法分离提纯获得一种小分子蛋白质,SDS-PAGE电泳为单一带,相对分子质量约为15ku。牡蛎血浆及其纯化后蛋白均具有一定的还原能力和清除超氧阴离子自由基的能力,并在30～50℃温度下具有良好的稳定性。     

生物活性肽抗氧化活性的研究进展

从多肽的来源着手,对近年来抗氧化多肽的研究状况进行了概括,并对多肽抗氧化的作用机理进行了总结,最后展望和分析了抗氧化多肽的发展前景以及存在的问题。     

绿茶抗氧化肽的分离纯化与抗氧化活性研究

通过饱和硫酸铵盐析的方法从干绿茶中提取得到绿茶粗蛋白,粗蛋白透析除盐后用葡聚糖凝胶Sephadex G-75层析柱进行凝胶色谱法分离纯化,收集具有抗氧化活性的蛋白样品,并冷冻干燥,同时利用SDS-PAGE的方法对凝胶分离后收集的活性样品进行纯度的鉴定及相对分子质量的测定,并采用·OH清除法及O-2·清除法研究绿茶抗氧化多肽纯品的抗氧化活性。结果表明,绿茶抗氧化多肽经葡聚糖凝胶sephadex G-75层析柱后,得到很好的分离和纯化,在SDS-PAGE电泳图谱上只有1条条带,其相对分子质量为2¹5ku;绿茶抗氧化多肽对·OH具有很强的清除作用,其半清除浓度（IC50）为0.069μg/mL;对O-2·也具有较强的清除作用,其半清除浓度（IC50）为18.462μg/mL,与VC的清除作用（IC50为11.186μg/mL）相当。      

绿茶抗氧化肽的分离纯化与抗氧化活性研究

通过饱和硫酸铵盐析的方法从干绿茶中提取得到绿茶粗蛋白,粗蛋白透析除盐后用葡聚糖凝胶Sephadex G-75层析柱进行凝胶色谱法分离纯化,收集具有抗氧化活性的蛋白样品,并冷冻干燥,同时利用SDS-PAGE的方法对凝胶分离后收集的活性样品进行纯度的鉴定及相对分子质量的测定,并采用·OH清除法及O-2·清除法研究绿茶抗氧化多肽纯品的抗氧化活性。结果表明,绿茶抗氧化多肽经葡聚糖凝胶sephadex G-75层析柱后,得到很好的分离和纯化,在SDS-PAGE电泳图谱上只有1条条带,其相对分子质量为2~15ku;绿茶抗氧化多肽对·OH具有很强的清除作用,其半清除浓度(IC50)为0.069μg/mL;对O-2·也具有较强的清除作用,其半清除浓度(IC50)为18.462μg/mL,与VC的清除作用(IC50为11.186μg/mL)相当。     

扁杏仁水解蛋白的喷雾干燥及其抗氧化活性

通过响应面设计方法探讨减压浓缩脱水比例、进风温度和进料速度等喷雾干燥工艺参数对扁杏仁水解蛋白溶液干燥效果及水解蛋白粉抗氧化活性的影响,获得表征相关指标的数学模型,在实践过程中可以对相关指标进行预测。扁杏仁水解蛋白粉具有一定的抗氧化活性,但受到喷雾干燥工艺参数的影响,通过SAS统计分析软件对相关指标进行优化,并进行验证实验,总体而言,脱水比例在0.5～0.6之间,进风温度200℃左右,进料速度在270～320mL/h,可以获得较好的综合效果。     

喷雾干燥法制备鸭血粉的工艺研究

以新鲜鸭血为原料,采用喷雾干燥法制备鸭血粉,研究了鸭血浓度、进风温度和进料速度对鸭血粉喷雾干燥效果的影响。试验结果表明:喷雾干燥法可用于制备鸭血粉,其最佳制备工艺参数为鸭血体积分数65%,进风温度190℃,进料速度0.057 ml/s,在此最佳制备工艺参数下制得的鸭血粉感官质量较高,水分含量低,溶解度较高;并初步建立了鸭血粉的质量指标。     

藜麦水解蛋白肽制备及其抗氧化活性研究

目的 使用蛋白酶水解藜麦蛋白,制备抗氧化性高的藜麦多肽。方法 通过单因素和响应面法优化,以1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical, DPPH·)清除率为指标,运用电子顺磁共振(electron paramagnetic resonance, EPR)技术,通过EPR波谱图分析,直接、准确地研究藜麦多肽的抗氧化活性。结果 根据所得EPR波谱图进行分析, 5种蛋白酶(复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶)的产物均有抗氧化性,胰蛋白酶处理所得物的DPPH·清除率最大,选择胰蛋白酶进行工艺优化,根据响应面模型对条件进行优化,得到最佳工艺条件是:酶添加量为2000 U/g、pH为7.2、温度为43.6℃、时间为4.30h。以优化所得最佳条件进行验证,藜麦抗氧化肽的DPPH·清除率为49.56%。结论 胰蛋白酶在最优条件下水解藜麦蛋白,可生产抗氧化性高的藜麦多肽。本研究为酶解藜麦蛋白生产抗氧化肽工艺提供了数据积累,有利于藜麦功能性产品的进一步研发。     

分子包埋技术制备脱腥牡蛎粉工艺的优化

将新鲜牡蛎去除杂质,用碱性和中性蛋白酶进行酶解,考察不同护色剂的添加量、复合酶配比、酶解温度、酶解时间和加酶量对酶解液感官品质的影响,找到最优的酶解条件。通过选取不同比例的酪蛋白、麦芽糊精、魔芋精粉为牡蛎酶解液的包埋壁材,对牡蛎浓缩液包埋后进行喷雾干燥。然后对牡蛎干粉的吸湿率、堆积密度、休止角、水分含量、氧化稳定性和感官品质等指标进行测定,评价其品质。经过试验得到牡蛎酶解的最优条件为:护色剂添加量0.1%、碱性蛋白酶与中性蛋白酶质量比为11,加酶量1%,酶解温度50℃,酶解时间30 min。喷雾干燥中壁材的最优配比条件为:酪蛋白麦芽糊精魔芋精粉质量比为50500.5。喷雾干燥壁材和浓缩1倍的酶解液的质量比为5050。     

喷雾干燥法制备南瓜粉的工艺参数研究

采用喷雾干燥法制备南瓜粉，通过对均质压力、料液温度、喷雾干燥进风温度3个因素进行单因素和正交实验分析，得出料液温度为40℃，均质压力为25MPa，喷雾干燥进风温度为160℃时制得的南瓜粉质量最佳，该南瓜粉的复水性、冲调稳定性及分散性较好。     

扇贝抗氧化肽对衰老小鼠体内抗氧化活性研究

目的研究扇贝副产物抗氧化肽对衰老小鼠体内抗氧化活性。方法采用D-半乳糖构建小鼠衰老动物模型,分别以不同性别小鼠肝脏中特征酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性及丙二醛(alondialdehyde, MDA)含量为指标,评价扇贝抗氧化肽的体内抗氧化功能。结果与模型组比较,灌胃剂量为0.5 mL/kg的样品组能够显著提高模型小鼠(雌性和雄性)中肝脏中SOD、CAT、GSH-Px等特征酶的活性,并降低MDA含量水平。同时以脾脏指数、胸腺指数、吞噬指数为指标评价扇贝抗氧化肽对小鼠免疫能力的影响。结果显示灌胃剂量为0.50mL/kg和1.0mL/kg的扇贝抗氧化肽能够提高小鼠的脾脏指数、胸腺指数和吞噬指数。结论扇贝抗氧化肽具有良好的增强机体抗氧化功能作用。