诊断电镜样品的快速制备方法

电镜作为生物科学研究和某些疾病病理检查的基本工具 ,已为科研工作者所熟知。但由于电镜样品制备的周期较长 ,影响了科研和检查的进度 ,特别对病理检查来说时间太长。近年来 ,随着诊断电镜学的发展 ,诊断电镜样品的快速制备方法受到国内外电镜工作者的关注。本文通过大量实验 ,摸索出一套比较满意的诊断电镜样品的快速制备方法。1 .材料和方法病人的肾穿标本 ,切成 0 .6～ 0 .8mm3大小的组织块。 4%多聚甲醛固定 30 min,用 0 .1 mol/LPBS(p H7.30 )漂洗 3次 ,每次 1 0 min。 1 % Os O4 后固定 30 min。依次用 5 0 % ,70 % ,90 %的乙醇各…     

一种简单方便的生物组织导电法

用扫描电镜观察的样品要求表面能导电,惯用的方法是在样品表面蒸涂导电层,对于表面起伏大而又容易变形的生物样品,这种方法效果不太好。近年来采用组织导电技术处理生物样品取得了比较好的效果,但一般对镜体污染大增加了仪器维护的麻烦。我们使用多种导电液处理样品在S—100电镜上面进行比较,觉得用四氯化锡导电液处理方法简单对镜体污染小。方法如下:把待观察样品按常规固定后保存在70％酒精中,把SnCl_4放入75％的酒精溶液中配制成5％的酒精四氯化锡导电液。把保存在酒精中的样品捞放入导电液中适当浸泡取出胶合即可观察。如果经过乙腈干燥后再     

微波辐射固定及其在免疫金标记技术中的应用

应用微波辐射快速固定大鼠胰腺组织和白血病病人骨髓细胞悬液,再按常规制作电镜超薄切片。包埋后超薄切片免疫金标记β细胞中的胰岛素分泌颗粒显示组织细胞结构清晰,标记率高,(图1)。骨髓细胞悬液包埋前免疫金标记和酶反应定位血小板表面糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)和胞浆内过氧化物酶均呈现阳性结果(图2)。电镜观察结果表明,经微波辐射固定的生物样品能较好地保存细胞的超微结构,抗原性及其酶活性。根据多次反复试验,我们取得的经验是,在进行微波辐射固定生物样品时,电镜样品固定温度和时间以26～28℃,15秒为宜。由于微波辐射加热温度升高很快,我们采用在炉室内四角放置四个盛有     

微波技术在诊断电镜标本制备中的应用

电镜作为某些疾病的病理检查手段 ,已为广大医务工作者所熟知。但电镜样品的常规制备方法周期较长 ,影响及时诊断。近年来 ,我们将微波照射作为常规技术应用于电镜标本制备 ,进行了大量的工作。结果表明 ,该方法不仅大大缩短了样品制备时间 ,而且用这种方法制备的样品的超微结构完全可以满足电镜诊断要求 ,现已成为本室诊断样品的常规技术。材　　料选用 National NN- 6 80型微波炉 ,分 HI,DEF,MEDHI,MED档 ,样品包括各种肿瘤组织 ,肝 ,肾 ,肺 ,软骨 ,及游离细胞 (血细胞 ,培养细胞 )。1 .标本固定固定液用 4%多聚甲醛 ,或 3%戊二醛 …     

微波辐射的糖元PA-TCH-SP电镜特染

在显示糖元等多糖类物质 (碳水化合物 )的众多染色法中 ,PA- TCH- SP染色法是一种较理想的方法[1] ,其显示糖元颗粒清晰 ,尤其是染色背景较干净 ,非特异性沉淀少 ,但染色时间长 ( 1～3d) [2 ]。为缩短染色时间 ,作者探索用微波技术辅助染色 ,取得较好效果 ,并应用于寄生原虫、人睾丸支持细胞中的糖元显示[3,4 ] 。材料与方法标本包埋、切片 :鼠肝、阴道毛滴虫、人睾丸用戊二醛固定 ,不经锇酸固定或固定 5 min,常规电镜包埋 ;超薄切片 90 nm。染色试剂 :1 %过碘酸 ( PA) ,2 %硫卡巴肼 ( TCH) - 2 0 %醋酸 ( HAc) ,1 %蛋白银 ( SP)。微…     

扁桃酸酰胺作用阴道滴虫的电镜观察

扁桃酸酰胺(Mandelic Amide)已证实为桃叶膏抗滴虫的有效成份,为探讨此成份的杀虫机制,作者曾作了光镜下的形态观察,而对电镜下的超微结构改变未见有过记载。本文就电镜下的观察结果报导如下。观察方法是在培养48小时的滴虫培养管内加入40mg/5ml扁桃酸酰胺,培养48小时后制备样品。另外取一滴虫培养管不加药品作对照组,并与实验管同时进行样品制备。样品制备是将上述两种标本,先以2.5％戌二醛液在室温下作一级固定,15分钟后,用pH7.4磷酸缓冲液水洗1小时,再入1％四氧化锇二级固定2小时。用乙醇进行系列脱水,用环氧树酯包埋处理48小时,作超薄切片,切片用醋酸铀和柠檬铅作双染色,随后在H—600型电镜下观察拍片。     

培养的肺动脉内皮细胞的免疫和细胞化学鉴定

本实验用间接免疫荧光法和电镜免疫胶金法显示培养细胞的胞内凝血Ⅷ因子相关抗原(ⅧR:Ag)反应阳性以及电镜下Weible-Palade(WP)小体存在,证明所分离并经多次传代的细胞为内皮细胞。材料和方法:1.从新生小牛肺动脉中以胶原酶消化法分离出内皮细胞,于199培养液中培养并传代,取第3-5代细胞。实验前细胞培养于涂有鼠尾胶原的载玻片上。2.WP小体检测:细胞以PBS(0.1M,pH=7.4)原位漂洗并分别以3％戊二醛45分钟、1％锇酸30分钟固定;将预聚好的Epon812块扣于经脱水和Epon812浸透的细胞单层上,聚合后用热烤法将细胞层剥离于载玻片,常规超薄切片和铅铀染色,透射电镜下观察。3.ⅧR:Ag检测:(1)间接免疫荧光法:以95％4℃乙醇原位固定细胞10分钟,     

盖玻片在培养细胞免疫电子显微术中的应用

体外培养的细胞不仅可用于研究其形态和机能的变化,而且可进行不同药物学作用时细胞内抗原成分的定位检测及细胞特征的研究。通常盖玻片放入培养皿中作为培养细胞的支持物,细胞在盖玻片上长成单层,可立即固定、染色,进行光学显微镜的观察。在实验中我们发现,加盖玻片的单层细胞培养法也可以直接应用于免疫电镜的包埋前和包埋后染色方法。该技术具有以下优点。(1)使用盖玻片可以避免免疫电镜标本制作过程中,为了搜集细胞而进行的数次刮取、离心。免疫反应及后固定、脱水、浸透、包埋均在盖玻片上进行,使培养细胞的损伤降低至最小程度。(2)如果在直径3．5cm的培养皿中进行免疫过氧化物酶反应大约需要至少200μl抗体,而使用盖玻片法,每张盖玻片则仅需要10μl抗体,大大节约了免疫反应的抗体量,既简便又经济。(3)盖玻片法使包埋后培养细胞呈单层位于包埋块的表面,在每一张超薄切片中都能观察到很多细胞。     

适合光镜和电镜诊断肾小球疾病的固定剂选择

目的：为了使已经石蜡包埋的肾穿组织脱蜡后进行电镜观察,关键是选择适当的固定剂。方法：在石蜡包埋前,肾穿组织分别用甲醛、戊二醛及戊二醛、锇酸双固定。根据光镜和电镜观察结果,选择能兼顾光镜和电镜的固定剂。结果：甲醛固定不能有效保存肾穿组织的超微结构,锇酸的固定能有效地保存超微结构,但严重影响了光镜切片的染色;而戊二醛与甲醛相比,较好地保存了肾穿组织的超微结构,同时又不影响光镜切片的染色。结论：在石蜡包     

微波辐射在电镜生物标本聚合中的应用

最近几年有较多的研究人员尝试用微波照射生物标本以提高固定质量 ,并加快固定的速度 ,在这方面已取得较大进展 ,但在聚合方面的应用报道甚少。据国外报道微波辅助环氧树脂 81 2包埋剂聚合 ,微波照射时间由电脑控制 ,反复照射 2 s,间断 1 s[1] ,由于条件的限制 ,尚未能推广应用。我国南方实验室普遍使用国产环氧树脂 6 1 8包埋剂 ,现将微波辐射快速聚合 6 1 8包埋剂的方法予以介绍。将成年弥猴处死 ,取肝脏切成 1 cm3的小块 ,经 3%戊二醛前固定、1 %锇酸后固定 ,5 0 %、70 %、90 %、1 0 0 %的乙醇、丙酮系列脱水 ,各 1 5 min,1 0 0 %丙酮∶ …     

Application of model of mixture of probabilistic distributions for definition of the signals of radiophysical probing

The article describes a model representation of radar probing data in form of a mixture of background and target samples, which is the sum of two random variables with very different parameters. For model development we research the behavior of the central moments of the distribution mix without assuming the distribution law form. An example it is described the detection of the signal at the output of compression system of chirp ionosonde.     

部分偏振光的表示方法

随着光纤通信和光纤传感的快速发展,人们时光的偏振态提出了越来越高的要求.光是一种横波,其偏振态大致分为:完全偏振光、部分偏振光和自然光.文中介绍了完全偏振光的几种表示方法,给出了几种部分偏振光的描述方法.并阐述了它们之间的差异与联系.     

浅析IP网服务质量(QoS)

解决IP网QoS问题是目前通信领域的研究热点之一.虽然研究已经取得了一定的进展,但人们对于IP 网QoS本身的含义及相关的问题还有着不同的理解.本文将从IP网QoS的定义入手讨论相关的一些问题以及解决IP网QoS问题所做的各种努力.     

Interpretation of responses of visual cells of limulus

Assuming that visual responses are due to the action of particles on the membrane of the visual cells, the stochastic variability of the response should be a function of the number of particles producing it. Quantitative predictions can be made with the aid of a model proposed in previous articles. It is found that responses produced in visual cells of Limulus by absorption of a single photon have the stochastic properties which would be expected if the response to one photon were brought about by 25 particles. It is concluded from this that the processes leading to visual responses produce multiplication of particles. The effects of temperature and of metabolic poisons suggest that these processes are of chemical nature.     

NTRUsign式计算量分析

介绍了NTRUsign签名算法的密钥生成过程,其在实现的过程中需要进行上百位的大数运算问题,这些数字远远超出了普通电脑存贮范围。而要进行大数运算,就得用数组存贮,进行模拟运算,这就大大增加了运算量。文中分析了这个算法实现过程中的运算量,分析结果说明NTRUsign的运算量过大,以致实际并非一个实用算法。     

Differential method of analysis of luminescence spectra of semiconductors

A method for analyzing the luminescence spectra of semiconductors is suggested. The method is based on differentiation of the spectra. The potentialities of the method are demonstrated for luminescence in the region of the fundamental absorption edge of Si and SiGe alloy single crystals. The method is superior in accuracy to previously known luminescence methods of determining the band gap of indirect-gap semiconductors and practically insensitive to different conditions of outputting radiation from the sample.     

“计算机组成原理”设计性实践教学模式研究

本文阐述了"计算机组成原理"设计性实验教学的重要性,对设计性实验教学的目的和基本特征进行了归纳,对"计算机组成原理"设计性实验教学的现状进行了调查,对存在的问题进行了较深入的分析;在此基础上.对组成原理设计性实验的教学模式进行了研究,对设计性实验的体系进行了初步设计,并对"计算机组成原理"设计性实验的实施方法进行了探讨.