耐盐高降解蛋白菌株的分离鉴定及其降解条件的研究

通过耐盐实验和发酵实验,从餐饮废水中分离得到一株耐盐且高效降解蛋白的细菌(A-3),为了确定该菌株的最佳降解条件,选择培养基初始pH、溶氧量、接种量和碳源4个影响因素进行降解实验。通过形态学、生理生化特征以及16S rDNA鉴定,将A-3初步鉴定为沙雷氏菌(Serratia sp.A3)。蛋白质降解实验结果表明:耐盐降解蛋白菌Serratia sp.A3最佳降解条件为:初始pH7.0,溶氧量180r/min,接种量5%,蔗糖作为碳源可以促进菌株对蛋白质的降解。     

赤水晒醋一株产气微生物的分离鉴定

为了解赤水晒醋产气原因,采用多种培养基分离和计数产气微生物,并检测其生理生化特征,生长特性以及16S rDNA基因序列分析。实验结果表明,从变质晒醋中分离到一株产气微生物,编号为N9,革兰氏阳性,有芽孢,最适生长温度为45 ℃,最适生长pH值为5.5,最适生长盐度（氯化钠含量）为1%,繁殖能力强。经过16S rDNA基因序列以及系统发育树分析可以鉴定该菌为产碱普罗威登斯菌（Providencia alcalifaciens）。     

蓝莓果浆中耐酸耐高温微生物的分离与鉴定

为了解和控制蓝莓果浆中的耐酸耐菌,采用酸化的凯氏培养基对蓝莓果浆中的耐酸耐热菌进行分离、培养和鉴定。结果表明,分离到的1株污染菌可以在60~90℃的温度范围及2.6~3.8的pH值范围内生长,符合耐酸耐热芽孢杆菌的特点。通过对分离菌株的细胞形态观察、菌落形态观察、生长条件、生理生化反应、16S rDNA测序等的分析研究,确立了分离菌与沙福芽孢杆菌有明显的相似性。     

低温熏煮香肠中败菌的分离及鉴定

研究低温熏煮香肠中腐败菌相,分离出一株主要腐败菌,命名为NO.IA.利用生理生化检验和16S rDNA序列分析对该菌进行鉴定,结合生理生化检验结果和系统进化树分析结果,确定该菌为枯草芽孢杆菌.     

鉴定乳制品中厌氧芽胞杆菌的3种方法比较

鉴定乳制品中的革兰氏阳性厌氧芽胞杆菌。方法 采用生化鉴定、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定和16S rDNA测序三种方法,对乳制品中5株革兰氏阳性厌氧芽胞杆菌进行鉴定。结果 生化方法鉴定出3株菌,而飞行时间质谱鉴定和16S rDNA测序法对5株菌都给出了鉴定结果。3种方法仅对其中1株菌的鉴定结果一致;飞行时间质谱鉴定和16S rDNA测序的鉴定结果一致性程度高,共有4株菌的鉴定结果一致;而生化方法的鉴定结果与这两种方法差异较大。结论 飞行时间质谱鉴定和16S rDNA测序可作为生化方法的补充,用于革兰氏阳性厌氧芽胞杆菌的快速鉴定。     

耐二氧化硫乳酸菌的筛选鉴定及其在泡野山椒中的应用

筛选出2株源于泡蒜的耐SO2乳酸菌,对其形态学观察、生理生化测试及16S rDNA序列测定,菌株2-2被鉴定为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),菌株2-5为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。利用2株菌耐SO_2特性,将其应用于野山椒泡制中,对含SO_2的泡野山椒基础配方进行优化,结果表明:2株菌均在含SO_2 150mg/L的MRS培养基中能正常生长;将2菌株按1∶1的比例混合,以2%(v/w)的接种量接种至含SO_2 75 mg/L,盐含量4%,蔗糖含量2%的野山椒中,室温发酵,成熟的泡野山椒酸咸适宜,色泽金黄、味道鲜美,具有泡野山椒典型的香气,为其工业生产提供了数据参考。     

蟹酱中度嗜盐菌的分离、鉴定及特性研究

从蟹酱中分离纯化鉴定嗜盐菌,对其进行形态学和生理生化特性研究.采用Gibbons培养基分离纯化,通过形态学、生理生化实验进行特性研究,16S rDNA序列比对分析进行鉴定,吸光度法测定生长特性.结果分离得到3株中度嗜盐菌PKY101,PKY102和PKY103,试验结果表明,3种嗜盐菌均为革兰氏阳性菌,不产芽孢,菌体呈球状,直径分别为0.6μm～1.9μm,0.8μm～1.0μm,0.7μm～1.5μm;系统发育分析将3株嗜盐菌鉴定为葡萄球菌属(Staphylococcus)中的3个不同的种,分别为:琥珀葡萄球菌(Staphylococcus succinus)、科氏葡萄球菌(Staphylococcus cohnii)和马胃葡萄球菌(Staphylococcus equorum).本研究将为进一步研究蟹酱中的嗜盐菌的类型及在发酵盐渍类食品中的作用开展了前期的基础工作,为防止嗜盐菌污染食品提供了理论参考.     

真空包装烟熏火腿切片主要腐败菌的分离及分子快速鉴定

利用微生物分离纯化与16S rDNA分子鉴定方法相结合,对真空包装烟熏火腿切片贮藏过程中主要腐败微生物菌相进行分离鉴定.产品在4℃贮藏,于不同时间取样,对其中微生物菌落进行分离和纯化、形态观察和部分生理生化鉴定,对最终得到的细菌纯培养物直接提取DNA,进行16S rDNA V3可变区扩增,PCR产物经测序后于NCBI与已知序列进行相似性比对.结果表明:从PCA和MRS培养基上共挑选出107株纯菌株.经形态学和生理生化鉴定,最后得到17株具有典型特征的纯菌株,经16S rDNA分子鉴定归纳为:Leuconostoc mesenteroides spp.、Lactobacillus sakei subsp.Sakei、Lactobacillus curvatus subsp.Melibiosus、Weissella viridescens、Dietzia sp.和Plantibacter aurantiacus.等6个属/种的细菌.     

产PrtS蛋白酶嗜热链球菌的筛选及其生长特性研究

从商业发酵剂中初步分离出8株疑似嗜热链球菌,与实验室保存的26株嗜热链球菌,共收集到34株菌。通过PCR反应获得具有PrtS基因的一株菌,利用FSDA培养基确定该菌株具有PrtS蛋白酶活性,经生理生化实验和16S rDNA序列同源性分析该菌株为嗜热链球菌,命名为Streptococcus thermophiles 922。该菌株在LM17培养基中培养10 h时,活菌数达到9.68 log cfu/mL;在脱脂乳培养基中,产酸速度快,产酸量较高。实验结果为深入探究PrtS蛋白酶对嗜热链球菌生长和发酵性能影响提供基础。     

耐高温L-乳酸菌的筛选与鉴定

耐高温乳酸菌对木质纤维素的同步糖化共发酵生产乳酸和减少发酵过程中冷却水用量,降低染菌机会具有重要作用。本文从土壤中筛选到两株耐高温的L-乳酸菌Y3和Y6。对它们进行形态特征、生理生化特征和16S rDNA鉴定,以准确地判断其属种。形态学和生理生化结果表明Y3和Y6均符合芽孢杆菌属特征,16S rDNA鉴定结果表明两菌株属于凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans。     

高效降胆固醇降甘油三酯乳酸菌的分离鉴定和功能分析

筛选出高效降胆固醇降甘油三酯(Triglyceride,TG)菌株,为新型药物、保健食品的研制提供优良菌株。从6种西北特有样品中筛选分离出乳酸菌,采用磷硫铁比色法测定菌株降胆固醇能力,并测定菌株降甘油三酯能力,通过抑菌实验、耐酸、耐胆盐及小鼠体内毒性试验研究菌株各项性能,利用生理生化及16S rDNA法对菌株进行鉴定。结果表明,本试验筛选出3株高效降胆固醇降甘油三酯乳酸菌,其中菌株ZL010降胆固醇、降甘油三酯效果最强,蛋黄中胆固醇的降解率为73.65%,高纯度胆固醇降解率为40.06%,甘油三酯降解率为5.10%。3株菌都具有很好的抑菌、耐酸、耐胆盐能力,菌株经生理生化及16S rDNA鉴定ZL005为耐久肠球菌(Enterococcus durans),ZL010为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),ZL016为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)。小鼠毒性试验表明,菌株无毒副作用,小鼠各脏器一切正常,菌株可用于降脂降胆固醇保健药品及功能食品的制备。     

酢辣椒中益生乳酸菌的筛选及其功能特性

为从酢辣椒筛选出具有益生特性的菌株,开发辣椒益生菌产品,本实验从地方特色发酵食品酢辣椒中分离得到16 株乳酸菌,以产酸速度、耐人工胃液能力为指标进行初筛,通过生化实验和16S rDNA序列分析方法鉴定;并通过研究菌株对工艺逆境的耐受能力,表面疏水性和自聚合能力以及抑菌活性、抗氧化能力、降解亚硝盐能力和安全特性来评价乳酸菌的益生特性。结果表明：发酵乳杆菌17-1、发酵乳杆菌18-2和短乳杆菌L3-5能耐受0.4%苯酚、溶酶菌和热处理;具有较高的表面疏水性和自聚合能力;能产生具有广谱抑菌效果的细菌素来抑制病原菌的生长;菌株L3-5和17-1具有较高的抗氧化能力;3 株菌都具有胆盐水解酶活性和产γ-氨基丁酸能力,并且都属于安全性菌株。综上所述,传统酢辣椒是分离益生乳酸菌新的天然来源,从中分离得到的发酵乳杆菌17-1、发酵乳杆菌18-2和短乳杆菌L3-5可以作为潜在的益生性菌株。     

Lactobacillus casei, dominant species in naturally fermented Sicilian green olives

This study investigated the phenotypic and genotypic characteristics of lactic acid bacteria in naturally fermented green olives, collected from different areas of Sicily. Both classical biochemical tests and PCR/Restriction Fragments Length Polymorphism (RFLP) of 16S rDNA were used to characterize the isolates. The identity of the isolates was obtained by the partial sequencing analysis of the 16S rDNA. The BioMerieux software assigned the 13 heterofermentative strains to the Lactobacillus brevis species; 24 homofermentative strains were classified as Lactobacillus casei and the remaining 11 homofermentative lactobacilli were identified as Lactobacillus plantarum. The rapid ID 32 STREP test identified coccal-shaped strains as Enterococcus faecium species. The PCR/RFLP analysis showed a remarkable bacterial heterogeneity within the isolates. The 16S rDNA partial sequencing did not confirm biochemical identification, revealing a strong dominance of isolates belonging to the L. casei species. It is noteworthy that this species has never been reported as dominant species in fermented vegetables.A combination of molecular and biochemical analysis allowed the identification of species involved in natural food fermentations.     

传统泡菜中抗性乳酸菌的筛选及鉴定

以传统泡菜中分离出的40株乳酸菌为对象,通过耐酸、抗人工胃液和抗胆盐试验,确定传统泡菜中具有良好抗性的乳酸菌,并使用16S rDNA序列和系统发育树分析良好抗性乳酸菌的种属关系。试验结果表明,40株乳酸菌中编号MFR-28和MFR-30两株菌对人工胃液和胆盐具有较强的耐受能力,其在人工胃液中的存活率分别为85.21%和90.47%,在0.3%胆盐中的生长效率分别为11.84%和7.37%;经16S rDNA序列和系统发育树分析,MFR-28和MFR-30均为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。该研究筛选出的2株抗性干酪乳杆菌,可作为潜在益生菌进一步探索其生理功能,以期用于开发益生菌产品。     

16S rDNA-RFLP技术鉴定西藏地区乳制品中的乳杆菌

将16S rDNA PCR技术和RFLP技术相结合,对分离自乳制品中的乳杆菌进行分类和鉴定.从我国西藏地区传统发酵乳中分离出51株乳杆菌,采用通用引物扩增16S rDNA,利用限制性内切酶AluI,HaeIII和HinfI将16S rDNA扩增产物进行酶切后,经聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱将菌种鉴定到种的水平.根据16S rDNA-RFLP的结果从中选出8株有代表性的菌株进行生理生化实验和16S rDNA序列的测定,实验结果与RFLP鉴定结果相吻合,表明此方法是一种快速、准确的可用于大量乳杆菌分类和鉴定的方法.     

海南黑山羊瘤胃液中乳酸菌的分离和鉴定

以海南黑山羊瘤胃液为研究对象,对其进行乳酸菌的分离和鉴定,为黑山羊饲料的青贮提供优质的乳酸菌菌株。通过形态学观察及H2O2酶、糖发酵等生理生化试验对所分得菌株进行初步鉴定,并对分离得到的菌株进行16S rDNA基因扩增与测序。结果表明从黑山羊胃液中筛选出15株革兰氏阳性、H2O2酶阴性的乳酸菌疑似菌株,除菌株HBG20不能在pH 3.0条件下生长,其余菌株均能生长;三株代表菌株HBG11、HBG46和HBG86在低温5 ℃和高温55 ℃条件以及pH2.5时均能生长,同时在盐浓度为6.5%时也能生长。16S rDNA基因测序结果表明,菌株HBG11与耐久肠球菌（Enterococcus durans）同源性最高,菌株HBG46与植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）同源性最高,菌株HBG86与干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）同源性最高。     

具有透明质酸酶抑制活性益生菌的体外筛选及鉴定

通过乳酸菌传统分离技术和益生菌体外评价,并结合透明质酸酶体外抑制实验,快速筛选出具有潜在抗过敏活性的益生菌.结果表明,从牛奶样品中分离的5株具有酸和胆盐耐受性的菌株表现出良好益生特性,其初步判定为安全菌株,所有菌株有较高透明质酸酶抑制率,结合相关研究表明其能够作为抗过敏益生菌筛选的指标之一.其中菌株L02和L15呈现出...     

自然发酵酸笋中乳酸菌的筛选鉴定及益生特性研究

为筛选自然发酵酸笋中的益生乳酸菌,采用MRS培养基分离,经生理生化实验及16S rDNA序列分析鉴定,通过溶血实验评价安全性以及耐酸耐胆盐实验评价耐受性,并测定乳酸菌体外抗氧化性。结果表明,共分离到69株乳酸菌,隶属于2个科3个属,分别为乳杆菌属（Lactobacillus）、片球菌属（Pediococcus）、链球菌属（Streptococcus）,均为γ-溶血的安全菌株,且均对0.3%胆盐具有良好耐受性,其中41株乳酸菌耐pH 2.0酸性条件,从中优选出的17株乳酸菌对人工胃肠液均有良好耐受性。4株短乳杆菌（Z1-02、ZR2-14、ZR2-12、ZR2-22）和2株消化乳杆菌（ZR1-02、ZR1-05）的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率、2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）自由基清除率、还原能力均分别＞62%、79%、0.393,其中乳杆菌Z1-02的综合抗氧化能力最强,这6株乳酸菌具备优良的益生性能和体外抗氧化活性。     

泡菜中乳酸菌的分离鉴定及体外抗性筛选

从泡菜中分离得到5株乳酸杆菌,经16S rDNA种属分析,其中4株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),编号分别为E-6-1、E-1-2、E-6-3、D-2-3,1株为消化乳杆菌(Lactobacillus alimentarius),编号为C-2-1。通过人工胃液和胆盐试验来确定5株菌的体外抗性。结果表明,D-2-3乳酸菌具有较好的抗人工胃液能力,其在pH 3.0的人工胃液处理3h后的存活率高达95.38%,且在1,2,3g/L胆盐中均能较好的生长。说明该菌株具有益生菌潜质。     

真空包装冷鲜牛肉中生物保护菌的分离鉴定与生物学特性

从真空包装冷鲜牛肉中分离筛选得到7 株具有生物保护潜力的乳酸菌，通过细菌形态学观察、生理生化鉴定和16S rDNA分子生物学鉴定确定为清酒乳杆菌（Lactobacillus sakei）。所有分离菌株均在25～35 ℃生长良好，其中菌株RS-16和RS-25的生长及产酸能力较强，除RS-33和RS-41外，其他菌株均未检测出耐药性或毒力基因。使用琼脂扩散法对7 株分离菌的抑菌性进行测定，结果表明，分离菌株对所有指示菌均表现出拮抗效果，且菌株RS-16和RS-25对鼠伤寒沙门氏菌的拮抗效果显著优于其他菌株；对保护菌的抑菌产物分析表明其抑菌性来源于有机酸。本研究从真空包装冷鲜牛肉中分离鉴定并筛选得到2 株具有生物保护潜力的清酒乳杆菌，丰富了生物保护菌的种质资源。