黑曲霉产糖化酶液态发酵条件研究

以糖化酶活力为指标,通过单因素实验,分别考察了添加物、补料时间和补料量对黑曲霉发酵产糖化酶的影响。通过正交实验,考察了发酵条件对黑曲霉发酵产酶的影响。结果表明,添加0.4%的(NH4)2SO4作为促进剂可使酶活提高17%,最佳补料时间为48 h,补料量6 mL,补料可使发酵周期由原来的96 h延长到120 h;最佳发酵条件为接种量15%,250 mL三角瓶装液量50 mL,初始pH为4.5。     

浓香型白酒产糖化酶菌株筛选及产酶条件研究

利用透明圈法从浓香型白酒曲房空气中筛选得到1株产糖化酶能力较强的菌株（J8M．53）,液体培养96h后,糖化酶活性可以达到887u／mL。研究发酵条件对该菌株产糖化酶能力影响,结果表明：虽然该菌株产糖化酶的最适初始pH值、培养温度和最佳碳源分别为5℃、30℃和可溶性淀粉,但在pH值为4,培养温度为40℃时酶活依然保持在较高的水平,且菌株对其他各碳源都有一定的利用。该菌株属于好氧菌或者兼性厌氧菌,对氧的需求量较大。另外,该菌株对酒精有一定的依赖性,并具有较强的耐酒精能力,当培养液中酒精浓度6％vol时,菌株的糖化酶活性最高,酒精浓度为12％vol时的糖化酶活性是最大值的74％。     

河溪香醋优势醋酸菌筛选

从河溪香醋醋醪中分离到30株醋酸菌，以显色圈法为初筛依据，初选5株为较优醋酸菌，并对初选菌株产酸速率、耐温度、耐酒精、耐底酸等主要生产性能进行比较，以筛选优势菌株。结果表明：31#菌株在产酸速率、耐酒精、耐底酸等方面表现突出，温度适应能力强，具有相对生产优势，为河溪香醋酿造中优势醋酸菌。     

黑曲霉6号主要水解酶类的酶系分析及最佳产酶条件的研究

乾钉曲霉又名琉球曲霉,是属于黑曲霉群中具有重要应用前景的菌株。而黑曲霉６号是本实验室工作人员诱变乾氏曲霉得到的一株纤维素酶、蛋白酶等酶活较高的菌株。本实验对黑曲霉６号的一般生物学特性及培养特性进行了摸索,并对其主要酶系－纤维素酶、蛋白酶、淀粉糖化酶和果胶酶进行了系分析、活性测定、最佳产酶条件的分析,为应用试验打下基础。     

内生黑曲霉产脂肪酶条件研究及其粗酶酶学特性

针对新疆酿酒葡萄中获得的1株产脂肪酶的内生黑曲霉菌株C2J6,研究了该菌株的产酶条件及酶学特性。结果表明,该菌适宜的产酶条件为1%的乳糖为碳源,1%的蛋白胨为氮源,培养基初始pH值为8.0,培养温度35℃,培养时间约72h,此时所产脂肪酶的活力可达18.75U/mL。该菌所产脂肪酶粗酶液的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为7.0,为中温中性酶;在50℃保温1h酶活力保留54.55%,具有良好的热稳定性;在pH值3.0~7.0范围内较稳定,有一定的耐酸性。金属离子Mn2+对酶活力有促进作用,Zn2+、Fe2+、Cu2+对酶活力有抑制作用,K+、Ca2+、Na+、Mg2+对酶活力影响不大。该酶在以葵花油和谷物调和油为底物时,酶活分别为228%和180%,明显高于橄榄油和油烟机废油。     

黑曲霉Ⅵ号主要水解酶类的酶系分析及最佳产酶条件的研究

乾氏曲霉又名琉球曲霉，是属于黑曲霉群中具有重要应用的菌株。而黑曲霉６号是本实验室工作人员诱变氏曲霉得到的一株纤维素酶，蛋白酶等酶活较高的菌株。本实验对黑曲霉６号的一般生物学特性及培养特性进行了研究，并对其主要酶系－纤维素酶、蛋白酶、淀粉糖化酶和果胶酶进行了酶系分析，活性测定，最佳产酶条件的分析及应用实验。     

高产蛋白酶菌株的筛选及产酶条件优化

从山西临汾汾河滩涂的表层土壤中分离到22株产蛋白酶菌株,用检测蛋白酶产生水解圈和蛋白酶活性测定相结合的方法,从中筛选出一株高产蛋白酶菌株P5,并通过正交试验对其产酶条件进行了研究。结果表明,影响P5菌株发酵产酶因素的主次顺序为培养温度、接种量、培养时间;影响P5菌株发酵培养基组成因素的主次顺序为氮源含量、起始pH值、碳源含量;确定的P5菌株的最佳产酶条件为,在以30 g/L葡萄糖为碳源,50 g/L蛋白胨为氮源,起始pH7.0的最适产酶培养基中,培养温度35℃,接种量为8%的条件下发酵培养48 h,具有最大产酶量,其蛋白酶活力可达129.2 U/mL。     

黑曲霉产木聚糖酶的研究

筛选了 1株高产木聚糖酶的黑曲霉 (Aspergillusniger)An 2 3 8菌株 ,研究了其在固态培养基中的产酶条件。该菌株发酵曲中除含有木聚糖酶 5 117U /g(干曲 )外 ,还有纤维素酶 42 5U/g(干曲 ) ,果胶酶 12 3 6U/g(干曲 ) ,蛋白酶 2 2 5 3 1U/g(干曲 )。     

产菊粉酶菌株的筛选及产酶条件优化

从盐碱地菊芋根际土壤中筛选出112株产菊粉酶菌株,并从中得到一株酶活较高的真菌A-6,经菌落观察以及采用真菌通用引物ITS1和ITS4 PCR扩增RNA基因序列,测序鉴定结果为烟曲霉Aspergillus fumigatus。对其产酶条件进行单因素分析结果显示,真菌A-6的pH耐受范围较广,且具有一定的耐盐性。经正交实验进行产酶条件优化,确定了A-6的最佳产酶条件为菊芋提取液（EJA）100g/L,酵母膏（YE）25g/L,NaCl为5g/L,NH4H2PO45g/L,pH为5,30℃,170r/min下振荡培养3d,酶活最高为13.29U/mL。      

生淀粉糖化酶的菌种筛选及酶学研究

从自然界分离到一株高酶活性的生淀粉糖化酶菌株黑曲霉Sx。在最适产酶条件;固体培养基pH6.5,固水比1：1.6,30℃发酵24h酶活达382u/g。经纸层析鉴定酶解产物为葡萄糖。粗酶液在贮藏时,当酶液中的SDS浓度达6mg/ml时,30℃保藏10天,酶活保持不变。分析经初步分离提纯的酶的性质得：以玉米淀粉为底物时,该酶最适pH4.5,最适酶反应温度为60℃。pH4.0-7.0范围内酶活力稳定,酶具有较强的热稳定性,80℃保温1h以后,酶活力仍能保持15％。金属离子等对酶的影响为：Ag^＋、Sn^2＋对酶有强烈抑制作用;Hg^2＋、Zn^2＋、Mn^2＋、Cu^2＋有抑制作用：EDTA、Ca^2＋、Fe^2＋对酶无影响;Co^2 、K^ 有一定的激活作用。     

湘西原香醋主要糖化菌分离及双菌种制曲研究

湘西原香醋采用传统酿造工艺,有大量微生物参与糖化。试验从其醋醅中分离黑曲霉、米曲霉等主要糖化菌,并通过不同条件下黑曲霉与米曲霉双菌种制曲的糖化酶活力变化分析,探讨接种比例、曲料含水量、培养温度、培养时间等因素对制曲效果的影响。结果表明:接种比例为1∶1,制曲温度33℃,曲料含水量90%,制曲时间48h时糖化酶活力高达1849U/g,比自然制曲提高约74%。双菌种制曲既能缩短制曲时间、提高原料利用率,而且保留了传统酿造工艺特色。     

糖化黑曲霉复壮方法的研究

采用透明圈法对糖化黑曲霉AS3.324和AS3.4309的复壮方法进行研究,选出了三种适合的筛选培养基,确定了具体的操作步骤.复壮后菌株的麸曲糖化酶活力分别比退化的出发菌株的麸曲糖化酶活力提高45%和44%.     

河溪香醋混合制曲工艺的研究

从河溪香醋醋醅中分离黑曲霉、米曲霉等糖化菌，并通过不同条件下黑曲霉与米曲霉混合制曲的糖化酶活力变化分析，探讨了接种比例、曲料含水量、培养温度、培养时间等因素对制曲效果的影响。结果表明：接种比例为1：1，制曲温度33℃，曲料含水量90％，制曲时间48h时，糖化酶活力高达1849U／g，比自然制曲提高了约74％。     

黑曲霉产果胶酯酶发酵条件的研究

比较了黑曲霉(AS3.350)以有机和无机氮为氮源液态发酵制备果胶酯酶的效果,并对有机氮源的液态发酵条件进行优化。结果表明,以有机氮为氮源的发酵效果优于无机氮,黑曲霉(AS3.350)接种量0.3mL(3×103个孢子),转速90r/min,30℃发酵4d时,果胶酯酶活力高达93.4U/mL培养基。     

黑曲霉液态发酵生产果胶酶的工艺条件初探

选用鲜苹果渣为碳源,通过试验探索了黑曲霉液态发酵生产果胶酶的工艺条件。确定最适发酵培养基的组成为:麸皮2.5g,鲜苹果渣1.5g,硫酸铵1.0g,K2HPO4 0.05g,KCl0.025g,MgSO4·7H2O0.025g,Na2SO4 0.025g,FeSO4·7H2O微量,蒸馏水50mL;最佳发酵条件为:发酵时间5d,发酵温度30℃,起始pH2.0,接种量2.0%,装瓶量50mL,在250mL三角瓶中进行摇床振荡培养,最终果胶酶平均酶比活力达到37.91U/mL。     

航天诱变黑曲霉菌株ZM-8产纤维素酶的固态发酵条件研究

以麦秸、麸皮为原料,利用固态发酵对航天诱变后筛选的黑曲霉ZM-8菌株生产纤维素酶的条件进行了研究。结果表明,最佳培养基配方为:小麦秸秆粉与麸皮质量比为8:2,(NH4)2SO4为4%,料水比为1:2;最佳培养条件为:接种量为6%,初始pH值为6.5,培养温度为28℃,培养时间为96h。在以上的培养基和培养条件下,测定滤纸酶(FPA)、羧甲基纤维素酶(CMC)和β-葡萄糖苷酶的活力分别为7.90U/g、24.99U/g、21.74U/g,比出发菌种分别提高了3.0倍、1.66倍、2.24倍。     

黑曲霉固态发酵产羧肽酶条件优化及在酱油酿造中的应用

该研究以羧肽酶活力为考察指标,采用响应面法对1株高产羧肽酶的黑曲霉（Aspergillus niger）H1-6固态发酵产酶条件进行优化。首先采用单因素试验结合Plackett-Burman（PB）试验筛选出重要影响因子：麸皮添加量、水分含量和接种量,通过最陡爬坡试验获得重要影响因子的峰值范围,最后采用Box-Behnken试验、响应面分析对重要影响因子进行优化。结果表明,黑曲霉H1-6的最优产酶培养条件为：麸皮添加量36%、豆粕添加量50%、NaCl添加量10%、pH值为6.0、含水量56.6%,接种量1.3%。在此优化条件下,固态发酵羧肽酶的酶活力达到938.33 mU/g。将该羧肽酶粗酶液添加到酱油酿造中,能有效提高酱油中氨基态氮的含量（达到1.38 g/100 mL）,进而提高其鲜味。