固定化中性蛋白酶制备水牛乳抗氧化活性肽的研究

采用琼脂包埋固定中性蛋白酶,优化固定化条件,并利用固定化酶水解脱脂水牛乳生产具有抗氧化活性的酶解液,对其进行调配研制具有抗氧化活性的饮料。结果表明,最佳固定化条件为3%的琼脂、每克琼脂添加160mg中性蛋白酶、固定化时间为4h。固定化酶水解脱脂水牛乳最佳工艺为pH7.5、温度55℃、加酶量为2500U/g和酶解5h。     

固定化碱性蛋白酶制备麦胚抗氧化肽条件优化

利用冻干麦胚蛋白粉为原料,筛选影响固定化碱性蛋白酶制备麦胚抗氧化肽工艺条件的因素,并利用影响因素优化麦胚抗氧化肽制备工艺。采用Plackett-Burman试验设计,筛选出显著影响因素。利用Box-Behnkeny试验设计,显著影响因素进行响应曲面优化试验。结果显示,显著影响因素从大到小依次为麦胚蛋白悬浊液pH值、酶水解温度、底物浓度;响应面分析试验得到麦胚抗氧化肽对自由基清除率的回归方程,方程达到极显著水平(F=35.62,P=0.000 5),拟和很好(R~2_(Pred)=0.964 5,R~2_(Adj)=0.957)。固定化蛋白酶制备麦胚抗氧化肽优化工艺参数:底物质量浓度为4.92 g/100 mL、麦胚蛋白悬浊液的pH为9.2和酶水解温度为58.5℃;在此条件下,抗氧化肽对自由基的清除率达到55.62%。固定化蛋白酶重复使用,第18次时抗氧化肽的相对产率达到91.47%。     

大豆抗氧化活性肽研究进展

自由基能够引起机体衰老、肿瘤等一系列疾病的发生,大豆抗氧化活性肽具有清除羟自由基、清除超氧阴离子自由基、抑制脂肪氧合酶活力和抑制脂质过氧化链式反应等功效。本文综述了自由基的形成、大豆抗氧化活性肽的抗氧化防御机理、制备方法和发展前景等方面近年来的研究概况。     

螺旋藻抗氧化肽的制备及其体外活性研究

为了制备高活性的螺旋藻抗氧化肽,通过优化木瓜蛋白酶酶解条件,并结合超滤、凝胶过滤层析等方法,从钝顶螺旋藻酶解液中分离、纯化抗氧化肽,并对其体外抗氧化活性进行研究。结果表明,木瓜蛋白酶酶解钝顶螺旋藻的最适工艺条件为:酶底比1.6%、温度60℃、水解时间9 h、pH7.0。相对分子质量范围为0到3 000的螺旋藻酶解液的抗氧化活性最高。该部分酶解液通过凝胶层析纯化获得更高活性的螺旋藻抗氧化肽,其DPPH·清除率、OH·清除率和总抗氧化能力分别相当于质量浓度为(1.01±0.07)×10-2、(4.77±0.28)×10-1、(3.79±0.81)×10-2mg/mL的抗坏血酸溶液,从而为螺旋藻抗氧化肽用于抗氧化功能食品和生物制药方面奠定基础。     

螺旋藻抗氧化肽的制备及其体外活性研究

为了制备高活性的螺旋藻抗氧化肽,通过优化木瓜蛋白酶酶解条件,并结合超滤、凝胶过滤层析等方法,从钝顶螺旋藻酶解液中分离、纯化抗氧化肽,并对其体外抗氧化活性进行研究。结果表明,木瓜蛋白酶酶解钝顶螺旋藻的最适工艺条件为:酶底比1.6%、温度60℃、水解时间9 h、pH7.0。相对分子质量范围为0到3 000的螺旋藻酶解液的抗氧化活性最高。该部分酶解液通过凝胶层析纯化获得更高活性的螺旋藻抗氧化肽,其DPPH·清除率、OH·清除率和总抗氧化能力分别相当于质量浓度为(1.01±0.07)×10-2、(4.77±0.28)×10-1、(3.79±0.81)×10-2mg/mL的抗坏血酸溶液,从而为螺旋藻抗氧化肽用于抗氧化功能食品和生物制药方面奠定基础。     

应用双固定化酶制备大豆肽的研究

采用固定化胰蛋白酶和固定化木瓜蛋白酶分步对大豆分离蛋白进行水解，水解后酶解液中大豆肽含量为1．628～1．702mg／mL，水解度为54．4％～57．8％。多肽分子量在180以下水解度为11．1％～13．5％，181～2000为11．5％～14．5％，2000～5700为27．1％～27．2％，5700～10000为44．7％～49．6％。结果表明：双固定化酶对大豆分离蛋白的水解作用效率高，并能有效地将大豆分离蛋白降解为分子量更小的大豆肽。     

固定化木瓜蛋白酶制备大豆肽的研究

采用固定化木瓜蛋白酶水解大豆分离蛋白,对大豆分离蛋白的最佳预处理温度进行了探讨,并对制备大豆肽的工艺条件进行了正交实验.结果表明:大豆蛋白的最佳预处理温度为90℃;在底物浓度2.7 mg/mL、温度55℃、pH7.8、流速0.6 mL/min的条件下,利用固定化木瓜蛋白酶制备大豆肽,酶解液中的可溶性蛋白含量为1.384 mg/mL,水解度43.65%;影响酶水解反应的因素主次顺序为:pH＞温度＞底物浓度＞流速.     

大豆生物活性肽的分离及其抗氧化活性研究

为制各具有抗氧化活性的大豆生物活性肽,本实验采用酶解处理大豆蛋白粉,对酶解产物进行葡聚糖Sephadex G-25凝胶柱层析分离,并对其各组分分子量分布及其抗氧化性进行了研究,对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析。结果显示,大豆蛋白酶解物经Sephadex G-25分离后得到了六个肽片段,其中平均链长为4,即含有2～6个氨基酸残基的大豆功能短肽SPP4,对羟自由基具有最佳的清除作用,清除率达到80．13%,氨基酸组成分析发现该组分中缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸含量较高。结果表明,含2～6个氨基酸残基的大豆生理活性短肽具有较好的抗氧化活性。     

碱性蛋白酶水解螺旋藻制备抗氧化活性肽的工艺优化

为了提高螺旋藻肽的抗氧化能力与收率,采用单因素实验和响应面法对碱性蛋白酶水解螺旋藻粉制备抗氧化活性肽的工艺条件进行优化。实验结果表明,与木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶相比,碱性蛋白酶对螺旋藻粉的水解能力最强,其最适水解条件为55.46℃、p H值为6.71、固(g)液(m L)比为1∶10.83。在此条件下,酶解240 min,螺旋藻肽的收率为58.50%,与优化前相比,提高了15.61%。所制备的螺旋藻肽具有较强的抗氧化能力,在质量浓度为0.86 g/L时,其DPPH·清除能力为77.60%,与优化前相比,提高了7.62%。     

应用固定化胰蛋白酶制备大豆肽的研究

采用固定化胰蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆低肽，对固定化胰蛋白酶水解工艺参数等进行了系统研究。结果表明：固定化胰蛋白酶的最适温度为60℃，最适pH为8．7，最佳底物浓度为2．0－3．0mg/mL，大豆分离蛋白的最佳流速为0．3mL/min，大豆分离蛋白的水解率达到45．6％，酶解液中大豆肽含量为1．462mg/mL。酶解液多肽分子量大部分在10000以下。     

乳清蛋白抗氧化肽的制备及体外抗氧化活性研究

采用酶解法制备乳清蛋白抗氧化肽并研究其体外抗氧化活性。结果表明:以羟自由基清除率和多肽含量为指标,筛选出中性蛋白酶为最优酶;在单因素试验的基础上,通过响应面试验确定最佳酶解条件为pH 5. 50、酶解温度65℃、酶解时间1. 65 h、底物质量分数5%、加酶量5 000 U/g,此条件下乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基清除率为74. 54%;乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基、ABTS+自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都具有较好的清除能力,IC50值分别为2. 174、0. 709、2. 813mg/m L和4. 579 mg/m L。表明乳清蛋白抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。     

大豆肽体外抗氧化效果的研究

研究采用酶解、超滤等方法制备的大豆肽的还原能力抗氧化能力及对·OH的清除作用,结果表明大豆肽的抗氧化能力随浓度的增加而增强,在一定浓度范围内,大豆肽具有较强的清除·OH的效果,此外,大豆肽无助氧化作用。     

大豆降血压活性肽和抗癌活性肽的制备研究

以大豆分离蛋白为原料,用7种不同的蛋白酶对其进行水解,得到大豆肽,在水解不同时间时测定大豆肽的血管紧张素转换酶(ACE)抑制率和胃癌细胞生长抑制率.结果表明,碱性蛋白酶制备的大豆肽ACE抑制率最高,其制备大豆降血压活性肽的最优条件为:反应温度55℃,pH 9.0,底物质量分数8%,酶添加量8 000 U/g,酶解时间5 h.木瓜蛋白酶制备的大豆肽胃癌细胞生长抑制率最高,其制备大豆抗癌活性肽的最优条件为:酶解温度55℃,酶添加量7 000 U/g,pH 7.5,底物质量分数6%,酶解时间4 h.     

大豆抗氧化活性肽发酵菌种的筛选

筛选发酵大豆抗氧化活性肽的菌种。以透明圈法、酶活力方法为指标从12株枯草芽孢杆菌中筛选出四株产酶高、活力强的菌株。用总抗氧化性为指标进行复筛得到适宜发酵生产大豆抗氧化活性肽的菌种Jb009,菌液酶活力达到2.28U/ml,水解产物体系总抗氧化能力为869.62U/g豆粕,此时水解度为11.47%。利用该菌作液体和固体发酵,结果发现,液体体系中发酵产物总抗氧化能力为621.68U/g豆粕,水解度为14.85%;固体发酵产物体系中总抗氧化能力为462.81U/g豆粕,水解度为15.39%。     

玉米抗氧化肽的分离制备及其体外抗氧化活性的研究

本实验以2709碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉制备玉米抗氧化肽，SephadexG-25、DEAE52纤维素纯化玉米抗氧化肽，并用几种不同的实验体系研究其体外抗氧化活性。结果表明，玉米抗氧化肽制备的最佳酶解条件为：pH=9．5，[E]／[S]=10％，时间4h，温度55℃。该条件下制备的玉米抗氧化肽对超氧阴离子自由基和羟基自由基有强烈的清除作用，并能显著地抑制细胞和组织脂质过氧化反应的发生（P〈0．01）。氨基酸组成分析表明其富含丙氨酸和亮氨酸，摩尔分数分别为17．39％和13．04％，并且含有5种人体必需的氨基酸，占玉米抗氧化肽氨基酸总含量的39．13％，因此在具有较高生物学活性的同时也具有较高的营养价值。     

松茸水解蛋白肽制备及其抗氧化活性的研究

目的 制备松茸水解蛋白肽,并研究其抗氧化活性。方法 松茸蛋白经蛋白酶酶解,对酶的种类和组合进行优化并制备水解蛋白肽。通过测定1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), ABTS]自由基及羟自由基的清除率,研究其抗氧化活性。结果 优化后最佳水解酶组合为风味蛋白酶:碱性蛋白酶质量比为1:3,最佳水解工艺条件为底物质量浓度为4 mg/mL,作用时间6 h,酶添加量质量分数为2.0%,松茸水解蛋白肽水解度为33.48%±0.2%,可溶性氮含量为72.32%±0.15%,且具有较强的DPPH自由基和ABTS自由基清除能力。结论 在优化后的条件下,松茸蛋白酶解效果最佳,且松茸水解蛋白肽有一定的抗氧化活性。     

应用固定化木瓜蛋白酶制备大豆肽的研究

以壳聚糖为载体,用戊二醛交联将木瓜蛋白酶固定化,研究水解大豆分离蛋白制备大豆肽的工艺条件,结果表明:固定化木瓜蛋白酶的表观米氏常数为8.9 mg/mL.固定化木瓜蛋白酶的最适温度为55℃,最适pH为7.8,最佳底物浓度为2.0～3.0 mg/mL,大豆分离蛋白的最佳流速为0.2 mL/min,大豆分离蛋白的水解率达到42.6%,酶解液中大豆肽含量为1.453 mg/mL.酶解液多肽分子质量大部分在10 ku以下.     

固定化胰蛋白酶制备大豆肽正交实验的研究

采用固定化胰蛋白酶水解大豆蛋白,对大豆蛋白的最佳预处理温度进行了探讨,并对制备大豆肽的工艺条件进行了正交实验。结果表明:大豆蛋白的最佳预处理温度为90℃;固定化胰蛋白酶的表观米氏常数为12.5mg/mL。影响酶水解反应显著性的顺序为:温度,pH值,底物浓度,流速;在底物浓度2.7 mg/mL、温度60℃、pH8.7、流速0.6mL/min的条件下,利用固定化胰蛋白酶制备大豆肽,酶解液中的可溶性蛋白含量最大为1.414mg/mL,水解度41.51%。     

碱性蛋白酶及其在大豆肽制备中的应用

碱性蛋白酶是一类重要的工业用酶,广泛应用于食品、医药、洗涤剂和皮革等领域。目前食品工业用酶主要来源于微生物,且实际生产中碱性蛋白酶的效果较好。从碱性蛋白酶的产生菌株、结构和性质、应用研究现状及其在大豆肽制备中的应用等方面进行了概述。     

固定化碱性蛋白酶制备麦胚降血压肽研究

采用中空壳聚糖作为载体,通过双功能试剂戊二醛作偶联剂,将碱性蛋白酶连接到中空壳聚糖,制备固定化碱性蛋白酶。研究固定化碱性蛋白酶的部分性质及水解麦胚蛋白质条件。实验结果显示,1.5% 戊二醛溶液活化的壳聚糖偶联1mg 碱性蛋白酶,酶催化相对活性可达90%;固定化酶最适pH 值为9.5,最适反应温度约65℃,催化水解麦胚蛋白质的水解率达16.5% 约需10min;固定化酶与麦胚蛋白质的比达到1:5 时,一次性获取含降血压肽水解物质的得率为15.6%。