细菌瓶法用于反硝化菌菌量的测定

在微生物采油(MEOR)研究、菌液产品质量检测、现场试验监控及环保领域,采用费时费事的最大概率数法(MPN法)测定反硝化菌(DNB)菌量。为了更简便准确的测定DNB的菌量,推荐使用含碳源、氮源、磷源及化学脱氧剂等培养液的DNB专用测试瓶。结果表明,将欲测水样注入测试瓶逐级稀释,并在30℃培养5 d后,培养液变浑浊并出现气泡表示有DNB菌生长。DNB的计数按常规细菌瓶法进行。用该细菌瓶法测定了某油田采出液、生物抑菌剂及微生物清防蜡菌剂中DNB菌数,所得结果与MPN法基本相同。与传统的MPN法相比,细菌瓶法具有生长指示明显、操作简单和工作效率高等优点。表4参17     

细菌瓶法用于石油烃降解菌菌数测定

目前在MEOR研究,菌液检测,现场试验监控及环保领域,石油烃降解菌（HDB）菌数的测定基本上采用费时费事的最大概率数法（MPN法）,本文推荐使用简单易行的细菌瓶法,研制了盛有唯一碳源石油烃,氮源,磷源及专用生长指示剂的培养液,适用于HDB菌的测试瓶,欲测水样注入测试瓶逐级稀释,在30℃培养5－7天,试液由红变黄表示有HDB菌生长,HDB菌的计数按常规细菌瓶法进行,用所推荐的细菌瓶法测定了某油田采出液,污水及采油用菌液中HDB菌数,所得结果与MPN法基本相同。HDB菌测试瓶已有工业产品（HDB－JH型）。     

细菌瓶法用于油气微生物勘探中气态烃氧化菌菌数测定

在油气微生物勘探中需要测定气态烃氧化菌(GHOB)菌数,目前所用主要测定方法是费时费事的MPN法和平板法。本文推荐使用简单易行的细菌瓶法。研制了盛有唯一碳源气态烃、氮源、磷源及专用生长指示剂的培养液,适用于各种气态烃氧化菌的系列测试瓶。将欲测土壤样品配制成水样,注入测试瓶逐级稀释,在30℃培养14天。培养液变浑变浊或液体表面出现菌膜,颜色由红变黄,表示有气态烃氧化菌生长。气态烃氧化菌的计数按常规细菌瓶法进行。用长江大学研制的JH系列气态烃氧化菌测试瓶测定了某油田勘探采样土壤中气态烃氧化菌的菌数(单位个/g),5个土壤样的测试结果为:甲烷氧化菌2.0×106(三次平行),乙烷氧化菌6.0×106(二次平行),丙烷氧化菌1.3×104(二次平行),丁烷氧化菌2.5×103(二次平行),丙/丁烷氧化菌1.5×105(三次平行),均十分接近常规方法测定结果;MPN法测定结果分别为2.0×106,6.0×106,1.3×104,3.0×103,1.6×105;平板法测定结果分别为1.9×106,6.3×106,1.1×104,3.2×103,1.8×105。表5参18。     

细菌瓶法用于产表面活性剂菌菌数测定

研制了测量产表面活性剂菌(SPB)菌数用的测试瓶。该瓶为容量12 mL的标准玻璃瓶,装有9.0 mL含原油(唯一碳源,最好为目的油藏原油)、氮源、磷源等的培养液。培养温度30℃或模拟油藏温度,培养时间7天,培养液轻摇变黑,其中的原油分散乳化,表示有SPB菌生长。用常规方法进行测试和细菌计数。使用长江大学制造的SPB-JH型SPB测试瓶测定某油田采油菌剂、采出液、含油污水中SPB菌数,分别为6.0×107个/mL(二次平行)、6.0×103个/mL(二次平行)、1.5×101个/mL(三次平行),与MPN法测值一致或基本一致(分别为6.0×107、6.0×103、1.65×101个/L),略低于平板法测值(分别为7.0×107、6.2×103、1.8×101个/L)。表4参7。     

油田水中细菌群落分析

油田水中细菌群落分析，对于外源性和内源性微生物采油技术的研究和开发都是必要的。介绍了油田水中常见的7类细菌对微生物采油的有益和有害作用。采用三管平行MPN或绝迹稀释法和浇注平板法对胜利油田S12块回注污水和5口油井产出水中有益菌(石油烃降解菌HDB，脱氮菌DNB，产甲烷菌MPB)和有害菌(硫酸盐还原菌SRB，铁细菌IB，硫细菌SB，腐生菌TGB)群落进行了计数分析，求得了最大可能含菌量，结果表明胜利S12块油藏内源微生物群落较丰富，3种有益菌和4种有害菌普遍存在，在各水样中各类菌的含量有所不同，含量总体较低。认为S12块油藏可以注入合适的营养物质，选择性地激活微生物采油有益菌，抑制有害菌，提高油藏采收率。表2参21。     

细菌瓶法用于黄原胶降解菌菌数测定

研制了测量黄原胶降解菌(XDB)菌数用的测试瓶.该瓶为容量12 mL的标准玻璃瓶,装有9.0 mL含黄原胶(唯一碳源)、氮源、磷源及特异性生长指示剂的培养液.培养温度30℃,培养时间5～7天,有XDB生长的细菌瓶颜色由红变黄,用常规方法进行测试和细菌计数.使用长江大学制造的XDB-JH型XDB测试瓶测定某油田含黄原胶的3个液样中XDB菌数(单位个/mL),与MPN法测定结果完全或接近一致,在钻井液样中均为6.0×102(二次平行),在压裂液样中均为6.0×106(二次平行),在污水样中分别为1.50×103和1.65×103(三次平行),十分接近平板法测定结果(在以上3个液样中分别为7.2×102,7.0×106,1.80×103).表5参2.     

克拉玛依油田空气辅助微生物驱油室内研究

针对克拉玛依油田油藏地质条件,室内进行了兼性采油菌的好氧、厌氧培养和代谢原油性能测定及空气辅助物理模拟驱油试验。结果表明,在好氧条件下,兼性采油菌的生长繁殖能力和代谢原油的性能都优于厌氧条件;空气辅助微生物驱比单一微生物驱提高最终采收率3.75个百分点,能进一步提高微生物驱油效果。     

油田水中有害微生物分析及防治

针对油田水中3种有害微生物(硫酸盐还原菌、铁细菌、腐生菌),阐述了测试瓶绝迹稀释法和培养-镜检法两种测定方法的优缺点.培养-镜检法,依据SRB菌、TGB菌和IB菌在生物显微镜下的不同形状、形态即可进行快速测定.并介绍了硫酸盐还原菌、铁细菌、腐生菌的性状,剖析其危害及腐蚀机理,提出了几种行之有效的防治方法:采用微生物防治法、抑制腐蚀菌营养和生长的条件、紫外线照射和超声波处理、采用杀菌剂等方法.快速准确地测定出有害微生物含量,及时采取措施有效地控制其生长和繁殖,避免或减少其危害,对油田生产具有非常重要的现实意义.     

硫细菌培养瓶的研制及应用

目前我国工业循环冷却水中硫细菌的检测方法普遍采用最大概率数法 (ＭＰＮ法 )。这种方法操作繁琐费时 ,因而硫细菌测试工作效率低。为此研制了硫细菌培养瓶。1　硫细菌培养瓶的制作通过比较不同配方培养液培养硫细菌的速度 ,优选配方 ,得到以硫代硫酸钠为主要成分的由多种无机盐组成的培养液配方。将配制好的培养液分装入玻璃瓶中 ,每瓶 9 0ｍｌ,然后灭菌、封口 ,即成为硫细菌培养瓶。2　生长指示剂选择为了及时准确地反映培养液中细菌生长与否 ,必须选择合适的生长指示剂。要求指示剂敏感、特异性强、易于判断。根据硫细菌代谢特点 ,选择…     

大庆油藏本源微生物生态分布规律的研究

调查了大庆油田本源菌的分布状态,进行了激活油藏本源微生物的研究。实验表明,水驱后和聚合物驱后的油藏中生长着好氧性烃氧化菌、厌氧或兼性厌氧的硫酸盐还原菌、石油烃降解菌、腐生菌、铁细菌、发酵菌、硫细菌、产乙酸盐菌、产甲烷菌、糖蜜菌、反硝化菌等11种本源微生物。同时,水驱后的油藏中总菌数比聚合物驱后的油藏高2个数量级,本源微生物之间的生长具有相关性,存在协同代谢作用,而且油藏经多年注水开发已经形成了较稳定的微生物菌群,适合采用激活本源微生物采油技术。