冰激凌中阪崎肠杆菌的检测

目的 对市售冰激凌中的阪崎肠杆菌进行抽样检测。方法 按照《食品安全国家标准 食品微生物学检验 (GB 4789.40- 2010)》进行检验。结果 从冰激凌中检出阪崎肠杆菌,经过染色和生化试验, 在29份样品中有3份样品分离出阪崎肠杆菌,检出率为10.34%。结论 市售冰激凌样品中存在一定比例的阪崎肠杆菌,有较大的安全隐患。质检系统应加强对市售的冰激凌的卫生预防与控制。     

副溶血性弧菌定量检测的不确定度分析和评定

目的 分析和评定冷冻天然海虾中副溶血性弧菌定量检测最大可能数(most probable number, MPN)计数的不确定度。方法 依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》、SN/T 4091–2015《食品微生物学测量不确定度评估指南》, 分析和评定检测过程中的不确定度主要来源, 运用统计学方法计算合成不确定度和扩展不确定度。结果 在95%的置信水平下, 当检验结果为75 MPN/g 和93 MPN/g时(k=2), 扩展不确定度为0.3526取值范围分别为(49~101) MPN/g、(60~126) MPN/g。评定结果表明, 实验过程的不确定度主要由样品匀液、加样体积、不同人员重复实验引入。结论 该方法适用于对冷冻天然海虾中副溶血性弧菌最大可能数计数结果的不确定度评定, 对检测结果准确度的提高具有指导意义。     

食品中致病微生物检测结果的不确定度评定

了解本地区抽查的速冻面米制品的微生物指标状况,并探讨金黄色葡萄球菌的定量检测的数值结果的不确定度评定方法。按照国标法GB 4789.1-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验总则》、GB 4789.4-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》、GB 4789.10-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》和GB 19295-2011《食品安全国家标准速冻面米制品》进行抽样和检测,依据JJF1059.1-2012《测定不确定度评定与表示》,泊松分布及相关统计学方法对检测结果数字不确定度进行评定。抽检的142批次速冻面米制品,两种制品抽检合格率都为100%,得出的两份样品检测结果平均数分别为290 CFU/g和20 CFU/g,相对应该的标准不确定度分别为30 CFU/g和4 CFU/g。本文采用的评定方法,可以对面米制品金黄菌定量检测结果平均数不确定度作出估计,用于速冻面米制品的安全评估。     

2012年广西市售婴幼儿食品食源性致病菌监测与分析

目的了解2012年广西市售婴幼儿食品食源性致病菌污染状况,为食品安全预警和食源性疾病预防提供科学依据。方法从广西14个地区的百货商场、超级市场、批发市场和便利店采集婴幼儿食品,按照国标方法进行金黄色葡萄菌、阪崎肠杆菌、蜡样芽胞杆菌检验。结果 1共监测1 939份样品,总检出率为13.56%(263/1 939),其中,阪崎肠杆菌检出率为3.15%,谷类辅助食品检出率为4.19%明显高于配方食品的检出率0.83%(χ2=15.361,P0.05),蜡样芽胞杆菌检出率为10.37%,配方食品检出率为14.12%明显高于谷类辅助食品的检出率8.68%(χ2=13.238,P0.05),金黄色葡萄球菌检出率0.05%;2定量结果:61份阪崎肠杆菌阳性样品中,43份5 MPN/100 g,3份110 MPN/100 g,最大值为240 MPN/100 g;201份蜡样芽胞杆菌阳性样品中,MPN法测得159份100 MPN/g,10份100 MPN/g,最大值为1 100 MPN/g,平板法测得19份100 cfu/g,13份100 cfu/g,最大值为4×107cfu/g;3不同年龄段谷类辅助制品蜡样芽胞杆菌和阪崎肠杆菌检出率范围分别为5.69%~21.05%和3.45%~5.26%,配方食品蜡样芽胞杆菌和阪崎肠杆菌检出率范围分别为11.11%~16.25%和0%~1.37%;4不同产地婴幼儿食品致病菌检出率范围为8.84%~23.47%。结论广西市售婴幼儿食品存在蜡样芽胞杆菌和阪崎肠杆菌污染,应加强企业生产监管,保障婴幼儿食品的安全。     

乳粉中阪崎肠杆菌检测能力验证结果与分析

目的提升实验室检测乳粉中克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)的速度和准确性。方法依据GB4789.40-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》和经优化的SN/T1632.3-2013《出口奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)检验方法第3部分:荧光PCR方法》以及能力验证作业指导书对乳粉中克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)进行检测和结果判断。结果通过实时荧光PCR法的快速初筛,初步判断样品CODE29为阴性,样品CODE95为阳性;再经显色平板分离和VITEK2生化鉴定,结果显示:样品CODE29检出肺炎克雷伯杆菌、弗氏柠檬酸杆菌和大肠埃希氏菌;样品CODE95检出阪崎肠杆菌和大肠埃希氏菌。结论本次乳粉样品中克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检测能力验证结果合格,为提高相关微生物实验室的检测能力提供参考。     

味全奶粉被检测出含致病菌

目前,国家质检总局公布了去年8月至11月进境的852批不合格食品、化妆品名单。其中,味全食品的三类配方奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。去年10月17日,产自台湾的9,624吨配方奶粉从香港进境时被检验出阪崎肠杆菌超标,进口商为深圳市恒利安贸易有限公司。不合格奶粉包括味全婴儿配方奶粉、味全幼儿成长配方奶粉和味全较大婴儿配方奶粉。     

克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)的分离与鉴定能力验证结果与分析

目的 通过参加“奶粉中克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)的检测能力验证计划”,验证实验室对克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)的检测能力,提高实验室检测技能。方法 依据GB 4789.40-2016 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验》中的第一法,对能力验证样品进行检验,对分离出的可疑菌落进行生化鉴定,同时用BIOLOG鉴定系统对可疑菌落进行鉴定。 结果 编号G785和编号V995的两个能力验证样品皆检出克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌) 结论 本次能力验证获得满意结果,证明本实验室具备克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)的检测能力。在本次能力验证实验过程中,在以国标法检测的同时,辅以BIOLOG进行鉴定,与传统生化鉴定结果互为印证,提高了检测结果的准确性,对以后的检测工作具有一定的参考价值。     

提高食品中阪崎肠杆菌的阳性检出率

阪崎肠杆菌对食品的污染具有微量和高度不均一性的特点，使得该菌能“逃避”食品卫生微生物学的检验。以国内生产的婴儿配方乳粉为样品，采用荧光定量PCR法和分离计数法分别进行检验，对影响检出率的主要因素进行比较和讨论。结果表明，样品中的阪崎肠杆菌分离株主要有6秕生化型，X—α—GlcA琼脂的选择分离效果优于其它培养基。荧光定量PCR法有一定的假阳性率。同一批次样品不同包装间的个体差异较大。而且在同一样品中，常常套同时检出阪崎肠杆菌的不同的生化型或亚种。要挑取足够多的菌落用于生化鉴定。     

婴儿配方粉及生产加工环节微生物污染情况调查

目的了解婴儿配方粉及生产加工环节中微生物污染状况。方法采自某企业婴儿配方粉原料、设备、人员及成品等共880份样品,按SN/T 0738—1997《出口食品中肠杆菌科检验方法》和GB 4789系列规定的方法进行肠杆菌科、阪崎肠杆菌和蜡样芽胞杆菌检测。结果肠杆菌科检出率为28.41%(250/880),阪崎肠杆菌检出率为0.46%(4/872),蜡样芽胞杆菌检出率为16.94%(31/183);原料中肠杆菌科污染最高(40.00%,40/100);预处理车间人员、设备和环境表面共检出4株阪崎肠杆菌;成品中蜡样芽胞杆菌检出率为22.73%(10/44)。结论婴儿配方粉及生产加工环节均存在微生物污染情况,企业及相关部门应从原料、生产环节、环境等多方面严格把关,确保产品质量。     

奶粉中阪崎肠杆菌的风险评估

阪崎肠杆菌能引起脑膜炎、NEC和菌血症等，约2．5％～14％婴儿配方奶粉含有阪崎肠杆菌，0％～12％的普通奶粉含有阪崎肠杆菌，含量从0．36-66．0cfu／100g。婴幼儿奶粉中的阪崎肠杆菌问题已受到了全世界的普遍关注。本文基于大量研究和调查数据，从奶粉中阪崎肠杆菌的危害识别、奶粉中阪崎肠杆菌的暴露评估、奶粉中阪崎肠杆菌危害特性以及阪崎肠杆菌的检测方法等方面客观地对奶粉中阪崎肠杆菌进行风险评估，并对降低我国婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌风险提出建议。     

柳江县市售国产婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌污染监测分析

目的 了解市售国产婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌污染状况,为消费预警提供科学依据。方法 分别按2011、2012年版国家食源性致病菌监测工作手册对市场上11家国内生产的32份婴幼儿配方粉进行检测。结果 32份样品检出2株阪崎肠杆菌,检出率为6.25%。其中婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌检出率4.35%(1/23);婴幼儿谷物食品中阪崎肠杆菌检出率11.11%(1/9)。结论 柳江县市售部分婴幼儿配方粉中存在阪崎肠杆菌污染,食用安全隐患不容忽视,应加强监测力度,预防和控制阪崎肠杆菌引起的食物中毒事件发生。     

GB 4789.40-2016和ISO 22964:2017方法检测婴幼儿配方奶粉中克罗诺杆菌属的实验室适用性研究

克罗诺杆菌属（原阪崎肠杆菌）可在婴幼儿配方粉（Powdered Infant Formula,PIF）中长期存活。随着食品贸易的全球化，人们对婴幼儿配方粉（PIF）中克罗诺杆菌的污染尤为关注。本文参照ISO 16140-2 2016中方法比对的原则要求，对检测PIF中克罗诺杆菌的中国标准方法 GB 4789.40-2016（参考方法）和欧盟标准方法 EN ISO 22964:2017（替代方法）进行了方法比较研究。共有12个外部实验室参与检测3个不同污染水平（0 MPN/10 g,1.299 MPN/10 g和2.210 PMN/10 g）下添加了测试菌株的576份盲样的测试。结果表明，在低污染水平和高污染水平下，GB 4789.40-2016的灵敏度分别为80.00%和81.16%，而ISO 22964:2017对应的灵敏度分别为90.00%和97.10%。无论污染程度如何，相对检测水平（RLODs）都低于接受限（AL=2.5）。同时，采用AOAC指南中提出的检测概率（POD）模型对统计数据进行了分析，结果显示替代方法和参考方法之间没有统计学上的显著差异。据此得出用于检测PIF中阪崎...     

Survival of Enterobacter sakazakii in a dehydrated powdered infant formula

A quantity of dehydrated powdered infant formula was prepared to contain Enterobacter sakazakii strain 607 at approximately 106 CFU/ml when rehydrated according to the manufacturer's instructions. The survival of the microorganism in the dry formula was followed for 2 years, during which samples periodically were rehydrated and analyzed for viable E. sakazakii. During the initial 5 months of storage at room temperature, viable counts declined approximately 2.4 log cycles. During the subsequent 19 months, the concentration of viable E. sakazakii declined an additional 1.0 log cycle. These results indicate that a small percentage of E. sakazakii cells can survive for extended periods in dehydrated powdered infant formula.     

阪崎肠杆菌及与肠杆菌科其他细菌差异比较

为进一步推动乳品企业对每批次婴幼儿配方乳粉进行阪崎肠杆菌出厂检验,寻求准确,更加便捷、且检测费用低廉的检测方法.选择3种基础肠道分离培养基组合应用进行了研究,分离阪崎肠杆菌并对几种常见的肠杆菌科细菌在5种肠道分离培养基上生物学特性反应差异比较,以及对3种方法所用的培养基分离鉴定结果进行比较.结果表明,3种基础肠道分离培养基组合应用,观察其不同形态特征及生物学特性反应后,可初步判别阪崎肠杆茼及肠杆菌科中不同的属以及同属不同种.3种用于分离鉴定阪崎肠杆菌方法,无统计学差异.该方法分离崎肠杆菌准确、操作便捷、且检测费用低廉,有利于乳品企业对每批次产品进行阪崎肠杆菌监控.     

奶粉中阪崎肠杆菌的污染及快速检测方法的研究

目的：了解福建省市售婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的污染状况、污染途径并寻找快速准确的检测方法。方法：应用分离鉴定、PCR 和荧光PCR 等方法检测,分离鉴定采用阪崎肠杆菌显色培养基和全自动微生物生化仪。结果：阪崎肠杆菌在192 份市售婴幼儿配方奶粉中的检出率为1.56%,在60 份原料奶粉中的检出率为13.33%,30 份生产车间环境样本均未检出。结论：福建省市售婴幼儿配方奶粉中存在阪崎肠杆菌的安全隐患,某工厂奶粉中阪崎肠杆菌的污染主要来自原料奶粉。荧光PCR 和显色培养基可用于阪崎肠杆菌的快速筛选和分离。     

2011—2016年广西壮族自治区市售婴幼儿食品食源性致病菌监测结果分析

目的 了解广西壮族自治区婴幼儿食品中食源性致病菌污染状况和趋势,为有效开展食源性疾病防控提供科学依据。方法 2011—2016年从广西壮族自治区14个市采集婴幼儿食品,按照GB 4789系列标准和《2014年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》规定方法分别进行4种致病菌检验。结果 共检测7 956份样品,其中婴幼儿谷类辅助食品阳性率为6.1%(249/4 084),婴幼儿配方食品阳性率为4.7%(183/3 872)。不同年度监测结果显示,婴幼儿谷类辅助食品中,阪崎肠杆菌阳性率范围为2.7%～5.6%,蜡样芽胞杆菌为2.3%～8.4%(除2011和2015年),金黄色葡萄球菌为0.0%～0.4%;婴幼儿配方食品中,阪崎肠杆菌阳性率范围为0.2%～1.8%,蜡样芽胞杆菌为10.2%～12.4%(除2011和2015年),金黄色葡萄球菌为0.0%～0.3%;沙门菌检出1份,产地为内蒙古自治区。婴幼儿谷类辅助食品中,国内阳性率为6.1%(248/4 077),7份国外样品检出1份阳性样品;婴幼儿配方食品中,国内阳性率为4.7%(177/3 758),国外为5.3%(6/114)。结论 广西壮族自治区市售婴幼儿食品中阪崎肠杆菌和蜡样芽胞杆菌污染持续存在,对婴幼儿食品安全造成威胁,应加强对国内生产企业的卫生监管。     

辣椒粉中检出阪崎肠杆菌

目的—验证辣椒粉中阪崎肠杆菌存在状况.方法—采用国家标准GB 4789.40-2010,应用VITEK 32全自动微生物鉴定及药敏系统进行检验.结果—从辣椒粉中检出阪崎肠杆菌.结论—阪崎肠杆菌存在于辣椒粉调味品中,存在较大的安全隐患.     

婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌双重荧光PCR快速检测方法的建立

旨在建立针对阪崎肠杆菌的双重荧光PCR快速检测方法。以阪崎肠杆菌局部大分子合成(MMS)操纵子和外膜蛋白A(ompA)为靶基因,建立双重荧光PCR反应体系,探讨该体系的特异性、灵敏度和抗干扰能力。结果表明,双重荧光PCR体系对阪崎肠杆菌的灵敏度为4.3×103 CFU/mL,人工污染初始菌量为2 CFU/100 g奶粉样品增菌24 h即可检出;39株实验菌中的15株阪崎肠杆菌出现特异性扩增,24株非阪崎肠杆菌未出现特异性扩增。本研究所建立的双重荧光PCR体系特异好、灵敏度较高及抗干扰能力强,可用于婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌的快速检测。     

Rapid, specific detection of Enterobacter sakazakii in infant formula using a real-time PCR assay

Enterobacter sakazakii is a rare cause of invasive infection with high mortality rates in neonates. Powdered milk-based infant formulas have been associated with the E. sakazakii-related outbreaks in premature or other immunocompromised infants. In this study, an assay was developed for the specific detection of E. sakazakii in infant formula using an application of the fluorogenic 5' nuclease assay (TaqMan). A set of primers and probe was designed using the E. sakazakii partial macromolecular synthesis operon: the rpsU gene 3' end and the primase (dnaG) gene 5' end. The specificity of the assay was evaluated using 68 Enterobacter and 55 non-Enterobacter strains. The newly developed assay enables us to detect 100 CFU/ ml in pure culture and in reconstituted infant formula in 50 cycles of PCR without enrichment. The assay was specific enough to discriminate E. sakazakii from all other Enterobacter and non-Enterobacter strains tested. The developed real-time PCR assay could save up to 5 days and eliminate the need for plating samples on selective or diagnostic agars and for biochemical confirmation steps. The real-time PCR assay could be used to rapidly screen infant formula samples for E. sakazakii and would be a boon to food industries and regulatory agencies.