储藏期内转Bt基因稻谷对印度谷螟生长发育的影响（网络首发、推荐阅读）

对转Cry1Ab/Cry1Ac基因稻谷（华恢1号）及其非转基因亲本明恢63在储藏期内对害虫印度谷螟生长发育的影响开展研究。结果表明，转Cry1Ab/Cry1Ac基因稻谷对印度谷螟低龄幼虫（1至3龄幼虫）具有较强的致死作用。温度显著影响印度谷螟各虫态的发育历期和发育速度，以2%转基因稻谷糙米粉饲喂印度谷螟后发育历期显著延长。种群生长发育速率与温度关系的非线性拟合结果显示，印度谷螟发育起点温度为7.40~15.94 ℃，以2%转基因稻谷糙米粉饲喂印度谷螟发育起点温度为4.90~17.36 ℃。以上研究结果在理论上加深对转Bt基因稻谷生态安全的认识，在实践上为科学开发利用转Bt基因水稻提供理论支持。     

转Cry1Ab/Cry1Ac基因大米粉饲喂印度谷螟后的比较转录组分析（网络首发、推荐阅读）

转Cry1Ab/Cry1Ac基因作物可以有效防治害虫。以世界性的储粮害虫印度谷螟Plodia interpunctella (Hübener)为研究对象,借助高通量测序法研究试虫中与Bt毒蛋白密切相关的基因,以期初步揭示转Bt稻谷的杀虫作用机制。结果表明,在对印度谷螟非胁迫种群和转Bt基因大米粉胁迫种群分别进行转录组测序,经De novo组装后共得到37 246个Unigene,其中有23 310个Unigene获得注释。随后,通过比较分析上述两种品系试虫基因表达量,共筛选出34 466条显著差异表达的基因,其中在胁迫品系中有15 741条基因表达量显著上调,另有18 725条基因表达量显著下调。一方面大大扩充了针对该物种的基因信息,另一方面为转基因稻谷抗印度谷螟的相关机理研究提供了新思路。     

利用实时荧光PCR方法检测转Bt基因大米

应用实时荧光PCR技术对转基因大米进行了定性和定量检测研究.本研究以转基因B163大米为材料,采用TaqMan探针技术,对大米中的内源基因蔗糖磷酸合酶SPS和转基因水稻中普遍存在的外源基因CaMV35S启动子、NOS终止子以及苏云金芽孢杆菌(Bacillusthndngiemis,简写为Bt)杀虫晶体蛋白基因Cry1Ac进行了实时荧光PCR研究,并对外源基因Cry1Ac进行了定量检测和敏感性分析.该实时荧光PCR方法检测结果和常规PCR结果一致,同时不用进行凝胶电泳,更为快速、简便,降低了污染机会,可用于转Bt基因大米的定性和定量检测.     

磷化氢对不同地理种群谷蠹成虫体内三种保护酶的影响

对不同地理种群谷蠹成虫体内过氧化氢酶(CAT),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD)的活性研究表明：熏蒸前,不同地理种群的谷蠹成虫体内三种保护酶的活性不同;使用磷化氢进行熏蒸处理后,不同地理种群谷蠹体内的三种保护酶活性的变化规律为：SOD活力升高,POD和CAT活性降低。采用SPSS16.0分别对熏蒸前试验种群的致死中浓度(LC50)及三种酶活性两两变量进行相关性分析,结果表明：试验种群的LC50与CAT之间存在显著简单相关性(P = 0.031 < 0.05);LC50 与SOD,POD两种酶活性不存在显著相关性(P = 0.545; 0.053 > 0.05);CAT及POD之间存在简单相关性(P = 0.034 < 0.05)。     

转几丁质酶-葡聚糖酶双价基因水稻稻米毒理试验

通过小鼠急性毒性试验、小鼠致突变试验、大鼠90d毒性试验,对转几丁质酶-葡聚糖酶双价基因水稻稻米的毒理进行了初步的评价。转基因大米粉MTD≥37.5g/kg灌胃给予小鼠,连续观察7d,动物全部存活,表现正常,未见中毒反应。致突变灌胃给予小鼠,未发现对小鼠骨髓细胞微核和精子畸形发生率有不良影响。转基因大米粉分别以15、7.5g/kg/d,90d灌胃大鼠,其行为活动、外观体征、饮食、粪便、体重,结果均无异常,5项血液学检查和13项生化指标检测及尸体解剖观察、脏器系数、脏器病理学检查,结果均属正常,与空白对照无显著差异。转基因大米粉结果提示携带几丁质酶基因、葡聚糖酶基因、NPT-II标记基因等外源DNA的转基因大米无明显的毒性和致畸作用。     

磷化氢对不同地理种群谷蠹成虫体内3种保护酶的影响

对不同地理种群谷蠹成虫体内过氧化氢酶(CAT),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD)的活性研究表明:熏蒸前,不同地理种群的谷蠹成虫体内3种保护酶的活性不同;使用磷化氢进行熏蒸处理后,不同地理种群谷蠹体内的3种保护酶活性的变化规律为:SOD活力升高,POD和CAT活性降低.采用SPSS 16.0分别对熏蒸前试验种群的致死中浓度(LC50)及3种酶活性两两变量进行相关性分析,结果表明:试验种群的LC50与CAT之间存在显著简单相关性(P =0.031 ＜0.05);LC50与SOD,POD两种酶活性不存在显著相关性(P =0.545;0.053 ＞0.05);CAT及POD之间存在简单相关性(P =0.034 ＜0.05).     

三种食用菌贮藏过程中抗氧化酶活力的变化研究

目的研究易腐烂的草菇及双孢蘑菇与耐贮藏的巨大口蘑在贮藏过程中的三种抗氧化酶SOD、CAT和POD活力的变化,以分析三种酶在果蔬保鲜的作用。方法三种酶均采用分光光度法测定。结果贮藏期间巨大口蘑SOD活力整体显著低于草菇SOD活力,在d 3~4显著高于双孢蘑菇SOD活力,草菇SOD在d 7具有最大峰值505.20 U/min·g;巨大口蘑CAT活力显著高于草菇和双孢蘑菇,巨大口蘑CAT活力最大值为0.1829 U/min·g;巨大口蘑POD活力显著低于草菇,在贮藏前期显著高于双孢蘑菇,后期显著低于双孢蘑菇,草菇在d 3具有最大峰值0.2427 U/min·g。结论巨大口蘑在贮藏期间具有高活力的CAT,能够有效降解H2O2,贮藏前期POD活性较高,能有效清除自由基,后期POD活性降低,能有效减轻对细胞的伤害,这是巨大口蘑比草菇和双孢蘑菇耐贮藏的主要原因。     

稻谷储藏中细胞膜透性、膜脂过氧化及体内抗氧化酶活性变化

对国内不同储藏区域、储藏时间的120个商品稻谷样品的电导率、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)等生理生化指标进行测定,研究了稻谷在储藏过程中细胞膜透性、膜脂过氧化及体内抗氧化酶活性的变化规律,并讨论了上述变化产生的原因及其对储藏稻谷品质产生的影响.结果表明随着稻谷储藏时间的延长和陈化的加深,细胞膜透性和膜脂过氧化程度逐渐增大和加深,而其体内抗氧化酶(POD、CAT)活性则逐渐降低.由此可见,稻谷储藏过程中发生了氧化和过氧化作用,存在自由基损伤.     

痕量及微量转基因大米成分半巢式PCR检测方法的建立

采用半巢式PCR技术建立了食品中痕量及微量转基因大米成分的检测方法。根据大米内源SPS基因以及转基因大米Bt63含有的外源Cry1A(b)/Cry1A(c)融合基因和Btc基因,分别设计了6对普通与半巢式PCR引物。扩增结果显示,针对理论DNA浓度的检测灵敏度,普通PCR扩增灵敏度为1ng/μl左右,半巢式PCR扩增灵敏度达到10-3～10-4ng/μl,半巢式PCR比普通PCR方法提高了103～104倍;在质量百分比的检测灵敏度方面,普通PCR方法扩增灵敏度在0.1%～1%之间,半巢式PCR方法的检测灵敏度能够达到0.001%～0.01%,半巢式PCR比普通PCR方法要提高10倍以上。在实际样品的检测中,速冻汤圆、婴儿米粉及芝士小圆饼等食品经普通PCR扩增,其内源SPS基因条带模糊或未扩增到,进一步采用半巢式PCR扩增后,能够得到清晰明亮的特异性条带。所有样品均未扩增到外源Cry1A(b)/Cry1A(c)和Btc基因。     

复合淀粉酶水解米粉的工艺优化

用α-淀粉酶和β-淀粉酶对米粉进行酶法水解,以还原糖含量为指标,采用响应面分析法得到大米粉的最佳酶解工艺:α-淀粉酶添加量为0.5μg/g,β-淀粉酶添加量为0.9 μg/g,酶解温度58.5℃,pH5.5,酶水解时间为2.5h.在此条件下,大米粉的酶解程度最高,DE值为49.77％,经过酶解后大米粉颗粒直径由20.63 μm降低到8.54 μm.     

几种杀虫剂对烟青虫抗氧化酶的影响

为探讨6种常用杀虫剂对烟青虫抗氧化酶活性的影响,以烟青虫3龄和4龄幼虫为材料,应用愈创木酚法等方法测定了溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、阿维菌素、乙酰甲胺磷、甲维盐和氯虫苯甲酰胺6种杀虫剂对烟青虫3龄和4龄幼虫体内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）酶类活性的影响。实验结果证实,经6种杀虫剂处理后,烟青虫3龄和4龄幼虫体内的抗氧化酶活性均高于对照,并且不同龄期的烟青虫体内各种酶活性变化趋势一致,但4龄幼虫酶活性增长率低于3龄幼虫。表明供试杀虫剂对3龄和4龄幼虫体内酶活性均能产生一定的影响,并且4龄幼虫对农药的敏感性低于3龄幼虫。      

储藏过程中稻谷挥发性风味物质和酶活力变化的研究进展

风味劣变是影响稻谷品质和商品价值的关键问题。稻谷中的挥发性风味物质变化与酶活力变化密切相关,本文综述了稻谷储藏过程中挥发性风味物质和酶活力变化的研究概况,重点讨论了挥发性风味物质种类、香气贡献及前体物质。稻谷中的挥发性风味物质包括烃、醇、酚、醛、酯、酮、杂环类7类化合物,醛类化合物对稻谷整体风味影响最大,杂环类化合物相对含量最多、种类最丰富。除酚类化合物含量下降和酮类化合物含量呈无规律变化外,其余几类化合物的含量、种类均随储藏时间的延长而上升。稻谷储藏过程中风味劣变主要是脂质经脂肪酶（LPS）水解,脂肪氧化酶和脂氧合酶（LOX）氧化成己醛、丙二醛、异戊醇、糠醇等化合物造成的。稻谷储藏过程中,脂肪水解酶、脂肪氧化酶和LOX活性增加后下降,蛋白酶、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性呈降低趋势。储藏过程中采用科学的方法来控制酶活力的变化是减缓稻谷陈化的有效措施。     

正己醇处理对桑葚采后生理与抗氧化酶的影响

为保持桑葚采后品质,延长桑葚的贮藏期,研究采后低温(0～2℃)条件正己醇处理对桑葚呼吸强度、VC、过氧化物酶(POD)、脂氧合酶(LOX)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的影响。结果表明：正已醇可以降低桑葚的呼吸强度和LOX比活力;延缓桑葚VC的减少;保持POD和CAT比活力;对SOD比活力影响则前后不一,前4d降低了桑葚中SOD比活力,4d后则提高了桑葚中SOD比活力,但各处理与对照差异不显著。     

转双反义淀粉分支酶基因大米中蛋白质的营养价值评价

目的 对转双反义淀粉分支酶基因大米和亲本大米蛋白质的营养价值进行评价.方法 采用通用的非生物学评价方法,即化学评分、氨基酸评分、蛋白质消化率校正后的氨基酸评分、必需氨基酸指数、营养指数、氨基酸比值系数和氨基酸比值系数分,评价大米蛋白质的营养价值.结果 转基因大米和亲本大米的化学评分分别为62,59;氨基酸评分分别为75,62;蛋白质消化率校正后的氨基酸评分分别为65,56;必需氨基酸指数分别为79,80;营养指数分别为11,8;氨基酸比值系数分分别为76.7,67.0;氨基酸比值系数都是l.1.结论 转双反义淀粉分支氨基因大来中抗性淀粉含童显著提高,但并未影响到其自身蛋白质的营养价值.该转基因大米蛋白质的营养价值与亲本大米具有"实质等同性".     

接种TMV的烟草高温胁迫后防御酶活性的变化

采用温度转换和人工接种试验研究了接种TMV的烟草经高温胁迫后防御酶活性的变化。结果表明:烟草接种TMV后经过高温处理(48℃,24h),防御酶中的超氧化物歧化酶(SOD)活性变化较小;过氧化氢酶(CAT)活性在处理后2d内没有明显变化,2d时高于对照;过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均高于对照;多酚氧化酶(PPO)活性在大部分阶段高于对照。因此,CAT、POD、PPO、PAL活性的变化可能与高温诱发烟草对TMV的抗性有关。     

低DE值大米粉酶法制备工艺优化

以大米粉为原料,采用α-淀粉酶为生物酶制剂制备低DE值的碳水化合物基脂肪替代物,研究考察了加酶量、底物浓度、反应温度、反应时间4个因素对大米粉酶解物DE值的影响。结果显示:DE值随加酶量与反应温度增加而增加,而随着底物浓度的增加呈现先增加后减少的趋势,当反应到15 min后,DE值变化缓慢。应用响应面法对酶水解工艺进行优化,采用3因素3水平的响应面分析法,考察底物浓度、酶添加量和反应温度3个影响因素对大米粉DE值的影响,建立DE值和影响因子的多元二次回归方程。最终确定酶法制备大米基脂肪替代物的最佳工艺参数:底物浓度35%,酶添加量8.40μL/100g,温度72℃,在此条件下大米水解物的DE值为6.05±0.24%,在碳水化合物基脂肪替代物适宜聚合度的范围。     

不同氧分压贮藏条件下金针菇衰老相关酶活性的研究

研究不同氧分压条件下金针菇贮藏过程中抗氧化相关酶活性的变化及其对保鲜效果的影响。在聚乙烯塑料袋中放入金针菇100g、膨润土吸湿剂8g、活性炭6g,分别按0、20%、50%、70%、80%、90%、100%氧气分压充气包装,于1～3℃冷藏,每隔5～7d取样检测。结果显示：80%氧气分压试验组的保鲜效果最好;在贮藏的最初2周,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、脂氧合酶(LOX)等与抗氧化、清除自由基相关的酶活性明显升高,多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、纤维素酶(CMCase)等酶活性降低;贮藏2周后SOD、CAT、LOX等酶活性明显减弱,POD、PPO等酶活力明显增强。表明SOD、CAT、LOX等抗氧化酶活性的减弱,导致菇体内O2－ ·、 ·OH、过氧化物等逐渐积累,细胞膜结构受损,细胞内容物外渗增多;纤维素酶对细胞壁降解,导致组织软化出水,酶促褐变活力增强,是致使金针菇衰老、加速变质、品质降低的重要原因。     

谷蠹侵害稻谷后其储藏品质变化研究

以粳稻谷为研究对象,选择不同的虫口密度(0、10、20、50、100和200头/500 g),在(30±1)℃与(75%±1%)RH条件下,对稻谷进行侵害实验,测定不同感染时间稻谷的水分、脂肪酸值、电导率、过氧化物酶、丙二醛等储藏品质指标,探讨不同虫口密度和感染时间下谷蠹对稻谷储藏品质的影响。结果表明:随着虫口密度的增加和侵害时间的延长,稻谷中的水分和过氧化物酶(POD)逐渐增加,而脂肪酸值、丙二醛和电导率逐渐降低,其中感染50 d时,各虫口密度感染的稻谷其过氧化物酶无明显变化,而50d后,迅速下降;水分和POD与感染时间呈极显著负相关,脂肪酸值、丙二醛和电导率与感染时间呈极显著正相关;脂肪酸值与虫口密度呈极显著正相关,电导率和丙二醛与虫口密度呈显著正相关,POD与虫口密度相关性不显著;脂肪酸值、POD、电导率、丙二醛各指标之间均呈极显著相关,水分除与POD呈显著正相关外,与其它各指标均呈极显著负相关;当虫口密度为50头/500 g时,感染稻谷30d后其品质便开始发生变化,因此,当稻谷中谷蠹虫口密度较大时,需要在30d内进行杀虫处理,以避免其品质遭受到大的影响。     

小麦胚芽蛋白酶解物体内抗氧化性评价

研究小麦胚芽蛋白酶解物体内抗氧化作用,为小麦胚芽资源开发利用提供基础。以0.1、0.2、0.4 g/(kg.d)3种剂量小麦胚芽蛋白酶解物分别给低剂量组(0.1 g/kg.d)、中剂量组(0.2 g/kg.d)和高剂量组(0.4 g/kg.d)昆明小鼠经口灌胃,空白对照组以生理盐水灌胃,30 d后全部小鼠颈椎脱臼处死,摘除眼球进行眼眶采血,解剖取肝、脑组织并测定其中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH–Px)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量。实验结果显示,小麦胚芽蛋白酶解物使小鼠血清、肝脑组织中SOD、GSH–PX、CAT等抗氧化酶活性明显高于正常对照组;而MDA含量明显低于正常对照组,小麦胚芽蛋白酶解物具有显著体内抗氧化活性。     

干旱处理对烟草叶片SOD和POD活性的影响

通过对盆栽旺长期烟草（3个近等基因系，即转Mn—SOD基因叶绿体高表达品系、转Fe—SOD基因叶绿体高表达品系和非转基因品系；2个推广品种。即红花大金元和K326）给予多达10d的干旱处理和4d的复水，结果表明，过氧化物酶（peroxidase，POD）活性干旱胁迫下表现出升高的趋势；抗旱品种（系）的超氧化物歧化酶（superoxide dismumse，SOD）活性先迅速升高然后逐渐降低，而不抗旱品种（系）的则在干旱处理期间缓慢升高。