乳清中酪蛋白糖巨肽的制备及纯化研究

研究了凝乳酶对酪蛋白的最佳酶解条件,确定了其最佳酶解参数为酶解温度50℃.pH6.5,酶和底物比3%,酶解时间90 min.酶解后通过12%TCA沉淀法得到纯度为85.25%的酪蛋白糖巨肽.     

响应面法优化酶法制备酪蛋白糖巨肽的工艺条件

采用Minitab方法设计实验,对影响酪蛋白糖巨肽制备的酶解因素进行优化,发现酶解时间、酶解温度、酶解pH、酶与底物比是影响酶解酪蛋白的主要因素.由于唾液酸是酪蛋白糖巨肽的特征性组分,本文以唾液酸的含量表征酶解上清液中酪蛋白糖巨肽的含量.根据Minitab分析的结果,采用Design Expert软件中水平设计和响应面分析法对影响酪蛋白糖巨肽产量的主要因素进行优化,建立唾液酸含量A580对酶解主要条件的二次回归模型,其回归方程的决定系数达到了0.962,9.得到的最佳酶解条件为：酶解时间80,min,酶解温度42.5,℃,酶解pH 6.28,酶与底物比270,U/g.唾液酸含量A580最高为0.653,此时酪蛋白糖巨肽的得率为17.91 mg/g.     

三聚磷酸钠处理酪蛋白对其酶解特性的影响

采用三聚磷酸钠(STP)对酪蛋白进行磷酸化处理,并用胰蛋白酶进行水解,通过正交试验确定磷酸化处理的最佳条件为:STP添加量为5%,温度为30℃,pH为9.磷酸化时间为3 h时,磷酸化程度最高(18.18 mg/g),SDS-PAGE表明酪蛋白谱带发生了明显的变化.与对照相比,酶解前10 min,可溶性氮含量无显著差异,而在酶解10~40 min时,磷酸化酪蛋白酶解液中可溶性氮含量高于对照,同时磷酸化处理可以提高酪蛋白的水解度.     

碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最适宜条件

蛋白质酶解是改善蛋白质特性,便于人体吸收的有效途径。我们对富含于乳制品中的酪蛋白,采用碱性蛋白酶进行水解实验。通过对主要影响因素的分析及回归方法,确定碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最佳工艺条件:温度55℃,酶-底物比为7%,底物质量分数为6%,pH值为8。     

CPP生产副产物——CNPP酶膜耦合法制备ACE抑制肽研究

采用酶解与膜分离耦合的方法,以酶膜耦合法生产酪蛋白非磷酸肽（CPP）得到的副产物——酪蛋白非磷酸肽（CNPP）为原料制备高活性ACE抑制肽.用Protease N、胰蛋白酶、Fla-vourzyme、AS1398、酸性蛋白酶等几种蛋白酶对经过酶膜耦合制备的酪蛋白非磷酸肽进行二次酶解,同时与1 K膜分离耦合,然后对二次酶膜耦合所得产物的ACE抑制活性进行比较.结果表明,Protease N比其他几种蛋白酶更适合用于酪蛋白非磷酸肽制备高活性的ACE抑制肽,其产物的蛋白质量浓度为1 g/L时的ACE抑制率达到55.60%.     

碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最适宜条件

蛋白质酶解是改善蛋白质特性，便于人体吸收的有效途径。我们对富含于乳制品中的酪蛋白，采用碱性蛋白酶进行水解实验。通过对主要影响因素的分析及回归方法，确定碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最佳工艺条件：温度55℃，酶—底物比为7％，底物质量分数为6％，pH值为8。     

沙果不溶性膳食纤维提取工艺的研究

以沙果为原料,采用酶-化学法研究了原料中不溶性膳食纤维的制备工艺.采用单因素试验分别从糖化酶加酶量、酶解时间、碱解pH、碱解温度和碱解时间筛选出影响显著的因素,通过正交试验确定了沙果中不溶性膳食纤维(insoluble dietary fiber,IDF)提取工艺的最佳条件.研究结果表明,沙果中IDF提取的最佳工艺条件为:糖化酶加酶量为0.6%(g/g),酶解温度为60℃,酶解时间为90 min,碱解pH为10,碱解温度为50℃,碱解时间为90 min.     

利用鱼糜加工下脚料生产鱼冻的工艺

利用鱼糜生产过程中产生的鱼头、鱼骨刺等下脚料提取蛋白质,以蛋白质提取液制备鱼冻.首先,通过正交实验,优化了水提取、碱性蛋白酶酶解、木瓜蛋白酶酶解三步提取蛋白质的最佳条件.水提取条件为pH4.1、提取时间2.5 h、提取温度100℃;碱性蛋白酶酶解条件为pH8.5、酶解时间2 h、酶解温度55℃、酶/底物0.75;木瓜蛋白酶酶解pH6、酶解时间4 h、酶解温度50℃、酶/底物0.25.其次,通过单因素试验考察调配配料的最佳用量,鱼冻最终的配方为：蛋白液100%、魔芋胶0.15%、卡拉胶0.15%、柠檬酸钠0.1%、氯化钾0.1%（蛋白液为体积分数,其他配料均指质量分数）,所制得的鱼冻色形味俱佳,并含有丰富的蛋白质和氨基酸.     

酶解法提取番茄红素的研究

采用酶法从番茄中提取番茄红素,研究不同的酶解温度、酶解时间、酶浓度、酶解pH值等因素影响下的提取效果,确定最佳工艺条件为：酶解温度35 ℃,酶解质量分数0.4 %,酶解时间3～4 h,酶解pH值为8～9.     

水酶法提取青稞淀粉工艺研究

以纤维素酶作为水解酶,采用水酶法从青稞米籽粒中提取淀粉.通过单因素试验和正交试验,得到青稞淀粉的最佳提取条件:加酶量20 EGU/g、酶解时间8 h、酶解温度45℃、酶解pH值6.5.在最佳条件下青稞淀粉的提取率为60.2%.     

不同工艺条件对酶法提取牛蒡多糖的影响

以牛蒡为原料,采用双酶水解法提取多糖,分别对多糖提取温度、pH、固液比、酶解时间、酶解温度、加酶量等条件及Seveage脱蛋白法进行探讨.结果表明:双酶提取多糖最佳条件为10%木瓜蛋白酶和20%植物水解蛋白酶各酶解4h,固液比1:15,pH 8.0,温度45℃,多糖提取率为12.40%.     

酶法提取银杏黄酮工艺条件研究

以银杏叶为原料,研究了复合提取酶对银杏叶的酶解工艺,探讨了不同pH值、酶用量、酶解时间以及酶解温度等对银杏黄酮提取率的影响,结果表明复合提取酶有利于银杏黄酮的提取,在pH值4.8的缓冲液中添加0.4%的复合酶于50℃下酶解12h的最佳工艺条件下,银杏黄酮的得率达到1.50%,银杏叶中黄酮成分的提取率达到95.5%,比直接醇提法提高了28.2%.     

双酶酶解制备花生多肽的工艺研究

以水解度和蛋白提取率为指标,采用胰蛋白酶和风味蛋白酶双酶复合酶解花生粕制备花生多肽.结果表明,双酶复合酶解花生粕的最佳工艺条件为:风味蛋白酶与胰蛋白酶的添加比例为5∶4、pH为8.0、处理温度为50℃、底物浓度为5%.在此条件下酶解3 h水解度达到11.71%,蛋白提取率达到63.86%,多肽得率高达52.15%;酶解24 h,水解度达到26.21%,蛋白提取率及多肽得率分别降低至53.56%和26.88%.     

胰蛋白酶酶解法制备海参肽的工艺条件

以海参肽得率为指标,分别考察了酶解加酶量、时间、pH、温度、底物浓度对胰蛋白酶酶解海参蛋白质反应的影响.通过正交实验确定了胰蛋白酶酶解海参蛋白的最佳工艺条件：酶加量6 000 U/g,水解反应时间3 h,温度55 ℃,pH 8.0,底物浓度1.0%,在此条件下,海参肽得率可达32.93%.     

响应面法优化核桃ACE抑制肽的制备工艺研究

以核桃分离蛋白为原料,用Neutrase 0.8L酶解制备高活性的ACE抑制肽.采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定酶解多肽的ACE抑制率,同时以水解度和ACE抑制率为考查指标,通过单因素试验及响应面试验设计,优化了中性蛋白酶（Neutrase 0.8L）酶解核桃分离蛋白的酶解工艺.结果表明：各因素对水解度的影响顺序为pH〉温度〉E/S,对ACE抑制率的影响顺序为pH〉E/S〉温度;最佳酶解工艺条件为：pH 6.81、温度55℃、时间2h、底物质量浓度2%、酶与底物比3.43%,酶解产物的水解度达到8.52%,ACE抑制率达到67.94%.     

酶解改良米蛋白热凝固性的研究

改性大米蛋白在食品加工中具有重要的实际应用价值.现采用中性蛋白酶酶解大米蛋白, 对 酶法提高大米蛋白的热凝固性工艺条件进行了考察, 通过单因素实验及正交实验确定了最佳工艺 条件为:酶解温度45 ℃, 固液比1 ∶6 , 酶解pH 6 .0 , 每100 g-米蛋白的酶量20 U , 酶解时间0 .5 h . 在此最适条件下通过蛋白酶改性后大米蛋白热凝固度为49 .20 %(pH 7 .0)和51 .70 %(pH 6.0), 与不用酶时的11 .97 %相比有了较大的提高, 可见酶解处理大米蛋白对其热凝固性的改善有明显 的效果.     

不同酶法酶提取薯蓣皂苷元的研究

研究了复合酶法提取薯蓣皂苷元的酶解条件,同时比较研究了复合酶法、纤维素酶法、淀粉酶法、糖化酶法的提取效果.实验结果表明:纤维素酶法产品纯度最高;复合酶法产品收率最高,在酶解条件方面具有时间短、温度低等特点.最后确定复合酶法为最佳方法,提取薯蓣皂甘元的最佳酶解条件为:酶解时间为16 h,酶解温度35℃,酶解PH值5.0,每克黄姜用酶量为0.04g.     

不同酶解条件对提取红枣汁效果的探讨

以黄河滩枣为原料,应用果胶酶酶解技术,在单因素实验的基础上通过正交试验优化确定了酶解浸提红枣汁的最佳工艺条件：果胶酶添加量3.0‰,酶解温度45℃,酶解时间3 h,浸提液pH 4.0,加水量4 mL/g.实验表明,果胶酶解浸提红枣汁工艺合理可行,使得枣汁的浸提率达到了56.734 2%,总糖含量为72.083 9%,浸提率比传统热水浸提法提高了10.210 5%,总糖含量提高了6.789 6%,所得到的红枣汁品质优良、稳定性好.     

麸皮酶解制备还原糖的工艺研究

以麸皮为原料,经酶解制备还原糖.分别分析了温度、时间、pH、PBS用量及淀粉酶和纤维素酶的配比等因素对还原糖得率的影响,并通过正交试验得到麸皮酶解的最佳条件.试验结果表明,麸皮酶解制备还原糖的最佳工艺条件为温度60℃、时间40 h、pH4.50、PBS用量4 mL、淀粉酶和纤维素酶配比3∶3,此时还原糖得率达到37.23%.     

超声辅助酶解谷朊粉制备ACE抑制肽工艺优化

以谷朊粉为原料,采用超声辅助碱性蛋白酶酶解制备ACE抑制肽,并对碱性蛋白酶酶解条件进行单因素分析及正交试验设计,确定最优的水解工艺条件.研究结果表明:超声波作用能够提高酶解的水解度和抑制率,同时能够缩短酶解的反应时间.各因素对水解度的影响顺序为:超声功率>酶浓度>温度>时间;最佳酶解工艺条件为:酶浓度为30 mg/g、功率为250 W、时间为60min、温度为50℃,此时水解度为14.64%,抑制率为80.37%.