黑木耳多糖-乳清蛋白复合物的制备及其抗原性的研究

蛋白质和多糖在控制条件下通过美拉德反应会发生一定程度的共价复合,能显示更优越的性能。采用黑木耳多糖作为糖基供体,用糖基化的手段与牛乳中乳清蛋白结合形成木耳多糖-乳清蛋白复合物,并在现有的条件下探索不同质量比与不同反应时间对糖基化进程的影响,采用间接竞争ELISA法测定复合物中β-乳球蛋白和α-乳白蛋白抗原性的影响。结果表明,乳清蛋白与黑木耳多糖质量比为1：1,反应时间为24h,是糖基化反应最佳条件并且能有效减低乳清蛋白抗原性,其中β-乳球蛋白抗原性降低率为75.7%,α-乳白蛋白抗原性降低率为25%。     

响应面法优化干法糖基化改性乳清蛋白成膜性

为了改善乳清蛋白可食膜的机械性能,采用干法糖基化改性乳清蛋白,制备乳清蛋白(WPC)-海藻酸钠(SA)共价复合物及其共价复合物膜。分析反应时间、乳化体系的p H值、底物配比(海藻酸钠/乳清蛋白)、相对湿度对WPC-SA共价复合物膜拉伸强度和断裂伸长率的影响;在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计,对WPC-SA共价复合物膜的拉伸强度进行响应面分析。结果表明,WPC-SA共价复合物膜的最优工艺条件为反应时间60 h,乳化体系p H 8,底物配比3∶1(质量比)。经试验验证,此条件下的拉伸强度为(678.76±0.38)g,与预测值接近。采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术证明WPC和SA发生了共价结合反应;采用傅里叶红外光谱分析也表明乳清蛋白以共价键的结合形式接入了海藻酸钠分子。     

米糠蛋白复合戊聚糖糖基化反应条件的优化及性质研究

以米糠蛋白与戊聚糖进行糖基化反应制备复合物，考察不同条反应件（时间、温度、pH、米糠蛋白复合戊聚糖比例）对米糠蛋白戊聚糖复合物接枝度的影响。并在单因素实验的基础上，进行Box-Behnken响应面优化，优选出米糠蛋白戊聚糖复合物的最佳制作工艺参数。结果表明，通过响应面优化可知最佳工艺参数为pH=10.11、反应时间58.71 min、反应温度44.15 ℃及米糠蛋白与戊聚糖质量比1∶2.21时，在此条件下接枝度为29.07%。与米糠蛋白相比，米糠蛋白戊聚糖复合物的褐变程度、溶解性及乳化性质均有所改善，本研究为米糠蛋白的应用领域提供参考。     

面筋蛋白糖基化改性工艺研究

以小麦面筋蛋白和葡聚糖为原料,采用干法糖基化的化学改性方法,以接枝度为考察目标,通过单因素实验,研究了底物质量比、pH、反应温度和反应时间对接枝度的影响,利用Box-Benhnken原理进行响应面优化,获得了面筋蛋白-葡聚糖糖基化最优工艺条件为：当葡聚糖/面筋蛋白质量比135%,pH 12.0,温度60℃,时间50h,验证实验结果表明,此时面筋蛋白-葡聚糖复合物的接枝度为24.3%。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）表明明面筋蛋白和葡聚糖发生了糖基化反应;傅里叶红外光谱（FT-IR）和荧光光谱分析表明葡聚糖的引入改变了面筋蛋白的空间结构。对反应产物的功能性测定发现,与面筋蛋白相比,糖基化面筋蛋白的溶解性、乳化性均显著提高。     

亚麻籽胶-乳清蛋白改性物的制备及抗氧化性

利用亚麻籽胶对乳清蛋白进行糖基化改性，以接枝度为指标进行单因素及正交试验得到最佳反应pH,温度和时间，并对所得亚麻籽胶-乳清蛋白复合物进行扫描电镜、红外光谱、抗氧化性等测定。得到最佳制备条件为：pH 11、110℃、60 min。产物表面结构的变化、傅立叶变换红外光谱以及荧光分析证实了结合物的产生。抗氧化性测定结果显示，无论亚麻籽胶是否脱蛋白，其与乳清蛋白复合物的抗氧化能力均高于同等浓度下单一的亚麻籽胶和乳清蛋白，未脱蛋白亚麻籽胶所得复合物的抗氧化能力优于脱蛋白亚麻籽胶复合物。相关性分析表明，亚麻籽胶添加量与其所得复合物的接枝度、抗氧化能力均呈正相关。研究表明亚麻籽胶与乳清蛋白结合增强了两者的功能性质。     

糖基化反应条件对豌豆蛋白乳化特性的影响

以豌豆蛋白与低聚木糖为原料,通过湿法糖基化反应制备豌豆蛋白-低聚木糖复合物,考察豌豆蛋白与木聚糖质量比、反应温度、反应时间等条件对反应过程中豌豆蛋白乳化特性的影响。以豌豆蛋白乳化特性（乳化活性、乳化稳定性）为指标,采用Box-Behnken响应面设计,建立预测模型,优化反应条件。最终得到低聚木糖糖基化下乳化特性较好的豌豆蛋白糖基化制备条件：反应温度75℃、反应时间90 min、豌豆蛋白与低聚木聚糖质量比2∶1,此条件下制备的糖基化复合物的乳化特性最好,其乳化活性为12.32 m2/g、乳化稳定性为59.64%。     

水热糖基化大米蛋白质的结构以及溶解性研究

以大米蛋白质(RP)与木糖为原料,采用水热糖基化的方法,研究在不同反应时间、pH、木糖与RP质量比条件下,糖基化产物接枝度与溶解度的关系,并对反应条件为:温度120℃,时间为20 min,pH为8,木糖与RP质量比为7:1的RP-木糖糖基化产物的溶解性与结构变化之间的关系进行探讨。得出RP-木糖糖基化产物溶解度由11.35%增加到27.62%,接枝度达到46.5%。氨基酸组成、电泳、荧光光谱、紫外光谱、红外光谱结果表明:RP的谷蛋白聚肽、球蛋白亚基和谷蛋白碱性亚基中精氨酸、赖氨酸可能与木糖发生共价结合生成了可溶性聚集体;二级结构中α-螺旋、β-折叠减少,无规则卷曲增加。因此,水热糖基化反应使RP的溶解性质得到改善。     

响应面优化超声波辅助马铃薯蛋白糖基化反应

以马铃薯蛋白、麦芽糖为原料进行湿法糖基化反应,利用超声波辅助优化。通过单因素试验,确定反应时间、蛋白浓度和超声功率对糖基化反应接枝度的影响,通过Design-Expert 8.05b软件做响应面分析。最终确定最佳反应条件为:反应温度75℃,糖与蛋白质量比3∶1,pH 9,蛋白浓度12.42 mg/mL,反应时间60 min,超声功率240 W。在此条件下进行验证试验,马铃薯蛋白-麦芽糖糖基化反应的接枝度达40.187 4%,与模型预测值40.422 6%十分相似。证实响应面分析超声波辅助优化马铃薯蛋白糖基化条件切实可行,为马铃薯蛋白新产品的开发和应用提供理论依据。     

超声辅助处理对乳清分离蛋白糖基化产物的理化特性影响

采用超声辅助技术对乳清分离蛋白(WPI)进行糖基化改性,并与水浴加热法进行比较,探究两种处理方式对糖基化反应产物理化性质的影响。结果表明,与水浴法相比,超声辅助法可以更快地促进糖基化反应的进行,且对糖基化产物的理化性质有较大改善;当超声温度为70℃,功率为300 W,超声时间为40min时,乳清分离蛋白和葡萄糖的接枝度达到48. 10%,且乳清分离蛋白—葡萄糖接枝物的乳化性、在等电点处溶解性均增大。乳化系数由23.67 m~2/g增大到40.84 m~2/g;等电点附近的溶解度由19.09%增大到47.95%。且以接枝物为基质的乳液的粒径更小,储藏稳定性更好。     

pH值对乳清蛋白糖基化产物体外抗氧化特性的影响

选择6种不同的糖基配体,通过湿热糖基化反应,研究乳清蛋白不同糖基化复合物在不同pH值下的反应特性及抗氧化特性。结果表明:在pH值3～9的条件下,6种乳清蛋白糖基化复合物与乳清蛋白420nm和294nm处的吸光值差异显著(P<0.05);且6种乳清蛋白糖基化复合物的游离氧基酸含量均显著降低(P<0.05)。除了乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他5种乳清蛋白糖基化复合物的还原能力、DPPH自由基清除能、·OH自由基清除能力和抗脂质过氧化能力随pH值的升高都有所提高。乳清蛋白-木糖复合物的抗氧化能力提高最大,而且在pH值7～9的反应条件下,具有比V_c更高的还原能力。     

大豆分离蛋白-多糖美拉德反应共聚物的制备及性能研究

以大豆分离蛋白(SPI)和海藻酸钠、壳聚糖、葡聚糖利用干法美拉德反应制备大豆分离蛋白-多糖共聚物,通过比较反应产物的接枝度、乳化活性和乳化稳定性,选取大豆分离蛋白-海藻酸钠共聚物,并对其制备条件进行研究。在单因素实验的基础上,以接枝度、乳化活性和乳化稳定性为评价指标,通过正交实验,确定大豆分离蛋白-海藻酸钠共聚物最佳制备条件为:糖蛋白比9:10,反应温度为68℃,反应时间24 h;最终得到共聚物的接枝度为27.2%,乳化活性提高了121%,乳化稳定性提高了255%。     

乳清蛋白菊粉糖基化复合物的褐变特性与抗氧化活性

以褐变程度及抗氧化活性为检测指标,研究湿热反应条件对乳清蛋白菊粉糖基化复合物的褐变特性与抗氧化活性的影响。研究结果表明:反应物浓度越大,反应温度越高,乳清蛋白菊粉糖基化产物的褐变强度越大,抗氧化活性越强;起始反应pH值越大,乳清蛋白菊粉糖基化产物的褐变强度及还原能力越强,而其DPPH.清除能力呈现先升高后降低的趋势。当反应物浓度为6%,温度为100℃,起始反应pH值为9时,所获得的乳清蛋白糖基化产物抗氧化活性较强。     

改性乳清蛋白体外抗氧化特性

以木糖、葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖和乳清蛋白为美拉德反应原料,按照一定比例进行湿热糖基化反应。结果表明:在湿热糖基化反应后,6种糖类与乳清蛋白复合物在420 nm和294 nm处的吸光值差异显著(P<0.05);除乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他5种乳清蛋白糖基复合物的游离氨基酸含量均显著降低(P<0.05)。除了乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他5种乳清蛋白糖基化复合物随浓度的增加,还原能力和DPPH自由基清除能力都有所提高,其中乳清蛋白-木糖复合物的抗氧化能力提高最大,而且SDS-PAGE显示乳清蛋白-木糖复合物反应后分子质量明显增大;傅里叶红外光谱(FTIR)结果显示,乳清蛋白-木糖和乳清蛋白-葡萄糖复合物中蛋白质的酰胺I和II明显减少。     

葡萄糖修饰苦杏仁粕谷蛋白糖基化反应条件的优化

为提高苦杏仁粕谷蛋白溶解性,采用糖基化方法改性修饰.该试验选用葡萄糖进行接枝改性,考察反应温度、反应时间、pH值、蛋白与糖质量比对葡萄糖改性蛋白溶解度的影响.在单因素试验的基础上,通过Box-Behnken响应面法确定葡萄糖改性蛋白的制备工艺.结果表明,优化后工艺条件为反应温度63℃、反应时间0.6 h、pH 9.4、...     

大豆蛋白-葡萄糖共价复合物抗原性研究

该文以大豆分离蛋白与葡萄糖为原料,通过干法糖基化反应制备大豆蛋白–葡萄糖共价复合物。采用JMP数据分析软件的定制设计,以大豆球蛋白抗原抑制率为指标,考察了反应温度、蛋白与糖的比例、反应时间等因素对干热糖基化反应过程中大豆分离蛋白―葡萄糖糖基化复合物抗原性的影响,建立了预测模型,优化反应条件。结果表明:各因素对糖基化复合物的抗原性影响程度依次为反应时间>温度>蛋白与糖比例;此外,根据回归方程和预测模型,得到最佳制备条件为蛋白与糖比例5∶1、反应温度55℃、反应时间为72 h,糖基化产物的大豆球蛋白抗原抑制率从89.95%降至64.28%。     

米糠蛋白-阿拉伯木聚糖接枝复合物制备及其功能性质研究

在湿热条件下通过美拉德反应制备米糠蛋白与阿拉伯木聚糖接枝复合物。以接枝度为指标,进行单因素和Box-Behnken响应面试验优化糖蛋白接枝物的制备工艺条件。结果表明:糖蛋白接枝物的最佳制备工艺条件为接枝反应溶液pH控制在10,接枝反应时间48 min,阿拉伯木聚糖与米糠蛋白质量比2.2:1,接枝反应温度50℃,此时接枝度为34.01%。与单独的米糠蛋白相比,米糠蛋白与阿拉伯木聚糖接枝复合物持水性升高,乳化性和乳化稳定性有所改善,可扩大米糠蛋白在食品工业中的应用。     

响应面优化超声辅助裸燕麦蛋白/β-葡聚糖糖基化改性工艺

以裸燕麦蛋白、β-葡聚糖为原料进行糖基化改性,利用超声波辅助优化改性工艺条件。通过单因素实验,比较分析了超声时间、超声功率、超声温度和β-葡聚糖与裸燕麦蛋白质量比对接枝度和溶解度的影响,并利用Box-Benhnken原理对4个单因素进行响应面优化,以接枝度为指标,得到了裸燕麦蛋白糖基化改性的最优工艺条件为:超声时间95 min,超声功率240 W,超声温度75℃,β-葡聚糖与裸燕麦蛋白质量比为2:1,此时糖基化改性的接枝度为35.79%±0.86%。与未超声处理的裸燕麦蛋白糖基化改性相比,接枝度提高了2.34倍。结果表明,超声波辅助对裸燕麦蛋白糖基化改性过程有较大的促进作用。     

大豆蛋白-海藻酸钠共价复合物制备条件的优化

以大豆分离蛋白和海藻酸钠为原料,干热法制备大豆蛋白-海藻酸钠共价复合物以改善大豆蛋白的乳化特性.单因素试验结果表明,反应温度、反应时间、海藻酸钠添加量均对制备的共价复合物的乳化性和乳化稳定性有显著影响(P＜0.01).在单因素试验的基础上,采用响应面法对大豆蛋白-海藻酸钠共价复合物制备条件进行优化.以乳化性为响应值,大豆蛋白-海藻酸钠共价复合物制备的最佳条件是:反应时间10.4 h,反应温度43.8℃,海藻酸钠添加量33.4％;以乳化稳定性为响应值,大豆蛋白-海藻酸钠共价复合物制备的最佳条件是:反应时间7.6h,反应温度43.3℃,海藻酸钠添加量33.4％.     

湿法糖基化改性对大豆分离蛋白溶解性和乳化能力的影响

研究蛋白-葡萄糖质量比(4∶1,2∶1,1∶1,1∶2),反应温度(70,80,90℃)和反应时间(0,1,2,3,4,5,6 h)对大豆分离蛋白糖基化产物功能特性(溶解性和乳化能力)的影响。结果表明:在蛋白与葡萄糖质量比1:2,反应温度80℃,反应时间2 h条件下制得的糖基化大豆分离蛋白的溶解度最高,达92.93%,是未改性SPI的4.38倍,差异显著(P0.05);在蛋白与葡萄糖质量比1∶1,反应温度90℃,反应时间6 h条件下制得的糖基化大豆分离蛋白的乳化活性最高,达0.63,是未改性SPI的3.94倍;在蛋白与葡萄糖质量比1∶2,反应温度90℃,反应时间3h条件下制得的糖基化大豆分离蛋白的乳化稳定性最高,达50.92,是未改性SPI的1.98倍,存在显著性差异(P0.05)。糖基化改性过程可显著提高大豆分离蛋白的溶解性和乳化性能,这为拓宽其在食品工业中的应用提供了理论依据。     

响应面法优化微波辅助米渣蛋白糖基化改性工艺

为了改善米渣蛋白的溶解性,提高蛋白质的利用率,本文以米渣蛋白和海藻酸钠为原料,利用微波对米渣蛋白进行接枝改性处理,比较分析海藻酸钠:米渣分离蛋白质量比、微波温度、微波时间、微波功率、pH对接枝度和褐变度的影响,并采用Central Composite中心组合实验设计,以接枝度为响应值,建立米渣分离蛋白与海藻酸钠接枝反应的二次回归模型,通过响应面分析和方差分析得出影响RDP与海藻酸钠接枝度的最优参数为:海藻酸钠:米渣分离蛋白质量比为1.88:1、pH10.18、微波功率186 W、微波温度77.7℃,在此条件下接枝度为36.87%,与实验设计中心点的最大值37.03%误差在5%范围内。本文所建立的米渣蛋白改性方法不仅用时短、效率高,而且改性效果好,具有较大的推广应用前景。