山羊乳酪蛋白酶解工艺及抗氧化性研究

为了制备山羊乳酪蛋白活性肽,选用中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶,采用对比和正交试验方法,研究了山羊乳酪蛋白单酶和复合酶的酶解工艺,测定了山羊乳酪蛋白的总肽键摩尔数,优选出了山羊乳酪蛋白的酶解工艺参数。结果表明：山羊乳酪蛋白的总肽键摩尔数为8.5379 mmol/g。单酶中胰蛋白酶和中性蛋白酶对山羊乳酪蛋白的水解度较大,木瓜蛋白酶较小。胰蛋白酶对山羊乳酪蛋白适宜的酶解工艺：加酶量2500 U/g,pH 7.5,50 ℃下酶解2 h。中性蛋白酶和胰蛋白酶复合以及中性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶三种酶复合的水解度较大,其水解度、平均肽链长度和平均相对分子量分别为17.34%、21.16%,5.77、4.73和692、567 u。     

山羊乳酪蛋白酶解物制备及体外抗氧化活性研究

以自由基清除能力、金属离子螯合能力和抗脂质过氧化能力为指标,采用均匀试验研究山羊乳酪蛋白酶解物的制备及其体外抗氧化活性,并且比较自由基清除能力的方法。结果表明：山羊乳酪蛋白适宜的酶解工艺为在60g/kg的底物浓度下,中性蛋白酶和碱性蛋白酶的添加量分别为4000U/g和250U/g,45℃、pH7.5条件下酶解24h。山羊乳酪蛋白经酶解后其体外抗氧化活性显著增强。山羊乳酪蛋白酶解物 ·OH清除率的EC50值是其蛋白的3.59倍,ABTS＋ ·的清除能力是其蛋白的158.72倍,螯合Fe2＋的能力是其蛋白的5.44倍;在亚油酸体系中抗脂质过氧化能力强于TBHQ,与VE相当。清除 ·OH、DPPH自由基、O2－ ·和ABTS＋ ·的方法不能相互替代。     

羊肝蛋白酶解条件优化及酶解产物抗氧化活性研究

为优化羊肝蛋白酶解工艺条件及探讨其体外抗氧化活性,以水解度为评价指标,采用碱性蛋白酶酶解羊肝,在单因素试验基础上,通过响应面法优化羊肝蛋白的酶解工艺条件。结果表明,羊肝蛋白最佳酶解条件为酶解温度51 ℃、pH 8.5、酶解时间4.1 h、加酶量0.40%。在此条件下,进行3次验证试验,测得羊肝酶解液实际水解度为（40.31±0.24）%。体外抗氧化试验结果表明,羊肝酶解产物具有一定的抗氧化活性,其清除羟自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2-·）和DPPH自由基的IC50值分别为17.01 mg/mL、13.21 mg/mL和10.42 mg/mL,并具有一定的还原能力。     

响应面法优化杏仁蛋白酶解工艺及其抗氧化活性研究

研究了杏仁蛋白的酶解工艺及其抗氧化活性。在单因素试验基础上,通过Box－Behnken中心组合设计优化酶解条件,确定出最佳酶解条件为pH14．72、温度54℃、底物浓度2．8％、酶底比1．2％,在此最优条件下水解度（DH）为27．12％。杏仁蛋白酶解液对DPPH·自由基的清除能力最强,其次为0：一‘自由基,最弱的为·OH自由基,清除率分别为85．92％、73．97％和65．92％．     

响应面法优化芝麻蛋白酶解工艺及其产物 抑菌活性的研究

目的为了得到芝麻蛋白双酶分步酶解的最佳工艺参数以及酶解产物的抑菌活性。方法采用响应面法优化双酶分步酶解芝麻蛋白的工艺参数,并以抑菌圈直径大小为指标,考察芝麻蛋白酶解产物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性以及最小抑菌浓度。结果响应面优化得到双酶分步酶解的最适酶解条件为:总酶量6200 U/g,碱性蛋白酶:木瓜蛋白酶=3:1,先加入碱性蛋白酶后反应1.6 h后加入木瓜蛋白酶,总反应时间为4 h。在此条件下,芝麻蛋白水解度实测值为29.673%,与预测值30.622%相近。芝麻蛋白酶解产物对大肠杆菌无抑制作用,但是具有抑制金黄色葡萄球菌的活性,得到其最小抑菌活性浓度为25.29mg/m L。结论响应面分析法优化芝麻蛋白双酶分步酶解工艺是可行的,芝麻蛋白酶解产物具有抑制金黄色葡萄球菌的活性。     

西兰花茎叶蛋白酶解条件优化及其降血脂活性

为优化胰蛋白酶水解西兰花茎叶蛋白的酶解条件及研究西兰花茎叶蛋白肽辅助降血脂活性,选取pH、温度、加酶量和底物浓度为自变量,水解度为响应值,利用响应面分析法,确定最佳酶解工艺参数;通过小鼠喂养实验分析西兰花茎叶蛋白肽对小鼠甘油三酯(TC)、总胆固醇(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量以及动脉硬化指数(AI)的影响。结果表明,西兰花茎叶蛋白胰蛋白酶酶解的最优条件为:pH7.5,温度50℃,加酶量2000 U/g,底物浓度4%,水解度22.37%±0.46%;西兰花茎叶蛋白肽低剂量组(300 mg/kg)小鼠血清TC、ALT含量与模型组相比有极显著差异(P<0.01),TG、LDL-C含量与模型组有显著差异(P<0.05),对AST含量无明显降低作用;中(600 mg/kg)、高(1200 mg/kg)剂量组样品在降低TC、TG、LDL-C、ALT和AST含量上与模型组有极显著差异(P<0.01);高剂量组(1200 mg/kg)对HDL-C含量无明显影响,低(300 mg/kg)、中剂量组(600 mg/kg)能增加HDL-C含量,与模型组间有极显著差异(P<0.01),有利于AI指数的降低。以上结果表明西兰花茎叶蛋白肽具有良好的降血脂活性。     

椰肉蛋白酶解及其产物的抗氧化活性研究

将新鲜椰肉粉碎脱脂,利用碱溶酸沉法制备椰肉蛋白。用Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、Papain木瓜蛋白酶酶解椰肉蛋白,以DPPH自由基清除能力和水解度为指标对酶解过程进行分析,筛选出最适合制备抗氧化酶解物的酶为Alcalase碱性蛋白酶。然后采用单因素及多指标正交实验设计优化Alcalase碱性蛋白酶酶解条件,其中酶解温度和底物浓度对DPPH自由基清除率影响最大。优化后的制备参数为:酶解温度50℃,pH值10.5,加酶量14000 U/g,酶解时间7 h,底物浓度2%,该条件下水解液中蛋白含量为15.8 mg/mL,水解度和DPPH.清除率分别为29.16%和89.07%,椰肉蛋白酶解物显示出较强的抗氧化活性,接近同一浓度下谷胱甘肽的抗氧能力,比同浓度Vc的DPPH自由基清除率高3.33倍。     

木瓜蛋白酶水解羊乳酪蛋白的工艺研究

目的:研究木瓜蛋白酶酶解羊乳酪蛋白的最优工艺条件,以获得具有抗菌活性的酶解物.方法:以山羊乳为原料制备酪蛋白,以木瓜蛋白酶为水解酶对其进行水解,通过单因素试验和正交试验,以酶解液中氨基态氮含量为指标,优选木瓜蛋白酶酶解山羊乳酪蛋白的最佳工艺条件,并用该酶解物做抑菌活性试验.结果:木瓜蛋白酶酶解山羊乳酪蛋白的最佳酶解工艺:酶与底物比4 000 U/g,底物质量浓度85 g/L,初始pH 6.0,在温度60 ℃下酶解150 min.抗菌试验结果表明,酶解液氨基氮质量浓度为0.2889 g/100 mL时,对Ecoli.O157有一定的抑菌活性.结论:用木瓜蛋白酶酶解山羊乳酪蛋白,可得到具有一定抑菌活性的酶解物.这是获得抗菌肽的良好来源.     

鲶鱼骨蛋白酶解物中抗菌活性物质的初步分离纯化

用胃蛋白酶酶解鲶鱼头、鱼骨,酶解得到抑菌活性较高的鲶鱼骨酶解液,然后对酶解液进行初步分离与纯化。鲶鱼骨蛋白抑菌活性最强的酶解物经过超滤(MW3 000 u)和Sephadex G-15凝胶层析分离纯化,采用比浊法和滤纸片法测定其抑菌活性。结果表明,分离纯化后,酶解混合物对大肠杆菌、藤黄微球菌以及枯草杆菌的抑菌活性都有一定的提高,其中层析后峰2的抑菌活性最强,峰2对大肠杆菌、藤黄微球菌以及枯草杆菌的抑菌活性要比酶解粗品提高1倍左右,且各组分的平均分子质量均在1 500 u以下。峰2经反相高效液相色谱分析得出,组分由70多种物质组成,要想得到纯的抗菌活性物质还需要进一步深入研究。     

乳清蛋白酶解物的抗氧化活性研究

研究在不同的酶种类、[E/S]、酶解时间下,乳清蛋白酶解物的抗氧化活性。结果表明,在胃蛋白酶37℃,[E/S]为0.15%,水解温度水解时间2 h;胰蛋白酶[E/S]为0.4%,水解温度50℃,水解时间2 h的条件下,乳清蛋白的酶解物有较强的抗氧化活性。     

牦牛乳酪蛋白酶解产物清除DPPH自由基活性分析

以牦牛(Bos grunniens)乳酪蛋白为原料,用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶制备酪蛋白酶解产物,分别测定其DPPH自由基清除活力,发现碱性蛋白酶酶解产物的清除活力显著高于其他酶解产物(P<0.05).测定不同水解时间点酪蛋白酶解产物的DPPH自由基清除活力,发现第7h酶解产物的清除活力显著高于其它水解时间点的样品(P<0.05).还分析了碱性蛋白酶7h酶解产物的理化指标,发现其水解度、三氯乙酸氮溶解指数和蛋白质回收率均较高,表明此时大部分酪蛋白已降解,且酶解产物中短肽段的含量较高,用碱性蛋白酶制备具有DPPH自由基清除能力的酪蛋白酶解产物时得率较高,而其氨基氮含量相对较低,适宜作为保健食品功能性基料.     

牛乳酪蛋白源活性肽制备及结构研究现状

从牛乳酪蛋白源活性肽、制备方法、结构分析鉴定等方面，对以牛乳酪蛋白为原料研制开发的活性肽类进行了综述，并总结了目前人们从酪蛋白中发现的活性肽的氨基酸组成结构。     

杏仁蛋白酶解条件优化研究

采用二次回归正交旋转组合设计对杏仁蛋白的酶解工艺条件进行了优化,建立了水解度（Y）对水解温度（X1）、底物浓度（X2）、酶底比（X3）及水解时间（X4）四个实验因素的正交回归模型:Y=23.73865-3.16060X1-1.54037X2+2.07211X3+3.48164X4-3.31615X21-0.97209X22-0.40641X23-1.28322X24-0.21875X1X2+0.07125X1X3-0.26375X1X4-0.26375X2X3+0.07125X2X4-0.21875X3X4。从模型可知,当水解温度50℃时、底物浓度为2%、酶底比4%、水解时间为180min时,杏仁蛋白的水解度最大值达到27.22%,验证实验结果与模型值基本相符。      

脱脂羊脑蛋白酶解条件优化及酶解产物体外抗氧化活性

以脱脂羊脑蛋白为原料,采用响应面（response surface method,RSM）法建立脱脂羊脑蛋白的枯草芽孢杆菌中性蛋白酶水解回归模型,优化酶解工艺条件,在体外研究脱脂羊脑中性蛋白酶酶解产物的抗氧化性能。结果表明：脱脂羊脑蛋白底物质量浓度为3.03 g/100 mL,酶添加量为5 653.20 U/g,温度为39.4 ℃时,脱脂羊脑蛋白水解度最高,达到（14.59±1.26）%。当脱脂羊脑蛋白水解度为（14.39±1.17）%时,酶解产物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和羟自由基（•OH）清除能力最强;当脱脂羊脑蛋白水解度为（12.48±0.71）%时 ,酶解产物对超氧阴离子自由基（O2－•）清除能力和总还原能力最强;当脱脂羊脑蛋白水解度为（12.48±0.71）%时,酶解产物对DPPH自由基、•OH、O2－•、亚硝酸根阴离子的IC50分别为2.49、3.13、10.37、10.89 mg/mL,酶解产物对Fe2+螯合率的IC50为7.48 mg/mL,证明脱脂羊脑蛋白酶解产物具有一定抗氧化活性。     

杏仁蛋白酶解条件优化研究

采用二次回归正交旋转组合设计对杏仁蛋白的酶解工艺条件进行了优化,建立了水解度(Y)对水解温度(X1)、底物浓度(X2)、酶底比(X3)及水解时间(X4)四个实验因素的正交回归模型:Y=23.73865-3.16060X1-1.54037X2+2.07211X3+3.48164X4-3.31615X21-0.97209X22-0.40641X23-1.28322X24-0.21875X1X2+0.07125X1X3-0.26375X1X4-0.26375X2X3+0.07125X2X4-0.21875X3X4。从模型可知,当水解温度50℃时、底物浓度为2%、酶底比4%、水解时间为180min时,杏仁蛋白的水解度最大值达到27.22%,验证实验结果与模型值基本相符。     

鹅肉蛋白酶解条件优化及酶解产物抗氧化活性研究

运用响应面(RSM)分析对鹅肉蛋白酶解工艺条件进行优化。在单因素试验基础上,以抗氧化活性为主要指标,水解度为辅助指标,研究酶解时间、酶解温度、pH值、固液比、酶添加量对鹅肉蛋白水解度和抗氧化活性的影响。结果表明:鹅肉蛋白最佳酶解条件为酶解温度53℃、酶解液pH10.5、固液比1:3(m/V)、酶解时间7.2h,加酶量1200U/g,在此条件下,酶解液对Fe3+还原力为0.402,水解度可达34.74%。     

酪蛋白磷酸肽酶解工艺条件的优化研究

酪蛋白磷酸肽(CPP)是以牛乳酪蛋白为原料,通过生物技术制得的具有生物活性的多肽,能有效促进人体对钙、铁、锌等二价矿物营养素的吸收和利用,可用于各种营养、保健食品。本研究对不同种类的酶水解牛乳酪蛋白,优选出CPP得率最高的LC-1酶,对其工艺条件进行优化,确定其最佳酶解条件为:pH8.0、温度50℃、底物浓度10%、酶解时间2h。通过中试验证,CPP含量为22.3%。     

大豆蛋白和玉米蛋白酶解肽及其活性研究

将大豆蛋白和玉米蛋白按一定比例复配,采用碱性蛋白酶酶解。当酶解条件为:pH=10,45℃,酶解3h,酶浓度为7u/ml,底物浓度为0.8g/50ml时,复配物的水解度及氮溶解指数均最高,且具有较好的抗油脂氧化能力;酶解物的抗羟基自由基活性与水解度并非正相关关系,水解时间是影响·OH抑制率的主要因素,水解2h时,酶解物对·OH的抑制率高于80%。氨基酸分析表明:两种蛋白质复配后营养价值提高,可作为生产高F值寡肽的原料。     

羊肺蛋白酶解工艺优化及体外抗氧化活性研究

为优化羊肺酶解工艺及探讨酶解物体外抗氧化活性,采用中性蛋白酶酶解羊肺,以水解度为评价指标,在单因素试验的基础上,运用响应面法优化酶解工艺。结果表明:羊肺的最佳酶解条件为酶解温度50℃,加酶量1 700U/g,水料比2∶1(mL/g),酶解时间4h。在最优条件下,进行3次验证性实验,测得实际水解度为18.89%,与理论水解度(18.19%)相比误差较小。体外抗氧化结果表明:羊肺酶解产物具有一定的抗氧化活性,其还原力的吸光值为0.472,清除DPPH·、·O_2~-和·OH的IC_(50)值分别为67.00,40.07,31.88mg/mL。     

响应面法优化紫贻贝蛋白酶解工艺条件

分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶7种蛋白酶对紫贻贝蛋白的酶解工艺条件进行研究。根据水解度和感官评定的结果,确定中性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶可以作为紫贻贝蛋白酶解的外加蛋白酶。将上述4种蛋白酶进行两两复配,通过试验确定复合蛋白酶与中性蛋白酶按1:1进行复配,可作为紫贻贝蛋白酶解的最适复配酶。采用响应面优化分析得出复配蛋白酶最佳酶解条件为酶解时间2h、pH7、酶解温度50℃、酶添加量0.4%,在此条件进行实验,测得水解度为70.25%,游离氨基酸总量增加了388.46%。