海洋骨胶原低聚肽钙的分离纯化及结构鉴定

以三文鱼骨作为原料,以碳酸钙作为钙源制备出海洋骨胶原低聚肽钙,对其总蛋白含量、螯合率、得率进行测定,结果表明总蛋白含量为62.56%±0.26%,螯合率为51.38%±0.09%,螯合物得率为42.06%±0.10%。然后利用反相高效液相色谱（RP-HPLC）对其进行分离纯化,收集得到8个组分峰,利用Q-TOF质谱仪测定肽序列,共分析出22个肽段,分子量大多在1000 u以下。      

海洋骨胶原低聚肽钙配合物的稳定性

以三文鱼骨为原料制备海洋骨胶原低聚肽钙配合物,以分子量分布和钙含量为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对海洋骨胶原低聚肽钙配合物稳定性的影响。结果表明:海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有较好的热稳定性,各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的钙含量无显著性差异;海洋骨胶原低聚肽钙配合物在酸性和碱性条件下,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到8%,钙含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有65%以上的钙含量;海洋骨胶原低聚肽钙配合物经过蛋白酶消化后,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到6%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有40.5%的钙含量。这说明海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,是一种具有潜力的肽钙补充剂产品。     

海洋骨胶原低聚肽钙配合物的稳定性

以三文鱼骨为原料制备海洋骨胶原低聚肽钙配合物,以分子量分布和钙含量为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对海洋骨胶原低聚肽钙配合物稳定性的影响。结果表明:海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有较好的热稳定性,各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的钙含量无显著性差异;海洋骨胶原低聚肽钙配合物在酸性和碱性条件下,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到8%,钙含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有65%以上的钙含量;海洋骨胶原低聚肽钙配合物经过蛋白酶消化后,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到6%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有40.5%的钙含量。这说明海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,是一种具有潜力的肽钙补充剂产品。      

吉林人参低聚肽对高脂血症大鼠的影响

目的:观察吉林人参低聚肽(ginseng oligopeptides,GOP)对高脂血症模型大鼠是否具有降脂作用。方法:取SD大鼠108只,设立9个实验组:6个GOP剂量组(0.062 5、0.125 0、0.250 0、0.500 0、1.000 0、2.000 0 g/kg)、1个空白对照组、1个乳清蛋白组(0.250 0 g/kg)和1个模型对照组。空白对照组每日给予基础饲料,其余各组每日给予高脂饲料,2周后各组继续给予相应饲料并连续灌胃30 d。结果:GOP各剂量组大鼠血清胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯含量均无明显变化(P0.05);GOP能够降低高脂血症大鼠血清和肝脏丙二醛含量(P0.01),提高血清和肝脏超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力(P0.01),升高血清一氧化氮和一氧化氮合酶含量(P0.01)。结论:GOP没有辅助降血脂作用,GOP可能具有抗动脉硬化作用。     

牛骨胶原低聚肽促进皮肤切口手术模型小鼠术后伤口愈合的机制研究

探讨牛骨胶原低聚肽促进皮肤切口手术模型小鼠术后伤口愈合的可能机制。96只SPF级ICR雄性小鼠随机分为空白对照组和3个牛骨胶原低聚肽剂量组(低剂量、中剂量、高剂量,灌胃剂量分别为0.375、0.75、1.5 g/kg·bw),每组24只。建立小鼠背部皮肤切口手术模型,术后连续灌胃11 d,并在术后第3、7、11 d分批处死8只小鼠进行相关指标的检测。结果发现,术后第11 d,牛骨胶原低聚肽高剂量组小鼠抗张力强度显著高于空白对照组(p<0.05);术后第3、7和11 d,低剂量、中剂量和高剂量牛骨胶原低聚肽能够显著增加小鼠血清中白蛋白和前白蛋白浓度(p<0.05);术后第3、7和11 d,中剂量和高剂量牛骨胶原低聚肽能够显著促进血清白细胞介素-10的表达水平(p<0.05),术后第7、11 d,牛骨胶原低聚肽能够显著抑制肿瘤坏死因子-α的表达水平(p<0.05)。因此,牛骨胶原低聚肽可以有效促进小鼠伤口愈合,其作用机制可能与其提高小鼠营养状况及抑制炎症反应有关。     

猪皮胶原多肽螯合钙增加大鼠骨密度

以实验室制备的猪皮胶原多肽(collagen polypeptide,CP)和葡萄糖酸钙为原料,采用液体反应法合成胶原多肽螯合钙(calcium-binding CP,CP-Ca),并评价CP-Ca增加SD大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)作用。将120只断乳雌性4周龄SD大鼠随机分为10组:1)对照组(灌胃去离子水);2)低、中、高剂量CP-Ca组(139.28、278.55、557.10 mg/(100 g·d));3)低、中、高剂量CaCO_3组(25、50、100 mg/(100 g·d));4)低、中、高剂量CP+CaCO_3组(139.28 mg/(100 g·d)CP+25 mg/(100 g·d)CaCO_3、278.55 mg/(100 g·d)CP+50 mg/(100 g·d)CaCO_3、557.10 mg/(100 g·d)CP+100 mg/(100 g·d)CaCO_3)。所有实验大鼠饲喂基础饲料,自由饮用去离子水。实验过程中,每周测定大鼠的体质量和身长,灌胃第4周做3 d钙代谢实验。测定大鼠血清钙(S-Ca)、血清磷(S-P)浓度、碱性磷酸酶(alkaline phosphatese,ALP)活力、大鼠BMD和骨钙含量,并对大鼠股骨进行扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)分析。结果显示,中、高剂量CP-Ca组和高剂量CP+CaCO_3组可以显著促进大鼠体质量增加和发育(P0.05),CP-Ca效果更为明显。CP-Ca组和CP+CaCO_3组的ALP活力显著低于对照组(P0.05),而中、高剂量CP-Ca组和中、高剂量CP+CaCO_3组BMD显著高于对照组(P0.05),且高剂量CP-Ca组高于对应剂量CP+CaCO_3组,各剂量CP-Ca组和CP+CaCO_3组钙表观吸收率分别高于对应CaCO_3组,CP-Ca具有促进大鼠骨生长、发育、骨钙沉积的作用。SEM结果显示,CP-Ca和CP+CaCO_3能够预防和改善大鼠因长期钙摄入不足引起的骨质疏松症。CP-Ca溶解性高、解离性好,富含钙元素及多肽,具有预防骨质疏松症、增加骨质密度的作用。     

体外消化对三文鱼皮胶原低聚肽抗氧化活性的影响

本研究以三文鱼皮为原料通过酶解法制备三文鱼皮胶原低聚肽,并进行体外模拟消化实验,通过分子量分布分析、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、总抗氧化能力（ABTS法）以及活性氧ROS实验,探究三文鱼皮胶原低聚肽经模拟胃、肠道消化后抗氧化活性的变化。结果表明：经模拟消化实验后,三文鱼皮胶原低聚肽的重均分子量轻微减少,变化不超过4%;胃蛋白酶消化前后,DPPH自由基清除能力IC₅₀值分别为11.1、12.3 mg/mL,胰蛋白酶消化前后,IC₅₀值分别为12.5、14.6 mg/mL;胃蛋白酶消化前后,羟自由基清除能力IC₅₀值分别为12.2、13.2 mg/mL,胰蛋白酶消化前后,IC₅₀值分别为10.7、11.5 mg/mL;胃蛋白酶消化后,总抗氧化能力下降不超过13%,胰蛋白酶消化后,总抗氧化能力下降不超过19%;胃蛋白酶消化后,ROS清除能力提高不超过3%,胰蛋白酶消化后,ROS清除能力提高不超过5%。这表明三文鱼皮胶原低聚肽具有良好的消化稳定性和抗氧化活性,为其在抗氧化功能性食品的开发提供了理论基础。     

玉米低聚肽螯合钙的结构表征及其体外稳定性

以玉米低聚肽和氯化钙为原料制备玉米低聚肽螯合钙,通过分析氨基酸组成、电镜扫描、紫外扫描来表征玉米低聚肽螯合钙的结构特征,并分析其体外稳定性。结果表明：玉米低聚肽经过螯合后,结构和形态都发生了改变;有吸收峰且吸收强度有很大的变化;玉米低聚肽螯合钙在20～80℃、非强酸强碱、胃蛋白酶消化作用下,均具有较好的稳定性。     

低聚木糖对大鼠粪钙、尿钙的影响

对大鼠进行正常饲料及低钙饲料中添加2%低聚木糖的喂养,喂养周期21d。测定大鼠钙摄入,粪钙、尿钙含量以及钙的吸收率。得出:低聚木糖能够有效提高大鼠对钙的吸收率,降低粪钙含量,并且,低聚木糖对低钙饲料组的影响比普通饲料组的影响大。在喂养1周之后低钙饲料+2%低聚木糖组的粪钙含量8.09mg,较相应对照组降低59.6%;普通饲料+2%低聚木糖组粪钙含量21.71mg,较相应对照组降低58.5%;低钙饲料+2%低聚木糖组的钙吸收率为94.84%;普通饲料+2%低聚木糖组的钙的表观吸收率为92.33%。另外,低聚木糖对尿钙影响不大。     

玉米低聚肽和小麦低聚肽及其金属螯合物的抗氧化和抗过敏活性

以分析玉米低聚肽和小麦低聚肽理化性质为基础,对2种低聚肽及玉米低聚肽-Ca螯合物与小麦低聚肽-Fe螯合物2种金属螯合物的抗氧化能力和抗过敏活性进行研究。利用DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力及还原能力测试3种方法评价样品的抗氧化能力,并选择透明质酸酶抑制法评价样品的抗过敏活性。抗氧化能力分析表明,4种样品均有较强的抗氧化能力,且在羟自由基清除能力测试中,2种金属螯合物的羟自由基清除率明显高于对应的低聚肽。抗过敏活性分析表明,在质量浓度<20 mg/mL时,低聚肽金属螯合物的透明质酸酶抑制率远高于对应的低聚肽。这与羟自由基测试的结果类似,可见该条件下样品的抗氧化能力和抗过敏活性存在一定的正相关联系。而质量浓度为20～100 mg/mL时低聚肽的抑制率随浓度明显增大,螯合物的抑制率增长则趋于平缓。螯合物在质量浓度<20 mg/mL条件下同时具有较强的抗氧化能力和抗过敏活性,可在食品药品方向进一步应用发展。     

牦牛骨粉对大鼠骨钙、骨密度及骨钙吸收率影响的研究

目的:研究牦牛骨粉钙吸收率及对大鼠骨钙、骨密度的影响。方法:清洁级雌性SD大鼠,70只,随机分为7组,即低钙对照组(饲料中含钙量为1180mg/kg),牦牛骨粉高、中、低三个剂量组(相当于人体推荐摄入量的5、10、20倍),实测值饲料中含钙量为1437、1852、2778mg/kg,另设与样品对照组剂量相对应的三个碳酸钙对照组。于实验第4w末进行三天的钙代谢试验。整个喂养时间为12w,实验结束日,测右侧股骨长度,干重,骨钙含量及骨密度。结果:牦牛骨粉10、20倍剂量组股骨钙含量、股骨骨密度高于低钙对照组,5、20倍剂量组钙表观吸收率高于相应剂量的碳酸钙对照组(p<0.05)。结论:牦牛骨粉不仅有增加骨密度功能,并具有较高的钙表观吸收率。     

牛骨蛋白分步酶解制取胶原多肽螯合钙的研究

以富含胶原蛋白和有机钙的新鲜牛骨为原料,在采用正交试验确定胃蛋白酶(pepsin)适宜水解条件的基础上,通过添加A1398中性蛋白酶(neutral protease)结合三因素二次旋转试验方法对水解牛骨蛋白制备胶原多肽钙的工艺进行优化。结果表明:先用胃蛋白酶在pH1.5,料液比1∶30,E/S5∶000U/g(蛋白质),温度37℃,酶解3h,再调节pH值至7.5,E/S3000U/g(蛋白质),温度50℃,酶解40min,螯合率最高可达98.36%。     

鲫鱼皮胶原肽对小鼠的促钙吸收作用

目的：研究胶原肽（collagen peptides,CPs）对小鼠的促钙吸收作用。方法：采用小鼠低钙膳食模型法, 以昆明雄性小鼠为实验动物,设置正常组、低钙模型组、碳酸钙组、CPs低剂量（500 mg/kg mb＋CaCO3）、高剂量 （1 000 mg/kg mb＋CaCO3）组、酪蛋白磷酸肽对照组,连续灌胃6 周,考察小鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活力、钙吸收率、各项骨指标及骨微观结构、骨小梁形态变化。结果：CPs低、高剂量组小 鼠的ALP活力显著低于低钙模型组（P＜0.05）,其骨长度、干质量指数、骨钙含量、骨矿物密度（bone mineral density,BMD）、骨矿物含量（bone mineral content,BMC）均显著高于低钙模型组（P＜0.05）,CPs低剂量 组可使喂食低钙饲料的小鼠的各项指标达到正常组小鼠的水平。CPs低剂量组小鼠的ALP活力显著低于碳酸钙组 （P＜0.05）,其骨钙含量、BMD、BMC均显著高于碳酸钙组（P＜0.05）,提示补充碳酸钙的同时补充CPs,其促钙吸 收效果更好。结论：CPs可提高小鼠钙吸收率,增加骨小梁数目及强度,促进骨骼生长,从而能有效促进钙的吸收。     

正交试验优化胶原多肽螯合钙的制备工艺

以胶原多肽及氯化钙为原料制备胶原多肽螯合钙并确定其最佳制备工艺,结果表明：胶原多肽螯合钙最适的螯合条件为钙元素和胶原多肽的质量比为13:100、pH6.0、时间30min、温度30℃。在该最佳螯合条件下得到的胶原多肽螯合钙的螯合率达到77.7mg/g。傅里叶变换红外光谱分析结果表明胶原多肽螯合钙是一种新的物质,后期的动物实验也证明了胶原多肽螯合钙具有增加骨密度的功能。     

罗非鱼骨胶原钙螯合肽的酶解制备

本研究以罗非鱼骨胶原蛋白为原料酶解制备具有良好钙螯能力性的活性肽。以钙螯合活性为指标,将罗非鱼骨架经过脱肉、脱钙等前处理获得的罗非鱼骨胶原蛋白通过木瓜蛋白酶酶解制备得到罗非鱼骨胶原蛋白肽,通过单因素及正交试验对制备罗非鱼骨胶原螯合肽的酶解工艺进行优化。同时对最优条件下酶解获得的罗非鱼骨胶原钙螯合肽的分子量及氨基酸组成进行分析。结果表明,最优酶解工艺条件为:酶解时间4.5 h,pH 6.5,酶解温度62℃,酶底比0.6%。罗非鱼骨胶原钙螯合肽是一类小分子功能活性肽。同时通过对比罗非鱼骨胶原钙螯合肽及其钙-肽螯合物氨基酸组成,发现胱氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸和赖氨酸等氨基酸对活性肽的钙螯合能力起到重要作用。     

不同骨密度测量方法在补钙剂评价中的应用

目的:评价某补钙为主保健食品增加大鼠骨密度的功效,比较双能X线吸收法(DEXA)与阿基米德定律法在骨密度测量中的应用。方法:参照《保健食品检验与技术评价规范》(2003版")增加骨密度功能检验方法"方案一,将45只断乳Sprague-Dawley大鼠按体质量随机分为碳酸钙对照组、低钙对照组和保健品低、中、高剂量组(0.17、0.33、1.00g/kg),对某保健食品进行评价。结果:保健品高剂量组及碳酸钙对照组大鼠在钙表观吸收率、质量增加量、骨密度及骨钙含量上明显高于低钙对照组(P<0.05)。除骨密度外,保健品高剂量组同碳酸钙对照组相比各指标差异不显著;DEXA法与阿基米德定律法所测骨密度结果相关性较好。结论:该保健食品对大鼠有增加骨密度作用;DEXA法与阿基米德定律法均可用于动物实验中骨密度的测定。     

碳酸钙复合胶囊的增强骨密度功能作用及安全性评价

该研究旨在评价一种碳酸钙复合胶囊（Calcium Carbonate Compound Capsule,Ca-CC）增强骨密度功能作用和安全性。经口给予60只雌性大鼠低（0.18 g/kg·bw）、中（0.35 g/kg·bw）、高（1.05 g/kg·bw）三个剂量的Ca-CC 90 d的干预。通过测定雌性大鼠生长发育指标、股骨骨密度、骨钙含量在评估增强骨密度功能作用。结果显示：高剂量组Ca-CC(1.05g/kg·bw)增强大鼠的股骨远心端、股骨中心骨密度分别为7.39%(P<0.05)、8.29%(P<0.01),增强骨钙含量为29.70%(P<0.01)。通过给予昆明种小鼠20.00 g/kg·bw剂量的Ca-CC进行安全性评价。在受试剂量范围内,Ca-CC无诱发菌株突变、精子畸变、解剖及组织学检查异常等现象。在30 d观察期,以0.88、1.75、3.50g/kg·bw为剂量的低、中、高三个剂量组中,Ca-CC对试验小鼠各项生理指标均无影响。以上结果表明,Ca-CC具有增强骨密度功能作用且安全性良好。     

小茴香增加大鼠骨密度作用及机制的研究

目的:探究小茴香对去势雌性大鼠骨密度功能的影响,通过大鼠颅骨成骨细胞(ROB)初探其机制.方法:采用SD大鼠进行含小茴香的保健食品配方的急性经口毒性试验,以去势雌性SD大鼠建立骨质疏松动物模型进行增加骨密度的功能性验证.用新生SD乳鼠颅骨为细胞来源培养ROB,CCK-8法观察小茴香40％甲醇提取物对ROB增殖的影响,并...