多肽体外抗氧化活性测定方法的比较

为确定适用于多肽体外抗氧化活性的测定方法,以丁基羟基茴香醚（butyl hydroxylanisole,BHA）、VC和生育酚（vitamin E,VE）为对照,测定大豆肽的还原能力、螯合Fe2＋能力、清除2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt,ABTS）自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基及抑制脂质体氧化的活性。结果显示：在质量浓度为0～30 mg/mL时,大豆肽还原能力随质量浓度的增加而增强,与BHA、VE、VC类似,大豆肽最大还原能力仅为0.487。大豆肽抑制脂质体氧化的活性弱于BHA和VE,但具有较稳定的增加趋势,最大抑制率达到20.6%;在质量浓度为0～15 mg/mL时,大豆肽螯合Fe2＋能力随质量浓度的增加而增强,最大螯合率为38.7%。然而,未检测出BHA、VE、VC具有螯合Fe2＋的能力;在质量浓度为0～3.0 mg/mL时,大豆肽清除ABTS＋·活性与VC基本相同,大于BHA和VE,ABTS＋·清除率最大为61.2%。大豆肽DPPH自由基清除率最大仅为2.1%,清除DPPH自由基活性远低于VC（45.0%）、BHA（10.1%）和VE（10.7%）,表明螯合Fe2+能力、清除ABTS＋·及抑制脂质体氧化活性的测定方法适合用于评价大豆肽体外抗氧化活性。     

2种蛋白酶酶解曲拉干酪素条件优化及抗氧化性比较

以曲拉干酪素为原料、水解度为指标,在酶解时间、酶解温度、pH值、曲拉干酪素质量浓度、酶添加量单因素试验基础上,采用响应面试验对碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解工艺条件进行优化,并对2 种酶解液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基清除率,Fe2＋、Cu2＋螯合能力和还原力等抗氧化性指标进行比较。结果表明,碱性蛋白酶和胰蛋白酶分别在酶解时间3.8、2.5 h,酶解温度49.8、47.8 ℃,曲拉干酪素质量浓度60、35 g/L,pH 8.5、7.5,酶添加量140、2 900 U/g时水解度最大,为24.25%和13.57%。碱性蛋白酶解液超氧阴离子自由基清除率、Fe2＋螯合能力显著低于胰蛋白酶解液（P＜0.01）;羟自由基清除能力高于胰蛋白酶解液（P＞0.05）;2 种蛋白酶酶解液在酶解液质量浓度1～5 mg/mL时,Cu2＋螯合能力、DPPH自由基清除率和还原力随质量浓度均呈上升趋势,Cu2＋螯合能力低于Fe2＋螯合能力（P＞0.05）,DPPH自由基清除率和还原力二者差异显著（P＜0.01）。2 种蛋白酶对酶解物抗氧化性指标影响不同,碱性蛋白酶酶解物抗氧化性相对较优。     

牡蛎氨基酸螯合锌体外抗氧化作用研究

研究了牡蛎氨基酸螯合锌体外抗氧化能力,测定了牡蛎氨基酸螯合锌对DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O~-_2·)、羟基自由基(·OH)3种常见自由基的清除能力及其抗氧化值。结果表明:牡蛎氨基酸螯合锌具有较好的体外抗氧化能力,随着浓度的增加,牡蛎氨基酸螯合锌对DPPH、O~-_2·、·OH自由基的清除能力逐渐增强,抗氧化值也随之增加。当浓度0.01 g/m L时,对DPPH、·OH自由基的清除率分别为88.43%、82.64%。     

野葛总黄酮的提取工艺优化及抗氧化活性研究

通过单因素试验及正交试验确定野葛总黄酮的最佳提取工艺,并采用紫外分光光度法对野葛总黄酮的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除能力、总还原能力和羟基（OH）自由基清除能力进行测定。结果表明,野葛总黄酮的最佳提取工艺条件为：体积分数40%的乙醇、料液比1∶20（g∶mL）、80 ℃水浴提取2 h,提取2次。在此优化条件下,野葛总黄酮的提取率3.06%。抗氧化试验结果表明,野葛总黄酮质量浓度分别为0.8 mg/mL、0.4 mg/mL、0.8 mg/mL时,DPPH自由基清除能力、OH自由基清除能力、总还原能力（OD700 nm值）最大值分别为72.98%、65.38%、0.16,表明野葛中总黄酮具有一定的抗氧化能力,且在一定浓度范围内,浓度越高抗氧化能力越强。     

酚类菊糖衍生物的制备及抗氧化活性

以菊糖为原料，通过改性提高菊糖的抗氧化活性，研究其结构与抗氧化活性的关系。利用溴代、亲核取代和缩合三步反应制备酚类菊糖衍生物，通过活性基团的引入达到提高菊糖抗氧化活性的目的。结果表明，菊糖衍生物的抗氧化活性，包括还原能力、Fe2＋螯合能力和对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基3 种自由基的清除活性都较菊糖显著提高，含有双酚的菊糖衍生物（化合物3C、3D）比含有单酚的菊糖衍生物表现出更强的自由基清除能力。其中含有双酚的菊糖衍生物对DPPH自由基清除能力的半抑制质量浓度（half maximal inhibitory concentration，IC50）为0.007 mg/mL，较VE的DPPH自由基清除能力高；化合物3C超氧阴离子自由基清除能力IC50为0.042 mg/mL；化合物3B Fe2＋螯合能力IC50达到0.006 mg/mL。同时通过研究电子或质子转移和中间体探讨可能的自由基清除机制。体外细胞毒性实验证实酚类菊糖衍生物有较好的生物相容性，这些结果有助于开发菊糖衍生物在抗氧化剂或自由基清除剂等方面的应用。     

基于亚铁螯合能力的灰树花蛋白酶解工艺优化及其抗氧化活性

以灰树花为原料,探究灰树花蛋白亚铁螯合肽的最佳制备条件,并对其抗氧化活性进行评价。从6?种蛋白酶中筛选出酶解最佳用酶,在此基础上,以亚铁螯合能力为响应值,进行单因素和正交试验,同时研究了灰树花蛋白亚铁螯合肽对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基的清除效果。结果表明,碱性蛋白酶酶解物的亚铁螯合能力最强,在pH?9、加酶量1?800?U/g、酶解温度55?℃、底物质量浓度0.5?g/100?mL、酶解时间2.5?h的条件下,灰树花蛋白亚铁螯合肽的亚铁螯合能力最强,可达1.854?mg/g,此时水解度为6.14%。灰树花蛋白亚铁螯合肽对DPPH自由基和羟自由基有较强的清除效果,且与多肽质量浓度呈正相关。结果显示,灰树花蛋白亚铁螯合肽具有良好的亚铁螯合能力,并具有较好的抗氧化活性,有望发展为新型的膳食补充剂。     

高良姜多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

通过Box-Behnken试验设计,获得了热水浸提高良姜多糖的最佳工艺;以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基能力、还原力、清除羟自由基能力、螯合铁离子能力为指标,评价了高良姜多糖的抗氧化活性。结果表明,热水浸提高良姜多糖的最佳工艺条件为液料比43∶1（mL/g）、浸提温度95 ℃、浸提时间3 h,在此条件下多糖得率实测值为11.81%。高良姜多糖具有较好的抗氧化活性,清除自由基能力、还原力和螯合铁离子能力均表现出一定的质量浓度依赖性;高良姜多糖清除DPPH自由基、清除羟自由基和螯合铁离子能力的半数有效质量浓度（EC50）分别为（0.59±0.01）、（0.05±0.003）g/L和（2.75±0.2）g/L。     

一株柴胡红景天中内生真菌的抗氧化活性

对柴胡红景天中一株具有抗氧化活性的内生真菌Rb-R-1进行研究,获得其分类地位并评价抗氧化活性强弱。结果表明：这株真菌为Ascomacota门Hypocreales目Neonectria属的N. ramulariae真菌,具有较强的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基（•OH）、超氧阴离子自由基（O2－•）、NO2－清除能力和Fe2＋螯合能力,IC50值分别为8.86、4.40、9.65、16.53、1.91 mg/mL;其发酵产物中总酚和总黄酮含量分别达18.12、22.48 mg/g。发酵条件优化结果表明,在以乳糖为碳源、牛肉膏为氮源、装液量90 mL/250 mL、pH 7.0、25 ℃条件下培养10 d时,内生真菌Rb-R-1发酵产物对DPPH自由基的清除率最大,达到93.12%;总酚和总黄酮含量最高,分别为19.14 mg/g和28.25 mg/g。     

响应面法优化金蝉花多糖提取工艺及抗氧化活性分析

通过考察液料比、浸提时间及浸提温度对金蝉花多糖含量的影响,在单因素试验基础上进行响应面优化提取工艺条件,并通过测定金蝉花多糖总还原力、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH）自由基、羟自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O2－·）的能力研究其体外抗氧化活性。结果表明,金蝉花多糖适宜的提取工艺参数为浸提时间130min、浸提温度80℃、液料比50∶1（mL/g）,在此条件下金蝉花多糖含量实际值为26.14mg/g。金蝉花多糖具有较好的抗氧化能力,其清除DPPH自由基、·OH、O2－·的半抑制质量浓度（IC50）分别为28.99μg/mL、0.19mg/mL和0.30mg/mL。     

不同加热处理发酵酸肉多肽的体外抗氧化活性比较

以酸肉为研究对象,研究酸肉微波、蒸制、油炸、烤制处理后多肽抗氧化活性。比较不同状态下酸肉多肽提取率、巯基(-SH)含量、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)及羟自由基(-OH)能力、螯合金属离子(Fe2+)、抑制脂质氧化及清除亚硝酸盐能力。结果表明,微波、蒸制、油炸、烤制等热处理后酸肉粗肽液-SH含量分别为25.41 nmol/mg,22.89 nmol/mg,26.62 nmol/mg,24.60nmol/mg,随粗肽液浓度增加,抗氧化能力显著增强,相同浓度不同热处理状态下酸肉粗肽液抗氧化能力不同。在粗肽液质量浓度为5 mg/mL时,微波、蒸制、油炸、烤制、生酸肉等处理粗肽液DPPH自由基清除率及-OH自由基清除率均表现为蒸制>烤制>微波>油炸>生酸肉,Fe2+螯合能力分别为50.61%、52.67%、48.76%、50.58%、57.77%,在与亚油酸反应144h时,粗肽对脂质氧化的抑制率分别为47.33%、57.60%、44.26%、49.03%、51.63%,亚硝酸盐清除率分别为68.81%、75.37%、70.05%、74.86%、76.01%。综合分析,与生酸肉相比,加热处理后酸肉粗肽抗氧化活性提高,且蒸制最好,因此酸肉抗氧化多肽提取适宜的热处理方式为蒸制>烤制>微波>油炸。     

清酱肉体外模拟消化后粗肽的抗氧化活性和氨基酸分析

通过体外模拟胃、肠消化的方式分别对清酱肉和五花肉(对照组)进行酶解,比较其酶解物的抗氧化性,探究其氨基酸组成.结果表明,在相同浓度下,清酱肉酶解所得粗肽的抗氧化指标显著高于对照组五花肉粗肽的(P<0.05),当清酱肉酶解所得粗肽的质量浓度为5 mg/mL时,其DPPH·清除率最高达82.97％,Fe2+螯合率最高达30...     

西式发酵火腿粗肽的制备及抗氧化活性和氨基酸组成分析

采用磷酸盐缓冲液和盐酸溶液提取西式发酵火腿的粗肽,测定并比较2种溶液提取的粗肽1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基清除能力、Fe2+螯合能力及总抗氧化能力,同时对氨基酸组成进行分析.结果表明:磷酸盐法提取得到的粗肽粉A的质量和肽含量显著高...     

响应面优化冰岛刺参内脏团抗氧化肽制备工艺及其组成分析

以冰岛刺参内脏团蛋白为原料,利用复合蛋白酶酶解制备抗氧化肽。在单因素实验基础上,通过响应面法优化酶解工艺条件,并分析其抗氧化活性、分子量分布和氨基酸组成。结果表明,最佳工艺条件为底物质量分数4.4%,加酶量4887 U/g,pH7.0,酶解温度56 ℃,酶解时间4.2 h,在该条件下,2 mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率可达89.18%±0.11%,0.5 mg/mL酶解产物的ABTS自由基清除率和Fe2+螯合率分别为68.11%±0.12%、72.59%±0.08%,1.5 mg/mL酶解产物的羟基自由基清除率和还原力分别为71.86%±0.09%、0.7473±0.0105;分子量分布和氨基酸分析表明,冰岛刺参内脏团抗氧化肽中分子量低于1000 Da的肽占94.26%,富含酸性氨基酸和疏水性氨基酸,具有较高的抗氧化活性和营养价值。该研究为冰岛刺参深加工产业的发展提供了技术参考。     

大鲵油体外抗氧化活性研究

采用体外抗氧化实验研究大鲵油抗氧化活性,测定大鲵油对DPPH自由基、羟基自由基、超氧自由基清除能力和还原能力、Fe~(2+)螯合能力。以V_C为阳性对照,评价大鲵油的体外抗氧化活性。结果表明:大鲵油抗氧化能力强于鲐鱼油,添加复合抗氧化剂后抗氧化能力更强,对Fe~(2+)的螯合能力表现最好,相同质量浓度条件下强于V_C;对DPPH自由基、羟基自由基清除能力和还原能力与V_C相当。大鲵油对DPPH自由基、羟基自由基和Fe~(2+)螯合能力的半抑制质量浓度(IC_(50))分别为3.523、0.493、0.559 mg/m L,添加了复合抗氧化剂的大鲵油的相应IC_(50)分别为0.572、0.099、0.062 mg/m L。     

Reducing,Radical Scavenging,and Chelation Properties of Fermented Soy Protein Meal Hydrolysate by Lactobacillus plantarum LP6

Fermented soybean protein meal hydrolysate (FSPMH) was fractionated by gel filtration on Sephadex G-15. The fractions obtained were subjected to various antioxidant assays, amino acid and molecular weight determinations. Among the seven fractions, the highest antioxidant activity was found in fraction F2, with significant differences (P < 0.01) 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, hydroxyl radicals (^.OH) scavenging and Cu²⁺ chelating activity. Fraction F2 exhibited scavenging of DPPH (59.43%), ^.OH (72.80%) and 44.47% Cu²⁺ chelating activity. All other fractions showed variable activities in different assays. Amino acid analyses of F2 fraction with the strongest antioxidant activity also had the highest percentage of related antioxidative amino acids content (Histidine 3.46, Serine 5.78, Valine 4.08 and Lysine 11.49 g/100 g protein) compared with other six fractions. The molecular weight distribution of F2 was found to vary from 170 to 1500 Da.     

橄榄酚类提取物的抗氧化性能

为进一步开发利用橄榄中的酚类物质,文中通过测定橄榄酚类提取物的铁离子还原能力、亚铁离子螯合能力,及对2,2'-氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基(ABTS+.)、1,1-二苯-2-苦基苯肼自由基(DPPH.)、羟基自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O2-.)的清除能力,以考察橄榄酚类提取物的体外抗氧化性能,并与食品抗氧化剂丁基羟基茴香醚(BHA)和Vc进行对比。结果表明:橄榄酚类提取物具有较好的体外抗氧化性能,其ABTS+.、DPPH.清除率分别高达99%和95%以上,.OH、O2-.清除率可达50%左右,铁离子还原力约1 700μmol/L Trolox,亚铁离子螯合率最高为14.9%。且提取物ABTS+.、DPPH.和.OH清除能力及铁离子还原能力均强于BHA和Vc,而O2-.清除能力强于BHA但弱于Vc。另外,橄榄酚类粗提物和纯化物相同浓度下的ABTS+.、DPPH.、.OH清除能力和铁离子还原能力相当(P>0.05),而其O2-.清除能力和亚铁离子螯合能力表现有所差异。     

玉米淀粉硫酸酯的抗氧化性研究

合成了六种取代度分别为0.224、0.325、0.446、0.621、0.786、0.998的玉米淀粉硫酸酯,并通过还原力、Fe2+螯合能力、羟自由基及超氧阴离子清除能力四种体外方法评价了其抗氧化能力。结果表明,玉米淀粉硫酸酯具有一定的抗氧化活性,取代度越高,抗氧化能力越强。取代度为0.998的玉米淀粉硫酸酯的浓度分别为1、2、3、2mg/mL时,其还原力为1.013,Fe2+螯合能力为91.6%,羟自由基(.OH)及超氧阴离子(O2-.)清除率为49%、65.8%。因此玉米淀粉硫酸酯凭借其抗氧化性有望应用于食品或药品工业上。     

响应面法优化草菇抗氧化肽的酶法制备工艺

以草菇为原料提取蛋白质,蛋白酶酶解蛋白制备抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为指标,在单因素实验基础上,结合响应面法优化草菇抗氧化肽的提取工艺。通过超滤分离纯化获得不同分子量的肽段,采用DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力法测定超滤组分的抗氧化活性。结果表明:中性蛋白酶为最优酶解蛋白酶,最佳酶解工艺条件为酶解时间3.70 h,加酶量3.81%,底物质量浓度3.11 g/100 mL,在此条件下,酶解产物的DPPH自由基清除率为69.85%±2.52%。通过超滤分级制备所得分子量最小的肽段F1（<3 kDa）具有最高的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力分别为78.81%±1.56%、91.05%±1.65%、0.47±0.02。草菇抗氧化肽可作为潜在的天然抗氧化剂来源得到开发利用。     

玉米胚芽蛋白水解物的抗氧化活性研究

以玉米胚芽蛋白水解物为底物,通过对其羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、二苯基苦味酸基苯肼(DPPH)自由基清除能力、Cu2+螯合能力、在亚油酸体系中的抗氧化性、油脂过氧化值(POV)等指标的测定,研究玉米胚芽蛋白水解物的抗氧化活性.结果表明,玉米胚芽蛋白水解物对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基具有一定的清除能力,且浓度为6mg/mL时,清除效果最好;对Cu2+具有螯合能力,并且螯合能力随着玉米胚芽蛋白水解物浓度的增加而呈上升趋势;对亚油酸氧化具有抑制作用,作用效果与剂量成正相关,同时对油脂的POV值具有抑制作用,浓度为0.1％时抑制作用最强.