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将大肠杆菌BL21中的D-甘露糖异构酶(MIase)基因yihS克隆到表达载体pET-28a(+)中,并转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达。重组菌株经IPTG诱导培养6 h后MIase发酵酶活可达4.2 U/mL。重组MIase生产D-甘露糖时不需要金属离子的参与。该酶在40℃和pH 7.5条件下表现出催化D-果糖的最高活性,转化率为25%左右;通过研究底物浓度对酶活性的影响,得出该酶的活性不受底物浓度的抑制,以D-果糖为底物时,动力学参数Km为123.32mmol/L,Vmax为113.64μmol/(min·mg),催化效率kcat/Km为0.691 (s·mmol/L)。 相似文献
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提出了一种高效、低成本的两阶段生产D-阿洛酮糖的生产工艺。第一阶段,构建异源表达Flavonifractor plautii D-阿洛酮糖3-差向异构酶的重组大肠杆菌用于转化果糖,实现D-阿洛酮糖的全细胞生物合成。重组大肠杆菌在pH 7.5、65℃条件下反应最优,且在不添加金属离子、60℃反应条件下半衰期达到2.7 h,具有高热稳定性。在添加干重2.4 g/L重组大肠杆菌的D-果糖纯水溶液中,产物D-阿洛酮糖的终质量浓度为231 g/L,转化率达到33%。在添加硼酸根离子的条件下,D-阿洛酮糖的终质量浓度为378 g/L,转化率可以达到63%。在第二阶段,利用马克斯克鲁维酵母消耗混合体系中的D-果糖生产乙醇,降低分离成本。在不添加任何营养物质的情况下,在2种不同体系内,D-果糖均可以完全被消耗并产出约0.4 g/g的乙醇。该文研究结果为D-阿洛酮糖的低成本工业化生产奠定了良好的基础。 相似文献
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该实验以苦荞籽粒为研究对象,使用酶辅助超声法提取D-手性肌醇(D-Chiro Inositol,DCI)。考察了pH值、酶解温度、酶解时间、加酶量、料液比、乙醇体积分数对DCI浓度的影响,并在此基础上,采用响应面试验设计优化了DCI最佳提取工艺。结果显示:酶解最佳pH值为6,酶解温度为36.4 ℃,酶解时间为0.5 h,加酶量为2.1%,料液比为1:10,乙醇体积分数为48%时,DCI浓度为5.87 mmol/L。进一步利用α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶两项指标评价提取物纯化前后的体外降糖能力。采用活性炭、固相萃取离子小柱纯化DCI,结果显示阴离子(SAX)固相萃取小柱纯化效果最好,能够将纯度提高80%。苦荞中DCI对α-葡萄糖苷酶的半抑制质量浓度(50% Inhibitory Concentration,IC50)降低,IC50值由0.68 mg/mL降到0.47 mg/mL,表明纯化效果显著。采用α-半乳糖苷酶辅助超声法可以有效的获得高浓度DCI,并证实纯化后的DCI具有较好的体外降糖活性。通过该项目的研究为苦荞的综合开发利用提供理论参考。 相似文献
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D-甘露醇是一种很有价值的营养甜味剂,目前工业化生产甘露醇是用1:1的葡萄糖与果糖混合物在有镍催化剂下加氢而得。由于其收率低(25%~30%),需要寻求一种更好的工艺。本文列举了一系列不同生产方法的文献,包括把已知的工艺相结合可能有的新工艺。可以看出,从葡萄糖与葡萄糖/果糖浆制造甘露醇时,较好的工艺是同时使用葡萄糖异构酶与铜一硅催化剂(结合工艺)。 相似文献
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水酶法是在水代法基础上发展起来的一种现代提取植物油脂新技术。水酶法主要利用生物酶的酶解作用促进植物油脂的游离,与传统压榨法、有机溶剂浸出法及超临界萃取法等相比,其工艺简单,对设备的要求低,无高温处理及有机溶剂残留,油脂品质更好。因此,水酶法是一种"绿色、安全、营养"的提油新技术。本文介绍了水酶法提取植物油脂的技术原理及工艺特点,生物酶的选择与生物酶在水酶法提油中的应用现状,比较了水酶法与其他传统方法制备的植物油脂的品质;并重点讨论了水酶法提取植物油脂技术研究的关键问题,即:水酶法提油过程中乳化液的形成机制及破乳技术;同时,针对水酶法提油技术存在的用酶量大、成本较高及废水处理等问题提出了可能的解决途径,并对其应用前景进行了展望。 相似文献
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多糖是一种在自然界分布极广的天然生物大分子,具有生物相容性、可接受性和可降解性,被广泛应用于食品、药品、化妆品以及化工行业产品中。然而,由于某些多糖水溶性差或天然多糖不具备一些功能特性,其应用受到了限制。利用物理、化学或酶改性方法对多糖结构进行修饰,改善了其功能特性,扩大了其应用范围。酶具有高效性、特异性和选择性,酶法改性多糖安全性高、条件温和且环境友好,是一种极具潜力的多糖改性方法。酶法对多糖进行改性主要包括对多糖的水解和共价接枝。主要以多酚氧化酶、过氧化物酶、转谷氨酰胺酶和脂肪氧化酶等为例,介绍了近年来多糖酶法改性的研究进展,主要综述了酶法改性酶的种类、多糖改性方法和反应类型,讨论了改性多糖的功能特性,并对其应用前景进行展望。 相似文献
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人乳替代脂是一类模拟母乳脂组成的结构脂质,为促进人乳替代脂的绿色高效生产,介绍了母乳脂的甘油三酯组成,对人乳替代脂的酶法制备工艺以及实际应用的研究现状进行了分析、总结和探讨,并展望了未来的研究方向。我国母乳脂中1-油酸-2-棕榈酸-3-亚油酸甘油三酯(OPL)含量最高,其次为1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)。人乳替代脂的酶法制备工艺包括酯-酯交换法、一步酸解法、醇解-酯化两步法、两步酸解法、酯交换-酸解两步法等。提高酶的催化活性与位置选择性、抑制酰基迁移等是未来酶法制备人乳替代脂的研究方向。 相似文献
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食品乳化剂是现代食品工业不可或缺的添加剂。与化学合成法相比,酶催化法合成食品乳化剂具有很多优势,如催化效率高、反应条件温和、产品纯度高、色泽浅且容易分离纯化等。本文介绍了脂肪酸单甘酯、脂肪酸糖酯、丙二醇脂肪酸酯以及失水山梨醇脂肪酸酯四类常用食品乳化剂的酶催化法合成研究进展,对酶催化合成方法、反应媒介的选择及存在的主要问题等方面进行了综述。 相似文献