酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

蛹虫草HWM剩余物蛋白酶解工艺研究

以酶解液多肽指数为指标,选用胃蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶以及蜗牛酶、纤维素酶水解蛹虫草HWM剩余物,筛选蛹虫草HWM剩余物蛋白酶解最佳用酶。采用二次回归正交试验确定其最佳酶解工艺。试验结果表明,碱性蛋白酶为蛹虫草HWM剩余物蛋白降解的最佳用酶,其最佳酶解工艺参数为反应时间12 h,加酶量为干基底物质量的10%,底物质量浓度70 mg/mL,酶解温度55℃,初始pH 12.0。在此条件下,蛹虫草酶解液多肽指数达90.32%。     

牛排菇多肽的酶解工艺优化

以珍稀食用菌——牛排菇为原料,利用单因素试验和响应面法建立其多肽的酶解工艺。以水解度为指标,分别以5 种蛋白酶：酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶,对牛排菇进行酶解;考察不同反应时间、底物浓度、pH 值、温度、加酶量对牛排菇多肽提取过程中水解度的影响,并结合响应面试验优化工艺条件。结果显示：胰酶为酶解牛排菇多肽的最适蛋白酶,当酶解时间5 h、底物浓度5%、pH8、加酶量10 000 U/g、酶解温度45 ℃时,牛排菇多肽的水解度为59.17%,且蛋白质含量可达33.67%。     

蛹虫草菌丝体酶解制备多肽的工艺研究

蛹虫草和冬虫夏草是药食兼用的真菌,具有对人体有益的多种活性作用。以液体发酵后干燥的蛹虫草菌丝体粉末为原料,分别以底物浓度、温度、pH、加酶量和时间为条件,分析单因素对菌丝体酶解效果,结果表明:当蛹虫草菌丝体酶解液多肽指数达最大时,各个条件分别为:底物浓度10%左右;温度42℃左右;pH为2.0;加酶量2.5%;时间8 h。然后通过正交试验优化菌丝体多肽,获得最佳酶解工艺,即反应温度为42℃、时间为8 h、底物浓度为10%、加酶量为2.5%。最后利用Tricine-SDS-PAGE电泳确定多肽的分子量范围,结果表明:蛋白酶酶解蛹虫草菌丝体酶解液多肽主要分布在3 160 Da~7 629 Da附近。     

酶与高压蒸煮耦合水解蛹虫草蛋白质的工艺研究

以蛹虫草蛋白质为原料,利用胰蛋白酶与高压蒸煮耦合水解蛹虫草蛋白质,开发虫草肽产品。以耦合水解后的水解度和得率为指标,探讨胰蛋白酶与高压蒸煮耦合的方法对蛹虫草蛋白质的水解效果。结果表明,在底物浓度为7%,酶添加量1.3%,酶解时间8 h后进行高压蒸煮,蒸煮温度115℃(0.122 MPa),保压8 h的条件下,水解度为23.6%,得率为63.1%。胰蛋白酶与高压蒸煮耦合工艺对蛹虫草蛋白酶解效果相对较好,产品收率高,相对分子量小于1 000 Da的小肽占到90%以上。     

脱脂豆粕酶水解物抗氧化活性的研究

采用碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)对脱脂豆粕进行水解,以二苯代苦味酰基自由基清除率和亚油酸过氧化抑制率为指标,通过对酶解温度、时间、pH、加酶量以及底物浓度等影响因素的系统研究,建立了脱脂豆粕的优化酶解工艺.结果表明,酶解温度为55℃、时间为3h、pH为8.0、加酶量19200U/g底物、底物浓度8%,酶水解物的自由基清除率和过氧化抑制率分别为41.13%、34.16%.水解度为35.O%.     

雄蚕蛾蛋白制备功能性多肽酶解条件优化研究

以水解度(DH)和肽得率为指标,分别考察温度、pH值、底物浓度、加酶量对碱性蛋白酶酶解雄蚕蛾蛋白制备功能性多肽的影响,通过二次回归正交旋转组合设计确定碱性蛋白酶酶解反应的最佳优化参数为:温度64.5℃、pH9.36、底物浓度4.46%、加酶量6660U/ml、反应时间300min。在此条件下,酶解液水解度达到21.65%、肽得率达到34.81%。     

酶水解高温豆粕制备高水解度大豆肽的研究

采用碱性蛋白酶水解高温豆粕制备高水解度大豆肽,通过单因素和响应面实验确定酶解高温豆粕的优化条件。以水解度为指标,考察温度、时间、pH、加酶量、底物浓度等因素对水解度的影响。优化的酶解条件为:温度50℃、时间5h、pH8.60、加酶量17700U/g底物、底物浓度10.25%,该条件下得到大豆肽的水解度为37.20%。     

碱性蛋白酶酶解高温豆粕技术的研究

以高温豆粕为原料,通过单因素试验、正交试验进行直观分析和方差分析,确定碱性蛋白酶酶解高温豆粕的优化条件。以大豆肽水解度为指标,考察温度、时间、pH、加酶量、底物浓度等因素对水解度的影响。优化的酶解条件为:温度55℃、酶解时间为4h、pH为9.0、加酶量为9 600U/g(底物)、底物浓度为10%,在此条件下做验证试验得到的大豆肽水解度为34.93%。     

双酶法制备豌豆肽及其抗氧化活性

研究豌豆蛋白双酶水解的最佳工艺条件及产物的抗氧化活性。以豌豆蛋白粉为原料,通过单因素试验和正交试验优化出双酶分段水解豌豆蛋白的工艺条件,并初步研究豌豆肽的抗氧化活性。结果表明,双酶法制备豌豆肽的最佳工艺条件为:底物浓度10%,复合蛋白酶加酶量3.0%,pH 9.0,温度55℃,酶解3.5 h;用碱性蛋白酶酶解,加酶量3.0%,pH 9.5,温度50℃,酶解4.0 h。由此酶解得到水解物的水解度为39.61%。水解液蛋白浓度0.125 mg/mL时,其对Fe2+螯合能力为83.22%。试验表明和单酶水解相比,双酶水解工艺可提高豌豆蛋白的水解度和抗氧化活性。     

Protex-6L碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白的工艺研究

选用Protex-6L蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解生成肽和氨基酸。以水解度为考察指标,对其酶解工艺进行优化。基于单因素实验,考察了酶解参数:pH、酶解温度、底物浓度、加酶量、酶解时间等对酶解的影响,利用designexpert软件设计响应面对酶解条件进行优化分析,并在最优条件下通过SephadexG-75分析水解产物的分子量分布。结果表明:pH8.85、酶解温度57.34℃、底物质量分数7.00%、加酶量6884.36U/g、酶解时间4.19h,此条件下的绿豆分离蛋白的水解度(DH)为36.60%。水解得到的小肽分子量大部分都小于4000u。     

双酶水解虾粉的研究

为了提高虾加工下脚料的利用价值,用Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶同步水解虾粉,分析了水解温度、水解时间、起始pH值、酶用量（E/S）和底物浓度等对水解度的影响,确定的最佳酶解条件为：底物浓度为9.0%、Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶的添加量均为1.0%、水解温度为55℃、起始pH值为6.5和酶水解时间为8h,水解度为22.1%。     

酸枣仁ACE抑制肽酶解工艺优化

本试验以脱脂后的酸枣仁渣通过碱溶酸沉法提取得到的酸枣仁蛋白为研究对象,以血管紧张素转化酶(ACE)抑制率和水解度为指标,筛选复合酶种类,采用响应面分析法,以中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例、pH、底物浓度、酶解温度、酶解时间为试验因素,优化酸枣仁ACE抑制肽最佳酶解工艺参数。结果表明:筛选出中性蛋白酶和碱性蛋白酶作为复合酶,最适酶添加量确定为6000 U/g,5个因素对ACE抑制率和水解度的影响由大到小的顺序为:酶解温度、酶解时间、pH、中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例、底物浓度。通过拟合方程分析,得到酸枣仁ACE抑制肽酶解的最佳工艺条件为:中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例为2.1:1、酶解温度为54 ℃,底物浓度为3.1%,pH为7.5,酶解时间为62 min。在此条件下,复合酶解酸枣仁蛋白酶解液的实际ACE抑制率和水解度分别为（79.46%±0.49%）和（31.45%±0.85%）,与理论值接近。制备得到酸枣仁ACE抑制肽与阳性对照组卡托普利对比,酸枣仁ACE抑制肽的ACE抑制率大小为（79.46%±0.49%）,与卡托普利的ACE抑制率偏差为（19.28%±0.12%）,证明酸枣仁ACE抑制肽具有显著降压效果。本研究证明了酸枣仁蛋白通过酶解有效得到ACE抑制肽并优化其酶解工艺,旨在为酸枣仁渣废物再利用提供参考方向和理论依据。     

红岛蛤蜊肉酶解工艺优化及其产物降血压功能研究

以营养价值较高且具地域性特色的红岛蛤蜊为研究对象,以水解度为指标,比较了复合蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对蛤蜊肉的酶解效果。结果表明,复合蛋白酶的酶解效果优于其他蛋白酶。选用复合蛋白酶,通过酶解温度、pH、料液比、加酶量、酶解时间的单因素实验以及正交试验确定蛤蜊肉酶解的最佳工艺条件为:酶解温度58 ℃、酶解时间6 h、初始pH7.0、料液比1:2（g:g）、加酶量1000 U/g,在此条件下的水解度达71.03% ± 0.69%。通过高效液相测定蛤蜊肽的分子量分布,得出相对分子质量小于1000 Da的占比为94.29%。对蛤蜊肽进行降血压活性研究,结果显现了良好的血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制活性,其IC₅₀=0.67 mg/mL。本研究结果为红岛蛤蜊的精深加工和利用提供了理论依据。     

蚕蛹蛋白的酶法水解工艺及其口服液的制备

为了制得蚕蛹免疫活性蛋白肽口服液,对蚕蛹蛋白酶解工艺进行了优化。本文选用菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶这五种酶对脱脂蚕蛹蛋白进行酶解,以水解度和小鼠脾细胞的增殖为检测指标,得出碱性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解效果最好,并通过单因素和响应面实验确定蚕蛹蛋白肽酶解的最佳工艺条件为:酶解温度55℃,加酶量6%,酶解时间2 h,pH8,水和底物比20:1,此条件下水解度为19.96%±1.02%,免疫活性OD₄₉₀为0.2512±0.0125。并进行蚕蛹蛋白肽免疫活性口服液的研制,通过感官评定得到最佳工艺为:蔗糖量8%,柠檬酸量1%。     

蛋白酶水解鸡枞菌制备酶解液工艺优化及抗氧化活性

以鸡枞菌为原料,以DPPH·、ABTS^+·、O2^-·清除率及水解度为指标,采用蛋白酶对鸡枞菌进行水解,制备酶解液。以碱性蛋白酶为水解酶,以DPPH·清除率和水解度为参考值,采用单因素和正交试验分析法研究料液比、加酶量、pH、温度、时间对酶解效果的影响。结果表明:应用碱性蛋白酶制备的鸡枞菌酶解液抗氧化效果最佳,酶解条件为料液比1∶25(g/mL),加酶量3500 U/g,pH 7,酶解温度45℃,酶解时间2.5 h。此条件下所得酶解液的DPPH·清除率为73.23%,水解度为44.6%,酶解液对DPPH·、ABTS^+·和O2^-·3种自由基均有清除作用,其IC50分别为0.25,0.39,1.09 mg/mL,但清除能力明显低于同浓度Vc的清除能力。     

双酶法提取甜瓜籽多肽的工艺研究

以甜瓜籽为原料,水解度为考察指标,采用胰蛋白酶和碱性蛋白酶双酶协同酶解法制备甜瓜籽多肽。通过单因素试验和响应面设计试验对酶解条件进行优化,结果表明:酶解的最佳工艺条件为底物浓度为3%、加酶量为4%、酶解时间为180 min、酶解温度为50℃、pH值为8、双酶质量比为6∶4,水解度达到最大值13.85%。     

酶法制备黑豆粕粉多肽的工艺研究

该试验以黑豆粕粉为原料,以蛋白水解度为评价指标,从风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶中筛选水解效果最好的蛋白酶。考察酶解pH、加酶量、酶解温度和酶解时间对黑豆粕粉蛋白质水解度的影响。在单因素试验结果基础上,采用响应面试验对黑豆粕粉多肽的酶解条件进行优化。结果表明,碱性蛋白酶最适合酶解黑豆粕粉多肽,其最佳酶解条件确定为酶解温度55 ℃、酶解pH 9、酶解时间260 min、加酶量4.3%。在此最佳条件下,蛋白水解度为35.23%,较优化前蛋白水解度提高1.93%。     

液压压榨澳洲坚果粕酶解制备多肽工艺优化

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,分析了其常规营养成分含量与氨基酸组成。采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶催化酶解澳洲坚果粕蛋白制备多肽。以水解度为指标,利用单因素试验与正交试验考察了各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响。结果表明：液压压榨澳洲坚果粕中含有32.25%的蛋白质,17 种氨基酸,含量为25.05%。碱性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度影响的主次顺序为：酶解时间＞酶解温度＞加酶量＞酶解pH值＞底物质量浓度,最佳工艺条件为：酶解温度60 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度110 g/L、酶解pH 8.0、加酶量2 400 U/g,在此条件下水解度达到了22.83%。中性蛋白酶各因素影响水解度的主次顺序为：加酶量＞酶解时间＞底物质量浓度＞酶解温度＞酶解pH值,最佳工艺条件为酶解温度55 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度100 g/L、酶解pH 7.0、加酶量3 200 U/g,水解度达到了22.78%。碱性蛋白酶与中性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）。在最佳工艺条件下,碱性蛋白酶酶解液压压榨澳洲坚果粕制备多肽的效果优于中性蛋白酶。