苦荞麸皮蛋白的提取分离及清除自由基作用研究

以苦荞二道荞麸为原料,进行复合蛋白提取和蛋白质Osborne分级分离,并对各蛋白组分进行清除自由基能力研究。结果表明,苦荞麸皮中最主要的蛋白组分为清蛋白,占蛋白总量的51.22%;其次为球蛋白和谷蛋白,分别占13.69%和17.07%;最少的为醇溶蛋白,占8.83%。苦荞麸皮复合蛋白及各蛋白组分均有体外清除自由基作用,其中水溶性清蛋白和球蛋白清除自由基能力高于醇溶蛋白和碱溶蛋白,且在低浓度范围内,随蛋白质浓度增加,清除能力呈线性提高,但在高浓度时却无明显量效关系。     

Osborne法分级提取五味子蛋白及抗氧化活性比较

目的:采用Osborne法提取五味子各组分蛋白,并对其体外抗氧化活性比较研究。方法:用Osborne方法分级提取五味子中的蛋白质,得到四种组分蛋白:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,对其进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶（sodium lauryl sulfate-polyacrylamide gel,SDS-PAGE）电泳分析,并对不同组分蛋白和总蛋白的体外抗氧化活性进行对比研究。结果:分级提取得到的四种蛋白质,清蛋白亚基分子量分布在15~25 kDa和40~55 kDa,球蛋白分子量大致分布在15~25 kDa和35~55 kDa,谷蛋白亚基分子量在15~20 kDa和30~40 kDa。以五味子总蛋白为参照物,体外抗氧化试验结果表明,总蛋白对羟基自由基和DPPH自由基的清除能力强于各分级蛋白;四种分级蛋白对Fe3+的还原能力强于总蛋白;在ABTS自由基清除试验中含量最高的谷蛋白效果最佳,其清除效果在一定的浓度下与Vc接近,同时,其在羟基、DPPH自由基与Fe3+还原能力的试验中抗氧化活性良好,表明五味子组分蛋白中谷蛋白可作为一种良好的抗氧化潜在物质。     

超声辅助提取对菜籽清蛋白抗氧化活性的影响

利用超声辅助和传统水提制备菜籽清蛋白,通过DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)的清除作用以及铁还原能力、亚油酸氧化抑制能力等体外抗氧化活性试验,测定2种菜籽清蛋白的抗氧化活性。结果表明,超声辅助得到的菜籽清蛋白的抗氧化活性得到显著提高(P0.05),对各自由基清除作用强弱表现为:DPPH··OHO2-·;其铁还原能力及亚油酸氧化抑制能力明显提高,表明超声处理显著提高了菜籽清蛋白的抗氧化活性。     

大米蛋白体外消化产物抗氧化活性的研究

为了研究大米清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白体外消化产物的抗氧化活性,用Osborne法从大米粉中提取大米四种蛋白。采用胃-胰蛋白酶分步酶解,选择DPPH·,ABTS+·,·OH自由基清除能力和Fe2+金属离子螯合能力四个指标对消化产物的抗氧化活性进行综合评价。与市售的大豆肽比较,大米四种蛋白经模拟体外消化后具有良好的抗氧化活性。其中醇溶蛋白的消化产物抗氧化活性最好,DPPH·,ABTS+·,·OH自由基清除能力和Fe2+金属离子螯合能力的半抑制浓度分别为30.88 mg/m L、27.61 mg/m L、5.43mg/m L、0.18 mg/m L。大米四种蛋白酶解产物的Fe2+螯合能力半抑制浓度均小于1 mg/m L,具有良好的Fe2+螯合能力。研究结果表明大米四种蛋白的体外消化酶解物具有不同大小的抗氧化活性,分子量集中在181~1000 Da范围内,是一种易于被人体吸收的抗氧化肽。     

青钱柳提取物体外抗氧化活性研究

研究青钱柳不同溶剂提取物的体外抗氧化活性。测定了青钱柳不同溶剂提取物对DPPH自由基的清除作用,用化学发光法测定对超氧阴离子自由基(O·2)和羟自由基(·OH)的清除能力,并用烘箱储藏法测定对油脂的抗氧化活性。实验结果表明,醇提物具有较强的清除自由基能力和抗油脂氧化活性。     

桑黄不同组分抗氧化活性的比较分析

采用铁离子还原/抗氧化力测定法(ferric reducing/antioxidant power assay,FRAP)、邻苯三酚法、水杨酸法,比较研究桑黄不同极性组分的抗氧化活性。结果显示,4种桑黄不同组分体外总抗氧化能力高低顺序依次是:水溶性组分乙酸乙酯组分乙醇组分。在清除羟自由基(·OH)试验中发现石油醚组分对羟自由基清除能力最强,远远高于水溶性成分,乙酸乙酯组分和乙醇组分也很强。在清除超氧阴离子(O~(2-)·)试验中发现乙醇组分活性最高,石油醚组分次之。     

茄子皮红色素抗氧化活性研究

目的:研究茄子皮天然红色素体外抗氧化活性;方法:以抗坏血酸为对照,以Fenton反应产生羟自由基(·OH),肾上腺素自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O-2·)为试验模型,采用紫外分光光度法和荧光分析法,测定茄子皮红色素对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的清除作用;结果:茄子皮红色素对上述自由基均有清除作用,时羟自由基和超氧阴离子自由基清除效果比抗坏血酸好,清除过氧化氢能力弱于抗坏血酸;结论:茄子皮红色素具有明显清除自由基的作用.     

光裸方格星虫纤溶活性蛋白的提取及抗氧化活性研究

目的:从光裸方格星虫提取纤溶活性蛋白并研究其抗氧化能力。方法:光裸方格星虫全虫匀浆后,用3倍体积PBS缓冲液(0.02 mol/L,p H7.5)在4℃条件下抽提6 h,上清液用硫酸铵盐析法粗提纯纤溶活性蛋白;采用普鲁士蓝法测定该蛋白组分的还原能力,在DPPH体系,Fenton体系和邻苯三酚自氧化体系中分别测定对DPPH自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)的清除能力。结果:用30%饱和度硫酸铵沉淀杂质,再用50%饱和度硫酸铵沉淀上清液的纤溶活性蛋白可取得较好的纯化效果,该蛋白组分具有一定还原能力,具有显著的清除DPPH·和·OH作用,且与剂量呈正相关,EC_(50)分别为1.23、6.07 mg/m L,对O_2~-·则有负清除作用。结论:采用两级硫酸铵盐析纯化的光裸方格星虫纤溶活性蛋白具有一定体外抗氧化活性。     

核桃蛋白的分离制备及其酶解物的抗氧化特性

根据蛋白在水溶液、盐溶液、醇溶液及碱性溶液中的溶解性不同,从核桃粕中分离得到四类不同性质的蛋白组分:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,其中球蛋白和谷蛋白含量较高,分别为16.90%和71.40%。以脱脂脱酚粕、谷蛋白和球蛋白为原料,分别制备蛋白酶解液,以DPPH自由基清除率和蛋白质回收率为指标,对蛋白酶解工艺条件进行优化,探讨蛋白酶解液的分子量分布与抗氧化活性的关系。结果表明:在碱性蛋白酶、pH8及酶解9h的条件下,蛋白酶解液有较高的DPPH·清除率和蛋白回收率;脱脂脱酚核桃粕酶解液DPPH·清除率83.29%高于谷蛋白酶解液79.25%和球蛋白酶解液72.27%,蛋白回收率分别为69.83%、66.42%和73.71%。脱脂脱酚粕、谷蛋白和球蛋白酶解液以小分子肽居多,其中相对分子量≤1000的肽段分别占总量的42.73%、63.91%和55.10%,推测其抗氧化活性可能与小分子肽含量有关。     

葛根蛋白组分提取、抗氧化活性及功能特性研究

以葛根为原料，提取葛根蛋白组分，对其进行体外抗氧化活性研究，采用SDS-PAGE和傅里叶红外光谱(Fourier infrared spectroscopy, FT-IR)对葛根蛋白组分进行亚基、结构分析，对谷蛋白进行功能特性研究。结果表明，谷蛋白的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基及·OH清除率均可达90%以上，其IC₅₀值分别为0.118、0.089、0.217 mg/mL,还原能力也较高，为1.33;亚基分析结果显示，葛根醇溶蛋白无条带，葛根清蛋白在10～55 kDa均有分布，葛根球蛋白主要分布于10～25 kDa,葛根谷蛋白主要分布于33～25 kDa;氨基酸分析结果显示，4种葛根分级蛋白的氨基酸含量不同，其中葛根谷蛋白的氨基酸含量最高。FT-IR显示蛋白组分均有典型的蛋白吸收峰。谷蛋白的功能特性研究表明，pH值、温度及离子强度对葛根谷蛋白的持水(油)性、乳化及乳化稳定性、起泡及起泡稳定性有明显影响。     

蒜头果种子中水溶性蛋白的提取及其抗氧化性

采用饱和(NH4)2SO4法对蒜头果种子中水溶性蛋白进行逐级分离,并测定其体外抗氧化活性。结果表明:60%⁸0%饱和度的(NH4)2SO4对蒜头果种子中水溶性蛋白的分离效果最好,同时各级盐析蛋白组分均对超氧阴离子(O2-·)、二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)和羟自由基(·OH)有不同程度的清除能力,其中以40%80%饱和度的(NH4)2SO4对蒜头果种子中水溶性蛋白的分离效果最好,同时各级盐析蛋白组分均对超氧阴离子(O2-·)、二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)和羟自由基(·OH)有不同程度的清除能力,其中以40%⁶0%、60%60%、60%⁸0%和80%80%和80%¹00%3个(NH4)2SO4饱和度段的效果最为明显。结合十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图谱分析,分子质量为30.0 kDa和60.0 kDa左右的2种蛋白可能在蒜头果种子水溶性蛋白的抗氧化反应中发挥着重要作用。     

甜荞蛋白质组分的物化特性研究

研究甜荞不同蛋白组分的物化特性.采用分步提取法分离收集甜荞清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白.结果表明甜荞清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的含量分别占总蛋白的21.91%、19.36%、2.26%和19.95%,等电点分别为pH4.40、5.00、4.80和4.60,变性温度分别为79.39℃、70.36℃、80.04℃和83.09℃,前三种蛋白白色略偏黄,而谷蛋白偏红色.甜荞清蛋白、球蛋白和谷蛋白的必需氨基酸含量丰富.甜荞清蛋白含铁量高,醇溶蛋白含锌量高,球蛋白含镁量高,而铅、锡、砷在各蛋白质组分中的含量均很低.     

莲子心提取液对超氧阴离子和羟自由基的清除作用

本文采用正交实验的方法对不同提取条件下莲子心水提取液和乙醇提取液清除O2·和·OH的能力进行了研究。结果表明:无论是莲子心的水提液还是莲子心的醇提液都表现出了良好的清除超氧阴离子和羟自由基的能力。相比而言,莲子心水提取液清除超氧阴离子的效果比清除羟自由基的效果好,而莲子心乙醇提取液清除羟自由基的效果比清除超氧阴离子的效果好。以综合抗氧化能力为指标,莲子心水提取液中抗氧化的成分提取的最佳条件为料液比为1:12,在90℃时提取0.5h;莲子心醇提取液中抗氧化的成分提取的最佳条件为料液比为1:14,在60℃时提取6h。     

辣椒叶醇提物的体外抗氧化活性

探讨辣椒叶抗氧化作用,采用乙醇提取辣椒叶醇提物,测定其总黄酮含量,并考察该提取物体外总抗氧化活性以及清除超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基的能力。结果表明辣椒叶总黄酮含量为4.2%,醇提取物具有较强的体外抗氧化活性和清除自由基的活性。辣椒叶中含有黄酮以及抗氧化活性成分,具有明显抗氧化作用。     

核桃多肽体外抗氧化活性研究

以提取油脂后的核桃渣为原料分离出核桃蛋白,利用酸性、碱性、中性3种蛋白酶复合酶解核桃蛋白,制备水解度高的核桃多肽。通过测定核桃多肽的总还原能力、超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力、羟自由基(·OH)清除能力、二苯代苦味酰基自由基(DPPH)清除能力,研究核桃多肽的抗氧化活性大小。结果表明,3种酶协同对核桃蛋白进行水解,水解度可达到45.58%,核桃多肽有一定的体外抗氧化活性,其总还原能力、对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基清除率与质量浓度呈量效关系。     

玉米醇溶蛋白肽的超滤膜分级及产物的体外生物活性

为探究分子质量对玉米醇溶蛋白肽体外生物活性的影响,以玉米醇溶蛋白为原料,采用碱性蛋白酶Alcalase酶解制备玉米醇溶蛋白肽,采用截留分子质量为5、3 ku和1 ku的超滤膜对玉米醇溶蛋白肽进行顺次分级分离,获得分子质量大于5 ku、3~5 ku、1~3 ku和小于1 ku 4个组分,通过测定各组分的抗氧化活性和乙醇脱氢酶激活活性,表征超滤膜分级对玉米醇溶蛋白肽体外生物活性的影响。结果表明：用碱性蛋白酶Alcalase酶解玉米醇溶蛋白2 h时,清除DPPH自由基的玉米醇溶蛋白肽组分分子质量分布在1~5 ku范围内;螯合亚铁离子、清除羟自由基和激活乙醇脱氢酶的玉米醇溶蛋白肽组分的分子质量集中在小于1 ku;而玉米醇溶蛋白肽的超氧阴离子自由基清除活性和还原力受其分子质量大小影响较小。综上,分子质量对玉米醇溶蛋白肽的生物活性影响较大,可以选用超滤膜对玉米醇溶蛋白肽活性组分进行分级和富集。     

蛋清蛋白肽体外抗氧化作用模式的研究

目的 研究蛋清蛋白肽抗氧化作用模式。方法 利用超滤技术分离蛋清蛋白木瓜蛋白酶酶解产物; 采用Fenton体系、邻苯三酚自氧化体系和亚油酸自氧化体系分别测定超滤各组分清除羟自由基、超氧阴离子及抑制脂质过氧化的能力, 同时测定各组分对二苯代苦味肼基自由基清除能力(DPPH自由基)、还原能力及对猪胎儿成纤维细胞(porcine embryonic fibroblast, PEF)过氧化损伤的保护作用。结果 超滤各组分中分子量小于3 kDa组分(蛋清蛋白酶解产物-Ⅲ, egg white protein hydrolysate, EWPH-Ⅲ)占蛋清蛋白酶解产物(EWPHs)总量的50.06%。EWPH的抗氧化活性随分子量的降低而增强(P<0.05), 其中EWPH-Ⅲ在浓度为5 mg/mL时, 对羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基的清除率分别为52.86%、35.05%和78.74%, 对亚油酸氧化的抑制率为74.57%。在浓度为2.5 mg/mL时, PEF细胞存活率达到70.06%。结论 蛋清蛋白肽具有较强的抗氧化活性且分子量越小, 抗氧化活性越强, 可以作为氢供体、自由基稳定剂和金属离子螯合剂来抑制过氧化作用。     

芹菜叶提取物抗氧化作用研究

以索氏提取法用60%乙醇提取芹菜叶中的黄酮类物质,分别采用生化试剂盒法测定其总抗氧化能力及对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2·)的清除能力,另对不同油脂的抗氧化性能进行检测,评价芹菜叶提取物的体外抗氧化作用。结果表明:芹菜叶乙醇提取物具有较强的抗氧化作用和清除·OH、O2·的能力,并且随提取物质量浓度增大,其总抗氧化能力及清除自由基能力增强,表现出明显的量效关系;芹菜叶乙醇提取物有显著的防止油脂氧化的作用,其效果优于VC。     

软枣猕猴桃总黄酮体外抗氧化活性

研究软枣猕猴桃总黄酮体外抗氧化活性,采用分光光度法测定软枣猕猴桃总黄酮对DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O2－ ·)、羟自由基( ·OH)清除能力,对铁离子的还原能力以及对脂质体过氧化的抑制作用,并与VC比较。结果表明,软枣猕猴桃总黄酮具有较强清除DPPH自由基的能力和还原力,可有效抑制脂质过氧化,对O2－ ·、 ·OH有一定的清除作用,且抗氧化作用与软枣猕猴桃总黄酮含量呈正相关,软枣猕猴桃总黄酮具有显著的抗氧化活性。     

玛咖蛋白的提取优化及抗氧化研究

采用碱溶酸沉法对玛咖蛋白进行提取,通过正交实验设计优化提取工艺,考察料液比、碱溶时间、碱溶p H、酸沉p H对玛咖蛋白得率的影响,对比分析不同种植基地玛咖蛋白含量的差异。通过测定玛咖蛋白对DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基(·OH)清除能力,评价其体外抗氧化能力。结果表明:提取玛咖蛋白的最佳工艺为:料液比为1:8,碱溶时间为60 min,碱溶p H为9.5,酸沉p H为2.5,测得的玛咖蛋白得率最高,为(17.53±0.14)%。玛咖蛋白具有清除DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基(·OH)能力,秘鲁玛咖表现最佳,其IC50值分别为2.09、0.91、1.21 mg/m L。