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建立肿瘤耐药细胞系是研究肿瘤细胞的重要手段之一,也是探讨肿瘤多药耐药机制及其逆转的基础。采用大剂量间歇诱导法诱导 MCF-7细胞,建立 MCF-7/Adm耐药模型;MTT 法检测耐药倍数;流式细胞术检测MCF-7细胞和MCF-7/Adm细胞中阿霉素的积累量;real-time PCR检测MCF-7/Adm细胞中 A BCG2、A BCC1、A B-CB1基因的表达。结果显示,阿霉素抑制 MCF-7和 MCF-7/Adm 细胞存活的 IC50值分别为0.535μg/mL 和173.275μg/mL ,耐药倍数为324;MCF-7细胞中的阿霉素积累量较MCF-7/Adm明显高;MCF-7/Adm细胞中mR-NA水平 A BCB1基因表达明显上调,A BCG2和 A BCC1基因表达下调。成功获得对阿霉素耐药的人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Adm ,为进一步研究乳腺癌多药耐药机制及其逆转提供有利工具,并且对乳腺癌化疗药物的筛选具有一定的意义。 相似文献
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p38MAPK抑制剂增强阿霉素抑制乳腺癌细胞增殖的体外研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,经阿霉素及阿霉素联合p38MAPK抑制剂(SB20580)作用细胞,通过MTT法测定细胞存活率、光学显微镜观察细胞形态变化。实验数据显示相同药物浓度下,SB20580可以明显降低MCF-7细胞存活率。结果表明p38MAPK抑制剂可以促进阿霉素抑制细胞增殖的效果。 相似文献
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探讨紫杉醇在人乳腺癌细胞株MCF-7中诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2表达及与其诱导的相关途径.用不同浓度的紫杉醇刺激MCF-7细胞,MCF-7细胞生长受抑制.通过荧光实时定量PCR检测,发现紫杉醇刺激MCF-7细胞后硫氧还蛋白结合蛋白-2mRNA的表达升高.经荧光素酶活性检测,得出紫杉醇诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2基因启动子活性的增高.p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂,SB203580抑制了紫杉醇诱导的硫氧还蛋白结合蛋白-2mRNA的表达.因此,紫杉醇抑制MCF-7细胞生长,并通过p38丝裂原激活蛋白激酶途径诱导硫氧还蛋白结合蛋白-2表达. 相似文献
5.
建立人肺癌5-氟脲嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)的耐药细胞株H460/5-FU,并对其生物学特性进行分析。实验采用浓度梯度递增法诱导肺癌细胞耐药,建立肺癌细胞耐药模型。采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT),计算H460和H460/5-FU的半数抑制浓度(IC50)及耐药系数(RI);通过流式细胞仪分析H460和H460/5-FU的细胞周期分布;光镜观察细胞形态变化;通过流式细胞仪进行SP(side population)细胞检测,比较SP细胞所占比例;做细胞生长曲线和集落形成实验观察细胞生长及倍增情况。结果表明5-FU对H460和H460/5-FU的IC50分别为28.7μg/mL和90.44μg/mL,RI为3.15;H460/5-FU细胞倍增时间缓慢,DNA复制时间延长,且含有更多的SP细胞。 相似文献
6.
《浙江理工大学学报》2015,(9)
为了考察6种不同结构黄酮类化合物(5-OH-3′-OCH3黄酮,7-OH-3′-OCH3黄酮,7-OH-2′-OCH3黄酮,3,5,7,4′-4OH黄酮,5,7,3′,4′-4OH黄酮,Neodiosmin)对乳腺癌细胞MCF7的药物敏感性,综合运用MTT法,Hoechst 33342染色法以及流式细胞术评价黄酮类化合物与阿霉素联用对MCF7的抑制效果。结果表明,部分黄酮类化合物细胞毒性较低,其中5-OH-3′-OCH3黄酮,7-OH-3′-OCH3黄酮,3,5,7,4′-4OH黄酮能明显增强阿霉素对MCF7细胞的抑制作用。同时发现黄酮类化合物与阿霉素联用在MFC7细胞上所表现出来的协同作用可能与黄酮类化合物A环上5位与7位的羟基取代相关。 相似文献
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家蝇幼虫凝集素的分离纯化及其抑制MCF-7细胞活性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
家蝇幼虫血淋巴粗提液经过亲和层析,分离出3种与D-半乳糖特异性结合的蛋白,经高效液相色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳。分离出分子质量为38ku的家蝇幼虫凝集素(MLL-2),该组分具有明显的凝血活性.圆二色谱结果表明,MLL-2的二级结构主要是以/3折叠(80.3%)和无规卷曲(19.5%)的构象存在.MTT实验结果显示,MLL-2对人乳腺癌(MCF-7)细胞的生长具有明显的抑制作用,其抑制效果具有时间和浓度依赖性.形态学观察表明,MLL-2处理过的MCF-7细胞出现凋亡小体、染色质浓缩凋亡现象.经流式细胞仪分析MCF-7细胞被阻遏在G2/M期,并且凋亡率随作用时间的延长而增加.MLL-2通过诱导MCF-7细胞发生凋亡,从而起到抑制肿瘤细胞生长的作用. 相似文献
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由于肿瘤的异质性,抗肿瘤药物作用不同的肿瘤模型时表现出不同的敏感性和不同的作用机制.将水飞蓟宾分别作用乳腺癌细胞MCF-7和卵巢癌细胞SK-OV-3,研究其对细胞增殖、细胞凋亡的影响及可能的作用机制.与卵巢癌细胞SK-OV-3相比,水飞蓟宾对乳腺癌细胞MCF-7具有明显的细胞增殖抑制及诱导凋亡能力,并都通过激活caspase 3的方式启动凋亡程序.此研究结果将为肿瘤的个体化治疗和临床实验提供可靠的保证. 相似文献
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柠檬苦素类化合物对人乳腺癌细胞(MCF—7)的生长抑制及细胞周期动力学的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
为了探讨柠檬苦素 类似物 对乳腺癌细胞MCF-7生长抑制和对细胞周期的影响,应用MTT法和流式细胞仪检测癌细胞株生长和细胞周期。结果显示柠檬苦素类似物明显抑制MCF-7的生长,抑制率高于70%,并随作用时间和剂量增加其效果增加;柠檬苦素可以影响细胞周期G2/M期,柠檬苦素类似物可以明显抑制MCF-7的增殖,并有可能是通过阻滞细胞在G2/M期而降低其生长能力。 相似文献
10.
近年来有研究表明黑升麻提取物阿科特素具有抗肿瘤活性。但其分子机制仍然不够清楚。研究用基因集富集分析的方法分析了20μg,/mL和40μg/mL两种不同质量浓度的阿科特素处理乳腺癌细胞MDA—MB--4536h或24h后的基因表达谱,获取处理后的乳腺癌细胞中的基因集富集情况.结果表明:处理6h的乳腺癌细胞中没有获得有统计学意义的基因集,而在处理24h的乳腺癌细胞中与细胞分裂、细胞周期等相关的生物学通路则表达下调,40Ixg/mL阿科特素处理还可以使得乳腺癌细胞中大分子降解相关通路表达上调.由于阿科特素可以促进细胞凋亡并抑制细胞周期,为其今后用于乳腺癌的预防和治疗的可能性提供了良好的理论依据. 相似文献
11.
探讨冬凌草甲素(oridonin)对人乳腺癌细胞Bcap-37的增殖、凋亡以及引起细胞凋亡机制.以不同浓度的Ori处理Bcap-37细胞,通过MTT法检测细胞生长抑制率;应用流式细胞分析术检测细胞凋亡;Western Blot检测细胞发生凋亡的机制.结果是48~96 μmol/L的Ori可显著抑制Bcap-37细胞的增殖(P<0.05).48 μmol/L的Ori作用24 h后,细胞的增值抑制率达到了40%,而96 μmol/L的Ori只需处理12 h,增值抑制率竟达到了50%.96 μmol/L Ori处理24 h后,Bcap-37细胞的凋亡率为21.6%.Western Blot检测到了Fas的上调,细胞色素c的释放和随后Caspase 9的激活及其下游信号蛋白Caspase 3和它的底物PARP,ICAD的剪切.进一步检测到Survivin的下调和GADD34的上调.基于这些实验结果,推测冬凌草甲素作为一种潜在的抗乳腺癌制剂,诱导乳腺癌细胞Bcap37发生凋亡的发生可能与Survivin和GADD34相关. 相似文献
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实验采用PCR法获得CD1d基因片段,将其插入慢病毒pReceiver-Lv201载体(带GFP荧光)中获得EX-S0249-LV201重组质粒,经转染试剂EndoFectin-Lenti转染到293T细胞中获得慢病毒LP-S0249-LV201,用包装获得的慢病毒感染胰腺癌Panc-1细胞,在不同时间段用倒置荧光显微镜观察绿色荧光,并用反转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法验证获得的表达细胞株.实验结果显示经RT-PCR和Western blotting检测证实慢病毒LP-S0249-LV201 转染至Panc-1细胞株后,该细胞株表达CD1d基因和蛋白,成功建立了稳定表达CD1d基因的Panc-1细胞系,为进一步研究CD1d基因在胰腺癌免疫基因治疗中的作用奠定基础. 相似文献
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Hsp27高表达和低表达乳腺癌细胞的比较蛋白质组学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以Hsp27高表达的乳腺癌细胞株MCF-7为亲本,分别通过导入靶向Hsp27的shRNA敲减载体和对照空载体的方法,构建了Hsp27敲减细胞株和相应对照细胞株.然后对对照细胞株与Hsp27敲减细胞株3B2进行了比较蛋白质组学研究,结果发现在双向凝胶电泳的差异蛋白质表达谱上,共有7个明显差异蛋白点,经过MALDI-TOF-TOF质谱分析和数据库搜索,共鉴定出了4个差异蛋白点,它们分别是Hsp27和另外2种差异表达的蛋白OVCA2和PYRG2.本实验构建了Hsp27敲减的稳定细胞模型并为进一步了解Hsp27的生物学功能提供了新的线索. 相似文献
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采用RNA干扰的方法,通过稳定转染表达靶向雌激素受体α的shRNA的载体,由ERα阳性的乳腺癌细胞系(MCF-7)构建出稳定ERα敲减细胞株,同时构建转染了阴性对照载体的细胞株用作对照.类胰岛素生长因子-I处理稳定雌激素受体α敲减细胞株以及对照细胞株,双向电泳技术分析两种细胞蛋白质组的差异,胶内酶解结合质谱技术鉴定差异表达的蛋白质,在选择的27个差异表达蛋白中,经检验最终确定了11种差异表达显著的蛋白.这是第一次用蛋白质组学方法研究雌激素受体α在IGF-Ⅰ/IGFR信号通路中的作用,研究结果为理解雌激素和IGF-Ⅰ这两个最重要的促乳腺癌分裂因子之间的相互作用提供了线索. 相似文献
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张晶 《西安工业学院学报》2001,21(3):189-195
简述了光学二次谐波振荡原理,并用这种非线性光学方法,在表面共振激发条件下,通过入射光的0°和45°入射,对吸附了碱性金属Na原子的半导体材料Si(111)7×7表面结构的对称性进行了研究.给出了最新的实验结果,并加以讨论.实验结果表明,由于Na原子在Si(111)7×7表面上的吸附,使得该表面原本有序的3m对称结构发生了很大的变化. 相似文献
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对于MgO/Ni系FGM材料,分别用实验和微观力学模型测定和计算了用于热应力缓和设计的各物性参数。结合烧结体的显微结构,讨论了二种结果之间存在差异的原因。用有限元方法计算了FGM的热应力,得到MgO/Ni系FGM的综合设计准则。 相似文献
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本文报道了一种新型固定化体系:海藻酸钠—Fe_3O_4—BaCl_2.并研究了其固定化5~(?)酿酒酵母细胞的稳定性和活性.结果表明这种改良固定化细胞具有优良的稳定性和活性。本文还研究了Fe_3O_4浓度、底物浓度、PH及固定化细胞颗粒尺寸对其活性的影响。对5~(?)酿酒酵母细胞,确定了其底物浓度。Fe_3O_4浓度及PH′的最佳范围。 相似文献
18.
多层反膜系反射特性的计算机模拟计算及其应用 总被引:2,自引:0,他引:2
王珊 《上海工程技术大学学报》2006,20(1):49-53
根据薄膜光学与膜系设计的原理,对非四分之一波长的多层反射膜系的反射特性进行了计算,总结出高折射率薄膜的光学厚度与膜系的倍频反射带之间的关系,并以此指导设计出特殊要求的多层反射膜系. 相似文献
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采用表面引发原位聚合法制备了PMMA/Al复合粒子,其过程分为2步:引发剂在铝粉表面的吸附、单体在铝粉表面的聚合。研究表明,只有在pH〈7的条件下,引发剂才可能吸附在铝粉表面,其吸附过程可用与Langmuir吸附等温式相似的经验公式来描述;当m(MMA)/m(Al)=60%、m(APS)/m(MMA)=10%时,单体转化率、接枝率与接枝效率可达较优值;复合粒子的失重是由于有机聚合物的分解造成的,而其增重则是由于AlN形成的缘故。 相似文献
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从杭州市河道污水出口的淤泥中筛选到一株邻苯二甲酸二乙酯(DEP)降解菌HZ3,研究了该菌株的休止细胞对DEP的降解特性,结果表明:该休止细胞浓度为2×108~6×108 cpu/mL,pH7.0,30℃,180r/min条件下,可在6h内将118mg/L的DEP完全降解,37℃下的降解效率也无明显差异,加入0.01g/L Tween-80则对降解效率产生了一定的抑制.休止细胞对118~1 436mg/L的DEP表现出较高的降解能力,而生长细胞则对1 062mg/L的DEP无降解能力. 相似文献