4-（3，5-二氨基苯甲酸甲酯基）三苯胺的合成及其聚酰亚胺

以三苯胺为原料,通过Vilsmeier—Haack反应、酯化和还原等反应合成了含三苯胺基团的二胺单体4-（3,5-二氨基苯甲酸甲酯基）三苯胺,然后使它和4,4’-二氨基二苯醚与2,2-双[4-（3,4-二羧酸基苯氧基）苯基]丙烷二酐在N-甲基-2-吡咯烷酮溶剂中进行共聚合反应,经热环化脱水得到含三苯胺基团的聚酰亚胺。采用FTIR、1HNMR、UV—Vis、荧光分光光度计等仪器对合成的聚酰亚胺结构和性能进行了表征。结果表明,含三苯胺基团聚酰亚胺呈现明显的荧光特性。     

N,N-二(2-羟丙基)-2,4,6-三溴苯胺的合成

以苯胺、环氧丙烷和溴素为原料，合成了M，N-二(2-羟丙基)-2，4，6-三溴苯胺(BHTBA)。经红外光谱和元素分析等方法确认了BHTBA的化学结构。实验考察了物料配比、反应温度、反应时间、溶剂等条件对中间体N，N-二(2-羟丙基)苯胺及N，N-二(2-羟丙基)-2，4，6-三溴苯胺产率的影响。BHTBA可用作合成聚氨酯的阻燃型扩链剂。     

1-甲氧基羰基-3-（2’-硝基-5’-丙硫基苯）硫脲的合成

以3,4-二硝基氯苯为起始原料,首先经氨化还原得到5-氯2-硝基苯胺;将得到的产物在碱性条件下与正丙硫醇反应生成2硝基5丙硫基苯胺;然后在丙酮中与硫氰酸钠和氯甲酸甲酯反应得到1甲氧基羰基3(2’硝基-5-’丙硫基苯)硫脲,总收率56.40%,纯度99.0%。     

2-叔丁基-3-苯硫基-1H-吲哚的合成研究

首先邻碘苯胺与3,3-二甲基丁炔通过Sonogashira交叉偶联反应生成邻-(3,3-二甲基-1-丁炔基)苯胺,然后邻-(3,3-二甲基-1-丁炔基)苯胺再与二苯基二硫醚在碘单质的作用下发生亲电环合反应合成2-叔丁基-3-苯硫基-1H-吲哚,重要的是该步反应是在无金属条件下进行的。反应总收率84.7%,产物结构经由NMR和MS确证。     

N-(3-氯丁基-2-基)-2,6-二异丙基苯胺的合成及化学品安全分析

以二异丙基苯胺和3-氯-2-丁酮为原料,首次合成和制备了一种新型的二异丙基苯胺类配体,N-(3-氯丁基-2-基)-2,6-二异丙基苯胺;利用核磁共振(1H NMR,13C NMR)的方法对产物的结构进行表征.对反应温度、反应时间进行了优化,优化后的反应条件下可以成功得到目标产物.该合成方法为未来新型二异丙基苯胺类配体的...     

4-硝基-4′-N,N-二(2-羟丙基)氨基偶氮苯的合成与表征

以苯胺、环氧丙烷为原料制备了N,N 二(2 羟丙基)苯胺(NHPPA),然后NHPPA与对硝基苯胺通过重氮偶合反应制备了一种具有推拉电子结构的偶氮化合物4 硝基 4′ N,N 二(2 羟丙基)氨基偶氮苯(NHPA)。用元素分析、核磁共振、红外光谱分析了NHPA的结构,用紫外可见光谱研究了NHPA的吸收特性,在260和400nm附近发现特征吸收峰。并探讨了反应时间以及苯胺与环氧丙烷的量比对N,N 二(2 羟丙基)苯胺产率的影响,发现适宜的反应条件为:n(苯胺)∶n(环氧丙烷)=1 0∶2 3,反应时间为4h,相对于苯胺的产率可达92%。     

4-硝基-4′-N,N-二(2-羟丙基)氨基偶氮苯的合成与表征

以苯胺、环氧丙烷为原料制备了N,N 二(2 羟丙基)苯胺(NHPPA),然后NHPPA与对硝基苯胺通过重氮偶合反应制备了一种具有推拉电子结构的偶氮化合物4 硝基 4′ N,N 二(2 羟丙基)氨基偶氮苯(NHPA)。用元素分析、核磁共振、红外光谱分析了NHPA的结构,用紫外可见光谱研究了NHPA的吸收特性,在260和400nm附近发现特征吸收峰。并探讨了反应时间以及苯胺与环氧丙烷的量比对N,N 二(2 羟丙基)苯胺产率的影响,发现适宜的反应条件为:n(苯胺)∶n(环氧丙烷)=1 0∶2 3,反应时间为4h,相对于苯胺的产率可达92%。     

甲基取代三苯胺类化合物的合成

以氯化亚铜、1,10-邻菲咯啉为催化剂,二苯胺及其衍生物与对碘甲苯经U llm ann反应合成了4-甲基三苯胺(MTPA)、4,4′-二甲基三苯胺(DMTPA)和4,4,′4″-三甲基三苯胺(TMTPA),收率分别达到了94.61%、94.76%和94.93%,产物的HPLC纯度都高于99.50%,并用红外光谱、元素分析及质谱对产物结构和组成进行了鉴定。     

新型Ti系FI催化剂的合成及其催化乙烯“活性”聚合的研究

采用以配体为中心的催化剂设计理念,设计并合成了一种新型Ti系FI催化剂双[N-(3-叔丁基水杨醛)-2,6-二氟苯胺-4-苯乙烯基苯胺]二氯化钛(IV)(2F-BSFI)。采用核磁氢谱(1H-NMR)、核磁碳谱(13C-NMR)和傅里叶红外(FTIR)对催化剂配体N-(3-叔丁基水杨醛)-2,6-二氟苯胺-4-苯乙烯基苯胺(2F-BS)进行了表征。用1H-NMR、13C-NMR、元素分析(EA)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)表征了催化剂结构。以2F-BSFI和助催化剂甲基铝氧烷(2F-BSFI/d-MAO)为催化体系催化乙烯聚合,考察了聚合时间、温度、助催化剂用量对催化性能的影响。结果表明,随着聚合时间的增加,产物分子量分布指数(PDI)稳定在较低水平,产物数均分子量Mn几乎呈线性增长,说明该催化剂催化乙烯聚合具有拟活性聚合特征。     

3-(2-甲基-6-甲基硫代苯基)-4,5-二氢化异噁唑的合成研究

以2-(4,5-二氢异噁唑-3-基)-3-甲基苯胺为原料,铜为催化剂在无水的条件下经亚硝酸叔丁酯重氮化合成3-(2-甲基-6-甲基硫代苯基)-4,5-二氢化异噁唑。探索了反应温度、反应时间、催化剂的用量等因素对反应的影响,优化条件为反应温度为60℃,反应时间为1.5 h,n(2-(4,5-二氢异噁唑-3-基)-3-甲基苯胺)∶n(催化剂)=1∶3,反应收率为98.6%,产品结构经LC-MS、~1H NMR确证。     

中蜂囊状幼虫病毒VP1基因在杆状病毒表达系统中的表达

目的利用杆状病毒系统表达中蜂囊状幼虫病毒(chinese sacbrood virus,CSBV)结构蛋白VP1基因。方法提取感染CSBV的中蜂囊状幼虫总RNA,RT-PCR法扩增VP1基因,克隆至载体pFastBacI中,构建重组转座质粒pFastBacI-VP1,转化至感受态大肠埃希菌DHl0Bac中,获得重组杆粒rBacmid-VP1,转染至昆虫细胞sf9中,获得第1代重组杆状病毒,经透射电镜观察杆状病毒粒子;病毒连续传代3次后,RT-PCR鉴定重组杆状病毒,SDS-PAGE检测VP1蛋白的表达情况,Western blot检测表达产物的反应原性。结果重组杆粒经PCR鉴定构建正确;第1代重组杆状病毒经透射电镜观察,可见杆状病毒粒子;重组杆状病毒以M13通用引物和VP1基因特异引物进行PCR扩增,分别可见3 263和963 bp的片段,大小均与理论值一致;CSBV VP1基因能够在sf9细胞中表达,表达的重组VP1蛋白相对分子质量约31 000,可与兔抗CSBV-VP1阳性血清发生特异性反应。结论成功利用杆状病毒表达系统表达了CSBV VP1基因,为深入研究CSBV的感染机制和蜜蜂的免疫机制以及中蜂囊状幼虫病血清诊断试剂盒的研制奠定了基础。     

(+)-1-苯基乙磺酸的合成

以乙基苯和溴为起始原料,光照条件下制得1-溴乙苯;与硫脲缩合得S-(1-苯乙基)异硫脲氢溴酸盐;在碱催化下分解得1-苯乙硫醇;经过氧化氢氧化、氢氧化钠成盐得(±)-1-苯基乙磺酸钠[(±)-1-PES-Na];再经D-对羟基苯甘氨酸(D-HPG)拆分及分离制得(+)-1-苯基乙磺酸[(+)-1-PES]。(±)-1-PES-Na的合成总收率为29.6%;拆分收率为69.6%[以(+)-PES理论量计]。结构经IR、1H NMR确证。     

紫外辐射对皮肤角化细胞的影响及其防护的研究

利用紫外线照射人皮肤角化细胞，采用流式细胞技术观察细胞 进程和细胞凋亡情况，并研究了人参皂甙单体Rg-1和Rb-1对紫外辐射的保护.作用。结果表明一定剂量的紫外线可明显诱导人皮肤角化细胞S期阻滞及细胞凋亡，人参皂甙单体Rg-1和Rb-1能够释放S期阻滞，抑制细胞凋亡，对细胞的紫外辐射损伤具有不同程度的保护作用，为开发相关的抗紫外辐射护肤产品提供理论依据。     

固体酸催化合成3,5-二乙酰氧基苯乙烯

以3,5二-羟基苯乙酮(4)为原料,经三步反应制得3,5二-乙酰氧基苯乙烯(1)。在硫酸催化下化合物(4)与乙酸酐反应,得到3,5二-乙酰氧基苯乙酮(3),收率92%,对于化合物(3)进行了1H NMR表征;化合物(3)经催化加氢,得到1-(1羟-基乙基)-3,5二-乙酰氧基苯(2),收率98%,对于化合物(2)进行了1H NMR表征;化合物(2)在固体酸催化下反应得到3,5二-乙酰氧基苯乙烯(1),制备化合物(1)的反应条件为:m[化合物(2)]∶m(固体酸)=5∶1,110℃回流5 h,收率95%,纯度98%,对化合物(1)进行了IR,1H NMR,MS表征,并对化合物(1)的1HNMR,MS表征结果进行了进一步分析。     

滑石粉对PB-1熔融、结晶行为的影响

采用双螺杆挤出机熔融制备了聚丁烯–1(PB-1)/滑石粉复合材料,研究了滑石粉含量对PB-1熔融及结晶行为的影响。结果表明,滑石粉显著促进了PB-1的结晶过程,其成核能力在滑石粉质量分数为1%时最佳。非等温结晶动力学研究表明,在滑石粉的实验用量范围内(1%～10%),要达到相同的结晶度,PB-1/滑石粉复合材料的完成温度明显高于纯PB-1的完成温度。当滑石粉质量分数为1%～5%时,要达到相同的结晶度,PB-1/滑石粉所需的时间明显比纯PB-1短;当用量为7%时稍短;当用量为10%时又稍长。但滑石粉不影响PB-1的依热成核方式和三维生长机制。偏光显微镜结果表明滑石粉对PB-1的异相成核作用显著。广角X射线衍射研究表明滑石粉阻碍了PB-1由晶型Ⅱ向晶型Ⅰ的转变过程,使晶型转变变缓。     

1H-咪唑并[4,5-c]喹啉衍生物的合成

以1-(2-甲基丙基)-4-氯-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉(Ⅰ)为原料与哌啶反应合成了1-(2-甲基丙基)-4-[哌啶-1-基]-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉(Ⅱ),当用甲苯为溶剂,n(Ⅰ)∶n(哌啶)∶n(K2CO3)=1∶2∶0.3时,Ⅱ的收率为88.5%;Ⅰ与三倍过量的吗啉反应合成1-(2-甲基丙基)-4-[吗啉-4-基]-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉(Ⅲ),收率86.5%;Ⅰ与三倍过量的哌嗪在体积分数50%的1,4-二氧六环水溶液中反应合成1-(2-甲基丙基)-4-[哌嗪-1-基]-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉(Ⅳ),收率59%。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的合成工艺均较简单。     

Ipr1和GFP基因真核共表达穿梭质粒的构建及其在人肺癌细胞中的表达

目的构建胞内病原体抗性基因1(Ipr1)和绿色荧光蛋白(GFP)基因真核共表达穿梭质粒,并在人肺腺癌细胞A549中表达。方法采用PCR方法,分别从质粒pEGFP-C1-Ipr1和pEGFP-C1中扩增Ipr1和GFP基因,将GFP基因、分枝杆菌复制子OriM和Ipr1基因同时克隆入多启动子真核共表达载体pBudCE4.1中,构建pBud-GFP-OriM-Ipr1穿梭质粒,脂质体法转染A549细胞,荧光显微镜观察GFP的表达,免疫组化方法检测Ipr1蛋白的表达。结果酶切和测序分析表明,pBud-GFP-OriM-Ipr1真核共表达穿梭质粒构建正确。转染A549细胞后,荧光显微镜下可观察到转染细胞中有GFP表达,免疫组化法可检测到Ipr1蛋白的表达,且定位于细胞核内。结论已成功构建Ipr1和GFP基因真核共表达穿梭质粒,为进一步研究Ipr1抗结核的功能奠定了基础。     

H1N1亚型流感病毒M1基因重组杆状病毒的构建及鉴定

目的构建H1N1亚型流感病毒M1基因重组杆状病毒,并进行鉴定。方法 PCR扩增H1N1亚型流感病毒(A/PR/8/34)全长M1基因,与pFastBacdua(lpFBD)载体连接,构建重组杆状病毒转移载体pFBD-M1,转化含有Bacimd和Helper质粒的DH10Bac感受态细胞,获得骨架质粒rBacmid-M1,将其转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-M1。采用噬斑形成法检测病毒滴度,PCR法检测M1基因的插入,间接免疫荧光、Western blot和ELISA法检测M1蛋白的表达。结果重组杆状病毒骨架质粒rBacmid-M1经PCR鉴定证实构建正确;第3代rBac-M1病毒滴度为3×108pfu/ml;感染rBac-M1的sf9细胞经PCR扩增可见3 300 bp的条带,间接免疫荧光检测可见特异性绿色荧光,Western blot检测可与鼠抗流感病毒(PR8)和鼠抗M1蛋白(PR8)多克隆抗体发生特异性反应,ELISA检测M1蛋白可与鼠抗流感病毒(PR8)多克隆抗体发生特异性反应,具有良好的反应原性。结论已成功构建了H1N1亚型流感病毒M1基因重组杆状病毒,为进一步研究流感病毒M1的功能及新型流感疫苗开发奠定了基础。     

Differential effect of lysophospholipids on activities of human plasma paraoxonase1, either soluble or lipid-bound

Interaction of paraoxonasel (PON1) with lysophospholipids was examined with respect to activity regulation and binding property. Paraoxonase activity of purified PON1 was partially inhibited by palmitoyl-lysophosphatidylglycerol (palmitoyl-lysoPG) and lysophosphatidylinositol (lysoPl), which had a stimulatory effect on arylesterase and diazoxonase activities. The selective inhibition of paraoxonase activity by palmitoyl-lysoPG, characterized by noncompetitiveness and charge interaction, was also observed with HDL-or dimyristoylphosphatidylcholine (DMPC)-bound PON1. Mean-while, lysophosphatidylcholine (lysoPC) stimulated all three activities of purified PON1, although it stimulated DMPC-bound or HDL-bound PON1 to a lesser extent. The stimulatory action of lysophospholipids was observed around their CMC, suggesting that micelle formation of lysophospholpids might be involved in the stimulation of PON1 activity. Presumably in support of this, the tryptophan fluorescence intensity of PON1 was increased by lysophospholipids at concentrations required for the stimulation of PON1 activity. Separately, lysoPC stimulation was less remarkable for DMPC-bound PON1 than for either dimyristoylphosphatidylserine (DMPS)-or dimyristoylphos-phatidylglycerol-bound PON1, suggesting a tight association between PON1 and DMPC. In support of this, the stimulatory role of apolipoprotein A-I was less prominent for DMPC-bound PON1 than for DMPS-bound PON1. Taken together, these data suggest that the inhibition of paraoxonase activity by lysoPG or lysoPI may be due to binding to a site distinct from the active center, whereas the stimulation by lysophospholipid may be ascribed to the micelle formation around the lipid-associable region of PON1.     

双亚型(H3/H1)流感病毒血凝素基因真核表达质粒的构建及其在HeLa细胞中的表达

目的构建双亚型(H3/H1)流感病毒血凝素(HA)基因真核表达质粒,并在HeLa细胞中进行表达。方法通过PCR分别改造流感病毒H1亚型HA1和H3亚型HA基因片段,在融合片段间引入(G4S)3柔性linker和口蹄疫病毒2A蛋白linker。采用DNAstar结合生物信息学软件InsightⅡ分析后,对其空间构象进行模拟。将H1HA1-H3HA融合基因片段克隆至真核表达载体pVAX1 CMV启动子下游。通过脂质体法转染HeLa细胞,RT-PCR法检测转染细胞中目的基因mRNA的转录,间接免疫荧光检测转染细胞中目的蛋白的表达。结果表达双亚型(H3/H1)流感病毒血凝素基因的重组真核表达质粒pVAX1-H3HA-H1HA1经酶切和测序证明构建正确。转染重组质粒的HeLa细胞可检测到目的基因mRNA的转录和目的蛋白的表达。结论已成功构建了真核表达质粒pVAX1-H3HA-H1HA1,并可在HeLa细胞中正确转录与表达,为H3、H1亚型流感病毒双价核酸疫苗的研究奠定了基础。