贵州望谟板栗冷藏期致腐真菌鉴定及其生物学特性研究

板栗腐烂由多种真菌协同侵染造成,尤其冷藏期栗果腐烂率可达15%～20%。该研究以贵州望谟主产区板栗为实验对象,对其冷藏期进行致腐真菌分离纯化、柯赫氏法则致腐性测定、形态学和分子生物学鉴定。结果表明,分离鉴定出的3株致腐真菌分别为层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)、皮落青霉(Penicillium crustosum)和链格孢菌(Alternaria alternata)。生物学特性试验表明,层出镰刀菌菌丝生长和产孢最适pH值分别为7.0和8.0,最适菌丝生长和产孢碳源为乳糖,氮源为甘氨酸,温度为25℃,光照条件为24 h黑暗;皮落青霉菌丝生长最适碳源为乳糖、pH值为8.0,最利于产孢的碳源为大豆多糖、pH值为7.0,菌丝生长和产孢最适温度为25℃、氮源为尿素、光照条件为24 h黑暗;链格孢菌分别以蔗糖、麦芽糖为碳源时菌丝生长最快、产孢量最大,菌丝生长和产孢最适温度为25℃、氮源为蛋白胨、pH值为9.0、光照条件为24 h黑暗。贵州望谟板栗冷藏期主要致腐真菌的确定,可为板栗腐烂有效防控及致腐机制研究提供科学依据。     

棘孢木霉T-6对烟草促生及对黑胫病和根黑腐病的抗病作用

利用生防菌防治土传病害是植物病害防治中的重要措施,在温室盆栽条件下研究了棘孢木霉T-6对烟草促生和抗病效果。结果表明,棘孢木霉T-6对烟草黑胫病菌、烟草根黑腐病菌的菌丝生长抑制率分别达49.62%、59.23%;温室盆栽条件下,棘孢木霉T-6对黑胫病和根黑腐病的防治效果分别达到74.45%和75.14%。棘孢木霉T-6处理后提高了烟草叶片叶绿素含量、类胡萝卜素含量和超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶的活性,棘孢木霉T-6处理的烟株生长状况明显好于对照。棘孢木霉T-6能够促进烟株生长和提高烟草对黑胫病和根黑腐病的抗性,具有良好的应用潜力。     

河南烟草镰刀菌的分子鉴定及致病性分析

为明确河南省不同烟叶产区危害烟草的镰刀菌种类,以河南省烟叶产区典型镰刀菌根腐病烟株及烟田土壤为供试样品,采用组织分离法和土壤分离法获得纯化菌株,根据菌株形态和rDNA-ITS序列分析对病原菌进行鉴定,并采用无创接种法测定病原菌对烟草的致病性。结果表明,获得的98个菌株在PDA培养基上均产生白色菌丝,大型分生孢子呈镰刀形或马特形,无色、多孢;小型分生孢子呈肾形、椭圆形或卵形,无色、多无分隔。序列比对结果显示,所分离的98株菌分属尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）、茄病镰刀菌（Fusarium solani）、层出镰刀菌（Fusarium proliferatum）、木贼镰刀菌（Fusarium equiseti）和Fusarium nematophilum。致病性分析结果表明,尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌、层出镰刀菌和木贼镰刀菌对烟苗具有致病性;48株致病菌中豫南烟区烟草镰刀菌根腐病致病性病原菌为尖孢镰刀菌、层出镰刀菌和木贼镰刀菌,以尖孢镰刀菌为主;豫中为尖孢镰刀菌;豫东、豫西为茄病镰刀菌和尖孢镰刀菌。因此,尖孢镰刀菌为全省烟区重点防控对象,豫南烟区还需加强层出镰刀菌和木贼镰刀菌的防控,豫东、豫西需防范茄病镰刀菌的发生。      

葡萄溃疡病病菌(Botryosphaeria dothidea)的诱导产孢方法评价

分生孢子是病原真菌研究中的重要材料,本试验的目的是筛选诱导葡萄溃疡病病菌(B.dothidea)大量快速产孢的有效方法.采用不同培养基、菌丝打断法和接种葡萄绿枝条3种方法,选取葡萄溃疡病病菌JT-03和ZJZ-01菌株以产孢时间和产孢量对3种方法进行评价.结果表明,JT-03和zJZ-01菌株在WA(添加2％的葡萄枝粉末)、OA,DA和PSA 4种培养基上产孢慢且产孢量都很少;在PDA上培养7d开始产孢,产孢较多;菌丝打断法在涂断菌丝2d后产生分生孢子,产孢量不稳定;接种葡萄绿枝条4～5d时在病部即可以观察到产生大量分生孢子.因此,采用菌丝打断法适宜用于鉴定病原菌,接种葡萄绿枝条可以快速得到大量分生孢子,以用于致病性鉴定和侵染机理等研究.     

采后橄榄果实果腐病菌的分离与鉴定

果腐病是导致采后橄榄果实腐烂的主要病害。为明确导致采后橄榄果实果腐病的病原菌种类,本文以福建省主栽橄榄品种‘长营’果实为研究对象,试验采用组织分离法和传统纯化培养法分离采后橄榄果实果腐病病原菌,并用柯赫氏法则测定其致病性;利用真菌基因组DNA提取试剂盒法提取橄榄果实果腐病病原菌DNA,运用PCR技术对其r DNA-ITS基因序列进行扩增,并测定扩增产物的核苷酸序列,再用局部序列比对基本检索工具(BLAST)方法对测序结果进行同源性分析;采用MEGA 6.0软件的邻接法(Neighbor-joining,NJ)构建橄榄果实果腐病病原菌系统发育树,结合形态学、分子生物学及系统发育分析法鉴定橄榄果实果腐病病原菌种类。结果表明,导致采后橄榄果实果腐病的病原菌为小孢拟盘多毛孢(Pestalotiopsis microspora)。本研究为进一步控制采后橄榄果实果腐病、延长橄榄果实贮藏保鲜期提供科学依据。     

生防真菌与氨基寡糖素组合对烟草黑胫病和根黑腐病的防治

针对烟草黑胫病和根黑腐病两种烟草土传病害日益加重的现状,利用生防真菌棘孢木霉MX菌株和产紫青霉Q2菌株分别与植物诱抗剂氨基寡糖素进行组合,在盆栽条件下测定了其分别在两种病害胁迫下的抗病效果。结果表明,产紫青霉Q2和棘孢木霉MX对烟草黑胫病菌和根黑腐病菌均有较强的拮抗作用,其发酵滤液能有效抑制两种病原菌的生长,与氨基寡糖素组合后能够更好地促进烟草幼苗的生长,对黑胫病和根黑腐病的防治效果均达到65%以上,能显著提高发病烟草中防御酶PAL、SOD、POD的活性。     

黑腹果蝇和斑翅果蝇对‘玫瑰香’葡萄酸腐病的影响

为了明确葡萄采收期致腐病菌与黑腹果蝇、斑翅果蝇的关系,模拟田间条件,将8种与葡萄酸腐病相关的真菌分别与两种果蝇联合侵害葡萄果实,观察葡萄的发病率与病情指数。结果表明,黑腹果蝇和8种真菌在有损伤‘玫瑰香’葡萄上的发病率均为100%;黑腹果蝇和真菌联合侵害初期,黑腹果蝇显著降低桔青霉、层生镰刀菌、青霉菌、米曲霉的病情指数;但在侵染第7天时,8种真菌的病情指数在黑腹果蝇的取食后均显著增加。在侵染新鲜完整葡萄的初期,尖孢枝孢菌和黑曲霉的发病率明显低于斑翅果蝇;斑翅果蝇的取食增加桔青霉、层生镰刀菌、青霉菌、细极链格孢和棘孢曲霉的病情指数,降低黑曲霉的发病率。因此,黑腹果蝇促进8种真菌的发育与侵染,斑翅果蝇的产卵与取食为桔青霉、层生镰刀菌、青霉菌、细极链格孢和棘孢曲霉5种真菌侵染新鲜葡萄创造更为有利的条件。     

甘肃窖藏马铃薯干腐病病原菌分离鉴定及致病性分析

目的 明确引起甘肃马铃薯主产区窖藏块茎干腐病致病菌的种类,确定强致病性的优势种群。方法 通过组织分离法从甘肃省通风贮藏库窖藏的典型马铃薯干腐病发病块茎组织中分离纯化获得病原菌,采用形态学结合真菌ITS序列进行菌种鉴定,用MEGA软件比较亲缘关系,根据柯赫氏法则测定分离菌株对‘大西洋’和‘陇薯7号’马铃薯微型薯的致病性。结果 从采集的马铃薯罹病组织中分离纯化得到15株真菌,分别鉴定为三线镰刀菌(Fusarium tricinctum)、茄病镰刀菌(F. solani)、锐顶镰刀菌(F. acuminatum)、木贼镰刀菌(F. equiseti)、尖孢镰刀菌(F. oxysporum)和环孢镰刀菌(F. annulatum),分离频率在6.67%～26.67%之间。6种镰刀菌均可导致马铃薯块茎发病,其中锐顶镰刀菌、三线镰刀菌和茄病镰刀菌引起的病斑显著大于其他3种镰刀菌引起的病斑。结论 引起甘肃窖藏马铃薯干腐病的病原菌主要有三线镰刀菌、茄病镰刀菌、锐顶镰刀菌、木贼镰刀菌、尖孢镰刀菌和环孢镰刀菌,致病力强的优势种群为锐顶镰刀菌、三线镰刀菌和茄病镰刀菌。环孢镰刀菌作为马铃薯干腐病的致病菌属首次...     

云南省烟草镰刀菌根腐病病原鉴定

【背景和目的】烟草镰刀菌根腐病（Fusarium root rot）影响烟叶产量和品质,为明确云南省烟草镰刀菌根腐病病原种类。【方法】采用组织分离法分离病原并进行单孢纯化;结合形态学和分子生物学rDNA-ITS与EF-1α序列鉴定病原;采用灌根接种法测定病原菌的致病性。【结果】获得的300个菌株在PDA平板上均呈絮状,菌丝白色、紫色或粉红色,大型分生孢子无色、多孢、多为镰刀形;小型分生孢子无色、多无隔,呈椭圆形或纺锤形。经序列比对将300菌株鉴定为7个种,其中227株为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）,占比75.7%;43株为茄病镰刀菌（F. solani）;16株为共享镰刀菌（F. commune）;8株为木贼镰刀菌（F. equiseti）;3株为层出镰刀菌（F. proliferatum）;2株芬芳镰刀菌（F. redolens）和1株轮枝镰刀菌（F. verticillioides）。【结论】云南省烟草镰刀菌根腐病病原为尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌、共享镰刀菌、木贼镰刀菌、层出镰刀菌、芬芳镰刀菌和轮枝镰刀菌,其中尖孢镰刀菌为优势菌。     

兰州百合鳞茎贮藏腐烂病原菌的鉴定及生物学特性

为确定引起兰州百合鳞茎贮藏期间腐烂的病原菌,应用柯赫氏法则测定了从病样中分离的纯培养物的致病性,根据形态学特性和ITS序列分析对病原菌进行鉴定,并对病原菌的生物学特性进行了研究。结果表明,引起兰州百合鳞茎腐烂的病原菌分别是黄曲霉和米根霉。两种病原菌的最适生长条件相同,最适宜菌丝生长和产孢的培养基均是百合培养基和百合葡萄糖培养基,葡萄糖和蛋白胨为菌丝生长及产孢的最适碳源和氮源,最适生长温度为25℃,在p H5~9范围内都可生长,光照有利于菌丝的生长和产孢。     

基于质地多面分析法对不同苹果品种果肉质构特性的分析

为了细致研究"华红"苹果贮藏期间果肉质地变化和不同苹果品种质构特性差异,本实验以套袋和未套袋"华红"苹果为试材,应用质地多面分析法定期测定贮藏期间果肉质地参数;以及以不同熟期"华红"、"华苹"、"寒富"、"红星"、"嘎拉"、"津轻"为试材,比较不同苹果品种果肉质地品质差异,同时分析各质地参数之间相关性。"华红"套袋和未套袋果肉质地参数在常温贮藏过程中变化趋势基本一致,且未套袋果肉的各项质地参数稍高于套袋的。硬度呈下降趋势,在黏附性、内聚性、弹性、咀嚼性、回复性方面,贮藏0 d的果实与48 d相比稍有升高。"华红"果肉贮藏期间质地参数变化相关性和6个苹果品种之间质地参数相关性有相似处,内聚性与弹性、回复性、咀嚼性都呈正相关,弹性与回复性、咀嚼性都呈较好地正相关,回复性与咀嚼性呈较好的正相关。不同的是,"华红"果肉硬度与黏附性、内聚性呈负相关,而不同品种之间果肉硬度与内聚性、弹性、回复性、咀嚼性呈高度正相关。不同品种之间各质地参数也进行了量化比较。综上说明本实验选用的P5探头测定的果肉内聚性、弹性、回复性、咀嚼性能反映"华红"果肉质地变化规律,适用于苹果果肉质地品质的客观评价。硬度、内聚性、弹性、回复性、咀嚼性质地参数中的一项或多项可以作为评价"华红"果肉质地和比较这6个苹果品种果肉质地差异性的重要参数。     

On-farm sources of microbial contamination of persimmon fruit in Japan

Potential sources of microbial contamination for persimmon fruit during growing and harvesting in the 2005 season were investigated to provide a baseline to design the good agricultural practices program for persimmons in Japan. Microbial counts in the peel of persimmon fruit during production season were close to or below 2.4 log CFU/g for bacteria and 3.0 log CFU/g for fungi but were above these values on harvested fruit. The counts in the flesh were below the detection level with all fruit. Bacteria and molds isolated from peel and flesh of persimmons during growing were phytopathogenic and soilborne organisms such as bacteria genera Enterobacter and Bacillus and mold genera Fusarium and Cladosporium, which were found in soil, weeds, agricultural water, and pesticide solution throughout the production season. The agricultural water was one of the most important potential preharvest sources, because Escherichia coli O157:H7 was identified from agricultural water in May, and Salmonella was detected in agricultural water, pesticide solution containing the agricultural water for the mixture, and soil after application of the pesticide solution in June. Neither of the two pathogenic bacteria was detected in any of the fruit samples. Microbial counts and diversity in the peel of persimmons at harvest increased after contact with plastic harvest basket and container, which could be sources of contamination during harvesting. Therefore, monitoring and management on-farm should focus on agricultural water and harvest equipment as important control points to reduce microbial contamination on persimmons.     

响应面优化发酵磨盘柿褐变条件

黑色食品(Mat Black,MB)与其同类非黑色食品相比,具有较高的营养价值和保健功能。本课题以成熟的柿子为原料,通过接种可食用微生物来探究磨盘柿发酵加工黑柿的最佳工艺条件,为进一步加工柿子黑色产品提供一定技术参考。将黑曲霉(Aspergillus niger)、毛霉(Mucor sp.)、根霉(Rhizopus sp.)、米曲霉(Aspergillus oryzae)接种到经预处理后的柿子浆中恒温发酵,比较4种真菌对发酵柿子褐变程度的影响,得到Asp.niger是柿子黑色产品的最适微生物。通过单因素和响应面试验优化Asp.niger发酵柿子褐变条件,得到最佳发酵条件为:500.00 g柿子浆中接入Asp.niger菌悬液的量8 mL (1×10-4 g/mL)、温度33.5℃、时间72.5 d,在此条件下褐变度可达到5.62。本文比较4种真菌对发酵柿子褐变程度的影响,通过单因素和响应面实验优化Asp.niger发酵柿子褐变条件,得到影响褐变的显著因素和适宜条件,可为柿子黑色产品开发提供技术借鉴。     

苹果ACO1基因及转录因子MdHB-1基因的表达模式

研究苹果MdACO1基因及转录因子MdHB-1基因在不同器官和不同发育阶段的表达量及其对外源乙烯的反应,以期探讨两基因之间的可能关系。以苹果品种“皇家嘎拉”为试材,利用实时荧光定量聚合酶链式反应技术分析不同器官和果实不同发育阶段基因的表达,以及乙烯利处理果实对基因表达的影响。在不同组织器官中,MdHB-1在花瓣中表达量较高,而MdACO1在成熟果中表达量较高。在果实不同发育阶段中MdHB-1在未成熟果中（盛花期40 d后）表达量最高,MdACO1在成熟果中尤其是花后100 d表达量最高。外源乙烯利（500 mg/L）处理的果实放置0～1 d时抑制MdHB-1的表达,但在7 d后其表达量增高;MdACO1表达量在外源乙烯利处理后迅速升高,并随着放置时间的延长而大幅度增高。转录因子MdHB-1可能参与了苹果幼嫩果实和花器官中其他相关基因表达的调控,这一过程似与MdACO1无关。MdACO1参与了果实的成熟过程,但并无受MdHB-1调控的迹象。外源乙烯会诱导成熟果实ACO1基因的过量表达,这一反馈调节过程似与MdHB-1无关。     

不同果袋对“阿布白”桃果实香气成分的影响

为探讨套袋对桃果实风味品质的影响,对陕西关中主栽品种"阿布白"桃进行了7种不同果袋套袋实验,以不套袋果实为对照,利用固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术测定了果实的香气成分及含量。结果表明:供试桃共检测到89种香气物质,香气物质含量从高到低的顺序为:对照单层白色塑料膜袋双层外杂内黑纸袋单层黑色无纺布双层外黑内黑纸袋单层外黄内黑纸袋双层外黄内红纸袋双层外红内黑纸袋。检测到的挥发性物质的主要成分为醛类、醇类、酯类和烃类物。与对照相比,套袋提高了果实中醇类物质含量,增加了酸类物质含量,但降低了醛类和酯类物质含量。套袋果实之间的特征性香气成分也存在差异,单层外黄内黑纸袋的内酯类物质较其他果袋含量高,可为果实提供丰富的果香味。综合果袋对果实外在和内在品质的表现,以单层外黄内黑纸袋对"阿布白"着色效果好,果实硬度大,可溶性固形物和可滴定酸的含量适宜,果香味浓,适宜陕西关中地区应用。     

基于模糊数学和聚类分析的鲜食葡萄品种综合品质评价

对2013年陕西渭北地区的14 个鲜食葡萄品种的17 项生物经济学指标进行观察测定,并运用模糊数学和聚类分析评价了不同葡萄品种果实的综合品质。结果表明：品种间果实的果粒形状、产量、花色苷含量、果粉厚度、果皮厚度和果皮颜色性状变异系数较大,而果实感官品质和内在品质相关指标的变异系数较小。模糊数学评价筛选出综合品质较好的品种为红地球、夏黑、红宝石、8611、金田0601和魏可,而秦龙大穗、弗雷无核的综合品质较差。聚类分析结果表明,品质优等的8611、红地球、红宝石和魏可聚为一类,为优良的鲜食葡萄栽培种,品质中等的玫瑰香、巨玫瑰和红乳聚为一类,而品质最差的弗雷无核单独聚为一类。模糊数学评价方法结合聚类分析可给予葡萄综合品质较全面、客观的评价。     

High Hydrostatic Pressure in Astringent and Non-Astringent Persimmons to Obtain Fiber-Enriched Ingredients with Improved Functionality

This study examined the effects of high hydrostatic pressure (HHP) processing on dietary fiber, cell wall sugars, cell wall-modifying enzymes, and techno-functional properties of astringent and non-astringent persimmon flesh. The fruits were subjected to 200 and 400 MPa for 1, 3, and 6 min, at 25 °C. Dietary fiber and alcohol insoluble residue (AIR) were affected significantly (p ≤ 0.05). Soluble fraction of fiber (SDF) decreased, and AIR content increased up to 46% after application of high pressure. HHP reduced total sugar content of AIRs and promoted changes in the contribution of uronic acids (UA) and glucose, obtaining pectin-enriched materials (from 45 to 61% UA) in astringent persimmons treated by pressure. Pectinmethylesterase (PME) activity increased independently of the astringency level of persimmons (from 1.7- to 2.0-fold), while polygalacturonase (PG) activity was highly dependent on pressure and time conditions of HHP treatments. The application of HHP enhanced techno-functional properties of persimmon AIRs. Great water-absorption (21–31 mL/g AIR) and oil-holding (10–14 mL/g AIR) capacities were obtained for HHP-treated astringent and non-astringent persimmons, respectively, which showed the potential of HHP technology to add value to persimmons.     

O26等产志贺毒素的6 种血清型大肠杆菌的暴发流行情况及检测研究现状

近年来,产志贺毒素而非O157的大肠杆菌,尤其是被美国农业部称为“the Big Six”的6 种大肠杆菌在诸多国家及地区暴发流行,严重威胁人类的健康,越来越受到世界各国的关注。“the Big Six”包括大肠杆菌O26、O45、O103、O111、O121、O145等6 种血清型。目前,在国内,关于“the Big Six”的报道及研究相对较少。文中介绍“the Big Six”的暴发流行情况,并对各种检测方法进行综述。     

硫色镰刀菌（Fusarium sulphureum）接种对抗病/易感品种马铃薯块茎苯丙烷代谢的影响比较

以抗病品种“青薯168”和易感品种“陇薯3号”马铃薯块茎为试材,比较2 个品种马铃薯块茎、切片接种硫色镰刀菌（F. sulphureum）后苯丙烷代谢关键酶活性和相关产物积累的动态变化。结果表明,“青薯168”马铃薯块茎及其切片接种F. sulphureum后的病斑直径显著小于“陇薯3号”。2 个品种马铃薯接种F. sulphureum后,在前期苯丙氨酸解氨酶（PAL）、4-香豆酰-辅酶A连接酶（4CL）活性以及总酚、类黄酮含量增加,但随着病斑的扩展,PAL、4CL活性以及总酚、类黄酮含量迅速降低并低于未接菌对照。肉桂酸-4-羟化酶（C4H）活性和木质素含量在整个培养过程中均显著低于未接菌对照。抗病品种“青薯168”接种F. sulphureum后,PAL、4CL和C4H活性以及总酚、类黄酮和木质素含量均显著高于“陇薯3号”。表明苯丙烷代谢在F. sulphureum与马铃薯块茎互作的早期发挥了积极的作用,一旦病斑开始扩展,苯丙烷代谢的抗病作用将显著降低;抗病块茎的苯丙烷代谢活性显著高于感病块茎,表明苯丙烷代谢在马铃薯块茎抗干腐病方面具有重要的作用。     

青刺尖茶汤对便秘模型小鼠润肠通便的效果

目的：研究青刺尖茶汤对便秘模型小鼠的润肠通便作用。方法：将雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组和低、中、高3 个剂量的给药组。给药组分别经口给予低、中、高剂量（1、2、6 g/（kg·d））的青刺尖茶汤;空白组和模型组给予0.3 mL/20 g的蒸馏水;阳性组给予0.9 g/（kg·d）的麻仁丸。连续灌胃7 d后,观察各组小鼠的首次排黑便时间、5 h内排便粒数,测定粪便含水量和小肠墨汁推进率。结果：3 个剂量组与模型组和阳性组比较,各测定指标都有显著性差异;青刺尖茶汤能明显缩短小鼠首次排黑便时间,增加小鼠5 h内排便数量、粪便含水量和小肠推进率。结论：青刺尖茶汤有明显的润肠通便功效。