竹叶黄酮与谷胱甘肽对食源性非酶糖基化的抑制

研究了竹叶黄酮与谷胱甘肽对食源性非酶糖基化反应的抑制作用。采用氯化硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验检测糖基化反应产生的果糖胺,Girard-T实验检测二羰基化合物,295nm处的紫外吸收检测小分子醛类物质,荧光性非酶糖基化终产物AGEs的检测,以及用HPLC法检测5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量。结果显示,竹叶黄酮可抑制果糖胺、二羰基化合物、有效抑制荧光性终产物;而谷胱甘肽可抑制二羰基化合物、小分子醛类及5-HMF。     

8种别样茶对AGEs抑制能力的筛选及其抑制机制探究

目的:本研究通过检测非酶糖基化终末产物（advanced glycation end-products,AGEs）生成量评价8种别样茶的糖基化抑制能力,并探究抑制效果较好的别样茶对AGEs生成各阶段的抑制作用机制。方法:本研究首先对8种别样茶水提液中总黄酮含量进行检测,接着通过构建体外蛋白质非酶糖基化模型实验检测了8种别样茶抑制AGEs生成的能力,最后择优测定其对糖基化早期产物果糖胺、中期产物活性羰基化合物以及蛋白质交联的抑制能力,从而探究其对非酶糖基化反应的抑制机制。结果:大叶苦丁茶（Ilex latifolia Thunb）和甜茶（Rubus suavissimus S. Lee）对AGEs的抑制效果在8种别样茶中较为突出,50 μg/mL时AGEs抑制率分别达到了76.31%±0.87%和81.75%±0.41%;大叶苦丁茶和甜茶主要通过抑制糖基化早期、中期产物的生成量来减少AGEs的产生。其中,500 μg/mL甜茶对果糖胺抑制率最高（59.12%）,蛋白质交联抑制率最高（81.41%）,5000 μg/mL大叶苦丁茶对活性羰基化合物抑制率最高（94.24%）。结论:大叶苦丁茶及甜茶可以作为抑制糖基化反应的功能食品,本研究可为具有抑制AGEs产生功效原料的综合开发利用提供一定的理论依据。     

大黄素对食品模型中晚期糖基化终产物的抑制作用

通过建立L-赖氨酸-葡萄糖(Lys-Glc)反应体系,以大黄素作为抑制剂,利用NBT还原法、紫外分光光度法、高效液相色谱法及荧光分光光度法分别研究大黄素对果糖胺、乙二醛(GO)、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、类黑精、羧甲基赖氨酸(CML)及荧光性AGEs和戊糖素的抑制作用。结果表明:大黄素对氧化产物及由氧化产物进一步生成的中、末期产物GO、CML、类黑素有较好的抑制作用,对果糖胺、5-HMF有一定的抑制作用。大黄素对戊糖素、荧光性AGEs无明显抑制作用,延迟其产生。可见大黄素作为一种蒽醌类物质,对糖基化反应中氧化产物的抑制作用与其抗氧化性有关。     

硒化甜玉米芯多糖对非酶糖基化的抑制作用

以甜玉米芯多糖（SCP）为原料采用咪唑介导法合成一种硒含量为（7.19±0.067）mg/g的硒化多糖（SeSCP）,为探究Se-SCP对非酶糖基化反应的抑制作用,本文选用了果糖、牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）为底物,建立清白蛋白/果糖模拟体系。对非酶糖基化过程中的前、中、末期三个特征产物果糖胺→α-二羰基化合物→非酶糖基化终产物（AGEs）进行测定并通过透射电子显微镜（TEM）和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）在微观结构方面对比分析原多糖、硒多糖对非酶糖基化进程的影响。结果表明,Se-SCP对蛋白非酶糖基化过程的三个阶段均有不同程度的抑制作用,对非酶糖基化过程中的特征产物抑制率分别达到了89.5%、74.9%与71.7%;在抑制蛋白质交联结构方面,Se-SCP与SCP组相比,纹理相对清晰,结构密度较小,抑制效果明显;SDS-PAGE结果表明,Se-SCP减少了果糖诱导的高分子量交联蛋白的形成,其中Se-SCP效果较...     

不饱和脂肪酸对卵清蛋白糖基化反应的影响

糖基化反应是高营养食品常见的一类反应,食品中的脂类成分对糖基化反应有很大影响。本研究以葡萄糖和卵清蛋白（OVA）建立糖基化对照体系,与含有不饱和脂肪酸（UFA）的模型组进行对比,探究脂肪酸氧化对于糖基化反应产物二羰基化合物、晚期糖基化终产物（AGEs）及糖基化蛋白结构的影响。结果表明UFA通过不同方式促进二羰基化合物的形成,并通过改变OVA蛋白的高级结构显著促进糖基化反应。脂肪酸的不饱和度与二羰基化合物含量、TBA值、POV值均成正比,与羧甲基赖氨酸和吡咯素含量成反比。通过SEM结构模型的路径分析可知,脂质氧化次级产物对二羰基化合物的影响力较强（路径系数0.814）,对两种AGEs的影响力相对较弱（0.246）;脂质氧化初级产物对两种AGEs的影响力强于二羰基化合物。     

反应条件对牛血清白蛋白-葡萄糖体系糖基化产物形成的影响

以牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和葡萄糖为原料进行糖基化反应,研究糖基化时间和糖基化温度对果糖胺、羰基化合物、5-羟甲基糠醛(5-hydromethylfurfaral, 5-HMF)、丙烯酰胺等糖基化反应产物形成的影响。结果表明,BSA-葡萄糖糖基化体系中的果糖胺含量、羰基含量均随着反应时间的延长和反应温度的升高先增加后降低,褐变程度随着反应温度的升高而增大,但随着反应时间的延长先增大后下降。当糖基化反应温度高于60℃,且反应时间超过12 h时,样品中5-羟甲基糠醛、丙烯酰胺、后期糖基化末端终产物等潜在危害产物的含量显著增加(P0.05)。本研究结果可为通过控制加工时间和温度,减少高蛋白、高糖类食品在热加工过程中有害糖基化产物的形成提供技术参考。     

槲皮素抑制蛋白糖基化及DNA损伤

建立牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）-还原糖、牛血清白蛋白-甲基乙二醛/乙二醛（bovineserum albumin-methylglyoxal/glyoxal,BSA-MGO/GO）反应体系,研究槲皮素对反应体系中晚期糖基化终产物（advanced glycation endproducts,AGEs）的抑制作用。考察了槲皮素在不同阶段对BSA-核糖体系中AGEs形成的抑制作用。并对槲皮素抑制二羰基化合物对质粒pBR322DNA的损伤进行研究。结果表明：槲皮素具有抑制BSA-还原糖、BSA-GO、BSA-MGO体系中AGEs形成的作用,达到显著抑制效果的浓度分别为1、0.25、0.25 mmol/L。槲皮素对BSA-MGO体系中AGEs产生的抑制作用强于BSA-GO体系。在BSA-核糖体系中,反应初期随着反应时间的延长抑制作用不断增大,12 d后,抑制作用趋于平缓,维持在60%左右。槲皮素对二羰基化合物对DNA的损伤有抑制作用,且与浓度成一定相关性。     

天然酚类化合物对晚期糖基化末端产物抑制作用研究进展

晚期糖基化末端产物(AGEs)是还原糖与氨基化合物通过美拉德反应(非酶糖基化)生成的一类物质。AGEs大量存在于热加工食品中,其在人体内的积累与多种疾病相关。天然酚类化合物是一种重要的膳食抗氧化剂,具有较强的抗糖基化能力,能够有效抑制AGEs的生成,近年来引起广泛的关注。本文通过总结国内外体外模拟反应体系的研究,探讨天然酚类化合物抑制AGEs生成的几种机制,旨在为天然酚类化合物抑制AGEs生成提供理论指导。天然酚类化合物主要通过其自由基清除能力、金属鳌合能力、羰基清除能力以及蛋白质结合能力抑制非酶糖基化反应。目前对于天然酚类化合物抑制AGEs的机制仍缺乏系统资料,对各机制的研究也亟待完善。由于酚类化合物安全无毒、来源广泛,因此在抑制AGEs在食品中的生成以及预防与治疗相关疾病等方面具有重要的研究价值。     

食品加工中晚期糖基化终产物的变化趋势及茶多酚对其抑制作用

晚期糖基化终产物(AGEs)是食品加工和贮藏中美拉德反应、脂质氧化反应或葡萄糖氧化等多种途径中的产物,在人体内积累后能够引起一些慢性疾病,如糖尿病、肾病、高血脂等,因此抑制晚期糖基化终产物具有重要意义。采用葡萄糖(Glc)与牛血清白蛋白(BSA)模拟食品加工中产生的糖基化产物反应过程,以茶多酚为抑制剂加入反应体系中,通过NBT法测定果糖胺,高效液相色谱法(HPLC)测定乙二醛(GO)和羧甲基赖氨酸(CML),荧光法测定AGEs来检测糖基化反应的早、中期和晚期产物,根据蛋白质羰基和巯基含量和蛋白质相对分子质量变化,获得茶多酚抑制晚期糖基化终产物的主要机制。试验结果表明:在食品加工条件下茶多酚对糖基化反应的中间产物果糖胺、乙二醛有明显抑制作用,对CML和荧光性AGEs有一定抑制作用。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明茶多酚与蛋白质的相互作用引起蛋白质二级结构的变化,阻止蛋白质交联。结合茶多酚对蛋白质巯基的保护作用,茶多酚既以抗氧化作用参与抑制糖基化反应,又对蛋白质的交联反应有抑制作用。     

亚油酸对食品加工中晚期糖基化终产物的影响

研究一种不饱和脂肪酸——亚油酸对糖基化反应体系主要中间产物及终产物的作用,探讨在食品加工中不饱和亚油酸对晚期糖基化产物的影响。建立亚油酸、D-葡萄糖和L-赖氨酸反应的微乳体系,采用紫外-可见吸光光度法检测中间产物乙二醛、丙二醛和果糖胺的生成量;荧光法检测戊糖素和荧光性晚期糖基化终产物(advanced glycation end-products,AGEs)的生成量;高效液相色谱法检测终产物羧甲基赖氨酸[Nε-(carboxymethyl)lysine,CML]的生成量,分别比较各生成产物的变化,探讨亚油酸对反应途径的影响。结果显示:从中间产物上看,亚油酸能有效参与羰胺的糖基化反应,提高中间产物乙二醛含量,增加丙二醛含量,减少果糖胺的生成;从终产物来看,亚油酸的存在对戊糖素的生成量影响不明显,但能明显抑制羧甲基赖氨酸的形成并抑制荧光性AGEs的累积。在糖基化反应体系中亚油酸的存在一方面能够氧化葡萄糖,使参与羰胺反应的葡萄糖减少;另一方面因氧化促进了乙二醛等活性醛的生成,从而加速乙二醛与赖氨酸之间的反应,减少了参与羰胺反应的赖氨酸含量;亚油酸参与反应使中间产物丙二醛含量增加,进而增加了羧甲基赖氨酸同源的羧乙基赖氨酸(CEL)的生成量,减少了非荧光性产物羧甲基赖氨酸和荧光性AGEs生成量。     

Advanced glycation end products inhibitors from Alpinia zerumbet rhizomes

Advanced glycation end products (AGEs) are major factors responsible for the complication of diabetes. The present study was carried out to investigate the inhibitory activities on fructosamine adduct and α-dicarbonyl formations by hexane extracts of various parts of Alpinia zerumbet. Furthermore, we isolated two previously known compounds, namely 5,6-dehydrokawain (DK) and dihydro-5,6-dehydrokawain (DDK). 8(17),12-Labdadiene-15,16-dial (labdadiene) was isolated for the first time from the rhizome of A. zerumbet. The results showed that labdadiene (IC₅₀ = 51.06 μg/mL) had similar activity to rutin and quercetin against fructosamine adduct. The inhibition of α-dicarbonyl compounds formation by labdadiene was significantly higher than that of DK and DDK. Our results indicate that labdadiene is a potent antiglycation agent which was found to inhibit AGEs formation in three different steps in the pathway. These data indicate that labdadiene could be used to prevent glycation-associated complications in diabetes.     

Inhibitory effects of guava (Psidium guajava L.) leaf extracts and its active compounds on the glycation process of protein

Hyperglycaemia causes increased protein glycation and the formation of early glycation products and advanced glycation end products (AGEs) which are major factors responsible for the complications of diabetes. This study investigated the ability of guava leaf and compounds to inhibit glycation process in an albumin/glucose model system and compared the potency of these extracts with Polyphenon 60 which is a commercial polyphenol product extracted from green tea and with the standard antiglycation agent, aminoguanidine. The results showed that the inhibitory effects of guava leaf extracts on the formation of α-dicarbonyl compounds were over 95% at 50 μg/ml. Phenolic compounds present, namely gallic acid, catechin and quercetin exhibited over 80% inhibitory effects, but ferulic acid showed no activity. The guava leaf extracts also showed strong inhibitory effects on the production of Amadori products and AGEs from albumin in the presence of glucose. The phenolic compounds also showed strong inhibitory effects on the glycation of albumin, especially quercetin exhibited over 95% inhibitory effects at 100 μg/ml. According to the results obtained, guava leaf extracts are potent antiglycation agents, which can be of great value in the preventive glycation-associated complications in diabetes.     

Effect of combined UV-thermosonication and Ecklonia cava extract on advanced glycation end-products in soymilk

Thermal treatment is used to inactivate microbes in soymilk, but it increases the amount of advanced glycation end products (AGEs). Therefore, this study examined if ultraviolet light with thermo-sonication (UVTS) and Ecklonia cava extract (EX) could provide an alternative process to prevent AGEs formation in processed soymilk. A coiled tube UV reactor was used simultaneously with an ultrasonic generator for UVTS treatment, while an autoclave was employed for thermal treatment. UVTS treatment was examined at different temperatures and flow rates to achieve a 5-log reduction of pre-inoculated Escherichia coli and Salmonella typhimurium in soymilk. After confirming EX's anti-glycation effects against fructosamine, ɑ-dicarbonyl compounds, protein carbonyl content, and AGEs formation, it was added to soymilk before the UVTS. The ɑ-dicarbonyl compounds (glyoxal and methylglyoxal) and AGEs (N^ε-(1-carboxymethyl)-l -lysine [CML] and N^ε-(1-carboxyethyl)-l -lysine [CEL]) in soymilk increased after autoclaving (AC). Compared with AC, the UVTS with .05% EX decreased glyoxal, methylglyoxal, CML, and CEL by 78%, 82%, 32%, and 59%, respectively. These results indicated that UVTS with EX could be an alternative pasteurization process for soymilk that minimizes AGEs formation.     

莲原花青素对含有不同饱和度脂肪酸的乳糖-赖氨酸体系中晚期糖基化终末产物的抑制作用

研究莲原花青素低聚体（lotus seedpod procyanidin oligomers,LSOPC）对含有不同饱和度脂肪酸的乳糖-赖氨酸模拟体系中晚期糖基化终末产物（advanced glycation end products,AGEs）生成的抑制作用。选择α-乳糖、L-赖氨酸和油酸/亚油酸/亚麻酸建立3 种热加工模拟体系,采用荧光分光光度法、电子鼻等技术,研究了在不同加热温度和时间、不同质量浓度LSOPC、不同脂肪酸等因素的作用下LSOPC对模拟体系中生成AGEs抑制作用的影响。加热温度和时间是LSOPC抑制AGEs生成的重要因素。在各模拟体系中,LSOPC对AGEs的抑制率均随LSOPC质量浓度增加而增加,且低温加热模式下的抑制率和抑制速率比高温加热模式下大。通过电子鼻技术的指纹图谱分析,发现低温（100 ℃）时,添加LSOPC后3 种模拟体系生成的气味物质之间无明显差异,高温（180 ℃）时,则有显著差异。LSOPC对含有不同饱和度脂肪酸的乳糖-赖氨酸模拟体系中AGEs的生成有一定的抑制作用,具有剂量依赖关系,且与加热温度和时间以及脂肪酸种类相关。     

芦丁抑制牛血清白蛋白糖基化

目的：考察芦丁对糖及活性二羰基化合物诱导的牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）糖基化的抑制效果。方法：建立牛血清白蛋白-丙酮醛（bovine serum albumin-methylglyoxal,BSA-MGO）、牛血清白蛋白-乙二醛（bovine serum albumin-glyoxal,BSA-GO）、牛血清白蛋白-还原糖反应体系,利用荧光光谱的方法考察MGO、GO和还原糖对于BSA糖基化的影响,并考察芦丁对于3 个反应体系中晚期糖基化终末产物（advancedglycation end products,AGEs）的抑制作用。结果：MGO、GO、还原糖浓度分别为0.5、0.5、10 mmol/L时引发BSA蛋白糖基化反应较为显著。对于上述3 个体系,芦丁的添加浓度分别为0.25、0.25、1 mmol/L时,能有效地抑制AGEs的形成。结论：芦丁能有效地抑制BSA-MGO、BSA-GO、BSA-还原糖体系的牛血清白蛋白糖基化。     

冻融及加热过程鲢鱼鱼糜制品中晚期糖化终末产物的形成机制

将鲢鱼（Hypophthalmichthys molitrix）鱼糜在不同冻藏温度下进行冻融循环后加热，分析不同加热过程鱼糜制品中壬醛、1-辛烯-3-醇、内源性荧光物质、蛋白质亚基组成、赖氨酸、α-二羰基化合物（乙二醛（glyoxal,GO）和丙酮醛（methylglyoxal,MGO））及晚期糖化终末产物（advanced glycation end-products,AGEs）-羧甲基赖氨酸（Nε-carboxylmethyl-lysine,CML）和荧光AGEs的变化情况。结果显示，冻藏温度对鱼糜制品中各指标含量无显著影响（P>0.05）；随着冻融次数的增加，鱼糜制品中壬醛、1-辛烯-3-醇、内源性荧光物质、CML和荧光AGEs含量显著增加，赖氨酸含量增加，GO、MGO含量显著降低（P<0.05）；加热过程中，1-辛烯-3-醇、GO、MGO、CML和荧光AGEs含量显著增加，内源性荧光物质显著降低（P<0.05），赖氨酸含量先增加后降低，肌球蛋白重链逐渐降解成小分子蛋白。以上结果表明原料的冻融循环为鱼糜制品中AGEs的形成提供大量前体物质；热加工过程进一步促进了...     

Antioxidation and antiglycation of 95% ethanolic extracts prepared from the leaves of black nightshade (Solanum nigrum)

Hyperglycemia results in the formation of advanced glycation end-products (AGE), resulting in an inflammatory response that induces insulin resistance. Evidence indicates that antioxidants can suppress the formation of reactive oxygen species, decrease levels of AGEs by inhibiting glycation. Black nightshade (Solanum nigrum) can be used as a medicinal food for improving blood glucose; however, the identities of the active compounds and how they counteract diabetes remain unknown. This study demonstrate that 95% ethanolic extracts of black nightshade exerted significant antioxidative activity compared with 50% ethanolic extracts and aqueous extracts. Moreover, 95% ethanolic extracts of black nightshade produced antiglycative activity, which contributed to the inhibition of fructosamine and generation of α-dicarbonyl compounds. The concentrations of solasonine and solamargine in the 95% ethanolic extracts were 0.484 and 0.183 mg/mg, respectively. These results suggest that black nightshade might serve as a novel source of functional ingredients that exert antiglycation and anti-diabetes activities.     

大豆11S球蛋白糖基化有害交联产物的形成及抑制机理

目的：针对食品工业大豆蛋白糖基化改性工艺,建立大豆11S球蛋白-糖模拟体系,探究该体系中晚期糖基 化终产物（advanced glycation end products,AGEs）形成的影响因素,探究黄酮类化合物抑制AGEs形成的机理, 以便进行有效调控。方法：荧光光谱法（λex/λem＝340 nm/465 nm）测定糖的种类和浓度、温度、pH值以及黄酮抑制 剂等对AGEs形成的影响,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征糖基化过程及黄酮对AGEs的抑制效果,通过 液相色谱-串联质谱（liquid chromatograph-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）测定反应过程中槲皮素及其产物 的变化。结果：糖种类为果糖;11S球蛋白与果糖质量浓度分别为2、8 mg/mL,pH值为9.2,温度为121 ℃条件下产 生的荧光性AGEs量最多;槲皮素、木犀草素、染料木素、芦丁4 种黄酮对荧光性AGEs的形成均有一定抑制效果; LC-MS/MS结果表明槲皮素通过捕获糖基化中间产物甲基乙二醛（methylglyoxal,MGO）,抑制了大分子交联性的 荧光性AGEs形成;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证了1 mmol/L槲皮素有效降低了大分子交联的产物,但 不影响糖的修饰改性,乳化性能得到较好的改善。结论：采用分子质量较大的糖,降低糖质量浓度、pH值和反应 温度,添加黄酮类化合物可有效抑制大豆蛋白糖基化过程中有害产物AGEs的形成。