北冰洋来源白色念珠菌拮抗菌株的分离与鉴定

采用涂布平板法、对峙培养法及琼脂扩散法从北冰洋沉积物样品中分离、筛选对白色念珠菌（Canidia albicans）具有良好拮抗作用的菌株,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定,并对其抑菌谱进行研究。结果表明,从北冰洋沉积物样品中共分离纯化出314株菌株,其中,4株菌株对白色念珠菌具有明显拮抗作用,且菌株56#拮抗效果最好,抑菌圈直径为（32.14±0.72） mm。菌株56#被鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,其对大肠杆菌、副溶血性弧菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌、屎肠球菌、金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌都有一定的抑制作用,是一株广谱抗菌的海洋微生物。     

抗白色念珠菌海洋真菌的筛选及抑菌活性初探

实验以白色念珠菌为对象,对从渤海湾不同站位分离获得的55株海洋丝状真菌进行了抗真菌活性菌株的筛选。从中筛选得到了BH431、BH515、BH531和BH09721 4株抑菌活性较高的菌株,并进一步对不同浓度发酵液的抑菌活性及代谢物性质进行了检测。结果显示,4株海洋真菌对野生型白色念珠菌SC5314均具有较强抑菌活性,其最小抑菌浓度分别为 65 g/mL、19 g/mL、54 g/mL、23 g/mL;其中BH431和BH515菌株还显示出对基因敲除型菌株RM1000的抑菌活性,最小抑菌浓度分别为 32 g/mL、39 g/mL。4株海洋真菌所产生的活性代谢物具有较好的酸碱适应性,活性物质分子质量＜6 000 u;其中BH431菌株的活性代谢物还具有良好的热稳定性。     

抗黄曲霉的海洋微生物的筛选与鉴定

从南大西洋沉积物样品中分离、筛选出对黄曲霉具有良好拮抗作用的菌株并进行鉴定。用涂布平板法分离出205株菌株,通过初筛得到6株对白色念珠菌有明显拮抗作用的菌株;用琼脂扩散法复筛,最终得到1株拮抗效果最好的菌株,为2.6.2-1号菌株,其抑菌圈直径为29.05±2.72mm。通过形态学特征、生理生化特征和16S rDNA测序鉴定,证明该菌株为芽孢杆菌(Bacillus)。抑菌谱研究结果表明,2.6.2-1号菌株对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏杆菌、肺炎克雷伯氏菌及鲍曼不动杆菌都有一定的抑制作用,是一株广谱抗菌的海洋微生物。     

北冰洋来源广谱抗菌海洋细菌的筛选及发酵条件优化

从北冰洋海域沉积物中分离筛选广谱抗菌海洋细菌,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定,并以白色念珠菌（Candida albicans）为指示菌,抑菌圈直径为响应值,通过单因素及响应面试验对其培养条件进行优化。结果表明,分离筛选出一株具有广谱抗菌性的52号菌株,其对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、大肠杆菌（Escherichia coli）、鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）、肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）均有一定的抑制作用,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。52号菌株的最佳培养条件为培养温度36 ℃、培养时间75 h、初始pH值6.5、转速178 r/min。在此最优培养条件下,52号菌株对白色念珠菌的抑菌圈直径为30.23 mm。     

一株抗白色念珠菌的海洋真菌分离鉴定

从广东湛江海域采集到的海泥中分离真菌并通过抗白色念珠菌活性筛选获得强活性菌株GW08072。通过培养特征、形态特征、显微结构分析及ITS rDNA序列比对等方法对菌株GW08072进行分析鉴定,筛选分离到89株真菌,经复筛重复实验得到抗白色念珠菌活性的菌株6株,经复筛得到的GW08072具有较强的抗白色念珠菌活性,经过遗传稳定性跟踪研究发现该菌抗性能够稳定遗传,经鉴定为草酸青霉(Penicillium oxalicum)。     

湛江硇洲岛全缘马尾藻共附生抗菌活性菌的筛选与多样性分析

本文采用倾注平板法从湛江硇洲岛全缘马尾藻(Sargassum integerrimum)分离共附生细菌,分别以大肠埃希菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和白色念珠菌(Candida albicans)作为指示菌,利用牛津杯法测定抗菌活性,并对分离到的抗菌活性菌进行形态观察、生理生化试验及分子生物学水平的鉴定与多样性分析。共分离到36株细菌,经形态观察与生化试验去重,筛选到具有抗菌活性的细菌11株。经过16S rRNA分析发现,11株抗菌活性细菌分属于细菌域的厚壁菌门(Firmicutes)和放线杆菌门(Actinobacteria)的5个科(Bacillaceae,Staphylococcaceae,Micrococcaceae,Microbacteriaceae,Dermabacteraceae)、5个属(Bacillus,Staphylococcu,Kocuria,Microbacterium,Brachybacterium),其中7株菌为Firmicutes门,占活性菌株的63.6%,并成为优势类群,同时发现4株潜在新种(菌株X21、X24、X31、X34)。研究表明,该岛全缘马尾藻中存在较为丰富的抗菌物质产生菌,并蕴藏着较多的微生物新类群。     

海洋细菌GM-1-1菌株对白色念珠菌的抗菌作用机理初步研究

为了探究生防解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)GM-1-1菌株无菌发酵液对白色念珠菌(Candida albicans)的抗菌性质及其抗菌作用机理,采用牛津杯法检测其对白色念珠菌的抑菌效果,通过扫描电镜法、MTT法、分光光度法等测定发酵液对白色念珠菌孢子萌发、细胞形态、生物被膜形成、细胞通透性的影响,初步探讨其抗菌作用机理。结果表明,GM-1-1无菌发酵液对白色念珠菌具有明显的抑制作用,抑菌圈直径达39.5 mm,受抑制的白色念珠菌在不含发酵液的培养基上仍可继续生长;无菌发酵液对白色念珠菌的孢子萌发具有强烈的抑制作用;扫描电镜下发现处理后的白色念珠菌细胞表面凹陷,形态不规则,细胞壁残缺;无菌发酵液抑制了白色念珠菌生物被膜的形成,增加了细胞的通透性。本文初步揭示了GM-1-1无菌发酵液对白色念珠菌的抗菌作用机理,为该菌株的进一步研究和应用奠定基础。     

可抑制口腔致病菌的乳酸菌筛选及其抑菌特性研究

为了得到可抑制口腔致病菌的乳酸菌,从四川大凉山农家泡菜中分离筛选出9株乳酸菌,使用牛津杯法,以变异链球菌、白色念珠菌、具核梭杆菌、牙龈卟啉单胞菌为指示菌,对筛选的菌株进行抑菌试验,随后进行16S rRNA基因序列鉴定。每隔4 h测定菌株SD26上清液的pH值及对白色念珠菌的抑菌活力,并将不同pH的SD26上清液与白色念珠菌共培养,测定其对白色念珠菌生长过程的影响。将SD26上清液进行酸碱和盐析处理,测定其对白色念珠菌的抑菌活力。最后测定SD26上清液对食源性致病菌的抑菌谱。结果表明,初筛的9株乳酸菌中SD26对白色念珠菌的抑菌活性最高,抑菌圈直径为(26.63±0.30) mm。经鉴定SD26为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),培养20 h时,上清液pH为3.81,对白色念珠菌的抑菌圈直径最大,且SD26上清液对白色念珠菌抑制作用具有低pH环境的依赖性,盐析中性沉淀复溶液无抑菌活性。SD26上清液对食源性致病菌中单核细胞增生李斯特氏菌(CMCC54002)的抑菌作用最强,抑菌圈直径为(22.68±0.06) mm。研究表明,SD26上清液中对白色念珠菌起抑菌...     

骆驼酸乳中乳酸菌的抑菌实验研究

对新疆3个不同地区的骆驼酸乳中分离出来的10株乳酸菌(编号1～10)的抑菌作用进行研究,并用滤纸片法对大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、白色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌进行抑菌实验,结果表明,对大肠杆菌具有抑菌作用的是菌株3、6、7、10;对绿脓杆菌具有抑菌作用的是菌株7、8、9、10:对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用的是菌株6、7、8;对白色念珠菌有抑菌作用的是菌株6、7;对白色葡萄球菌具有抑菌作用的是菌株8、9;但这lO株乳酸菌发酵上清液对枯草芽孢杆菌均无抑菌作用.本实验提示从新疆3个不同地区的骆驼酸乳中分离出来的部分乳酸菌对指示菌具有抑菌作用.     

赤水丹霞山土壤来源抗菌活性链霉菌的分离及放线菌素产生链霉菌Streptomyces sp.CSDX001发酵产物分析

分离、鉴定赤水丹霞地区土壤来源的抗临床耐药菌活性的链霉菌。采集赤水丹霞山区不同海拔的土样并利用多种培养基分离、纯化菌株。热酚法提取菌株基因组DNA,PCR扩增16S r RNA基因并测序后在线比对以确定其系统分类学地位。利用多种测试菌测试抗菌活性,通过HPLC和LC/MS分析菌株发酵抽提物并与数据库比较。分离得到菌株600株,其中59株链霉菌中有41株具有1种以上的抗测试菌活性。Streptomycetes sp.CSDX001具有抗耐药耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、抗耐万古霉素金黄色葡萄球菌、抗多药耐药鲍曼不动杆菌、抗枯草芽孢杆菌、抗藤黄微球菌、抗白色念球菌的活性,具有抗多种微生物的活性和产生多种新结构次级代谢产物潜力,可能是抗微生物新天然活性产物的重要来源。     

山茱萸中有益菌的分离和鉴定

将药用植物山茱萸作为有益菌的分离源,以获得常见有害菌的抗性菌,提高山茱萸的利用价值。以马铃薯葡萄糖琼脂和营养琼脂平板分离、纯化其体外真菌和细菌,对获得的菌株进行黑曲霉、黄曲霉和大肠杆菌等有害菌的对峙实验,并对抗性菌进行分子生物学和生理生化的种属鉴定。实验结果表明：从山茱萸中分离纯化28株菌（12株细菌、16株真菌）,其中2株菌对黑曲霉、黄曲霉有一定的抑菌效果,经分子生物学和生理生化实验鉴定,菌株S136是肠杆菌属（Enterobacter sp.）、菌株S138是芽孢杆菌属（Bacillus sp.）的细菌。     

海洋微生物来源木聚糖酶研究进展

由于海洋微生物生存环境的特殊性，使其所产生的酶大部分具有突出的优势和特点，这些特性使得海洋微生物来源的酶在基础研究和工业应用等方面具有巨大价值，具有独特的应用前景。木聚糖酶作为一种重要的工业酶制剂，大部分来源于陆地，该文对木聚糖酶的海洋微生物来源、生产及应用现状进行综述，以期为木聚糖酶基因的研究提供参考。     

乳酸脱氢酶高产菌株的分离筛选与初步鉴定

通过筛选食品和土壤等样品中的芽孢杆菌,分离纯化得到136株菌株,经过培养和镜检,再筛选到12株菌株,比较其产乳酸脱氢酶的活力,其中BJ07活力最强,其细胞破碎液的酶比活为0.26 U/mg.经过形态和生理生化鉴定,初步确定BJ07菌株为枯草芽孢杆菌,研究其生物学特性,测定该菌株的生长曲线,其最适生长温度为34 ℃.     

Diversity of lactic acid bacteria in fermented brines used to make stinky tofu

Stinky tofu is a kind of fermented tofu with a strong odor. Although stinky tofu is a very popular snack in the Asian region, the community of microbes, and especially lactic acid bacteria (LAB), indigenous to the fermented brine from which it is made remains poorly described. We examined 168 isolates obtained from the original fermented brine (brine A) and two brines in which the hard tofu (brine B) and soft tofu (brine C) had been soaked. Through random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis for typing and 16S rDNA sequencing, 136 representative strains were identified as belonging to 7 genera and 32 species: Enterococcus (2 species), Lactobacillus (14 species), Lactococcus (3 species), Leuconostoc (6 species), Pediococcus (1 species), Streptococcus (2 species), and Weissella (4 species). The LAB composition of brine A was the most diverse: 19 different species were isolated, and 9 of them were classified as Lactobacillus species. The 16S rDNA sequences of 9 strains (6 from brine A and 3 from brine C) showed low values of similarity (below 98%) with currently known species by analysis using the FASTA software. Thus, a wide variety of LAB strains were associated with the fermentation of stinky tofu brines.     

腌鱼中耐盐酵母菌的分离鉴定及其生理生化特性

为了获得生产性能优良的菌株,采用PDA固体培养基平板涂布法从腌鱼中分离、纯化酵母菌,研究优势耐盐酵母菌株的生长温度、耐酸能力、耐亚硝酸盐能力等生理生化特性及ITS rDNA分子生物学鉴定。结果表明,15种不同种类腌制海鱼中共分离出436株酵母菌,经纯化后获得9株不同种属的酵母菌,通过不同NaCl含量的YPD液体培养基对9株酵母菌进行筛选,最终筛选出7^#季也蒙毕赤酵母和9^#奥默柯达酵母两株耐盐性较好的优势耐盐酵母菌菌株,耐盐能力分别达到9%和12%,最适生长温度均在28~32 ℃之间,最适pH在5~6之间,耐亚硝酸盐含量可达100 mg/kg。腌鱼中获得优势菌株具有良好的生长性能,可为腌鱼制品发酵剂的开发奠定基础。     

年糕中微生物的分离纯化和鉴定

通过对发生腐败变质的真空包装年糕中微生物进行分离、纯化和反证得到2株细菌、3株酵母菌、1株霉菌。经过形态观察、生理生化、微生物鉴定系统等方法,初步鉴定2株细菌分属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、不动杆菌属(Acinetobacter sp.),3株酵母菌都属于假丝酵母属(Candida spp.),1株霉菌属于构巢曲霉(Aspergillus nidulans)。     

生猪养殖场环境及屠宰加工环节金黄色葡萄球菌污染及耐药谱状况

为了探究养殖及流通环节金黄色葡萄球菌污染及其耐药状况,采集某养殖场环境,屠宰加工环节及某市场生猪肉等507份样本。根据国标GB 4789.10-2010分离金黄色葡萄球菌136株;纸片扩散法、E-test法检测分离菌株耐药谱;聚合酶链式反应(PCR)检测所有菌株携带四环素、大环内酯类、林可酰胺类耐药基因及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicilin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)特异性基因mec A与mec C(即mec ALGA251)状况。结果表明,来自屠宰场生猪肉样本金黄色葡萄球菌污染率达44.11%(60/136),与其它来源的分离率相比有显著性差异(P0.05);对临床用于治疗金黄色葡萄球菌感染的青霉素、四环素及克林霉素耐药率分别为92.64%(126/136)、56.61%(77/136)、50.00%(58/136);多重耐药达56.62%(77/136);耐药谱以CIP/P/CN/TE/CLR/SXT/DA,P/CLR/DA,CIP/P/TE/CLR/C/SXT/RD/DA为主;金黄色葡萄球菌携带耐药基因较为严重,其中耐四环素基因tet K检测率为最高,达90.44%。研究结果为控制多重耐药金黄色葡萄球菌随食物链的传播的提供科学依据。     

The functional property of Bacillus for shrimp feeds

In shrimp cultures, feed represents the most expensive production cost. The quantity and quality of diets are primary factors influencing shrimp growth, nitrogen loading of the culture system and disease proliferation. For these reasons there is an interest in developing 'environmentally friendly' feeds for optimal growth. In this study, Bacillus strains were isolated from marine environments. The isolates were qualitatively assayed for proteases, carbohydrolases and lipases using selective media. The selected strains (9b, 31 and 33) were molecularly identified as Bacillus subtilis, B. megaterium and B. megaterium, respectively. Subsequently the strains were grown in an inexpensive culture medium (soybean mineral medium (MMS)). The information generated from the present investigation may contribute towards better feed formulations for shrimp at low cost, including bacterial strains as probiotics.     

优质新型泸型大曲的研制及应用

从优质大曲中筛选出5株各具特色的优良功能菌，即糖化功能菌C－24和A2－3，发酵功能菌S2.10，生香功能菌R－3和S2.1182。将它们配制成复合菌种接入泸型大曲中，制成的新型泸曲无论是感官指标还是理化指标都明显优于对照，出酒率提高6.49%。     

上海临港海域产蛋白酶海洋细菌的筛选及鉴定

从上海临港海域采集海水及海泥样品,分离得到170株海洋细菌,经酪蛋白点种法初筛及福林酚显色法复筛筛选到一株高产蛋白酶菌株SE2011。通过形态学观察、生理生化鉴定及16SrDNA鉴定和系统发育分析,鉴定为鳗利斯顿氏菌。生长特性研究表明,该菌在15～30℃范围内生长良好,最适生长温度为30℃;生长盐度范围为0～7%(W/V),最适生长盐度为1%(W/V)。酶学性质研究表明,该菌所产蛋白酶在30～90℃范围内有活性,最适温度为55℃;在pH6.0～10.0之间有活性,最适pH为8.0,属碱性蛋白酶范畴。