黄绿木霉菌菌株产几丁质酶发酵条件的研究

[目的]研究黄绿木霉菌(Trichoderma aureoviride sp.)产几丁质酶的最佳发酵条件,为几丁质酶工业提供新酶源.[方法]采用正交试验设计,以DNS法测定酶解后糖含量变化为指标,对发酵务件进行优化.[结果]在以2%胶体几丁质为碳源、2%蛋白胨为氯源、摇床转速为170 r/min时,黄绿木霉菌产几丁质酶的最佳发酵条件组合:培养基的初始pH为5,接种量为8%,瓶装量为20 ml,在28℃下培养6 d.[结论]试验确定了黄绿木霉菌产几丁质酶最佳条件,为其在工业生产中的应用奠定了基础.     

果胶酶产生菌的分离及其产酶条件研究

[目的]从自然界寻求高效的果胶酶生产菌株,减少生产成本,使发酵产生的果胶酶直接应用于果汁、果酒等的澄清中.[方法]从富含果胶质的土壤及腐烂水果中采集样品,筛选出2株产酶活性相对较高的菌株,并对其最佳培养时间、培养温度、最适pH以及最适接种量等酶学性质进行初步研究.[结果]确定了2个菌株的最佳培养条件:A1在28 ℃,pH 7.0,接种量20%,发酵周期48 h时产酶最高,具有较强的分解果胶质的能力;A2在31 ℃,pH 7.0,接种量30%,发酵周期60 h时产酶最高,其有较强的分解果胶质的能力.[结论]菌株A1生长繁殖周期较短,具快速的生长期.同时生长的外界环境易于获得,但产酶效益较低,酶学曲线波动较大.稳定性差;A2具长的生长期,所需培养温度也较高,培养条件有些难度,但产酶效益较高,总体酶学曲线稳定性较好,具长的稳定期.     

脂肪酶产生菌的筛选·产酶条件及酶特性研究

[目的]筛选脂肪酶高活性菌株作为脂肪酶生产菌株和脂肪酶基因的供体菌.[方法]从油脂厂等地采集26份含菌样品,采用溴甲酚紫平板对样品进行初筛,以产脂肪酶发酵培养基摇瓶复筛,获得1株产脂肪酶活性较高的菌株09-7-1,经鉴定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger).采用正交试验对影响该菌株产酶的因素进行了研究,并探讨了该菌株所产脂肪酶的性质.[结果]该菌株最佳产酶条件:碳源为0.5%的可溶性淀粉,氮源为0.2%的酵母膏,培养温度为32℃,发酵液pH为5.2,该菌株最初发酵液中酶活力为13.164 U/ml,优化后酶活力达24.112 U/ml,是最初酶活力的1.83倍.该菌株所产脂肪酶最适作用温度为30℃,最适作用pH为7.0;酶液在60℃保温90 min后,活性损失较少,pH为5.5～10.0内稳定.[结论]该研究可为脂肪酶生产和基因研究奠定基础.     

三唑磷降解菌C-Y106的分离·鉴定及其降解特性研究

[目的]筛选能高效降解三唑磷的菌株,并研究其降解特性.[方法]从三唑磷生产厂的曝气池活性污泥中分离到1株三唑磷降解菌C-Y106,并根据C-Y106的形态、生理生化特征和16S rRNA同源性序列分析进行了菌株鉴定,同时研究了不同营养的培养基对C-Y106降解三唑磷速率的影响.[结果]经鉴定,C-Y106为枯草芽孢杆菌.C-Y106能以三唑磷为唯一碳源、唯一氮源、唯一磷源生长,其中以三唑磷为唯一磷源时其降解速率最大,且在31 ℃、初始pH值为8.0、150 r/min条件下,培养60 h后,三唑磷降解率为76.8%.[结论]为三唑磷降解酶的分离纯化提供了理论依据.     

北冰洋产淀粉酶海洋细菌的筛选与鉴定及其产酶条件的优化

[目的]筛选与鉴定北冰洋产淀粉酶海洋细菌,并对筛选出的细菌进行产酶条件优化.[方法]从156株北冰洋海洋细菌中筛选出淀粉酶高产菌株Arc B84A,并对其进行了菌株形态学鉴定、16S rRNA分子鉴定以及产酶条件优化.[结果]菌株Arc B84A属于交替假单胞菌属.菌株Arc B84A的最佳产酶条件为:培养基起始pH值为7.0～8.0;最佳碳源为0.5%葡萄糖;最佳氮源为1.0%蛋白胨;TritonX-100、Tween-20、Tween-80等表面活性剂可以提高菌株淀粉酶活性,其中1.0% Tween-80的效果最为明显.[结论]该研究为海洋细菌淀粉酶的生产与应用提供了理论依据.     

木质素降解酶的研究进展

从木质素降解酶的组成、作用机理、分子生物学研究、营养调控研究4个方面对木质素降解酶研究新进展进行了综述,并对木质素降解酶在工农业固体废弃物处理方面的应用做了展望.     

利用正交法分离鉴定苯胺降解菌及对其降解特性的研究

[目的]利用正交法分离鉴定苯胺降解菌,并对其降解特性进行研究.[方法]在某印刷厂排污口周围土壤样品中分离筛选出3株苯胺降解菌,测定其生理生化特性,并对其16s rDNA序列进行分析,考察不同温度、pH、摇床转速、培养时间及苯胺浓度对一株高效苯胺降解菌降解率的影响,并以苯胺降解率为指标,选择温度、pH、摇床转速、培养时间及苯胺浓度等因素进行正交试验设计,优化该菌株对苯胺的降解条件.[结果]3株苯胺降解菌AN-Y、AN-B和AN-H分别鉴定为Pseudomonas sp.、Acinetobacter gerneri和Delftia sp.;生长和降解效果的最适温度为30℃,最适pH为7.0,并可分别在苯胺浓度为3 300、2 000和3 000 mg/L基础培养基上生长;耐受能力最强的降解菌AN-Y其最佳降解条件为温度35 ℃、pH 8.0、苯胺浓度2 000 mg/L、摇床转速160 r/min、培齐时间72 h;方差分析表明,苯胺浓度对降解菌降解苯胺的效果影响最为显著.[结论]研究结果为苯胺降解菌的培养研究提供了参考.     

红树林湿地土壤萘降解菌的分离与鉴定

[目的]研究降解菌株对萘的降解能力,为其应用于被石油污染滨海湿地的生物修复提供参考.[方法]采用富集培养方法,从珠海市淇澳岛被石油污染的红树林湿地土壤中富集、分离和筛选出能降解萘的菌株,观察各菌落及菌体形态特征;研究菌株N4的生理生化特征,并应用16S rDNA序列分析方法进行鉴定.[结果]从土壤样中分离得到26个能以萘为唯一碳源生长的菌株,其中4个在平板上菌落较明显且具有不同的菌落特征,分别命名为N1、N2、N3和N4.菌株N4对萘的降解能力最强,在初始萘浓度为100 mg/L的无机盐培养基中培养5 d,萘降解率为54.2%,而菌株N1、N2和N3的降解率分别为52.7%、52.5%和47.8%.菌株N4经16S rDNA序列分析方法鉴定为赤红球菌.[结论]从被石油污染的红树林湿地土壤分离筛选出对萘具有较高降解能力的菌株.     

高效盖草能降解菌的分离与鉴定

针对海南地区长残效除草剂残留对后茬产生药害问题,以高效盖草能作为研究对象,采用富集培养的方法从长期施用长残效除草剂的土壤中分离到3株细菌,经过对这3株降解菌的培养特性及生理生化特征的测定试验,经传统鉴定方法对3种菌种进行鉴定,结果显示,HM1和HM2同为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),HM3为甲基球菌属(Methyloeoccus sp.).并分别研究了培养含糖量、温度、pH和高效盖草能初始浓度对分离出的3株降解菌生长的影响,结果表明,HM1和HM3的最适含糖量是0.HM2的最适含糖量为0.5%;HM1和HM3的最适温度范围相同,为20～37℃,HM2的最造温度为25～41℃;HM1、HM2和HM3的最适生长温度分别是35、30和30℃;HM3的生长对酸碱度要求不严格,最适生长pH范围为6.0～9.0.HM1适宜在中性偏酸的条件下生长,而HM2则适宜在中性偏碱的条件下生长,其最适生长pH均为6.0～8.0;HM1和HM2生长的最适高效盖草能浓度是100 mg/L,HM3生长的最适高效盖草能浓度为200mg/L.     

聚丁二酸丁二醇酯(PBS)降解菌的筛选及降解特性研究

通过土壤筛选和诱变,获得了一株对聚丁二酸丁二醇酯(PBS)具有降解作用的真菌Aspergillus versicolor DS0503-a,探讨了该菌株及其产生的PBS降解酶的作用机制,同时进行了菌株混合培养降解PBS的实验,从菌株互生和酶协同作用的角度探索了混菌降解PBS的特性和规律.结果表明:该菌株对PBS粉末和薄膜都具有明显的降解作用,产酶的最适pH值和温度分别为5.5和28℃;分泌的解聚酶以外切形式从羧基端对PBS链进行剪切,特定菌株的混合培养可以显著提高微生物对PBS的降解效率.     

2种微生物絮凝剂高效产生菌的筛选和培养条件的优化

[目的]筛选微生物絮凝剂高效产生菌,并优化其培养条件.[方法]从活性污泥中分离纯化絮凝剂产生菌株,考察它们对焦化废水的絮凝效果,并探讨了利用糖蜜废液作为廉价培养基扩大培养菌株的可行性.[结果]从活性污泥中共得到4株絮凝率>70%且絮凝特性稳定的菌株.其中,J-Y1和J-Y2菌液的絮凝活性最好,对高岭土悬浊液的絮凝率分别为94.4%和98.9%,在处理焦化废水时絮凝率最高分别也达到88.4%和93.9%.J-Y1和J-Y2在糖蜜废液中均生长良好,且糖蜜浓度未对絮凝率产生显著抑制.[结论]糖蜜废液可为J-Y1和J-Y2的扩大培养提供廉价的营养,并且这两个菌株在优化的试验条件下均具有相当高的絮凝能力,表明它们在废水处理中有巨大的应用潜力.     

胡椒果皮脱胶菌的分离及筛选

[目的]建立胡椒果皮脱胶菌分离、筛选的方法.[方法]从胡椒种植园的土样中采集样品30份,通过初筛、复筛及胡椒脱皮试验分离、筛选胡椒果皮脱胶菌.[结果]分离出7株能产生果胶酶的菌株,其中2株菌株产生的果胶酶活性较高;胡椒脱皮试验结果表明,菌株QH-2在4 d内脱胶效果较好,脱皮后胡椒产品感官评价优良.[结论]该研究建立的方法为胡椒果皮高效脱胶菌的筛选奠定了基础.     

多环芳烃厌氧降解菌的筛选与鉴定

[目的]筛选并鉴定多环芳烃厌氧降解菌.[方法]通过富集,在厌氧条件下从受焦油长期污染的土壤中筛选出多环芳烃的高效厌氧降解菌,并对其进行了生理生化试验和16S rDNA鉴定.[结果]从受焦油长期污染的土壤中分离出2株多环芳烃降解菌W2和Y3,经综合表征和16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株W2为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomo sp.),菌株Y3为芽孢杆菌属(Bacillus sp.).[结论]为多环芳烃的生物降解研究提供了理论依据.     

产抑菌活性物质放线菌菌株的筛选

[目的]筛选产抑菌活性物质的放线菌菌株.[方法]以金黄色葡萄球菌、对青霉素和头孢菌素类耐药的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为指示菌,采用滤纸片扩散法对300株放线菌的发酵产物进行抗菌活性筛选,通过最小抑菌浓度法(MIC)时筛选的阳性菌株进行抗菌活性测定.[结果]筛选到抗菌活性物质产生菌111株,抑菌率为37.0%;其中对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和耐药金黄色葡萄球菌有抑制活性的菌株分别为111、10和47株.各菌株的最小抑菌浓度有很大差别,菌株174883对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,其发酵样品稀释到2048倍仍然表现出抑菌活性.用青霉素酶和头孢菌素酶作用于阳性菌株发酵产物,筛选到6株菌株代谢产物的抑菌活性变弱,菌株32349和kj0428的抑菌活性被抑制最明显.[结论]筛选得到的阳性放线菌菌株具有良好的抗菌活性,为新型抗生素的筛选提供了研究基础.     

桑园专用杀虫剂的田间药效筛选及家蚕残毒试验

[目的]筛选出对桑园害虫防治效果好,桑叶残毒对家蚕影响小的杀虫剂.[方法]采用室内毒力测定、田间药效试验、农药残留速测以及残毒测定相结合的方法进行试验.[结果]室内毒力测定结果表明,桑树1号对桃粉绿芽的LC50为(316.1±57.3)mg/kg,桑树1号在药后14 d,防效达62.58%;药后7d的农药残留速测显示可安全饲育家蚕,达到用叶标准.[结论]推荐桑树1号作为桑园专用杀虫剂使用.     

抗性筛选在抗生素高产菌选育中的应用

抗生素产生菌的产抗能力与其对抗生素的抗性之间具有一定的相关性,这为抗生素高产菌株的定向筛选提供了一种有效方法,即抗性筛选.综述了抗生素高产菌选育中抗性筛选的机理及其应用.     

人参土传病害生防菌株的筛选及抑菌活性研究

[目的]筛选获得对人参土传病害具较好防治作用的生防菌株.[方法]采用稀释平板法和平板对峙培养法从患病人参根际土中分离筛选生防菌,并对菌株进行形态学、生理生化特征和16S rDNA鉴定.[结果]以立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、尖镰孢菌(Fusari-um oxysporum)和腐皮镰孢菌(Fusarium solani)为指示菌株,从黑龙江铁力农场患病人参根际土中筛选获得2株具较强拮抗作用的生防菌株B59和X1,鉴定为枯草芽孢杆菌.2株生防菌对8种不同真菌的抑菌率平均达90%以上,初步研究表明B59和X1菌株可分泌抗菌活性物质.[结论]2株生防枯草芽孢杆菌B59和X1菌株对人参土传病原菌具较强的拮抗作用,具有一定的开发应用潜力.     

拟南芥抗氧化突变体筛选条件的建立

[目的]建立筛选拟南芥抗氧化突变体的条件.[方法] 将灭菌的野生型拟南芥种子播种于MS培养基上,4 ℃层化2 d,并于23 ℃培养室中垂直放置培养4 d后,将幼苗转移至含有不同浓度的甲基紫精(MV)胁迫培养基中,倒置培养,比较不同MV浓度下根的弯曲生长情况,以根停止弯曲生长的MV浓度作为抗氧化胁迫突变体的筛选条件.[结果]野生型拟南芥幼苗的根在MV浓度为0.7 μmol/L时受到明显抑制,停止生长;在MV浓度低于0.7 μmol/L时能正常生长或被轻微抑制.[结论]确定筛选抗氧化突变体的MV浓度为0.7 μmol/L.     

角蛋白分解真菌的分离筛选及初步鉴定

[目的]为动物角蛋白的高效、经济降解和利用提供新种质资源.[方法]采用传统分离筛选、固体基质降解和动物试验相结合的方法,对角蛋白降解菌进行了分离筛选及初步鉴定.[结果]得到1株非致病、降解效率较高的丝状真菌,并初步鉴定为毛霉科(Mucora-ceae)的一个种.[结论]该菌株的发现丰富了角蛋白降解菌的家族成员,为动物角蛋白的降解利用提供了新种质资源.