黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的分子鉴定

为了揭示贵州省黔南烟区马铃薯Y病毒(PVY)株系分布及分子变异规律,先利用血清学方法初步鉴定PVY株系,再选择19个PVY分离物进行分子鉴定.结果表明,克隆的19个PVY cDNA片段全长均为1074 nts,包含1个801 nts的完整cp基因,编码266个氨基酸.序列比对发现,19个黔南PVY分离物cp基因核苷酸序列相似性为87.0％ ～ 99.9％,与GenBank登录的其他17个PVY株系cp基因序列相似性为86.6％ ～ 99.9％.系统进化树分析表明,黔南烟区19个PVY分离物中,有3个PVY分离物与PVYN株系和PVYNTN亲缘关系较近,而其他16个PVY分离物与PVYNN:O株系的亲缘关系最近.     

花生条纹病毒在芝麻上流行研究初报 ？

调查和试验结果说明：感染ＰＳｔＶ的花生是芝麻黄花叶病毒病主要初侵染源。桃蚜传毒效率最高，为３５％，豆蚜、大豆蚜和棉蚜传毒效率均很低。病害流行与蚜虫发生密切相关。供试的１０个芝麻栽培品种均不抗病，但存在一定成株期抗性。自花生条纹病毒（ＰＳｔＶ）感染的芝麻病株上收获的种子，种植后未发现病毒种传现象。     

炒芝麻风味的分离与鉴定

通过特别设计制造的电热解析器解析出香气成分,并收集在用液氮(-196℃)冷却的冷阱中。根据所得的质谱图确定了29个化合物的结构,包括几种在炒芝麻风味研究中未见报道的含硫化合物,获得了中国安徽省宣城黑芝麻的焙炒香味。     

芝麻过敏原的分离、鉴定与纯化

通过SDS-PAGE电泳分离芝麻的蛋白质组份,采用免疫印迹(Westem-blotting方法其鉴定过敏原,通过离子交换层析对芝麻主要过敏原进行初步纯化.结果表明白芝麻粗提液SDS-PAGE显示有14条蛋白条带.黑芝麻粗提掖SDS-PAGE显示有16条蛋白条带.Western-Blotting显示对芝麻过敏患者的混合阳性血清均能与黑芝麻、白芝麻11 ku蛋白反应,离子交换层析可初步纯化出白芝麻11 ku的过敏原蛋白.     

花生与芝麻混合压榨油的氧化稳定性研究

试验采取原料先混合后压榨的方法制备混合压榨油并研究其氧化稳定性,并通过化学方法及高效液相色谱法分析了多酚和木酚素类物质的含量与DPPH·清除能力等,初步分析了其抗氧化机理。结果表明花生芝麻混合压榨油的抗氧化能力优于传统调和油,芝麻中多酚类物质对混合压榨油的氧化稳定性起关键作用,其中白芝麻的效果优于黑芝麻;芝麻中结合多酚的含量约为自由多酚的5倍,自由多酚的DPPH·清除能力约为结合多酚的2倍,白芝麻花生混合压榨油的木酚素类物质比黑芝麻花生的略多20%,较传统压榨油多出30%~50%。     

福寿螺(Ampullaria crossean)mfc 基因的分子克隆和序列分析

目的:从福寿螺胃组织细胞中扩增多功能纤维素酶基因,与pGEM T-easy载体连接,转化大肠杆菌删DH5 a.结果:该基因全长为1 225 bp,上游5'端非翻译区19 bp,3'端非编码区21 bp,开放阅读框(0pen reading frame,ORF)1 185bp,编码395个氨基酸,推测等电点pI为6.57,分子质量45.8k Da.推测的多功能纤维素酶具有糖苷水解酶保守的氨基酸序列,属于糖苷水解酶第10家族.同源性比对结果显示,该基因及推测的氨基酸序列与egx(GenBank Accession No.AAP 31 839)的同源性分别为99.3%和99.8%,在8个位点出现核苷酸差异.在1个位点出现氨基酸差异.通过软件分析并预测,该基因编码的蛋白共存在14个丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸化位点.没有信号肽序列.结论:成功克隆出福寿螺多功能纤维素酶基因.     

一株产脂肪酶芽孢杆菌的鉴定及其脂肪酶基因LIP的克隆分析

依据形态学和生理生化特征,将一株产脂肪酶芽孢杆菌BL03初步鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis).提取该菌核酸,PCR扩增出地衣芽孢杆菌脂肪酶基因LIP,克隆到pMD19-T载体后进行PCR鉴定及序列测定和生物信息学分析,结果表明该菌LIP基因片段完整,开放阅读框为615bp,编码204个氨基酸,与已发表地衣芽孢杆菌脂肪酶基因(GeneID:3098655)相比,核酸序列相似为99.67％,推导编码氨基酸序列相似性为99.02％,该基因的获得为其异源表达及相关研究奠定了基础.     

一株产脂肪酶芽孢杆菌的鉴定及其脂肪酶基因LIP的克隆分析

依据形态学和生理生化特征,将一株产脂肪酶芽孢杆菌BL03初步鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）。提取该菌核酸,PCR扩增出地衣芽孢杆菌脂肪酶基因LIP,克隆到pMD19-T载体后进行PCR鉴定及序列测定和生物信息学分析,结果表明该菌LIP基因片段完整,开放阅读框为615bp,编码204个氨基酸,与已发表地衣芽孢杆菌脂肪酶基因（GeneID:3098655）相比,核酸序列相似为99.67%,推导编码氨基酸序列相似性为99.02%,该基因的获得为其异源表达及相关研究奠定了基础。      

花生、大豆、芝麻与绿茶复合饮料的研制

以花生、大豆、白芝麻、绿茶叶、姜为主要原料,添加适量的其它辅料,经烘烤、浸泡、磨浆、调配、均质、脱气、杀菌等工艺研制出口感优良、风味独特、香气浓郁、营养丰富、质量稳定的具有一定保健功效的饮料.试验采用对比试验、正交试验找出最佳工艺条件和配方.该饮料的最佳配方为:100mL饮料中混合浆液50mL,姜茶汁20mL,糖6g,柠檬酸0.15g.     

可变形芝麻和花生饼的渗透率试验与数值模拟

进行了芝麻与花生饼植物油料的压榨渗透率试验。考虑芝麻与花生饼的孔隙率、渗透率在压榨过程中的变化,根据流固耦合渗流理论,建立了可变形芝麻与花生饼的一维渗流微分方程,给出了一维定常耦合渗流问题的解析解。在渗透率的试验基础上,采用改进模拟退火计算方法对与芝麻与花生饼渗透率模型参数进行了反演。研究表明:饼中孔隙压力与渗透率均为非线性分布;渗透率与有效应力呈指数关系。     

芝麻中脂肪酸成分的GC分析

选取黑芝麻和白芝麻两个品种,研碎,用甲醇和氯仿提取脂肪,将提出的脂肪甲基化,并用TLC分离纯化甲基酯,纯化的甲基酯通过100m×0.25mm的GC毛细管柱来测定脂类中脂肪酸组成.结果显示:芝麻中主要含有10种脂肪酸,不饱和脂肪酸为主要成分,其中单不饱和脂肪酸的含量分别为38.888%,40.041%,主要为油酸,其含量分别为38.616%,39.759%;多不饱和脂肪酸含量分别为44.695%,44.545%,主要为亚油酸,其含量分别为44.026%,44.119%.同时还发现有少量的共轭亚油酸的存在.分析表明,黑芝麻和白芝麻的脂肪酸组成相近.     

芝麻、花生营养豆腐的研制

以黄豆、花生、芝麻为原辅材料生产内脂豆腐,利用三者之间营养成分的差异进行互补,突出表现为氨基酸的含量大大提高,豆腐香味更加浓郁诱人     

山东烟区主要病毒的株系鉴定

1995年至1997年间,从山东烟区各主要产烟县(市)采集病毒样品,经鉴定、分类、分离、纯化后,对纯化物进行了生物学特性、病毒粒体形态、血清学关系等方面的比较,从而明确了山东烟区主要烟草病毒病病原物的株系:烟草黄瓜花叶病毒的普通株系(CMVc)、坏死株系(CMVTN)、黄化株系(CMVY);烟草普通花叶病毒的普通株系(TMVC)、坏死株系(TMVN)、黄化株系(TMVY)、环斑株系(TMVRS);烟草马铃薯Y病毒的普通株系(PVYO)、坏死株系(PVYN);烟草蚀纹病毒的轻症株系(TEVM)、重症株系(TEVs)。其中烟草黄瓜花叶病毒的普通株系(CMVC)、烟草普通花叶病毒的普通株系(TMVC)、烟草马铃薯Y病毒的坏死株系(PVYN)、烟草蚀纹病毒的重症株系(TEVS)是优势株系。烟草蚀纹病毒(TEV)的株系毒力分化属国内首次报道。      

嗜热链球菌胸苷酸合成酶基因的克隆与序列分析

本研究以嗜热链球菌(S．thermophilus)染色体DNA为模板,利用PCR技术扩增出胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,thyA)基因,将其克隆入T载体中,转化DH5α,筛选阳性克隆,提取质粒,进行酶切鉴定,PCR扩增鉴定,进行测序,与已知序列进行同源性比较,结果表明成功克隆了thyA基因,全长900bp,与国外报道的S．thermophilus ATCC19258 thyA基因同源性达99．9%。这为构建以thyA基因为选择压力的非抗生素抗性载体提供了理论依据。     

黑龙江烟区烟草马铃薯Y病毒株系的分子鉴定

为明确黑龙江烟区烟草马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)株系种类及其分布状况,采用多重PCR技术及测序手段,对采集黑龙江省烟叶产区的107份疑似PVY样品进行了鉴定分析。结果表明:4个有代表性的PVY分离物HLJ-SH8、HLJ-SC2、HLJ-SC6和HLJ-MDJ4的基因组序列全长分别为9 698、9 702、9 702和9 698 bp,都包含一个由9 186 bp组成的开放读码框(ORF),编码一个由3 061个氨基酸组成的多聚蛋白。系统进化树分析结果表明这4个PVY分离物分别为PVYNTN、PVYN、PVYNW和PVYNTN-NW株系,其中PVYNTN-NW株系是侵染黑龙江烟草的优势株系。      

纯芝麻酱中花生致敏蛋白Ara h2、Ara h3及芝麻蛋白2S albumim的分析鉴定比较

针对花生致敏蛋白Ara h2、Ara h3及芝麻蛋白2S albumim,使用实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)及酶联免疫吸附法(ELISA)对纯芝麻酱中上述蛋白进行检测.两种方法的特异性、重复性方法学验证显示均良好.验证后使用实时荧光定量PCR法对纯芝麻酱DNA进行芝麻蛋白2S albumim基因、花...     

烟草花叶病毒病的分子鉴定

为了建立烟草病毒病的分子鉴定体系,采用TMV,CMV和PVY3种病毒的检测引物对烟草花叶病样品进行了RT-PCR扩增,并从核酸水平上对病毒基因序列进行了分析。RT-PCR鉴定结果显示,该病害病原为TMV,测序结果显示扩增产物长923bp,序列比对后发现该序列与TMV3个中国分离物的同源性高达97%,序列分析结果表明该段序列位于TMV基因组3'末端,包含部分MP基因、完整CP基因和3'端非编码区。对CP基因进行了系统进化分析,且该序列已成功登陆GenBank。     

一株芝麻枯萎病菌的鉴定及其生物学特性

为明确发生在南阳芝麻田块的芝麻枯萎病病原物,以有效防治病害,从南阳市采集枯萎病显症芝麻植株,用常规组织分离法获得一株镰刀菌ZY-2,依据柯赫法则确定ZY-2对芝麻幼苗的致病性,显微观察形态特征,检测生物学特性,并依据核糖体基因内转录间隔区（rDNA-ITS）序列和翻译延伸因子1α基因（tef）序列对该菌进行分子鉴定。在基于rDNA-ITS序列构建的系统发育树中,菌株ZY-2与2株尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum的参比菌株（GenBank登记号：AF69310和EU285553）在自举值98%相聚一群。基于tef基因序列构建的系统发育树中,菌株ZY-2与3株F.oxysporum的参比菌株（GenBank登记号：KF030591、KF301636和FJ985299）在自举值100%相聚一群。该菌适宜生长温度为22~31℃,最适为28℃;pH2.0~10.0范围内均可生长,最适为pH6.5~7.5;能利用多种碳源和氮源进行营养生长,但在以葡萄糖和L-脯氨酸分别作为唯一碳源和氮源的培养基上不产生分生孢子。     

几株酵母菌的分子系统学鉴定

通过对酵母菌5.8S核糖体RNA的ITS区域PCR扩增及限制性酶切片段多态性(RFLP)的图谱分析以和26S rDNA D1/D2区及5.8S-ITS区的序列分析,共鉴定13株分离自新疆鄯善地区的葡萄酒相关酵母菌。5.8S-ITS区的4种内切酶(HaeⅢ、Hin6Ⅰ、HinfⅠ、AluⅠ)的酶切分析产出4种特异性图谱。根据26S rDNA D1/D2区的序列分析和BLAST比对,将供试菌株鉴定为4个属4个种,分别为Saccharomyces cerevisiae、Candida zemplinina、Hanseniaspora uvarum、Pichia kluyveri var. kluyveri;而根据5.8S-ITS-RFLP及5.8S-ITS序列分析,将供试菌种鉴定为Saccharomyces cerevisiae、Candida zemplinina、Hanseniaspora uvarum、Issatchenkia terricola 4个属4个种。3种方法对供试的10个菌株的鉴定结果一致,而对另外3株的鉴定结果不同。