阿魏酸酯酶对晒青毛茶发酵过程的影响

以晒青毛茶为原料,研究阿魏酸酯酶对晒青毛茶发酵过程中活性物质的影响。利用高效液相色谱法以及分光光度计法测定茶叶中各种活性物质含量的变化。实验结果表明,发酵8 d后茶叶的水浸出物、还原糖、阿魏酸及低聚木糖均比晒青毛茶高,茶汤的p H值及游离氨基酸含量下降。在晒青毛茶中同时添加3 m L(75 U/m L)阿魏酸酯酶和3 m L(75 U/m L)木聚糖酶,在发酵第8天阿魏酸及低聚木糖分别可达838. 9μg/g及3. 78μg/g,比不添加任何酶的茶样分别高20. 9%及38. 6%。在晒青毛茶发酵过程中,同时添加阿魏酸酯酶与木聚糖酶有利于提高茶叶的品质,从而提升茶叶的附加值。该研究结果对发酵型茶的保健功效提供一定的理论依据。     

HPLC法同时检测食醋中川芎嗪和阿魏酸的含量

本文建立了一种高效液相色谱法同时检测食醋中川芎嗪和阿魏酸的方法,其检测条件为:采用Sepax GP-C18柱,流动相:甲醇∶水(含0.2%冰乙酸)=23∶77(v/v),检测波长310nm,柱温35℃,进样量10μL,1.0m L/min等梯度洗脱。结果表明:川芎嗪在1.00~60.00μg/m L的浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数R2=0.990,保留时间为14.71min;而阿魏酸在1.00~15.00μg/m L的浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为R2=0.997,保留时间为19.45min;该方法检测川芎嗪和阿魏酸的检出限分别为0.115、0.041μg/m L,测定限分别为0.383、0.135μg/m L;加标回收实验的结果得出川芎嗪的平均回收率为100.01%,阿魏酸的平均回收率为99.85%。该方法快速、灵敏、准确,样品前处理简便,可应用于食醋产品中川芎嗪和阿魏酸检测。     

HPLC同时测定靓靓胶囊中没食子酸、葛根素、芍药苷、阿魏酸的含量

建立同时测定靓靓胶囊中没食子酸、葛根素、芍药苷及阿魏酸含量的方法。采用高效液相色谱法,对有效成分进行分离并测定其含量,色谱条件为Waters Symmetry C18(4.6mm×250mm×5μm)液相色谱柱,以乙腈-0.02%三氟乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长250nm(没食子酸,葛根素,芍药苷);316nm(阿魏酸),流速为1.0m L·min-1,柱温30℃。在上述色谱条件下,没食子酸,葛根素,芍药苷,阿魏酸之间有良好的分离度,没食子酸、葛根素、芍药苷、阿魏酸的线性范围分别为11.54-144.23μg·m L-1(r=1);26.67-160.04μg·m L-1(r=0.9998);12.45-124.45μg·m L-1(r=0.9997);1.00-10.01μg·m L-1(r=0.9996)。4个成分的平均回收率分别为没食子酸100.37%,葛根素98.44%,芍药苷98.89%,阿魏酸98.72%(RSD分别为1.78%,2.14%,1.83%,1.78%)。线性考察,精密度试验,重复性试验,稳定性试验,加样回收率试验均符合方法学验证试验相关要求。本方法简便,准确,重复性好,专属性好,适用于靓靓胶囊的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定心动颗粒中阿魏酸和欧前胡素的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定心动颗粒中阿魏酸和欧前胡素含量。方法色谱柱为Welchrom@C18反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-水(10 mmol/L磷酸)(B),梯度洗脱:0~3.5 min,15%A;3.5~12 min,15%A→25%A;12~21 min,25%A);流速1.0 m L/min;检测波长310 nm;柱温35℃。结果阿魏酸和欧前胡素的质量浓度分别在5.19~51.90μg/m L和5.20~52.05μg/m L浓度范围内呈良好的线性关系(r20.9995),平均回收率分别为98.34%和98.06%,RSD分别为1.02%和0.96%(n=6)。结论本测定方法简便、准确,稳定性、重复性好,适用于心动颗粒中阿魏酸和欧前胡素的含量测定。     

液相色谱法测定发酵液中阿魏酸酯酶的活力

基于高效液相色谱法测定产物阿魏酸含量的方法,建立了阿魏酸酯酶酶活力的测定方法。实验采用ZORBAX Eclipse Plus C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, Agilent),以甲醇∶1%乙酸=70∶30作为流动相,等度洗脱(柱温35℃,流速1.0 ml/min,进样量10μl),在254 nm下测定阿魏酸含量。结果表明,该法测定酶反应产物阿魏酸含量的检测限为69.15μg/L,定量限为234.78μg/L,且在10～100 mg/L范围内呈良好的线性关系,R²=0.999 9,重复性RSD小于1%,加标收回率为99.25%。在此基础上进一步确定阿魏酸酯酶酶活力测定时的酶反应终止液为30%的乙酸溶液。当阿魏酸生成量在15～25 mg/L时,酶反应处于动力学上的线性区。试验待测酶样的最适温度为55℃,最适pH5.0。经检验,该酶活力检测方法的精密度RSD小于3.0%,达到酶活力检测要求。     

高效液相色谱法检测运动饮料中甜菊糖苷

建立一种用高效液相色谱-PDA检测法测定运动饮料中甜菊糖苷的检测方法。样品前处理采用硅胶固相萃取小柱进行富集和净化,氮气吹干后用流动相复溶上机检测。采用Waters RP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以乙腈∶水=30∶70(体积比)作为流动相,用PDA检测器检测,外标法峰面积定量。结果表明,9种甜菊糖苷组分在20.0μg/m L~200.00μg/m L浓度范围内线性良好,相关系数r2为0.991~0.999,检出限在1.0μg/m L~3.0μg/m L,定量限为3.0μg/m L~9.0μg/m L,加标回收率达到81.4%~90.5%。     

HPLC法测定舒心糖浆中阿魏酸的含量

目的:采用高效液相色谱法测定舒心糖浆中阿魏酸的含量。方法:采用美国Waters公司C18色谱柱(3.9mm×150mm,5μm);甲醇-冰醋酸-水(30:0.01:70)为流动相;检测波长为321nm。结果:阿魏酸在40~320μg·mL-1范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.3%。结论:所建立的方法分离效果好,灵敏、准确、简便,适宜舒心糖浆中阿魏酸的测定。     

反相高效液相色谱法测定保健食品中阿魏酸的含量

目的建立保健食品中阿魏酸的反相高效液相色谱法测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱:AichromBond-1 C184.6 mm×150 mm,5μm,流动相:乙睛∶0.085%磷酸水溶液=20∶80检测波长320 nm,流速1.0ml/min,柱箱温度30℃。结果阿魏酸在1.0～10.0μg/ml范围内呈好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为90.3%～94.2%,相对标准偏差分别为6.00%～7.51%。结论该方法简便,准确,能够满足保健食品中阿魏酸含量的检测要求。     

HPLC测定不同厂家发酵型茶叶中阿魏酸含量

采用高效液相色谱法测定不同厂家发酵型茶叶中阿魏酸的含量,色谱条件为Shimpack VP-ODS C18（150 mm×6 mm,5 μm）色谱柱,流动相为0.2%冰醋酸-甲醇（28∶72）,检测波长314 nm,柱温30 ℃,流速1.0 mL/min。结果表明,阿魏酸在20～100 μg/mL范围内线性良好（相关系数R2=0.999 8）,平均加样回收率为98.73%,相对标准偏差（RSD）为1.71%。测得9个厂家不同发酵型茶叶中阿魏酸的含量在22.559～30.286 μg/g,其中湖南益阳的湘益茯砖茶阿魏酸含量最高,为30.286 μg/g。该方法简便快速,适用于发酵型茶叶中阿魏酸含量的测定。     

核壳型色谱柱-反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定饮料中5种人工合成甜味剂

建立了一种同时测定饮料中主要限用人工合成甜味剂:安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、三氯蔗糖和阿斯巴甜的反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法。采用核壳型HALO色谱柱,甲醇/甲酸-三乙胺缓冲溶液(p H=4.5)为流动相,梯度洗脱,ELSD检测,结果表明5种甜味剂在4.5 min内能够实现完全分离。线性范围为5μg/m L~500μg/m L,线性相关性系数大于0.997,方法最低检出限为2μg/m L,定量限为5μg/m L。在3个添加水平下,样品的加标回收率为83.0%~106.7%,相对标准偏差为0.84%~3.37%。该方法方便、快速、适用性强并可快速推广,可实现饮料中多种人工合成甜味剂的同时分离检测,同时也适用于无紫外吸收的甜味剂的检测。     

甜茶中齐墩果酸及熊果酸的检测方法的建立

建立测定甜茶中齐墩果酸及熊果酸的高效液相色谱分析方法。对色谱分析条件及样品前处理进行优化研究,样品经乙醇超声波提取,醇提水沉进行杂质沉淀,以Hypersil Gold C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,甲醇和0.2%乙酸铵溶液(83∶17)为流动相,检测波长为210 nm,流速为0.6 m L/min,外标法进行定量。在此条件下,齐墩果酸及熊果酸能达到完全基线分离,分别在2.23μg/m L~112μg/m L、1.84μg/m L~92μg/m L浓度范围内具有良好的线性关系(R~20.999),方法检出限分别为0.04、0.08 g/kg。在低中高3种含量添加水平的回收率在92%~102%,RSD(n=6)为0.8%~3.8%。     

超声波辅助碱醇提取HPLC法测定麦麸中阿魏酸含量

建立了HPLC法测定麦麸中阿魏酸含量的方法,利用超声波辅助碱醇溶液对麦麸中阿魏酸进行提取分离,色谱柱采用Hyperclone BDS C18柱(150×4.60 mm,5 μm,phenomenex),以甲醇-水-冰乙酸(25:75:0.75)为流动相,柱温30℃,流速1.0 mL·min-1,在320 nm波长下测定分析,利用方法学考察的结果表明:阿魏酸在0.0342～0.2397 μg内(r=0.9999),进样量与峰面积呈良好线性关系,检出限为0.0005μg.平均加标回收率为97.9%(n=3).该方法操作简便、准确、回收率高,为开发麦麸中阿魏酸提供了技术基础.     

高效液相色谱-串联质谱法测定白酒中的阿魏酸

建立了一种快速准确测定白酒中阿魏酸的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。样品经简单前处理后,以乙腈和含0.1%甲酸的水溶液为流动相,在电喷雾多反应监测模式下进行质谱分析。实验结果显示,该方法线性相关系数R~2大于0.9999,检出限为1.41μg/L,定量限为4.70μg/L,样品的回收率为101.1%～101.3%,相对标准偏差为0.10%～2.00%。方法简单、快速、准确、灵敏,为白酒中阿魏酸的研究提供了可靠的检测方法。     

HPLC测定覆盆子中椴树苷和山奈酚的含量

建立HPLC测定覆盆子中椴树苷和山奈酚含量的方法。采用高效液相色谱法,SHISEIDO C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)。流动相为甲醇—0.1%磷酸水(52∶48,体积比),流速1 m L/min,柱温25℃,检测波长366 nm。覆盆子中椴树苷、山奈酚分离效果良好,线性范围分别为3.2μg/m L~160μg/m L和0.168μg/m L~8.4μg/m L。该方法准确灵敏、稳定可靠,可用于覆盆子的质量控制。     

阿魏酸异辛酯抑制酪氨酸酶活性的动力学研究

在30℃,pH=6.8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中,采用酶动力学方法研究阿魏酸异辛酯对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制动力学。实验结果表明,阿魏酸异辛酯对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有良好抑制作用,对单酚酶和二酚酶活力的相对抑制率达到50%的阿魏酸异辛酯浓度(IC50)约分别为0.24 mmol/L和0.45 mmol/L,比熊果苷抑制二酚酶活性的IC50值5.3 mmol/L小得多。阿魏酸异辛酯能明显延长单酚酶的迟滞时间,0.4 mmol/L阿魏酸异辛酯能使迟滞时间由1.1 min延长至3.6 min。Lineweaver-Burk图显示阿魏酸异辛酯对二酚酶的抑制作用表现为竞争性抑制,抑制常数(K)I为0.20 mmol/L。     

高效液相色谱检测运动饮料中的人工合成色素

建立一种同时测定运动饮料中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝等6种人工合成色素的固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)方法。样品前处理采用固相萃取小柱进行富集和净化,淋洗液选择甲酸-水溶液,洗脱液选择氨化甲醇,氮气吹干后用水复溶上机检测。采用Waters RP C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以甲醇-乙酸铵水溶液(20.0 mmol/L)作为流动相,用PDA检测器检测,外标法峰面积定量。结果表明,6种人工合成色素在2.00μg/m L~32.00μg/m L浓度范围内线性良好,相关系数r2为0.99,检出限在0.04μg/m L~0.15μg/m L,定量限为0.12μg/m L~0.50μg/m L,加标回收率达到85.6%~92.4%。该方法具有前处理简单、净化效果好、灵敏度高和检测速度快的优点,适用于运动饮料中人工合成色素的分离和定量检测。     

米糠中阿魏酸的提取及高效液相色谱法测定

以提取液中阿魏酸的含量为指标,考察了碱溶液提取法、乙醇提取法、超声提取法、甲醇-甲酸提取法、碱醇提取法的优劣,用正交实验法对碱浓度、温度、时间、碱醇比和固液比5个因素进行研究,得到最佳工艺条件:1%氢氧化钠溶液与乙醇按4∶1的比例混和,80℃下提取6h,固液比为1∶8,加入0.2g/L的亚硫酸钠作为抗氧化剂。采用高效液相色谱法测定,色谱柱为C18ODS(4.6mm×150mm),流动相为甲醇-水-冰乙酸(35∶65∶0.9,v/v),流速1.0mL/min,柱温25℃,检测波长为322nm。上述条件下,阿魏酸在1.0～5.0μg/mL范围内线性关系良好,r=0.99928。该方法相对标准偏差在0.98%以内,平均回收率为99.7%。     

猕猴桃中甲基硫菌灵和异菌脲HPLC测定方法研究

建立高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)同时测定猕猴桃中甲基硫菌灵和异菌脲两种农药的含量。猕猴桃样品用乙腈涡旋提取,采用反相高效液相色谱法测定,色谱柱为Diamonsil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为30℃,进样体积20μL,流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,流动相为乙腈-0.05%甲酸水溶液=(60∶40),采用等度洗脱模式。结果表明,甲基硫菌灵和异菌脲分别在0.204μg/m L~10.2μg/mL和0.210μg/m L~10.5μg/mL范围内线性关系良好,方法的专属性和准确度良好,能够用于检测猕猴桃样品中上述两种农药的残留。     

气相色谱法测定人参提取物中3种农药残留

建立GC-ECD(气相色谱-电子捕获检测器,Gas chromatograph-electron capture detector)检测人参提取物中五氯苯胺、腐霉利、烯酰吗啉3种农残的方法。人参提取物样品用水溶解,环己烷萃取,通过毛细管气相色谱-电子捕获检测器检测。五氯苯胺和腐霉利在范围为0.01μg/m L~1.0μg/m L(n=5),烯酰吗啉在范围为0.1μg/m L~10.0μg/m L标准曲线范围内线性良好,加标回收率平均值为97.71%~107.45%,RSD为1.61%~5.09%(n=9),检测限为1μg/kg~20μg/kg。该法可用于准确检测人参提取物中五氯苯胺、腐霉利、烯酰吗啉3种农残含量。     

黑曲霉发酵麸皮产总阿魏酸工艺优化及其抑菌活性初探

本文对黑曲霉发酵麸皮产木聚糖酶、阿魏酸酯酶活性与产总阿魏酸量的相关性进行研究，运用Box-Behnken实验及响应面分析，对麸皮培养基配方进行优化，提取黑曲霉发酵麸皮产总阿魏酸，并检测其抑菌效果。实验结果显示，木聚糖酶和阿魏酸酯酶活性与麸皮总阿魏酸释放量呈正相关。黑曲霉发酵麸皮产总阿魏酸工艺参数优化组合为：麸皮10 g，料液比为1：1.4，麦芽糖、尿素、磷酸二氢钾在所加溶液中的浓度分别为6.42 g/L、2.00 g/L、0.11 g/L，黑曲霉种子液接种量为1.0 mL，30℃发酵96 h，麸皮总阿魏酸释放量为2.72 mg/g。以75%乙醇为溶剂，黑曲霉发酵麸皮产总阿魏酸提取量最大，为2.92 mg/g。用80%、75%乙醇提取的总阿魏酸分别对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果最佳。