聚乙烯醇复合固定化植酸酶方法研究

分别以海藻酸钠、聚乙烯醇(PVA)及聚乙烯醇(PVA)-海藻酸钠复合凝胶为载体,对植酸酶进行固定化研究.结果表明,由于PVA复合凝胶的多孔性网状结构,有利于物质传递.海藻酸钠有助于阻止酶活力的漏失,包埋效果优于其他两种方法.植酸酶经过固定化后,机械性能和化学稳定性都得到提高,可以重复多次对植酸钠进行水解反应.同时对该自南酶和固定化酶进行酶学特性研究.发现自南酶和固定化酶的最适pH值分别为5.5和7.0,最适反应温度分别为45和60%.固定化酶的Km(20mg/mL)大于自由酶的Km(14 mg/mL).植酸酶红固定化,提高了酶的操作、温度和贮藏稳定性.     

醋酸纤维素-聚四氟乙烯复合膜固定化脂肪酶的研究

以醋酸纤维素(CA)和聚四氟乙烯(PTFE)为材料制备醋酸纤维素-聚四氟乙烯复合膜,采用吸附-交联相结合的固定化方法,用该复合膜固定化脂肪酶。研究温度、吸附时间、酶液质量浓度、交联时间和交联剂体积分数对脂肪酶固定化效率和催化效果的影响,并对固定化酶膜的酶学性质进行研究。得到最佳的固定化条件为：温度25℃、吸附时间2h、酶液质量浓度0.02g/mL、交联时间3h、交联剂(戊二醛)体积分数0.2%,固定化酶最大酶活力为17.2U/cm2。固定化酶膜的酶学性质为：最适温度35℃,比游离酶降低了5℃;最适pH8.5,与游离酶相比pH值向碱性偏移1.0;经10次(10h /次)重复使用后,固定化酶相对酶活力为55.5%。SEM结果显示CA-PTFE复合膜能较好的固定化脂肪酶。     

海藻酸钠-聚乙烯醇-活性炭共固定化重组大肠杆菌细胞

目的:研究产酸性磷酸酶的重组大肠杆菌BL21(DE3)/p ET28b-AP/PT固定化制备条件以及固定化细胞的酶学特性。方法:比较9种细胞固定化方法,海藻酸钠-聚乙烯醇-活性炭共固定化为最佳方法;优化凝胶组成、菌体包埋量和固定化时间等条件,比较固定化细胞和游离细胞的酶学性质。结果:最适共固定化条件是:活性炭质量分数1.0%,海藻酸钠质量分数2.0%,聚乙烯醇质量分数6.0%,Ca Cl2质量分数2.0%,菌体包埋量6 g/100 m L凝胶溶液,固定化时间6 h。固定化细胞的酸性磷酸酶最适作用温度为35℃,比游离细胞提高5℃;固定化细胞与游离细胞的酸性磷酸酶最适作用p H均为5.0,固定化细胞显示出比游离细胞更宽泛的p H适应性。固定化细胞在重复使用12批后相对酶活力为54.5%,具有良好的操作稳定性。结论:海藻酸钠-聚乙烯醇-活性炭共固定化是非常适合固定化重组大肠杆菌BL21(DE3)/p ET28b-AP/PT的方法。     

聚乙烯醇复合凝胶固定壳聚糖酶的研究

以聚乙烯醇(PVA)和海藻酸钠复合凝胶为载体,利用反复冻融法固定壳聚糖酶,利用响应面中心复合设计法优化聚乙烯醇与海藻酸钠的浓度,结果分别是10·88%、1·07%,并对游离的壳聚糖酶和固定化酶的特性进行比较,经固定化的酶,其机械性能和化学稳定性都得到显著提高,与游离酶相比,固定化酶的最适反应pH由5·0降至4·5,最适反应温度由60℃升至65℃,其米氏常数由7·24mg/mL升至10·12mg/mL,固定化的酶在连续使用7次后,仍可保持79%的酶活。     

金针菇漆酶的固定化及其性质研究

采用海藻酸钠包埋法制备固定化漆酶,结果表明,固定化pH值为4.5,海藻酸钠与CaCl2质量浓度均为2％,酶液与海藻酸钠体积比为1∶1时,漆酶的固定化效果最佳,酶活回收率为48.6％.固定化酶的最适pH值为3.0,最适温度为40℃,米氏常数Km为21.5μmol/L,游离酶的最适pH值为3.0,最适温度为30℃,米氏常数Km为18.6μmol/L,与游离酶相比,固定化漆酶的热稳定性有明显提高,耐酸性略有增加,最适反应温度提高了10℃.     

棉织物上SESA活化法固定化脂肪酶工艺的研究

研究了对-β-硫酸酯乙砜基苯胺活化法在棉织物上固定化脂肪酶的工艺条件,并考察了固定化酶的最适作用温度和pH及间歇操作稳定性。最佳固定化条件为醚化pH为10.0,偶联pH为7.0,脂肪酶的浓度为6mg/ml,偶联时间为12h,所得固定化脂肪酶的最大活力为35U/g(棉)·min。固定化酶的最适作用温度为35℃,最适pH为8.0,半衰期为6d。     

固定床双酶协同生物转化植物蛋白的研究

采用海藻酸钠作为载体包埋固定化木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,双酶耦合协同对大豆蛋白进行催化水解实验研究。以包埋剂海藻酸钠的浓度、固定化包埋酶量、固定化凝胶颗粒的固化时间以及大豆蛋白液底物浓度等因素对催化转化的效果进行了分析,结果表明,在催化反应体系pH 7、催化反应温度48℃的条件下,最佳底物浓度(大豆:水)为1:7;最适凝胶粒子固化时间为2.5h;最适包埋酶量:海藻酸钠溶液体积为1%;海藻酸钠最适浓度为3%(w/v)。     

固定化脂肪酶性能研究及在洗毛中的应用

利用硅藻土吸附法对解酯假丝酵母发酵产生的脂肪酶进行了固定化,研究了固定化酶和游离酶的酶学性质,以及用固定化脂肪酶对羊毛进行生物酶法洗毛。结果表明:固定化酶比游离酶的最适作用温度提高了5℃,最适作用pH值向碱性方向移动了0.5个单位,热稳定性和pH值稳定性有了大幅度提高。在固定化酶的最适作用pH值下,得到最佳的洗毛条件为:温度45℃、浴比1∶35、时间20 h。     

壳聚糖/聚乙烯醇微球固定化酯酶的研究

利用吸附、交联的原理,以壳聚糖、聚乙烯醇(PVA)、戊二醛等为材料,通过冻干技术制备了冻干-PVA-壳聚糖固定化酯酶.并通过单因素优化实验,确定了固定化酶生产的适宜条件:壳聚糖浓度3％、PVA浓度3g/L、酶液固定化载体体积质量比5∶2(mL∶g),戊二醛浓度0.4％,交联时间30min,此时固定化酶活力回收率为73.8％.固定化酶在60℃,pH值为7.0的反应体系中活性最大,使用5次后,固定化酶载体形状基本没变化,活性保留了71％,表明冻干-PVA-壳聚糖固定化酶具有良好的操作稳定性.     

聚乙烯醇-海藻酸钙固定化柚苷酶

利用聚乙烯醇(PVA)-海藻酸钙为载体,通过戊二醛交联,制备水不溶性的固定化柚苷酶凝胶颗粒.结果显示:添加戊二醛和延时包埋法制备的固定化酶凝珠活力较高.固定化酶的优化工艺为:以9.0g/100mL PVA与1.0g/lOOmL海藻酸钠为载体,固化剂CaCl2的质量浓度为1.0g/100mL,酶液质量浓度2.0mg/mL...