草本刺嫩芽根多糖AKSP2纯化、鉴定及体内抗氧化活性

研究了草本刺嫩芽根可溶性多糖(AKSP)主要的组成及其抗衰老活性.采用DEAE-纤维素柱对粗提多糖进行分离,Sephadex-G100层析对AKSP2多糖进一步纯化,HPLC层析确定AKSP2组成及组分比例,利用红外光谱鉴定多糖AKSP2糖苷键.建立了小鼠衰老模型,对饲喂AKSP2多糖小鼠进行抗衰老活性的生物化学指标测定.采用DEAE-纤维素柱分离多糖, 得到5种组分分别为AKSP1、AKSP2、AKSP3、AKSP4、AKSP5.对AKSP2进行理化性质研究,HPLC证实AKSP2水解物由木糖、果糖、甘露糖、葡萄糖组成,并且它们之间的摩尔比值为1∶1.05∶0.89∶1.32.红外光谱确定多糖AKSP2为呋喃糖苷,其构型为β-型糖苷,且糖基中含有乙酰基.草本刺嫩芽根多糖AKSP2提高了小鼠肝脏与血清中的SOD、CAT值,降低了MDA含量.说明AKSP2具有抗氧化活性,对衰老有一定的预防作用.     

地皮菜多糖的分离纯化及结构组成分析

以地皮菜为原料,采用水提醇沉法获得地皮菜多糖(Nostoc Commune polysaccharides,NCP),经Sevage法脱蛋白、DEAE-Sepharose CL-6B柱色谱法分离纯化、透析、冻干等制备地皮菜精制多糖。利用紫外和红外光谱对其进行纯度及结构分析,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生HPLC法测定其单糖组成及含量。结果表明:地皮菜多糖经DEAE-Sepharose CL-6B柱色谱分离可得到5种多糖组分,其主要组分NCP-3具有典型的多糖吸收峰。HPLC分析表明NCP-3主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖构成,其摩尔比为2.17∶7.14∶2.56∶1。     

藜麦多糖的分离纯化及结构初步分析

以藜麦粉为原料,采用超声波辅助法提取得到藜麦粗多糖。粗多糖经AB-8大孔树脂吸附,DEAE纤维素柱分离得到QPs-Ⅰ、QPs-Ⅱ、QPs-Ⅲ3种多糖。通过Sephadex G-100葡聚糖凝胶层析柱对QPs-Ⅰ进一步纯化得到QPs-Ⅰ-Ⅰ。采用气相色谱、紫外光谱和红外光谱对藜麦多糖QPs-Ⅰ-Ⅰ的结构进行初步研究。结果表明:多糖QPs-ⅠⅠ由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖6种糖组成,且各组成比例为:鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=0.61∶0.85∶0.92∶1.19∶2.22∶23.41。紫外光谱检测显示QPs-Ⅰ-Ⅰ在260～280nm处未见核酸和蛋白质等大分子的吸收峰,红外检测证实QPs-Ⅰ-Ⅰ具有多糖的特征吸收峰。     

桦褐孔菌多糖的分离纯化及其组成分析

为更好地开发利用桦褐孔菌这一丰富的真菌资源,采用水提法得到桦褐孔菌粗多糖（CIP）,经DEAE-SepharoseCL-6B离子交换层析、SepharoseCL-6B和Sephadex G-100凝胶过滤层析得到一个桦褐孔菌多糖组分（IP2a）。采用高效液相色谱法、比旋度法及琼脂糖电泳法鉴定其纯度,气相色谱法、高效液相色谱法及红外光谱研究其组成、相对分子质量和结构。结果表明IP2a为均一组分;IP2a由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,其摩尔比为2.3∶4.5∶1∶2.5,其相对分子质量为86053u,含有α-型糖苷键。IP2a是一种不含核酸和蛋白质的杂多糖,是桦褐孔菌水溶性多糖的重要组成。      

生姜皮多糖的分离纯化及其结构组成分析

以生姜皮为原料,经热水浸提法,乙醇醇沉得到生姜皮粗多糖。再经DEAE-纤维素-52阴离子交换柱和Sephadex?G-100凝胶柱对所得粗多糖进行层析纯化,得到3种水溶性生姜皮多糖(GE-1、GE-2、GE-3)。利用高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用测定各多糖组分的分子质量,利用柱前衍生高效液相色谱法分析各多糖组分的单糖组成,通过紫外光谱扫描、红外光谱扫描进一步分析各组分多糖结构。结果表明3种纯化多糖组分总糖含量分别为(98.06±0.15)%、(97.41±0.42)%、(97.89±0.22)%,分子质量分别为462、194 k D和376 k D。GE-1的单糖组成主要为甘露糖、葡萄糖、木糖,含有微量的半乳糖,其物质的量比为1.25∶6∶1;GE-2的单糖组成主要为甘露糖、葡萄糖和岩藻糖,其物质的量比为2.51∶9.25∶1;GE-3的单糖组成主要为甘露糖、核糖、半乳糖、阿拉伯糖,其物质的量比为17.39∶1∶1.89∶1.23。紫外光谱扫描结果显示3种多糖组分无明显的核酸和蛋白质吸收峰,红外光谱结果分析得出GE-1、GE-2和GE-3含有多糖类物质的特征吸收峰。     

高产胞外多糖嗜热链球菌的筛选及胞外多糖的结构分析

目的:嗜热链球菌是一种对人体有明显食疗作用的有益菌。以从传统发酵乳制品中分离得到的442株嗜热链球菌为研究对象,从中筛选出1株高产胞外多糖嗜热链球菌MGD1-4,对该菌株发酵液所产胞外多糖进行分离、纯化与结构分析。方法:采用DEAE-Cellulose 52离子交换柱及Sepharose CL-6B凝胶过滤层析方法从嗜热链球菌MGD1-4液体培养基中获得的胞外多糖中分离得到单一组分,利用凝胶渗透色谱仪(GPC)测定各组分分子质量,采用高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR)及核磁共振(NMR)等对各EPS纯化组分的单糖的组成及结构进行解析。结果:EPS-1a为中性多糖,分子质量为1.572×10~5u;EPS-3a为酸性多糖,分子质量为3.825×10~5u,且二者均为单一多糖。单糖组成测定结果表明:EPS-1a主要由葡萄糖、甘露糖和半乳糖构成,三者的物质的量比为3.62∶1∶2.99,占总糖量90%以上;EPS-3a主要由甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖构成,占总糖量80.6%,其物质的量比为1.19∶1∶1.08。对1D NMR的研究表明,EPS-1a和EPS-3a的糖环形式均为吡喃糖环,糖苷键构型均为α型。结论:通过分析该菌株所产胞外多糖结构,初步确定其分子结构及理化性质,对进一步研究EPS的构效关系具有重要意义。     

霍山铁皮石斛多糖的脱蛋白工艺及结构分析

优选霍山铁皮石斛多糖脱蛋白工艺,并对其进行分离纯化及结构分析。以蛋白脱除率和多糖损失率为评价指标,比较Sevag法、酶法及酶-Sevag法3种脱蛋白方法。结果表明,酶-Sevag法脱蛋白效果最佳,蛋白脱除率为81.58%,多糖损失率为15.63%。采用DEAE-52纤维素柱、Sephadex G-100凝胶柱分离纯化石斛多糖,得活性组分DOPA-1;采用紫外扫描光谱、高效液相色谱鉴定DOPA-1为均一多糖;采用气相色谱分析表明组分单糖由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成(各单糖的物质的量比为1∶0.42∶0.27);采用红外光谱和刚果红实验分析糖链结构表明,DOPA-1有典型的糖类特征吸收峰,存在β-D-甘露吡喃糖苷,且具有三股螺旋构象。     

美味牛肝菌胞外多糖的分离纯化及组分分析

主要对美味牛肝菌发酵产生的胞外多糖(BeBEP)进行了分离纯化和组分的分析。方法:采用DEAE-纤维素柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析对BeBEP进行分离纯化,得到的主要成分BeBEPⅢa,用紫外光谱和醋酸纤维素薄膜电泳方法进行纯度鉴定,红外光谱进行结构分析,高效液相色谱法分析单糖组分。结果表明:BeBEPⅢa为均一组分,存在吡喃糖苷,由D-木糖、D-甘露糖和D-半乳糖三种单糖组成,摩尔比为3.1∶63.3∶1.0,其中主要以D-甘露糖为主。     

美味牛肝菌胞外多糖的分离纯化及组分分析

主要对美味牛肝菌发酵产生的胞外多糖（BeBEP）进行了分离纯化和组分的分析。方法:采用DEAE-纤维素柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析对BeBEP进行分离纯化,得到的主要成分BeBEPⅢa,用紫外光谱和醋酸纤维素薄膜电泳方法进行纯度鉴定,红外光谱进行结构分析,高效液相色谱法分析单糖组分。结果表明:BeBEPⅢa为均一组分,存在吡喃糖苷,由D-木糖、D-甘露糖和D-半乳糖三种单糖组成,摩尔比为3.1∶63.3∶1.0,其中主要以D-甘露糖为主。      

胖大海酸性多糖的分离纯化及初步结构研究

采用水溶醇沉法从胖大海中提取水溶性粗多糖,通过棉纤维和DEAE-Sephrose CL-6B离子交换柱分离得到含量较大的酸性多糖ASP Ⅰ;经凝胶色谱和高效凝胶渗透色谱鉴定其为均一组分,气相色谱和离子色谱测其单糖组成（质量比）为鼠李糖：阿拉伯糖：半乳糖：葡萄糖：木糖：半乳糖醛酸=24.55：14.22：10.45：1.84：1.22：28.05.红外光谱测定表明,ASP Ⅰ具有多糖的特征吸收峰.     

金蝉花多糖的抗氧化活性及结构分析

本实验研究金蝉花多糖的抗氧化活性,并对其纯化组分进行结构分析。采用热水浸提、不同浓度乙醇分级沉淀的方法从金蝉花中提取多糖,分别获得50%醇沉金蝉花多糖（50% polysaccharides from Cordyceps cicadas,CP50）和80%醇沉金蝉花多糖（CP80）,并检测两者的体外抗氧化活性。结果表明：CP50较CP80表现出较强的清除自由基的能力,且具有一定的还原能力和总抗氧化能力。CP50进一步经二乙氨乙基（diethylaminoethyl,DEAE）纤维素-52和Sephadex G-100凝胶柱分离纯化,得到活性多糖CPA-1和CPB-1。经紫外扫描光谱法和高效凝胶过滤色谱法鉴定CPA-1和CPB-1为均一多糖;单糖组成分析显示两个组分中均含有葡萄糖、甘露糖和半乳糖,其物质的量比分别为：1∶0.48∶0.52和1∶0.14∶0.114。红外光谱（infrared spectroscopy,IR）及刚果红实验发现,CPA-1和CPB-1具有典型的多糖红外吸收,且含有三股螺旋分子结构。     

嗜热链球菌CH9胞外多糖的分离纯化及结构分析

对嗜热链球菌CH9胞外多糖进行分离纯化,经DEAE-52离子交换柱及Sephadex G-100凝胶柱得到单一组分,利用高效液相色谱(HPLC)测其分子质量,结果表明:EPS1a为中性多糖,分子质量为1.8×106u;EPS2a、EPS3a为酸性多糖,分子质量分别为1.06×106、1.05×106u。经琼脂糖凝胶电泳及Sephadex G-100凝胶柱鉴定3种糖均为单一组分。紫外及红外光谱扫描结果显示:3种糖均具有多糖的特征吸收峰,且EPS2a、EPS3a可能为糖与蛋白的复合物。刚果红实验表明:EPS1a具有三股螺旋结构,而其他两种糖并未发现此现象。β消去实验证明:EPS1a、EPS3a为—O—连接,EPS2a为—N—连接。     

灵芝孢子粉多糖的分离纯化、结构表征及免疫活性初探

采用水浴回流法提取灵芝孢子粉粗多糖,再依次使用DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱和Sepharose CL-6B凝胶色谱柱分离纯化得到2种多糖组分GLP1a和GLP1b,HPSEC法测得2种组分均呈单一峰,重均分子量分别为1.12×106和1.21×105。HPLC、红外光谱和核磁共振分析的结果表明,GLP1a和GLP1b主要由葡萄糖组成,主链都是以β-(1,6)糖苷键连接,GLP1b在部分1→6连接的葡萄糖的3位和4位有分支。MTT实验表明,2个多糖级分均具有一定的免疫活性,而且都存在明显的量效关系,GLP1b的免疫活性明显高于GLP1a。     

真姬菇多糖的分离纯化及结构分析

以真姬菇(Hypsizigus marmoreus)子实体为材料提取粗多糖。用Sevage法脱蛋白,活性炭脱色,经DEAE-纤维素柱(D3.5 cm×60 cm)层析得真姬菇纯化多糖HPS-Ⅰ和HPS-Ⅱ。经SephadexG-200凝胶柱(D1.6×30 cm)层析,证明HPS-Ⅱ为单一组分。元素分析结果表明,HPS-Ⅱ不含氮、磷、硫,碳和氢的含量分别是37.81%和6.737%。采用Sepharose CL-4B凝胶柱(D1.6×30 cm)层析,以Dextran多糖为标准品,测得HPS-Ⅱ的平均分子量为4.61×105。经红外光谱和1H NMR和13C NMR谱分析确定HPS-Ⅱ为以(1→4)-α-D-Glep为主链,(1→6)-α-D-Glep为侧链的α-D-吡喃葡聚糖。     

大蒜多糖的体外抗凝血作用及结构分析

采用碱提法和DEAE-52纤维素柱层析法,从大蒜中分离纯化出3种多糖组分(GPⅠ、GPⅡ和GPⅢ);采用体外抗凝血活性试验分析了大蒜粗多糖及其分离组分GPⅠ的抗凝血作用;采用SephadexG-100凝胶层析法和冻融分析法鉴定GPⅠ的纯度,采用气相色谱分析了GPⅠ的单糖组成,首次采用凝胶渗透色谱与多角度光散射仪及示差检测器连用系统测定了GPⅠ的分子结构。结果表明:GPⅠ、GPⅡ和GPⅢ分别为大蒜多糖总量的75.2%、15.5%、9.3%;大蒜粗多糖及其分离组分GPⅠ能显著延长人体血浆的APTT值,通过影响内源性凝血系统发挥抗凝血作用;GPⅠ由鼠李糖、果糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖及1种未知单糖组成,构成比例为1.5∶1.1∶3.3∶1∶5.1∶3.5,分子质量为5.2×104～5.6×104u,分子旋转半径为31.5～32.9nm,分布宽度指数为1.039和1.084,分子呈球形。     

紫甘薯水溶性多糖的提取工艺优化及结构研究

以紫甘薯为原材料,采用单因素和响应面试验对紫甘薯水溶性多糖的提取条件进行工艺优化,确定最佳提取率的工艺参数。采用Sepharose 4B凝胶对紫甘薯多糖进行分离纯化,并对纯化组分进行紫外扫描、红外光谱和单糖组成分析。结果表明,紫甘薯多糖提取的最佳条件：提取时间2.5 h、提取温度80℃和液料比15∶1（mL/g）,提取率可达到9.03%。多糖经分离纯化后,得到分子量为2.63×103kDa的均一多糖（purple sweet potato polysaccharide,PSPP-A）。紫外吸收图谱显示PSPP-A在260 nm和280 nm处均无吸收峰,说明不含核酸和蛋白质。红外光谱检测到PSPP-A具有多糖的特征吸收峰,离子色谱分析显示PSPP-A由5种单糖构成,分别为鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸,且摩尔比为 1.89∶8.45∶1.95∶1.13∶1。     

黄酒多糖的分离纯化及理化性质研究

以绍兴黄酒为原料,采用乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白得到黄酒粗多糖,经DEAE-Sepharose FF色谱柱和葡聚糖凝胶G75色谱柱对黄酒粗多糖进行分离纯化,并采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)对黄酒多糖的相对分子质量和纯度进行检测,进一步采用紫外光谱、红外光谱以及核磁共振波谱对黄酒多糖组分CRWP1的结构特征进行初步解析。结果表明:所得多糖组分为纯度较高的中性多糖组分,其重均相对分子质量为7 850;主要由主阿拉伯糖、葡萄糖和木糖组成,并含有少量岩藻糖、半乳糖和甘露糖;所得多糖组分CRWP1为在1,3糖苷键主链上连接有1,4糖苷键支链的杂多糖,含有α糖苷键构型,并且其单糖残基为吡喃型。     

一种荔枝壳多糖的分离鉴定

本研究采用DEAESepharoseFastFlow阴离子交换柱和G50葡聚糖凝胶柱从荔枝壳中分离出一种水溶性多糖组分,并对其进行结构分析。气相色谱法分析结果表明其主要由甘露糖和半乳糖组成,含少量的阿拉伯糖,摩尔百分比为65.6%:33.0%:1.4%。通过高碘酸氧化和Smith降解法分析表明分子间存在1,2键,1,3键和1,6键,其摩尔百分比为8.7%:83.3%:8.0%。凝胶渗透色谱测定该多糖分子量为14000D。采用红外光谱进一步分析其结构特征。     

黄花倒水莲多糖的纯化、表征与体外抗氧化活性研究

提取纯化黄花倒水莲多糖(polysaccharide of Polygala fallax Hemsl.,PFP),对其结构进行表征,并测定其体外抗氧化活性。采用水提醇沉法提取PFP,运用Sevag法除蛋白、活性炭脱色以及G-75葡聚糖凝胶柱层析对其进行纯化分离获得不同的多糖组分。分别用红外光谱(infrared spectrum,IR)、凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography,GPC)与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazalone,PMP)柱前衍生高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法对PFP组分进行表征分析。最后测定PFP组分对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS+自由基的清除率来评价其体外抗氧化活性。经分离纯化得到两种PFP组分(PFP1与PFP2)。其中PFP1的分子量为20 794 Da,多分散指数为1.32,红外光谱中呈现多糖的典型特征吸收峰,PFP1是由甘露糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖与一种未知单糖组成的一种杂多糖,且摩尔比为0.09∶1∶0.48∶0.64∶0.71∶0.35。PFP1对4种自由基均有清除能力,且在一定浓度范围内呈正相关。因此PFP在体外具有抗氧化活性,为今后进行更深入的研究与开发利用提供依据。     

燕麦中β-葡聚糖的分离纯化及结构表征

以我国山西产燕麦(晋燕8号)为原料提取并分离纯化,得到Oglu-1和Oglu-2两个燕麦β-葡聚糖级分,经凝胶渗透色谱层析和Sephacryl-400SF柱层析,证实Oglu-1为单一组分,纸层析和HPLC分析表明该级分多糖由葡萄糖为单一糖基组成,红外光谱和核磁共振分析证明该多糖分子链中存在β-(1→4)和β-(1→3)两种糖苷键,其比例为2.1:1,该结果与国外学者的研究基本一致。采用凝胶渗透色谱和激光光散射联用仪(GPC-LLS)测定Oglu-1的重均相对分子质量为4.49×105。