氨基酸组成及溶剂环境对淡水鱼胶原蛋白热稳定性能的影响

本文探讨了氨基酸组成、分布以及溶剂环境对鱼源胶原蛋白蛋白热稳定性能的影响。利用不同鱼类的胶原蛋白为实验样本,测定胶原蛋白氨基酸组成和热变性温度,通过相关性分析明确了影响胶原蛋白热变性温度的主要氨基酸种类和分布指标。结果表明,胶原蛋白中脯氨酸羟基化率、碱性氨基酸、带电荷极性氨基酸和总极性氨基酸含量与胶原蛋白热变性温度呈正相关,而亚氨基酸与非极性氨基酸含量与胶原蛋白热变性温度呈负相关(p0.01)。运用逐步多元回归分析方法,建立了脯氨酸羟基化率和带电荷极性氨基酸与胶原蛋白热变性温度之间的相关性数学模型,经验证,该模型能较好的预测鱼源胶原蛋白的热变性温度。在此基础上,进一步研究了胶原蛋白所处溶剂环境对其热稳定性能的影响。结果表明,提高水分子浸润胶原蛋白程度和体系离子强度,或降低体系pH均会显著降低胶原蛋白热稳定性能。     

α-亚麻酸对HepG2细胞增殖能力及氧化应激的影响

采用MTT比色法研究α-亚麻酸对HepG2细胞的损伤作用,利用倒置相差显微镜观察HepG2细胞形态,并通过测定ROS水平、SOD活性以及MDA含量来探讨α-亚麻酸对HepG2细胞氧化应激的影响。结果表明:α-亚麻酸在50~250μmol/L浓度范围内呈剂量-时间依赖性方式抑制HepG2细胞的生长增殖,说明α-亚麻酸能够诱导HepG2细胞损伤;α-亚麻酸在200μmol/L浓度下作用24 h后HepG2细胞形态发生明显改变,并在高浓度时HepG2细胞呈典型的凋亡形态学改变;α-亚麻酸作用HepG2细胞后致使细胞大量生成ROS,SOD活性下降,MDA含量升高,这说明α-亚麻酸对HepG2细胞氧化应激产生影响,从而诱导HepG2细胞损伤。     

乳状液中αs1-酪蛋白和β-酪蛋白的结构特点及吸附行为

乳状液界面处主要的酪蛋白成分是αs1-酪蛋白和β-酪蛋白.本文主要综述了这两种酪蛋白分子的结构特点并比较其差异,进一步阐述了pH、离子强度、分子聚合、未吸附粒子等因素对其吸附行为的影响.     

Ca~(2+)结合位点对极端嗜热α-淀粉酶ApkA高温活性及热稳定性的影响

开发耐高温α-淀粉酶是目前淀粉液化工艺的迫切需要,极端嗜热α-淀粉酶具有优良的高温活性和热稳定性,其高温适应性机制研究可以为构建耐高温α-淀粉酶提供理论依据和设计思路。通过分析来源于极端嗜热古生菌Thermococcus kodakarensis KOD1的α-淀粉酶Apk A的氨基酸序列,构建Ca2+结合位点突变体Apk Ads N110A/D155A/D164A。酶学性质分析表明,与野生型Apk Ads相比,突变体Apk Ads N110A/D155A/D164A的高温活性和热稳定性明显降低。其中Apk Ads的最适反应温度为90℃,对应的绝对酶活为2946.75 U/mg;突变体Apk Ads N110A/D155A/D164A的最适反应温度为80℃,对应的绝对酶活为917.07 U/mg。Apk Ads于90℃的半衰期约为5 h,突变体Apk Ads N110A/D155A/D164A于90℃的半衰期约为2 h。本研究结果表明Apk A中Ca2+结合位点与其高温活性和热稳定性均相关,Asn110、Asp155及Asp164这三个氨基酸残基的丙氨酸替换突变不利于Apk A维持其高温活性和热稳定性。     

超临界CO_2流体色谱分离α-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮

采用超临界CO2流体色谱分离α-紫罗兰酮与β-紫罗兰酮2个异构体,考察了改性剂浓度、柱温、柱压对容量因子和分离度的影响,确定了较佳的分离条件:硅胶柱(250mm×4.6mmI.D.6μm);流动相:V(CO2):V(异丙醇)=99:1;流速:2mL/min;柱温:40℃;柱压程序:起始压力8MPa,以300kPa/min的速率升至12MPa;紫外检测波长:254nm;进样:2μL浓度为480mg/mL的α-紫罗兰酮与β-紫罗兰酮2个异构体的二氯甲烷溶液,此时,分离时间约10min,分离度达到3.3。     

葡萄糖基（α-1→6）β-环糊精的波谱学数据与结构确证

对酶法合成的葡萄糖基（α-1→6）β-环糊精的红外（IR）光谱、质谱（MS）、氢谱（^1H—NMR）、碳谱（^13C-NMR）、氢氢相关谱（^1H-^1H COSY）、氢氢完全相关谱（^1H-^1H TCOSY）、异核单量子相干相关谱（HSQC）和异核多键相关谱（HMBC）进行了解析报道，对所有的^1H—NMR和^13C—NMR谱进行了归属，讨论了红外特征吸收峰所对应的官能团的振动形式。     

CTGF-siRNA对TGF-β1诱导的肝星状细胞胶原分泌的影响

目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的小RNA(CTGF-siRNA)对TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)胶原分泌的影响。方法:实验分为5组:正常组(单纯HSC-T6细胞组)、对照组(TGF-β1诱导组)、siRNA组、非特异siRNA组、lipo组(脂质体组)。培养大鼠HSC-T6细胞,以10ng/mL终浓度的TGF-β1对培养的HSC-T6细胞进行诱导,再通过脂质体法将CTGF-siRNA转染入HSC-T6细胞,通过RT-PCR、Western blotting方法研究各实验组细胞中CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(Collagen type I,Col 1a1)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA及蛋白的表达水平。结果:正常组细胞内CTGF有低水平的表达,在给予TGF-β1诱导后表达水平显著升高(P0.05);TGF-β1刺激24h后,靶向转染入特异性siRNA后,CTGF、Col 1a1、FN及α-SMA的表达均显著下调(P0.05)。结论:本研究提示,通过RNA干扰使CTGF基因沉默后,在体外可明显抑制HSC-T6肝成纤维细胞的表型转化及细胞外基质的合成,进一步提示CTGF是促肝纤维化的关键性细胞因子,而RNA干扰是一种特异高效的很有前途的干预手段,为基因治疗肝纤维化提供实验依据。     

蒲桃中氨基酸组成与含量对其营养与风味的影响

采用柱前衍生-液相色谱法对蒲桃中水解氨基酸与游离氨基酸的种类与含量进行测定。通过对蒲桃中水解氨基酸的分析,发现蒲桃中含有全部18种氨基酸,人体所必需的8种氨基酸占总氨基酸比例为33.49%,表明蒲桃是具有较高营养价值的水果;对影响感官的游离氨基酸进行分类,研究各类味觉氨基酸对蒲桃风味的影响,结果表明,人体所必需的氨基酸中蛋氨酸和半胱氨酸含量不足,影响蒲桃的营养价值,而谷氨酸与天冬氨酸对果实的整体鲜味有较高的贡献。     

制麦条件对麦芽氨基酸组成的影响

在制麦过程中,大麦中的蛋白质在蛋白酶的作用下逐渐分解为低分子肽类和氨基酸,这些营养物质为酵母的生长和代谢提供了保障。实验采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定麦芽中氨基酸的含量和组成,并研究了不同麦芽品种和工艺条件下,麦芽氨基酸组成的变化规律。结果表明,不同大麦品种在相同的工艺下,其氨基酸组成差异并不显著;同种大麦采用不同的制麦工艺其氨基酸含量和组成差别明显。     

山杏仁蛋白酶水解物抑制炎症因子NO、TNF-α和IL-1β的产生

分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶制备山杏仁蛋白酶水解物,通过格里斯实验和ELISA方法,研究山杏仁蛋白酶水解物对巨噬细胞产生炎症因子NO、TNF-α和IL-1β的影响。结果表明山杏仁木瓜蛋白酶水解物显著抑制炎症因子NO、TNF-α和IL-1β产生,其抑制率分别为62%、11%和21%,而其它四种蛋白酶水解物没有显示明显的抗炎作用。将山杏仁木瓜蛋白酶水解物分离制备为5~10,3~5,1~3 kDa和小于1 kDa等不同分子量组分,进一步研究其抗炎活性,结果表明小于1 kDa低分子量组分具有较高抗炎活性,其对NO、TNF-α和IL-1β产生的抑制率分别为81%、59%和46%。分析氨基酸组成与含量结果表明,抗炎活性较强的小于1 kDa组分中,疏水性氨基酸和亲水性氨基酸含量均较高,同时谷氨酸、天冬氨酸和精氨酸等具有抗炎作用的氨基酸含量也较高。以上结果表明,山杏仁蛋白被木瓜蛋白酶水解后能够释放抗炎生物活性肽,该活性肽的分子量小于1 kDa,可能是具有两亲性的结构。     

牛乳过敏原β-乳球蛋白分离纯化方法优化及IgG结合能力分析

目的 优化分离纯化方法,获得高纯度、高得率且具有良好IgG结合能力的β-乳球蛋白(β-lactoglobulin, β-Lg)。方法 以超速离心脱脂、等电点沉淀、硫酸铵沉淀为前处理方法,通过Sephadex G-75凝胶柱层析、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析纯化β-Lg,并对纯化条件进行优化,结合SDS-PAGE与LC-MS/MS对β-Lg进行鉴定,采用Western blot对其IgG结合能力进行验证。结果 凝胶层析最佳洗脱条件为0.02 mol/L pH 6.8 Tris-HCl+0.15 mol/L NaCl,流速0.4 mL/min;阴离子交换层析最佳洗脱条件为0.05 mol/L pH 6.5 Tris-HCl+0~0.5 mol/L NaCl,流速0.5 mL/min;结合SDS-PAGE与LC-MS/MS鉴定,该条件下获得的终产物为β-Lg;该方法获得的β-Lg得率为54.89%,纯度为100%(SDS-PAGE),且具有良好的IgG结合能力。结论 本研究建立了一种简单、可重复的β-Lg分离纯化方法,在获得高纯度β-Lg的同时保持良好的IgG结合能力,为后续牛乳过敏及脱敏研究提供技术支撑。     

营养素对苹果酒中结合SO2影响的研究

研究SO2在果酒酿制中的变化规律以及如何降低果酒中的SO2使用量是果酒食品安全的重要课题。本文利用单因素试验和二次通用旋转组合设计研究了磷酸氢二铵、硫酸铵、硫胺素等外加营养素对苹果酒酒精发酵结束后结合SO2量的影响。结果表明，磷酸氢二铵、硫酸铵、硫胺素的添加能够在不同程度上降低酒精发酵结束后结合SO2的量；酒精发酵结束后结合SO2(Y1)的量与磷酸氢二铵(x1)、硫酸铵(x2)的添加量关系显著，回归方程为Y1=67．22-3．075X1^2 5．48X1X2-4．685X1～3．676X2^2，相关系数为0．7543。     

普洱茶对高脂血症大鼠血脂、血浆中血栓B_2、6-酮前列腺素F_(1α)水平影响

采用高脂饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型,同时以0.5、1.0、2.0g/(kg.d)3种普洱茶的剂量饲喂昆明种SPF级雌性大鼠35d后,检测大鼠血液总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,采用ELISA法定量测定大鼠血浆血栓素B2(thromboxaneB2,TXB2)、6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的含量。结果表明,普洱茶能明显降低模型大鼠血液TG、TC、LDL-C、TXB2含量,提高HDL-C、6-keto-PGF1α含量。     

Ppargc1α基因与肉质品质的相关性

Ppargc1α是一种核转录辅激活因子，能在棕色脂肪组织、骨骼肌等部位大量表达，而在白色脂肪组织、胰腺及大脑中的分布较少。Ppargc1α通过参与机体能量平衡和多种代谢调控过程，有效诱导线粒体生物合成并且上调线粒体生物氧化功能从而影响机体的生长、疾病的发生和生物体内各种物质的合成。肉质品质与物种的遗传因素有着密切而直接的关系。本文通过分析ppargc1α基因的作用机制，阐述了ppargc1α对骨骼肌肌纤维类型、基因型表达和多种生化过程的调控作用，体现出ppargc1α作为一种辅转录激活因子能停靠多种转录因子增强靶基因转录效率，可以通过调控线粒体表达和生物氧化等途径来影响肉质品质。     

实施“2＋1”模式，强化纺织高职产学结合

纺织高等职业教育是培养拥护党的基本路线，适应纺织企业生产、管理、销售等一线所需要的知识面宽、素质高、实践动手能力强、通技术、能管理、善于解决现场实际问题并具有可持续发展能力的技术应用型人才。这样的人才只靠学校是不能达到培养目标的，必须校企合作，走产学结合之路，而“2＋1”人才培养模式是产学结合的有效途径。     

枸杞中绿原酸对转化生长因子-β1诱导心肌成纤维细胞纤维化的影响

目的：考察枸杞中分离得到的绿原酸对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）诱导心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）纤维化的干预效果。方法：质量浓度10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型，用不同质量浓度绿原酸处理纤维化细胞，细胞毒性实验（cell counting kit-8，CCK-8）检测绿原酸对CFs增殖的影响；酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测纤维化标志蛋白胶原蛋白（collagen，Col）I、Col III和免疫荧光检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qPCR）检测Twist1、Acta2、Snail2及纤维化蛋白S100A4等mRNA表达水平；Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白及其磷酸化表达水平。结果：CCK-8检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能抑制细胞异常增殖；ELISA和免疫荧光检测表明，枸杞中分离得到的绿原酸能下调纤维化标志蛋白Col I、Col III和α-SMA的表达；qPCR检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调纤维化转录调控因子Acta2、Twist1、Snail1、Snail2、Smad4及纤维化蛋白S100A4的mRNA表达（P＜0.001）；Western blot检测表明枸杞中分离得到的绿原酸能高度显著下调TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达（P＜0.001）。结论：在本研究质量浓度范围内，枸杞中分离得到的绿原酸抑制TGF-β1诱导的CFs纤维化过程，其机制可能与TGF-βl/Smads信号通路有关。     

β-胡萝卜素对H2O2诱导的斑马鱼肝损伤的保护作用

研究β-胡萝卜素对H2O2诱导的斑马鱼肝损伤的保护作用。选择适宜浓度的H2O2诱导斑马鱼肝脏氧化应激损伤,分别以5、10、20 μg/mL的β-胡萝卜素对其进行保护。给药48 h后检测组织匀浆中谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力和丙二醛（malondialdelyde,MDA）含量;苏木精-伊红染色观察斑马鱼肝组织病理变化情况;实时荧光定量聚合酶链式反应技术检测SOD、CAT和GSTP2以及核转录因子Nrf2 mRNA的相对表达量。结果表明：H2O2处理斑马鱼仔鱼48 h后,组织匀浆液中ALT和AST活力升高,SOD活力降低,MDA含量升高;与模型组比较,β-胡萝卜素能够抑制ALT和AST的升高,提高SOD活力,降低MDA含量;病理切片结果显示β-胡萝卜素组能显著改善斑马鱼肝脏组织病理形态;提高Nrf2 mRNA的相对表达量,上调抗氧化酶基因的相对表达量。β-胡萝卜素对H2O2诱导的斑马鱼肝损伤具有保护作用。     

赤霉酸对大麦制麦特性和氨基酸组成影响的研究

研究了制麦过程中,添加不同浓度的赤霉酸(GA3)时Azurel大麦制麦特性、麦芽质量参数和氨基酸组成的影响.结果表明,当赤霉酸添加量为0.2mg/kg时,库尔巴哈值为55%、游离氨基氮达到最大值190.1 mg/100mg干麦芽,麦芽中的氨基酸含量最高.当赤霉酸添加量低于0.2mg/kg时,麦芽的酿造品质可得到不同程度的提高.     

β-伴大豆球蛋白中α、α′亚基对大豆分离蛋白薄膜微观结构和功能特性的影响

为了研究β-伴大豆球蛋白中不同亚基组成对大豆分离蛋白薄膜微观结构和功能特性的影响,采用东农47(Wild对照)、α亚基缺失型(α-lack)、α′亚基缺失型(α′-lack)以及α、α′双亚基缺失型[(α+α′)-lack]的大豆为原料提取大豆分离蛋白。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析4种大豆分离蛋白的亚基组成,采用溶液流延法制备不同亚基组成的大豆分离蛋白薄膜,探究不同亚基组成对薄膜流变行为、微观结构、机械强度、耐水性、屏障特性、热稳定性及光学性能的影响。结果表明,不同亚基组成对大豆分离蛋白膜的微观结构和功能特性均有不同影响,与α亚基缺失和α、α′双亚基缺失相比,α′亚基缺失对薄膜结构和功能特性影响最为明显。红外光谱分析结果显示,相较于Wild薄膜,α′亚基缺失加强了蛋白质分子间氢键的相互作用,α′-lack薄膜β折叠含量减少到27.84%,α螺旋和无规则卷曲含量增加到16.83%和13.84%。扫描电镜分析结果显示,α-lack和(α+α′)-lack薄膜纹理形貌较散乱疏松,而α′-lack薄膜无明显气泡且具有平整致密的网络结构。流变特性分析结果发现,α亚基缺失会降低成膜强度,而α′亚基缺失会明显提高膜液的G′,使α′-lack具有更好的潜在成膜能力。与其他3种薄膜相比,α′-lack薄膜具有最大的抗拉伸强度2.31MPa,最小的水分含量(9.54%)和水溶性(30.81%),最低的水蒸气透过系数[21.89g·mm/(d·m²·kPa)],表现出优异的热稳定性和可见光阻隔特性。α′亚基的缺失能显著改善大豆分离蛋白薄膜微观结构和功能特性,研究结果旨在为生产高成膜性大豆蛋白系列产品提供理论参考。     

水牛αS1-酪蛋白多态性对马苏里拉干酪品质的影响

目的分析水牛α_(S1)-酪蛋白多态性对马苏里拉干酪品质的影响。方法以α_(S1)-酪蛋白AB型、α_(S1)-酪蛋白BB型和混合组水牛乳样为原料分别制成全脂马苏里拉干酪,比较3组水牛乳样和干酪在组成、功能特性和微观结构等方面的差异。结果α_(S1)-酪蛋白AB型水牛乳在脂肪、蛋白质和总固形物含量上显著高于BB型。制成马苏里拉干酪后,AB型干酪的蛋白质含量显著高于BB型和混合组干酪。BB型和AB型干酪在硬度、咀嚼性和胶黏性上显著高于混合组。结论不同基因型α_(S1)-酪蛋白水牛乳的乳成分存在差异,α_(S1)-酪蛋白多态性与水牛乳马苏里拉干酪的组成、质构和融化特性等存在显著关联。