乳清中酪蛋白糖巨肽的制备及纯化研究

研究了凝乳酶对酪蛋白的最佳酶解条件,确定了其最佳酶解参数为：酶解温度50℃,pH6.5,酶和底物比3%,酶解时间90 min.酶解后通过12%TCA沉淀法得到纯度为85.25%的酪蛋白糖巨肽.     

响应面法优化酶法制备酪蛋白糖巨肽的工艺条件

采用Minitab方法设计实验,对影响酪蛋白糖巨肽制备的酶解因素进行优化,发现酶解时间、酶解温度、酶解pH、酶与底物比是影响酶解酪蛋白的主要因素.由于唾液酸是酪蛋白糖巨肽的特征性组分,本文以唾液酸的含量表征酶解上清液中酪蛋白糖巨肽的含量.根据Minitab分析的结果,采用Design Expert软件中水平设计和响应面分析法对影响酪蛋白糖巨肽产量的主要因素进行优化,建立唾液酸含量A580对酶解主要条件的二次回归模型,其回归方程的决定系数达到了0.962,9.得到的最佳酶解条件为：酶解时间80,min,酶解温度42.5,℃,酶解pH 6.28,酶与底物比270,U/g.唾液酸含量A580最高为0.653,此时酪蛋白糖巨肽的得率为17.91 mg/g.     

凝胶过滤分离纯化酪蛋白糖巨肽的研究

酪蛋白糖巨肽具有重要生理功能,可广泛地应用于保健食品和药品。以Superdex 75 10/300 GL为分离介质,对酪蛋白的凝乳酶水解物中的酪蛋白糖巨肽进行分离纯化研究,结果表明,分离纯化CGMP的适宜条件为:0.1M醋酸铵平衡上样、洗脱,洗脱流速0.5ml/min;酶解上清液浓缩25倍上样,上样体积0.5ml。分离所得的CGMP由分子量分别为43000Da、30000Da和25000Da,糖基化程度分别为71.6μg/mg、99.1μg/mg和44.4μg/mg的三个组分组成,其平均糖基化程度为76μg/mg,总蛋白回收率为1.45%。     

酪蛋白糖巨肽的制备及其对变形链球菌的抑菌特性

研究了胃蛋白酶水解酪蛋白制备酪蛋白糖巨肽（Casein Glycomacmpeptide，CGMP）的工艺条件，通过正交实验得到最佳水解条件为：水解时间40min，pH1．8，温度45℃，酶与底物质量比0．75：100．采用间苯二酚一盐酸法证明该水解物中存在CGMP．通过滤纸片扩散法研究表明，粗品CGMP对变形链球茵的生长具有抑制作用．     

三聚磷酸钠处理酪蛋白对其酶解特性的影响

采用三聚磷酸钠(STP)对酪蛋白进行磷酸化处理,并用胰蛋白酶进行水解,通过正交试验确定磷酸化处理的最佳条件为:STP添加量为5%,温度为30℃,pH为9.磷酸化时间为3 h时,磷酸化程度最高(18.18 mg/g),SDS-PAGE表明酪蛋白谱带发生了明显的变化.与对照相比,酶解前10 min,可溶性氮含量无显著差异,而在酶解10~40 min时,磷酸化酪蛋白酶解液中可溶性氮含量高于对照,同时磷酸化处理可以提高酪蛋白的水解度.     

碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最适宜条件

蛋白质酶解是改善蛋白质特性,便于人体吸收的有效途径。我们对富含于乳制品中的酪蛋白,采用碱性蛋白酶进行水解实验。通过对主要影响因素的分析及回归方法,确定碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最佳工艺条件:温度55℃,酶-底物比为7%,底物质量分数为6%,pH值为8。     

碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最适宜条件

蛋白质酶解是改善蛋白质特性，便于人体吸收的有效途径。我们对富含于乳制品中的酪蛋白，采用碱性蛋白酶进行水解实验。通过对主要影响因素的分析及回归方法，确定碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最佳工艺条件：温度55℃，酶—底物比为7％，底物质量分数为6％，pH值为8。     

CPP生产副产物——CNPP酶膜耦合法制备ACE抑制肽研究

采用酶解与膜分离耦合的方法,以酶膜耦合法生产酪蛋白非磷酸肽（CPP）得到的副产物——酪蛋白非磷酸肽（CNPP）为原料制备高活性ACE抑制肽.用Protease N、胰蛋白酶、Fla-vourzyme、AS1398、酸性蛋白酶等几种蛋白酶对经过酶膜耦合制备的酪蛋白非磷酸肽进行二次酶解,同时与1 K膜分离耦合,然后对二次酶膜耦合所得产物的ACE抑制活性进行比较.结果表明,Protease N比其他几种蛋白酶更适合用于酪蛋白非磷酸肽制备高活性的ACE抑制肽,其产物的蛋白质量浓度为1 g/L时的ACE抑制率达到55.60%.     

一种来源于酵母Y.Lipolytica的新型蛋白质激酶——酪蛋白激酶…

培育了酵母菌种Ｙ．Ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ，并从中制取，纯化了一种蛋白质激酶－酪蛋白激酶Ⅱ。这种酶是一个四聚体α２β２，其分子量为１５８ｋＤ。     

酪蛋白非磷肽分子组成及其抑制血管紧张素转换酶活性的研究

测定了酪蛋白非磷肽(CNPP)的分子组成,并对酪蛋白非磷肽抑制血管紧张素转化酶(ACE)的活性进行了研究.研究结果表明:酪蛋白非磷肽的相对分子质量分布在226~8 314之间,其中数均相对分子质量253的肽含量最多,约占26.54%,其次是数均相对分子质量603的肽,含量约占25.69%;CNPP具有较强的疏水性,其中碱性氨基酸Lys、H is和Arg的含量为11.29%,芳香族氨基酸Tyr和Phe的含量为13.03%;CNPP对ACE活性具有抑制作用,且具有一定的量效关系,IC50是0.63μmol/L.