有机相酶促反应中固定化脂肪酶的非共价修饰

在选用８种具有两亲性质的表面活性剂,２种胆汁盐和１２种金属盐,对庚烷中催化己酸乙酯合成的固定化米氏毛霉脂肪酶进行了非共价修饰发现：在一定的质量浓度范围内,阴,阳离子型和非离子型的表面活性剂对脂肪酶酶促催化活性有不同程度的促进,在底物浓度从０．２５ｍｏｌ／Ｌ提高至０．５ｍｏｌ／Ｌ时,气溶胶硫代琥珀酸２（２－乙己酸）酯钠盐,十二烷基磺酸钠和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００以于脂肪酶保持稳定的催化活性有较大的提高     

脂肪酶构象刻录及稳定性研究

探讨了一种高度稳定的新型固定化酶--刻录酶的制备方法和催化性能.以聚乙二醇200（400）二（甲基）丙烯酸酯4种不同的功能单体和三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯为原料，底物月桂酸对脂肪酶进行构象诱导后，经过紫外光聚合和洗脱月桂酸，获得了4种锁定脂肪酶活性构象的聚合物，即刻录脂肪酶.研究结果表明，选用聚乙二醇400二丙烯酸酯为功能单体时，刻录脂肪酶的活性较游离脂肪酶提高近1倍，并且所得4种刻录脂肪酶的稳定性大大提高.在强酸、强碱和高温下刻录脂肪酶可以分别保持其初始活性的75%、50%和70%以上，用沉淀变性剂浸泡刻录脂肪酶30 d后，酶活性仍然可以保持其初始活性的50%以上.     

碱性脂肪酶在洗衣粉中稳定性的研究

本文对各种碱性脂肪酶在洗衣粉中的稳定性做了系统的研究，更加全面深入地了解各种碱性脂肪酶的特性，为碱性脂肪酶在洗涤剂中的应用提供了理论依据。     

假单胞菌JW12发酵液的脂肪酶稳定性

通过对假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）ＪＷ１２发酵液脂肪酶稳定性的研究,表明了发酵液脂肪的稳定性主要受蛋白酶的影响,当用吐温８０作为碳源时,通过对发酵培养基组成的调整,达到降低低蛋白酶的目的,提高发酵液脂肪酶酶活。     

具脂肪酶和酯酶活性酵母菌的选育及酶学研究

从青岛市区含油土壤中筛选得到一株酵母S9菌株，它可以同时产生较高酶活的脂肪酶和酯酶．对影响S9产脂肪酶和酯酶的各种因素进行了研究，1％的可溶性淀粉为最佳碳源，最适的初始培养pH和温度分别为pH 6．5和28℃，对S9脂肪酶和酯酶的各种酶学性质进行的研究表明，脂肪酶和酯酶的最适作用温度都为30℃，最适作用pH分别为7．0和8．0，两者都属于常温酶，在30～40℃范围内比较稳定，脂肪酶在中性偏碱的pH环境中比较稳定，酯酶属于碱性酶，在pH 7．5～10．5范围内相当稳定。     

β-葡萄糖苷酶交联聚合物的制备及酶学性质

对来源于黑布林的β-葡萄糖苷酶进行了交联法制备(CLEAs),并对其酶学性质进行了初步研究。结果发现,当异丙醇为蛋白沉降剂时CLEAs的酶活回收率最高达58.9%;该聚合酶的最适温度为55℃,显示出良好的温度耐受性;CLEAs的Km、Vmax和Ki值分别为5.74 m M、203.4μmol/(min·mg蛋白)和394.03 m M;此外,金属离子Hg2+、Ag+可显著降低CLEAs的酶活。     

产脂肪酶根霉和诱变及其酶促酯化反应的研究

西方通过紫外线诱变获得产脂肪酶菌株ＵＶ６－２，使其脂肪酶活力比原始菌株提高了３０％，同时对该酶的酯化性质进行了研究，并用正交试验方法确定了合成油酸正丁醇酯的最佳条件，最佳条件为温度３５℃，时间１０ｈ，加酶量为３００μ。     

吸附交联法和包埋法固定化混合酶研究

对从自然界分离得到的Microbacterium sp．OU01进行发酵,制得粗酶液（壳聚糖酶和伊肛氨基葡萄糖苷酶混合液）,采用吸附交联法及包埋法对其进行固定,研究其固定化的最优条件和固定化酶的酶学性质。结果表明,游离混合酶液的最佳PH为5．6,最适反应温度为50℃。吸附交联法固定化酶的最佳条件为：戊二醛体积分数5．0％,加酶量15mL（49．51U／mL）,固定化时间6h。该条件下制得的固定化酶的最适pH为4．5,最适反应温度为60℃。包埋法固定化酶的最佳条件为：海藻酸钠质量浓度10g／L,CaCl。质量浓度15g／L,加酶量为1mL（50．35U／mL）／5mL质量浓度10g／L海藻酸钠,固定化时间20min。该条件下制得的固定化酶的最适PH为5．0,最适反应温度为50℃。固定化酶酶解壳聚糖所得产物中含D-氨基葡萄糖,说明粗酶液中的壳聚糖酶和外切-β-D-氨基葡萄糖苷酶被同时固定。通过对游离酶和固定化酶稳定性的研究,表明吸附交联固定化酶更适于工业化应用生产D-氨基葡萄糖。     

蚜虫莫氏黑粉菌脂肪酶的酶学性质研究

为明确蚜虫莫氏黑粉菌脂肪酶的应用价值,研究了反应温度、pH值、金属离子、表面活性剂、抑制剂和有机溶剂等对脂肪酶活性的影响。结果表明：蚜虫莫氏黑粉菌脂肪酶的最适反应温度为70℃、pH值为8,具有较好的温度稳定性和pH耐受性,是一种常温发酵合成的耐高温碱性脂肪酶;Zn²⁺对其活力具有显著的抑制作用;吐温-20、吐温-80、曲拉通-100等表面活性剂和甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丙酮等有机溶剂对脂肪酶活力均表现出明显的促进作用;该脂肪酶对三油酸甘油酯的水解无位置特异性;水解对硝基苯酚棕榈酸酯(p-NPP)的米氏常数K_m为1.14 mmol/L,最大反应速率v_max为119.05 mol/min。蚜虫莫氏黑粉菌脂肪酶在高温、弱碱性、有机溶剂等工业反应条件下具有良好的应用前景。     

214型离子交换树脂固定化假丝酵母脂肪酶的研究

以假丝酵母脂肪酶(Candida rugosa lipase)催化脂肪酸甲酯化是植物油精制副产物中提取天然维生素E的重要预处理反应.为提高预处理效果,通过固定化假丝酵母脂肪酶提高其酯化能力,降低水解反应的能力.笔者在不同性能树脂筛选的基础上,开展了离子交换树脂214型固定化假丝酵母脂肪酶的研究.以酶固定化率为指标,开展了酶质量浓度、树脂的量、缓冲液pH、固定化温度、时间和振荡速率等条件试验和响应面试验,得到的最适固定化条件为酶质量浓度6.09mg/mL,5mL酶液中加入0.75g树脂,缓冲液pH 8.4,振荡转速134.26r/min,固定化温度30℃,固定化时间4h.该条件下,假丝酵母脂肪酶与树脂的结合率最高,酶的水解作用基本消失,酯化能力得到保持,可以获得较好的维生素E提纯预处理效果.     

离子交换树脂固定化脂肪酶催化合成蔗糖乙酯

南极假丝酵母(Candida rugosa)脂肪酶具有优良的催化性能,对其进行固定化可以很方便地实现酶的回收和再利用.采用4种离子交换树脂为载体,对来源于南极假丝酵母的脂肪酶进行了吸附固定化,并对固定化酶催化合成蔗糖乙酯的活性进行考察.结果表明,以弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂214为载体的固定化酶活性最高.固定化酶制备过程中缓冲液的最适宜pH值为8.4,最佳固定化时间为3h,最佳酶液浓度为8mg/mL,最适固定化温度为35℃.所得固定化酶催化合成蔗糖乙酯,酯化率达57.12%,蔗糖-6-乙酯的选择性达到51.21%.10批反应后,该固定化酶仍有较高的酶活力.     

磁性壳聚糖微球固定化脂肪酶的研究

以纳米级磁性壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂固定化脂肪酶,对固定化脂肪酶条件进行优化,同时对固定化脂肪酶的理化性质、活性回收率、热稳定性和储存稳定性进行研究.结果表明,固定化脂肪酶的最佳时间为7 h,最佳pH为8,最佳温度为50 ℃,最佳酶加量为每100 mg磁性微球加酶10 mg.和自由酶相比,脂肪酶被磁性壳聚糖固定...     

界面聚合制备含杯芳烃结构的交联膜

通过界面聚合将对叔丁基-杯[4]芳烃四-0-乙酰氯的正己烷溶液分别与己二胺、辛二胺及双端氨基聚乙二醇1000水溶液进行界面缩聚,制备出3种杯芳烃为交联点的无支撑聚合物薄膜,通过IR和SEM等手段对3种薄膜的化学结构和形貌进行了表征.结果表明,杯芳烃与双端氨基聚乙二醇1000形成的交联膜平滑、致密、具有黏性,适合在支撑膜表面形成含杯芳烃结构的聚酰胺皮层,可用于制备复合膜.     

The structural stability in nano-sized crystals of metals

The equation of phase equilibria in nano-sized crystal of metals has been established in terms of thermodynamic equilibrium. The thermodynamic parameters are calculated and the critical grain size for the stable high-temperature phase at room temperature is obtained. As an example, the critical grain size of β-Co at room temperature is determined at 35nm when the excess volume is 10%. The result agrees well with the experiment of Katakimi et al. The factors affecting the stability of β-Co are also discussed.     

酶工程在功能食品开发中的应用

酶工程是现代生物技术的重要组成部分。酶作为生物催化剂，具有高催化效率，强专一性，反应条件温和及酶活性可以调控，已广泛应用于食品加工。本文介绍了酶工程在无乳糖牛乳、低胆固醇乳脂乳、低变应原米、活性多糖、功能性低聚糖、糖醇、活性肽及氨基酸、功能性油脂、核苷酸、维生素、微量活性元素、糖苷开发中的应用。     

活性炭粒度与吸附条件对脂肪酶固定化的影响

以活性炭为载体固定化脂肪酶,研究了活性炭粒度和吸附条件对脂肪酶固定化的影响。结果表明,随着活性炭粒度减小,其吸附酶量和固定化酶活力增大,但吸附酶量过大会导致酶分子相互凝结,降低固定化酶的催化活性。当酶液质量浓度在0.01~0.05 mg/mL时,提高酶液质量浓度可以提高载体吸附酶量和固定化酶活力。酶液pH和温度仅对固定化酶活力有影响,而对载体吸附酶量无影响。在pH 7.0、30℃和150 r/min振荡条件下,采用40目活性炭吸附0.05 mg/mL酶液1 h,制得的固定化脂肪酶活力达65 U/g。     

酶工程在功能食品开发中的应用

酶工程是现代生物技术的重要组成部分。酶作为生物催化剂,具有高催化效率,强专一性,反应条件温和及酶活性可以调控,已广泛应用于食品加工。本文介绍了酶工程在无乳糖牛乳、低胆固醇乳脂乳、低变应原米、活性多糖、功能性低聚糖、糖醇、活性肽及氨基酸、功能性油脂、核苷酸、维生素、微量活性元素、糖苷开发中的应用。     

活性炭粒度与吸附条件对脂肪酶固定化的影响

以活性炭为载体固定化脂肪酶,研究了活性炭粒度和吸附条件对脂肪酶固定化的影响。结果表明,随着活性炭粒度减小,其吸附酶量和固定化酶活力增大,但吸附酶量过大会导致酶分子相互凝结,降低固定化酶的催化活性。当酶液质量浓度在0.01~0.05 mg/mL时,提高酶液质量浓度可以提高载体吸附酶量和固定化酶活力。酶液pH和温度仅对固定化酶活力有影响,而对载体吸附酶量无影响。在pH 7.0、30℃和150 r/min振荡条件下,采用40目活性炭吸附0.05 mg/mL酶液1 h,制得的固定化脂肪酶活力达65 U/g。     

含负折射率材料的一维光子晶体的能带特性

进一步研究光子晶体的传输特性,从色散关系出发,通过数值模拟计算研究了由正折射率材料和负折射率材料交替组成的一维光子晶体的能带结构与光子晶体的结构参数之间的关系。结果表明：当两种材料的光学厚度相同时,含负折射率的光子晶体的带隙比传统的光子晶体带隙大得多,并且具有狭窄的透射带。讨论了带隙的存在与折射率比值的关系,与传统光子晶体的透射谱进行了比较。为应用负折射率材料拓宽一维光子晶体带隙和设计多通道光子晶体滤波器提供了有益的理论参考。