胍基化修饰结合稀土金属标记应用于蛋白质相对定量研究

稀土金属元素标记技术利用双功能试剂二乙三胺五乙酸双酸酐(DTPA双酸酐)将稀土金属元素和目标肽段连接起来作为质量标签,结合基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析实现蛋白质的相对定量研究。为进一步提高标记效率,本研究对反应体系温度、pH值、反应时间和金属标签过量倍数等进行优化,并结合胍基化修饰技术封闭蛋白质酶切肽段中的侧链ε-氨基,使标记反应只发生在末端氨基,提高标记选择性。标准蛋白质实验结果表明,所有酶切肽段胍基化反应效率均大于95%,且胍基化修饰反应对金属标记效率没有影响。对于选定的7个标准蛋白质而言,每个蛋白质都至少有3个肽段可以得到良好的标记结果。对于离子抑制效应带来的干扰,可通过标准曲线进行校正,结果表明,当两种金属离子浓度比小于6时,该效应对蛋白质相对定量没有影响。胍基化修饰结合稀土金属标记方法不仅能在肽段水平实现相对定量,而且能在蛋白质水平实现相对定量。     

甲胎蛋白纯品的同位素稀释质谱法测定

建立了基于特征肽段的甲胎蛋白的液相色谱-同位素稀释串联质谱检测方法。选取3条同位素标记的甲胎蛋白特征肽段作为内标,准确称其质量后与酶切后的甲胎蛋白样品定量混合,采取Phenomenex Kinetex 2.6 μm C18色谱柱分离,电喷雾三重四极杆串联质谱多反应监测模式（MRM）测定,并对最优酶切条件、酶切效率以及定值结果的不确定度进行了考察和评定,得到的甲胎蛋白标准物质的最终测量结果为（0.329±0.016）mg/g。     

UPLC-ESI-TOF MS/MS分析太子参中环肽类成分

建立超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱（UPLC-ESI -TOF MS/MS）分析太子参中环肽类成分的方法。实验采用反相C18色谱柱,梯度洗脱,分离并检测太子参中11种环肽类成分。通过信息关联采集（IDA）模式,运用动态背景扣除(DBS),消除背景离子干扰,在获得11种环肽类成分MS/MS图谱的同时,也得到其精确的分子质量信息。     

LC/MS用于匹多莫德有关物质结构鉴定

采用液相色谱-质谱（LC/MS）技术鉴定匹多莫德的有关物质,选取Sepax GP-C8色谱柱(250 mm×4.6 mm×5 μm),以甲醇-三氟乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,对匹多莫德有关物质进行分离;采用电喷雾正离子化-高分辨飞行时间质谱法（ESI-TOF MS）测定各有关物质离子的准确质量和元素组成,三重四极杆串联质谱（ESI-MS/MS）测定子离子特征。结果表明：在所建立的条件下,匹多莫德及其有关物质的分离良好,检测并鉴定出11个主要有关物质。该技术能有效地分离鉴定匹多莫德中的有关物质,其鉴定结果可为质量控制和工艺优化提供参考。     

液相色谱—质谱法（LC—MS）分析细胞色素C酶解肽谱及一级结构

本文采用液相色谱—质谱联用法（LC／MS）,对一种蛋白质—细胞色素C（Cyt．C）的胰蛋白酶酶解产物进行了质量肽谱分析,确定了各肽段在蛋白质中的位置。并用串联质谱（MS／MS）分析了大部分肽段的序列,均获得满意的结果。     

液相色谱-质谱法检测肝脏中5种β-受体激动剂

建立了合理、可靠的液相色谱-质谱联用测定β-受体激动剂的方法。样品经5%高氯酸溶液提取,反相C₁₈小柱净化,采用Agilent Zorbax Eclipse Plus C₁₈柱分离,以0.1%乙酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行等度洗脱。通过液相色谱-质谱以MRM方式检测,测得5种 β-受体激动剂的检测限为0.4~1.2 μg•kg^-1。对肝脏进行添标回收实验,平均回收率为77.2%~95.6%。     

高效液相色谱-串联质谱法检测血液中甲卡西酮及其代谢物卡西酮

建立了高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法检测血液中甲卡西酮及其代谢物卡西酮。用双苯戊二氨酯（SKF_525A）的乙腈溶液提取含甲卡西酮及卡西酮的血液样品,提取液过0.22 μm微孔有机滤膜后,进行HPLC-MS/MS检测。采用Column Eclipse Plus C18色谱柱分离,柱温45 ℃,以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱;电喷雾离子源（ESI）正离子多反应监测模式（MRM）检测。结果表明,甲卡西酮在0.2~2 000 μg/L浓度范围内线性关系良好（r=0.999）,日内精密度低于7.9%,日间精密度低于8.8%;卡西酮在0.5~2 000 μg/L浓度范围内线性关系良好（r=0.999）,日内精密度低于8.2%,日间精密度低于9.1%。该方法操作简便、检测灵敏度高、专一性强、线性范围宽,可用于血液中甲卡西酮及其代谢物卡西酮的检测。     

双（氢化牛脂基）二甲基季铵化合物的质谱裂解规律及色谱分离研究

建立了高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-ESI-MS/MS）联用技术快速鉴定和检测双（氢化牛脂基）二甲基季铵化合物（DHTDMAC）的方法。通过对双（氢化牛脂基）二甲基氯化铵标准品的质谱解析,由一级质谱中各成分的特征母离子峰和二级质谱裂解碎片,得出质谱裂解规律,并推断出标准品中所包含的16种DHTDMAC组分。通过中性丢失扫描、母离子扫描和子离子扫描对质谱解析和裂解规律进行了验证。通过色谱条件的优化,采用电喷雾电离正离子（ESI⁺）、多反应监测（MRM）模式,建立了色谱分离、质谱检测的方法。本研究鉴定出不同链长烷基和碳数的DHTDMAC组分,并建立了DHTDMAC单个组分的简便、高效的检测方法,对准确研究该类化合物,以及加强环境、化工产品和消费品中DHTDMAC的监控提供了依据。     

气相色谱-串联质谱法测定木制儿童用品中的10种木材防腐剂

建立了固相萃取-气相色谱-串联质谱法（SPE-GC-MS/MS）同时测定木制儿童用品中氯酚类化合物和菊酯类化合物等10种木材防腐剂。采用甲醇溶剂提取,乙酸酐试剂衍生、固相萃取净化后,经HP-5MS色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）分离,串联质谱在多反应离子监测模式（MRM）下进行检测,内标法定量。同时,考察了多种实验参数对检测结果的影响,并进行方法验证。结果表明,该方法对于复杂基质的木材样品中目标物的检测具有良好的选择性与灵敏度。对于不同物质的定量限（LOQ）在0.002 5~0.2 mg/kg之间,线性范围为0.002 5~25 mg/kg,低、中、高3个添加水平的平均回收率在85.2%~100.1%之间,日内精密度（RSD,n=6）在0.6%~9.1%之间,日间精密度（RSD,n=6）在2.3%~7.2%之间。将该方法应用于实际样品抽查中,发现了多种木材防腐剂的残留。     

兴奋剂生长激素的MALDI-TOF质谱研究

采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI TOF MS）法对生长激素（GH）标准品和国产GH制剂进行比对研究。在完整分子的相对分子质量测定中,GH的精确分子质量为22 124 u,检测灵敏度达74 fmol。实验还发现1种GH制剂的相对分子质量为22 254 u,质量数比理论质量多131 u,经胰蛋白酶解产物的二级质谱测序证实是N端多一甲硫酸残基(Met)的GH。GH酶解后的肽段样品可以鉴定出8个GH肽段,覆盖率为45.5%,Mascot蛋白谱库检索蛋白质评分值为132,蛋白质置信区间为100%。测序结果说明,N端的甲硫酸残基可以作为鉴定外源GH的分子标记。     

高压模块性能对数字离子阱质谱仪性能的影响

数字线性离子阱质谱仪的供电高压模块的稳定度、负载变化率等参数对数字离子阱的性能有很大影响。为了研究供电高压模块对仪器性能的影响,本工作基于正在研制的便携式数字线性离子阱质谱仪,以1 mg/L苯、甲苯、二甲苯、氯苯混合标准气体为检测对象,研究高压模块性能改进后仪器性能的变化情况。结果表明：通过增加稳压模块的方法,使离子阱质谱仪一级质谱的质量稳定性、离子响应,二级质谱的隔离效率都有较大幅度的提高;一级质谱中,离子的质量轴波动减小到之前的一半,响应值提高了10%以上,二级质谱离子的隔离效率提高了1.6倍。     

离子阱质谱分析仪在研究气态配位化合物形成及配位平衡方面的应用

本研究利用离子阱质谱仪的碰撞诱导解离技术（collision-induced dissociation）和气态离子-分子反应（ion-molecule reaction）技术研究气态配位化合物的配位键形成,解离以及再平衡过程。实验发现,气相中配位化合物在被外来能量打断配位键后,可以捕获其它分子形成新的配位化合物,从而达到新的络合稳定平衡,并提出化学气相系统中配位新平衡的建立是基于金属配合物的热力学稳定性。实验结果表明,可以通过改变离子阱质谱仪的碰撞诱导解离过程中激发时间,研究配位化合物的热力学稳定性。     

印花金属板生产线加工技术研究

为实现高品质金属板的大批量生产,设计了一条三色印花金属板生产线。该生产线可连续不间断地生产,一条生产线可实现2种板材的深加工,既可以生产印花金属板,又可以生产热覆膜金属板。整条生产线结构紧凑,采用三辊顺涂技术,并带有钢带纠偏系统。金属板印花均匀美观,热覆膜机采用分体设计,操作灵活方便,耗材无污染,属于绿色环保产品。该生产线生产效率高,生产出来的产品经检验符合国家标准,具有应用及推广价值。     

非对称双曲面线形离子阱的设计及性能研究

为提升离子阱质量分析器的分析性能,本文提出一种非对称双曲面线形离子阱结构,通过优化离子出射方向上x电极的单向拉伸距离Δr_a,引入合理的非对称射频电场,从而提高离子单向出射效率。利用SIMION和AXSIM模拟软件分析非对称双曲面线形离子阱的内部电场分布、离子运动轨迹及模拟质谱图。结果表明,在性能优化的对称双曲面线形离子阱结构的基础上,其中1个x电极单向拉伸Δr_a=0.8 mm时,通过优化AC频率和扫描速率等参数,非对称双曲面线形离子阱的离子单向出射率可达90%以上,同时m/z 609离子的质量分辨率超过5 100。经优化几何结构后的非对称双曲面线形离子阱可在保证高质量分辨率的情况下,大幅提高离子检测效率,这在小型化质谱仪的开发中具有显著的优势。     

甘草酸钾盐和甘草酸钠盐的电喷雾离子阱质谱研究

用(+)电喷雾离子阱质谱对三元有机弱酸甘草酸的钾盐和钠盐进行了研究。结果显示,甘草酸的一级、二级和三级钾盐或钠盐均可产生很强的质子化分子离子峰;在甘草酸各级钾盐和钠盐的质子化分子离子的二级质谱中,可产生丢失一个葡萄糖醛酸单元的子离子,同时出现双葡萄糖醛酸单元加合相应金属离子的子离子,并且以上子离子均包含与母离子相同数目的相应金属离子。因此,(+)ESI离子阱质谱是区别甘草酸各级钾盐和钠盐的一种有效手段。另外,在甘草酸二钾和甘草酸二钠的(+)ESI-MS一级质谱中,可清楚地观察到一级盐和三级盐的质子化离子,表明甘草酸二盐在水溶液中存在分子间的离子交换     

Determination of dioxins/furans and PCBs by quadrupole ion-trap gas chromatography-mass spectrometry

The versatility and sensitivity of the quadrupole ion trap tandem mass spectrometer has been applied to the determination of polychlorodibenzo-p-dioxins (PCDDs) and polychlorodibenzofurans (PCDFs), and of polychlorinated biphenyls (PCBs). A brief introduction to the theory of ion confinement in a quadrupole ion trap permits discussion of ion trajectory stability, mass-selective ion ejection, the frequencies of ion motion, and the role of resonant excitation of ion motion. The tandem mass spectrometric examination of PCDDs and PCDFs eluting and co-eluting from a gas chromatographic column is described. Illustrative examples are given of the analysis of field samples containing PCDDs and PCDFs. A comparison is presented of the performance of each of a quadrupole ion trap tandem mass spectrometer, a triple stage quadrupole mass spectrometer, and a sector instrument of relatively high mass resolution for the determination of PCDDs and PCDFs. This comparison is made with respect to instrument tuning, calibration plots, detection limits, ion signals at low concentration, relative response factors, ionization cross-sections, and the examination of field samples. The application of quadrupole ion trap tandem mass spectrometry to the examination of PCBs is focused upon those PCB congeners that have the greatest toxicity. 39 congeners of the total of 209 PCB congeners have been identified as having the greatest toxicities. Chemical ionization has been used for the determination of co-eluting congeners #77 and #110 where the toxicity of the former is much greater than that of the latter. An analytical protocol, based on the variation of molecular ion fragmentation according to the degree (or absence) of chlorine ortho-substitution, has been proposed for distinguishing between toxic and nontoxic PCB congeners.     

Design and evaluation of a unipolar aerosol particle charger with built-in electrostatic precipitator

A new unipolar charger of aerosol particle has been designed and evaluated. The free ion and particle trajectories have been simulated. Four parameters, including electrical characteristics, particle loss, charging efficiency and the average charges, were varied to evaluate the charger. The experimental results show that the average discharge current was stable at 5?µA with 2.6?kV applied on the needle. The standard deviation is 0.0016 when clean air is entered in the discharging zone, as compared to the deviation of 0.024 with unfiltered ambient air which indicates that discharge current is more stable when clean air is entered. The electrostatic loss, diffusion loss and total particle loss were below about 4, 7 and 9% for all particles (sizes of 20–1000?nm), respectively. The intrinsic and extrinsic charging efficiency increased with the particle diameter. The intrinsic efficiency is practically 100% for particle diameters above 50?nm. Compared to the intrinsic efficiency, the extrinsic charging efficiency decreased by 5% given the fact that some of particles may be deposited inside the charger. As for the average particle charge number, the maximum relative error between the results of experiment and theory was less than 15%.     

超高效液相色谱-串联质谱法同时检测毛发中112种合成大麻素类物质

建立了高灵敏的超高效液相色谱-三重四极杆质谱（UPLC-MS/MS）法同时测定毛发中112种合成大麻素。用甲醇提取毛发样本后,在多反应监测模式（scheduled MRM）下,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱分离,并对离子通道、碰撞能量、同分异构体或质量数接近的合成大麻素的分离度等进行优化。结果表明,112种合成大麻素的检出限为0.5~5 ng/g,线性相关系数（r）均大于0.999 0;在4个添加水平（1、5、25、100 ng/g）下,基质效应和提取回收率分别为81.0%~117.8%、80.4%~119.7%。利用本方法测定实际案件中15份毛发检材,结果检出多种合成大麻素,含量为1.4~48.2 ng/g。该方法效率高、准确性好,可同时测定目前国内发现的所有种类合成大麻素。     

非对称三角形电极离子阱的单向出射性能模拟研究

三角形电极离子阱（triangular-electrode linear ion trap, TeLIT）是一种新型结构的线性离子阱,具有简单的电极结构和良好的分析性能。为进一步提高TeLIT的离子探测效率,本实验将离子出射方向的2个电极设置为不同角度,建立非对称结构的TeLIT,通过引入非对称场实现离子单向出射。通过分析电极角度差与其内部电场分布的关系,并模拟离子运动轨迹,获得离子出射情况和模拟质谱峰。理论模拟结果显示：当离子出射方向三角电极的角度差Δα=15°时,在优化的AC频率条件下,三角形电极离子阱的m/z 610离子单向出射率可达95%以上,且质量分辨率达到2647。经优化几何参数后的非对称三角形电极离子阱可在几乎不损失分辨率的情况下实现离子单向出射,大幅提高了单检测器模式下TeLIT的离子探测效率和仪器的灵敏度,使其在小型化质谱仪的开发中具有显著优势。