鲜切莲藕的酶促褐变及贮藏中褐变生理的研究

以鲜切莲藕为研究对象,试验探讨多酚氧化酶(PPO)活性测定的最佳条件、抑制剂对多酚氧化酶的影响,并研究鲜切莲藕在贮藏期间相关指标的变化规律。结果表明:邻苯二酚为底物时,最适波长为410 nm、pH值为7.0、温度为35℃、底物浓度0.09 mol/L及抑制剂组合为Vc浓度0.20%、亚硫酸钠浓度0.10%、柠檬酸浓度0.20%、EDTA浓度0.25%。鲜切莲藕在贮藏期间,褐变度呈上升趋势,水分含量、可溶性蛋白质含量、PPO活性呈先上升后下降的趋势。     

豆壳过氧化物酶的酶学性质研究

豆壳过氧化物酶(Soybean Hull Peroxidase,SHP)是从大豆豆壳分离得到的一类重要的氧化还原酶,试验通过缓冲溶液抽提法提纯豆壳过氧化物酶,采用愈创木酚法测定酶活力。结果表明,豆壳过氧化物酶是一种耐高温、耐酸碱的酶,其酶作用的最适温度为35℃,最适pH值为5.2,对愈创木酚和过氧化氢的表观Km值分别为1.53 mmol/L和0.36 mmol/L。常见化合物对豆壳过氧化物酶活性的影响也不尽相同,Fe3+对酶的抑制作用明显,而Mg2+对酶反应有一定的激活作用。     

抑制苹果梨汁酶促褐变的研究

以色度、褐变率、总酚含量、多酚氧化酶活性及苹果梨汁的感官评价等5个指标作为评价标准,考察了3种处理方法(水浴处理法、抗坏血酸处理法和硫代硫酸钠处理法)对苹果梨汁酶促褐变的抑制效果.结果表明, 3种处理方法均可有效抑制酶促褐变,且均对苹果梨汁的感官品质无明显影响.经对比上述3种处理方法在处理苹果梨汁后放置不同时间的各指标显示,添加体积分数为0.075%的抗坏血酸时其抑制酶促褐变的效果优于其他2种方法.本文研究结果可为解决苹果梨深加工中出现的酶促褐变现象提供参考.     

香蕉加工过程酶促褐变控制的研究

研究了香蕉果实不同部位的褐变情况以及去皮、切片、打浆、钝酶工艺中的褐变,通过褐变抑制试验,筛选了几种护色剂。结果表明,香蕉的果皮、果肉上的丝络、果心部位均比果肉易于褐变。去皮、切片、打浆处理对香蕉酶促褐变的影响程度由大到小为:打浆 > 切片 > 去皮,打浆时间越长,褐变程度越高。微波法钝酶比热水法、蒸汽法护色效果好,且能保持香蕉的风味。柠檬酸、异抗坏血酸、4-乙基间苯二酚、植酸分别对香蕉浆液均有护色作用,其最佳配比为:柠檬酸0.32%、异抗坏血酸0.06%、4-乙基间苯二酚0.12%、植酸0.02%。     

茶树菇过氧化物酶的研究

报道了茶树菇在不同发育时期的茵体组织的过氧化物酶同工酶的研究。研究发现，茶树菇在不同生长期有不同的过氧化物酶同工酶酶谱。在菌丝体阶段，过氧化物酶分布较稳定，活性随生长天数增加持续递减；在子实体阶段，过氧化物酶同工酶条带数及活性均随生长天数增加而衰减。     

白腐真菌锰过氧化物酶的研究

建立白腐真菌如Phanerochaete chrysosporium，Trametesversicolor，Trameteshirsuta，Trametes hispida等菌的液体反应体系。研究各种因子对产锰过氧化物酶的影响。研究表明：①Mn^2＋是产锰过氧化物酶必不可少的因子；②在所有体系中VA（0．4mmol／L）、Tween80（0．1％）和草酸（5mmol／L）都能促进产酶；③对Phanerochaete chrysosporium而言，高N抑制产酶；对Trametes hispida而言，N源多少对产酶没有影响；④L-苯丙氨酸（20mmol／L）、D-苯丙氨酸（20mmol／L）和二琉基苏糖醇（0．1％）均抑制Phanerochaete chrysosporium产酶；⑤Trametes versicolor产酶能力比Phanerochaete chrysosporlum大的多，且Tvametes versicolor产酶时间长。     

白腐真菌锰过氧化物酶的研究

建立白腐真菌如Phanerochaete chrysosporium,Trametes versicolor,Trametes hirsuta,Trametes hispida等菌的液体反应体系。研究各种因子对产锰过氧化物酶的影响。研究表明:①Mn2+是产锰过氧化物酶必不可少啪因子;②在所有体系中VA (0．4 mmol／L)、Tween80(0．1％)和草酸(5 mmol／L)都能促进产酶;③对Phanerochaete chrysosporium而言,高N抑制产酶;对Trametes hispida而言,N源多少对产酶没有影响;④L-苯丙氨酸(20 mmol／L)、D-苯丙氨酸(20 mmol／L)和二巯基苏糖醇(0．1％)均抑制Phanerochaete chrysosporium产酶;⑤Trametes versicolor产酶能力比Phanerochaete chrysosporium 大的多,且Trametes versicolor产酶时间长。     

酶切方式对工程菌植酸酶性质的影响

将无花果曲霉（A.ficuum)AS3.324的植酸酶基因（phyA)，克隆到pPIC9K中，得到重组载体pPIC9K/phyA Ⅱ，分别用限制性内切酶Dra I和Bpul 102 I线性化，用电穿孔转化方法导入宿主巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris)GS115中，构建了两种植酸酶工程酵母。本文比较了这两种工程菌表达的植酸酶的酶学性质。研究结果表明，两者的酶学性质无显著差异。     

新型D-氨基酰化酶的特性及固定化酶的研究

本文研究了一株具有N-酰基酰化酶（DAA）生产能力的细菌,通过对其酶学特性及固定化酶用于D-氨基酸的生产进行了研究。显示此酶的最适温度为37℃,最适pH7.4,1mmol/L以下的CaCl2,CdCl2,CoCl2,CuCl2,FeCl2,HgCl2, MnCl2,ZnCl2对酶的活性没有影响,在20mmol/L的EDTA条件下仍可保持65%的酶活性。底物特异性显示酶的最佳底物是N-乙酰-D-苯丙氨酸,50mmol/L以上的N-乙酰-D-苯丙氨酸显著抑制酶的活性。利用海藻酸钠固定酶后,在30℃条件下,使用50mmol/L的N-酰基-D-苯丙氨酸底物进行的降解实验显示水解率可以达到84%,转化批次达到6次以上,活性保持达到70小时以上。     

伏安酶联免疫分析中一类新的HRP底物体系的初步研究

提出了以酚红、１,２,５,８－四羟基蒽醌、１,８－二羟基蒽醌三种染料类物质作为电化学酶免疫分析中辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）催化氧化反应的底物,这三种具有电化学活性物质,在ＨＲＰ的催化作用下,被Ｈ２Ｏ２氧化生成非电活性的产物,导致测定的电流下降,其减少程度和ＨＲＰ的浓度有一定的关系,从而建立了三种底物测定ＨＲＰ的新体系,比较了它们测定ＨＲＰ的灵敏度,对酶催化反应机理进行了初步的探讨。     

聚天青A/辣根过氧化物酶电极的制备及性能

以循环伏安法在玻碳电极表面电化学聚合天青 A的同时实现了辣根过氧化物酶 ( HRP)的固定化 ,制备了聚天青 A/辣根过氧化物酶 ( PAA/HRP)电极。该电极对 H2 O2有很好的生物电催化还原作用 ,可在没有电子传递体的情况下催化 H2 O2 的还原 ,催化电流与 H2 O2 浓度在 1 .0× 1 0 - 6～ 6.0× 1 0 - 3mol· L- 1的范围内呈良好的线性关系 ,相关系数 r=0 .9993( n=1 6)。该酶电极制备简单 ,重现性良好 ,用于 H2 O2 的测定 ,可使用 60次以上。     

以ODA为底物固体电极伏安法测定辣根过氧化物酶及其标记物的研究

以玻碳电极为工作电极研究了邻联茴香胺 ( ODA)为底物微分脉冲伏安法测定辣根过氧化物酶 ( HRP)及其标记物的方法。 HRP能够催化 H2 O2 氧化 ODA,其反应产物在玻碳电极上 - 0 .31 V ( vs.Ag/Ag Cl)左右被还原产生一个灵敏的还原峰 ,还原峰电流随着酶浓度的增大而增大 ,借助此还原电流可以测定 HRP,并可用于以 HRP为标记物的酶免疫分析。对酶催化反应条件和酶催化反应产物的测定条件进行了详细的研究 ,在最佳实验条件下测定游离 HRP的线性范围是 4.0× 1 0 - 10 ～ 6.0× 1 0 - 8g· m L- 1,检测限为3.3× 1 0 - 10 g· m L- 1;测定游离的酶标记物 ( Ig G- HRP) ,稀释范围为 1∶ 2 0 0 0～1∶ 1 0 0 0 0 0 0 ,最大稀释比为 1∶ 1 0 0 0 0 0 0。     

超高氧高阻隔膜气调包装对鲜切胡萝卜品质的影响

高氧气调包装是近年来研究较多的气调包装方式之一.研究了在不同储藏温度（4,15,25℃）下,高阻隔膜超高氧气调包装的鲜切胡萝卜品质变化规律（对照空气包装）.结果表明,超高氧气调包装显著增加了鲜切胡萝卜的失重率、呼吸强度,同时加速了维生素C、总胡萝卜素含量的损失,但能提高多酚类物质含量.总之,高阻隔膜超氧气调包装不能有效地维持鲜切胡萝卜的品质.     

利用苯胺检测过氧化物酶活力的方法

以过氧化物酶催化苯胺发生氧化聚合反应，利用分光光度法测定反应液的吸光度，以吸光度的变化速率来表征过氧化物酶活力。确定了苯胺-乙醇溶液的最佳体积分数为11．1％及反应液的最佳吸收波长为415nm。讨论了苯胺的体积分数、H2O2的体积分数、pH、温度对过氧化物酶活力的影响。同时，通过重复实验、方差分析确定了该方法的可靠性。     

小白杏热泵干燥特性和褐变研究

热泵用于食品干燥已越来越受到关注,而在小白杏干燥上的应用却少见研究.通过对新疆轮台小白杏进行整粒（分别用促干剂、NaHSO3和清水处理）和切分4种处理方式的干燥试验,研究了小白杏在热泵条件下的干燥特性和褐变规律.试验表明小白杏的干燥周期缩短1 ～2d,杏干的感官品质和卫生质量得到大幅提升.     

新型过氧化物酶荧光底物的合成及其性能的研究

合成了辣根过氧化物酶的５种荧光底物，它们分别是：Ｎ，Ｎ′—二氰甲基邻苯二胺（ＤＣＭ－ＯＰＡ），３，４—二氧喹喔啉－２（１Ｈ）－酮（ＤＨＱ），３－甲基－３，４－二氢喹喔啉－２（１Ｈ）－酮（ＭＤＨＱ），３，４－二氢喹喔啉－２（１Ｈ）－酮－６－羧酸（ＤＨＱ－６－Ａ）及３－甲基－３，４－二氢喹喔啉－２（１Ｈ）－酮－６－羧酸（ＭＤＨＱ－６－Ａ）。其中荧光底物ＤＣＭ－ＯＰＡ，ＤＨＱ和ＭＤＨＱ都可以很容易地进行大量纯品的制备。我们用流动注射分析法对合成底物和已有的最佳荧光底物在ＨＲＰ及其模拟酶氯化血红素催化体系中的性能进行了比较研究。结果表明，ＤＣＭ－ＯＰＡ和ＭＤＨＱ是合成的５种底物中最好的两个，而对羟基苯丙酸（ｐ－ＨＰＰＡ）和对羟基苯乙酸（ｐ－ＨＰＡ）优于高香草酸（ＨＶＡ）和酪氨。底物ｐ－ＨＰＰＡ和ｐ－ＨＰＡ与合成底物ＤＣＭ－ＯＰＡ和ＭＤＨＱ体系在对过氧化氢的分析方法性能相当，最低检测限都在１～１０ｎｍｏｌ／Ｌ之间。对酶的检测，ＤＣＭ－ＯＰＡ是所有研究的底物中最灵敏的，上述两种合成底物保存在４℃的冰箱中都可以稳定一个月以上。     

生物酶催化木素与酚共聚反应的研究

用过氧化物酶在微乳液中催化木质素与酚的聚合反应。结果表明 ,在微乳液系统中酶催化聚合反应速率很大。     

聚苯乙烯微孔膜固载辣根过氧化物酶降解苯酚

以聚苯乙烯蜂窝状微孔膜为载体,碳二亚胺为活化剂,将HRP固定在微孔膜上,探讨固定化条件如酶溶液质量浓度、固定化时间对HRP酶活性的影响,以及固定化HRP酶催化氧化苯酚性能.结果显示,固定化HRP适宜酶溶液质量浓度为1 g/L,固定化时间3 h.固定化HRP酶催化氧化苯酚适宜用量为15 g/g,反应时间50 min,H2O2与苯酚的摩尔比为3∶2,在此条件下苯酚的去除率在76%左右.HRP固定化酶可循环使用3次,3次后其对苯酚的去除率降为4.26%,催化性能有待一进步提高.     

辣根过氧化酶催化H_2O_2氧化邻苯二胺反应产物的循环伏安法研究

用辣根过氧化物酶催化H2O2氧化邻苯二胺制备了酶促反应产物。经高效液相色谱法、紫外 可见光谱法和红外光谱法测定分析,产物为 2, 3 -二氨基吩嗪。用金圆盘电极循环伏安法和金超微盘电极循环伏安法对 2, 3- 二氨基吩嗪在B R缓冲溶液中的电还原性质进行了研究,求得电极反应电子转移数和参与电极反应H+的反应级数均为 2。2,3- 二氨基吩嗪在电极上经历了H+eH+e的两步一电子过程,生成产物 2, 3 -二氨基- 5, 10 -二氢吩嗪。