旋转生物传感器高灵敏检测盐酸克伦特罗方法研究

盐酸克伦特罗(clenbuterol hydrochloride, CL),又名双氯醇胺、氨哮素、克喘素,为白色结晶状粉末, 无味略苦,是一种人工合成的β2-肾上腺素受体激动剂。盐酸克伦特罗又称"瘦肉精",被非法用于肉用动物生产。彻底查禁CL 的非法滥用,必须要有高效、灵敏、特异的残留检测方法。本研究着重应用免疫学和生物化学方法,构建了基于量子点标记的ATP合酶分子马达免疫旋转生物传感器 (immuno-rotary biosensor, IRB),结合荧光技术,利用中国科学院生物物理研究所张仲伦老师研发的BPCL弱光检测器实现了对盐酸克伦特罗快速、高灵敏度的检测。     

SPR生物传感器及应用

快速检测具有高灵敏度、高通量、快速、简便等特点．非常适用于现场或在线实时检测。     

浅谈盐酸克伦特罗的危害

20世纪70年代末，美国等发达国家首次将盐酸克伦特罗(CLB)开发研究，80年代被广泛应用到畜禽生产中，近年来畜产品中CLB的残留对人类的健康造成严重的危害，着重从CLB理化特性，对人畜的危害性，检测方法以及治理措施方面作一概述。     

动物性食品中盐酸克伦特罗ELISA检测方法的建立及应用

目的:建立动物性食品中盐酸克伦特罗残留快速检测技术,确保食品安全.方法:以盐酸克伦特罗重氮化后分别连接到牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL.通过免疫得到多抗血清,经硫酸铵沉淀,Sephrose 4B-proteinA对抗体进行纯化,在此基础上建立间接竞争ELISA方法.结果表明:包被抗原的最适质量浓度为10 μg/mL,抗体的最佳稀释度为1∶1000;该方法的IC50为2.18 ng/mL,最低检测限达0.05 ng/mL,与沙丁胺醇和妥洛特罗的交叉反应率分别为8.28％和7.75％,平均加标回收率为90.78％.结论:该法灵敏度高,样品前处理简便、快速,适用于动物源性食品中盐酸克伦特罗残留的大批量现场检测.     

竞争化学发光酶免疫测定技术检测盐酸克伦特罗

目的建立一种检测盐酸克伦特罗(clenbuterol,CLB)的竞争化学发光酶免疫测定法(chemiluminescent enzyme immunoassay,CLEIA)。方法基于CLB的竞争酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),通过优化反应温度、反应时间和缓冲体系p H建立了CLB的CLEIA测定法。用CLB小鼠中毒模型评价CLEIA检测法对实际样本的检测效果,并将CLEIA与LC-MS法的相关性进行了比较。结果 CLEIA法测定CLB的检测范围为0.0433~42.5363μg/L,检测限为0.0178μg/L,变异系数小于10%,回收率为95%~110%,对莱克多巴胺和沙丁胺醇仅有极低的交叉反应性。所建立的CLEIA法与LC-MS法在检测实际样本时具有较高的相关性。结论本研究建立的CLEIA法操作简便,检测限、灵敏度、准确度、特异性均符合检测要求,可用于实际样品的检测。     

动物源性产品中盐酸克伦特罗检测方法的研究进展

对盐酸克伦特罗检测方法进行了概述,比较了色谱法、免疫法与生物传感器分析法的区别,并讨论了最新检测方法的进展与方向,为今后在盐酸克伦特罗残留检测方法上提供新思路。     

盐酸克伦特罗及肉品卫生

阐述了盐酸克伦特罗在机体内的分解代谢。残留和对人畜的危害。比较分析了残留的检测技术．重点阐述了ELlSA方法的原理、应用及发展前景，为保证肉品卫生作好监控。     

利用表面等离子体共振技术检测猪尿中盐酸克伦特罗

利用表面等离子体共振技术检测猪尿液中的盐酸克伦特罗。将盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白偶联物作为传感芯片特异识别探针结合到生物芯片表面,通过溶液竞争法结合表面等离子体共振技术检测盐酸克伦特罗。标准曲线被建立并且检测盐酸克伦特罗的检测限能够达到1.03 ng/m L,与莱克多巴胺、沙丁胺醇无交叉反应,具有良好的特异性,猪尿的回收率为98.2%~107.0%,变异系数在可接受范围内。所采用的表面等离子体共振方法对于检测猪尿中的盐酸克伦特罗具有灵敏性,准确性,精密性。     

ELISA检测盐酸克伦特罗残留的方法学评侈

以盐酸克伦特罗（clenbuterol hydrochloride）重氮化后分别连接到牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。通过免疫兔获得含有多克隆抗体的血清，经硫酸铵沉淀、纯化，得到兔源抗CL的抗体，在此基础上建立了间接酶联免疫检测方法。实验结果表明，抗CL抗体最适稀释度为1：1000，羊抗兔酶联抗体（HRP—IgG）的最适稀释度为1：1500。该检测方法的检测灵敏度为1．452μg／L，线性检测范围为7．26-90．75μg／L。     

共振光散射法检测肉制品中盐酸克伦特罗

目的:建立一种测定盐酸克伦特罗的新方法。方法:人血清白蛋白（HSA）与盐酸克伦特罗结合,用共振瑞利散射光法进行盐酸克伦特罗的检测。结果:在365nm处共振光散射增强强度与盐酸克伦特罗的浓度呈线性关系。以K2HPO4-NaH2PO4为缓冲体系维持盐酸克伦特罗测定溶液的pH=5.80,当温度为305.16K（28℃）和静置时间为30min时,方法的检出限为0.10μg/mL,线性范围为0.10～2.80μg/mL,线性相关系数r=0.995,方法精密度（RSD）和准确度（P）分别2.98%～5.19%和92.50%～108.00%。结论:方法可靠、简便、快速,可直接测定样品中的盐酸克伦特罗。      

SPR生物传感器在乳品工业中的应用

介绍了SPR的概念和SPR生物传感器基本原理，并从监测乳牛发情，检测乳品抗生素残留，检测乳品脂肪含量，检测乳品微生物污染和检测乳品掺假成分这5个方面综述SPR生物传感器在乳品工业中的应用及发展前景。     

SPR传感器在食品检测中的应用

SPR生物传感器能够准确、灵敏、快速、简便地检测多种生化指标,并实时监测分子间的相互作用。经过20年来的发展,目前在食品检验中已成为很受关注的一项光电检测技术。简要介绍了SPR的基本原理、组成结构以及在食品检测中的应用。     

应用ELISE法测定盐酸克伦特罗的残留

介绍了酶联免疫吸附法测定猪肉中的盐酸克伦特罗的方法.利用试剂盒对猪肉中的盐酸克伦特罗残留处理后,用酶标仪进行检测分析.此法较适用于现场检验,检测速度快、灵敏度高,是保证肉品卫生安全的较好监控方法.     

Love wave SAW biosensors for detection of antigen-antibody binding and comparison with SPR biosensor

In this study, 77 and 155 MHz Love wave surface acoustic wave (SAW) biosensors were fabricated to detect antigen-antibody reactions in liquid environments. The single-interdigital transducer (IDT) on the quartz crystal substrate was found to be not suitable for Love wave SAW biosensor because of its signal distortion due to triple transit echo (TTE) between the IDT fingers. As a waveguide layer for the Love wave SAW biosensor, SU-8 photoresist was coated on a quartz crystal substrate with double-IDT patterns. Anti-mouse IgG was immobilized on the sensing area with a protein G layer bound to a gold surface. The minimum detectable concentrations of mouse IgG for 77 and 155 MHz Love wave SAW biosensors and a surface plasmon resonance (SPR) biosensor were found to be 2.5, 1, and 1 μg/mL, respectively. The fabricated Love wave SAW and SPR biosensors showed similar performances in detectable concentrations of mouse IgG and in coefficient of determination.     

出口肉及制品中盐酸克伦特罗的ELISA检测方法的建立

介绍了酶联免疫吸附法测定出口肉及制品中的盐酸克伦特罗的方法。利用盐酸克伦特罗试剂盒对出口肉及制品中残留的盐酸克伦特罗用酶标仪进行测定分析,结果显示,盐酸克伦特罗的交叉反应为100%,猪肉罐头和牛肉中的检测限(LOD)为0.026(μg/kg)和0.028(μg/kg),样品的平均回收率在83.6%～91.3%之间,相对标准偏差为3.5%～5.6%,经HPLC确证假阳性率≤2.0%。表明酶联免疫分析定量法可快速、准确实现对食品中盐酸克伦特罗残留量的快速筛选。     

生物传感器在食品工业中的应用

本文在介绍生物传感器发展现状、组成及基本原理的基础上。重点论述了生物传感器在食品成分快速分析、食品中农药、抗生素和有毒物质分析、食品中有害微生物检测、食品新鲜度评价、食品感官评定以及食品生化过程自动控制中的应用。     

动物组织中盐酸克伦特罗(瘦肉精)的快速检测

本文对我国强制性农业行业标准(NY/T468-2001)“动物组织中盐酸克伦特罗的测定气相色谱-质谱法”的检测方法的样品预处理进行适当调整,然后再按标准方法对预处理过的样品进行乙酸铵抽提,净化、衍生,用GC-MS气相色谱-质谱联用仪分析定量。结果发现此方法不影响检测结果,而且可大大缩短检测时间。     

丝网印刷生物传感器在食品分析中的应用

丝网印刷生物传感器因其成本低,耗时短,微型化等优点,近年来在食品分析领域得到广泛应用。本文对丝网印刷电极的原理、制作过程进行了介绍,并综述了丝网印刷生物传感器在食品分析领域的研究进展,探讨了其在食品分析领域的应用前景。      

Quick detection technique for clenbuterol hydrochloride by using surface plasmon resonance biosensor

Clenbuterol hydrochloride (CLB) is a kind of lean meat powder which can increase the conversion rate of lean meat. Though it is allowed in human and veterinary medicine, CLB is harmful for human body and, therefore, is restricted to its use as a growth promoter. In this paper, a quick detection technique for clenbuterol hydrochloride is proposed. The technique, which is based on surface plasmon resonance (SPR) and immune reaction, includes two methods, the direct method and the suppression method. The direct method can be applied, to screen an antibody and in the study of the dynamic reaction. For the immune suppression method, the concentration of CLB is inversely proportional to the change of SPR angle. The detection limit of this method is smaller than 2 μg/L, and the pork extraction is detected. The concentration of CLB in the sample is 2.75 μg/L, and the concentration of antibody is 250 μg/L. The detection of CLB by SPR is quick, highly sensitive, and label free. And the utilized equipment is cheap, simple, environmental friendly, and easy to control. The proposed technique could achieve the real-time detection of a large number of samples and be widely used to detect CLB in all fields of food processing. Therefore, this method is expected to be used in the inspection process for foods in the supermarket, bazaar, and factory.