琯溪蜜柚疏果黄酮酶法辅助提取工艺优化及其抑制酪氨酸酶活性

本论文旨在探讨β-葡萄糖苷酶法辅助提取琯溪蜜柚疏果黄酮的工艺及提取得到的黄酮对酪氨酸酶抑制作用。以总黄酮提取量为指标,采用单因素实验及响应面试验对β-葡萄糖苷酶酶活力、酶解pH、温度及时间进行优化,并研究总黄酮提取物对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明,通过单因素实验和响应面试验优化得到琯溪蜜柚疏果黄酮提取的最优条件是：β-葡萄糖苷酶酶活力0.0128 U/mL、酶解pH4.4、酶解温度35℃、酶解时间4.8 h,在该工艺条件下疏果总黄酮提取量为34.0 mg/g;该黄酮提取物对酪氨酸酶的半抑制浓度(IC₅₀)为0.31 mg/mL。本研究结果说明酶法工艺可显著提高琯溪蜜柚疏果黄酮的提取量,且琯溪蜜柚疏果黄酮具有较强的酪氨酸酶抑制作用,研究结果为琯溪蜜柚疏果黄酮提取及应用提供了参考依据,有利于促进琯溪蜜柚的高值化利用。     

枸杞叶黄酮对胰脂肪酶活性的抑制作用

采用酶动力学法探讨枸杞叶黄酮对胰脂肪酶活性的抑制作用。采用紫外、荧光和红外光谱研究枸杞叶黄酮与胰脂肪酶相互作用的机理。结果表明:枸杞叶黄酮对胰脂肪酶活性有抑制作用,半抑制浓度(IC50)为(0.910±0.008) mg/mL,抑制类型为可逆非竞争抑制,抑制常数为6.04 mg/mL。紫外和荧光光谱显示:枸杞叶黄酮能使胰脂肪酶芳香氨基酸暴露,微环境和酶构象改变,内源荧光猝灭,猝灭类型为动态猝灭为主的混合型猝灭。热力学参数显示:枸杞叶黄酮与胰脂肪酶的相互作用力主要为疏水相互作用。红外光谱显示:枸杞叶黄酮对酶蛋白二级结构的影响,主要表现为复合物结构变得有序化,β-折叠向α-螺旋的转化。枸杞叶黄酮通过改变胰脂肪酶结构和微环境,进而抑制胰脂肪酶活性。     

铜藻多酚的提取工艺及其稳定性和抑制酪氨酸酶活性

对铜藻多酚提取工艺、稳定性及其对酪氨酸酶活性的抑制作用进行研究。以新鲜铜藻为原料提取铜藻多酚,以铜藻多酚提取率为指标,考察乙醇体积分数、提取时间、液料比对铜藻多酚提取率的影响,并根据Box-Behnken试验设计对铜藻多酚的提取条件进行优化,得到铜藻多酚的最佳提取条件：乙醇体积分数40%、超声时间53 min、液料比为60∶1(mL/g),在该条件下所制备的铜藻多酚具有较高的热和光照稳定性。以左旋酪氨酸和左旋多巴为底物,铜藻多酚浓度为700μg/mL时,对酪氨酸酶活性的抑制率分别为92.68%和39.18%。     

牛蒡根多酚和黄酮超高压提取工艺优化及体外抗氧化活性

对牛蒡根多酚与黄酮的超高压提取工艺和抗氧化活性进行研究。在单因素试验基础上,用Box-Behnken设计,采用三因素三水平的响应面分析方法优化牛蒡根多酚和黄酮提取工艺。依据数据的模型拟合和回归分析,确定乙醇体积分数和料液比是影响多酚和黄酮得率的重要因素,并最终获得超高压辅助提取牛蒡根多酚和黄酮的最佳工艺条件为：乙醇体积分数75%、料液比1∶28（g/mL）、压力236 MPa、保压时间9 min、室温提取,采取该工艺得到牛蒡根多酚得率为（107.83±1.148） mg/g,黄酮得率为（21.27±0.950） mg/g。体外抗氧化实验结果表明：牛蒡根多酚提取物具有较强的金属离子螯合能力（IC50值为（1.393±0.011） mg/mL）、DPPH自由基清除能力（IC50值为（0.309±0.007） mg/mL）和铁离子还原能力。     

胰脂肪酶特异性卵黄抗体对胰脂肪酶活性的抑制作用研究

肥胖对人类的健康构成了极大的危害,胰脂肪酶抑制剂由于可以有效地预防和治疗肥胖而受到了人们的广泛关注。本研究首次以胰脂肪酶为抗原制备了胰脂肪酶特异性卵黄抗体（L-Ig Y）,并分析了其对胰脂肪酶活性的抑制效果。结果表明,L-Ig Y可通过与胰脂肪酶的非竞争性结合发挥显著的酶活抑制作用（p<0.05）,计算得出其表观半抑制浓度（IC50）为168.62μg/m L。模拟胃液消化环境中10 min,L-Ig Y的活性几乎完全丧失,但是在模拟肠液中2 h,L-Ig Y的免疫活性仅下降了约20%,表明其有望作为一种潜在的胰脂肪酶抑制剂应用于肥胖的预防和治疗。      

沙棘黄酮对酪氨酸酶活力抑制作用的研究

研究沙棘黄酮对酪氨酸酶活性的抑制作用。实验测定了沙棘黄酮分别在温度、pH、时间、底物浓度、酶液加入量等因素条件下对酪氨酸酶活力的影响。结果显示,沙棘黄酮对酪氨酸酶活性的抑制率随着时间的延长,底物浓度的增加,酶量的增加而增强,而且在35℃及pH7.1时沙棘黄酮对酪氨酸酶活力的抑制作用最强可达到47.45%。说明沙棘黄酮对酪氨酸酶的活性具有较强的抑制作用。     

辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制研究

探讨辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用,为开发辣木叶天然胰脂肪酶抑制剂提供理论依据。在单因素试验的基础上,用正交试验优化提取条件,研究辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制作用,并结合Dixon图和LineweaverBurk图探讨其抑制类型。结果表明最佳提取条件为:料液比1∶50(g/mL)、提取液乙醇浓度70%、超声功率400 W、超声处理时间600 s、提取温度50℃;该条件下辣木叶粗提物对胰脂肪酶活力的抑制率为79.15%;辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用为非竞争性抑制。辣木叶提取物对胰脂肪酶的活性有明显抑制作用。     

文冠果壳黄酮提取物抑制酪氨酸酶活性的研究

为开发文冠果壳中黄酮的功能,实现文冠果壳废物利用.本试验分别采用水、70％的乙醇2种溶液浸提文冠果壳粉,确定最佳提取溶剂.通过测定酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率,研究了文冠果壳粉的乙醇提取液对体外酪氨酸酶活性的抑制作用.结果表明,文冠果黄酮对酪氨酸酶的抑制率与抑制剂浓度呈非线性变化,随着浓度的增加,黄酮提取液对酪氨酸酶活性的抑制率增加幅度呈下降趋势.当黄酮质量浓度为0.48 mg/mL时,抑制率最高可达45.1％.     

山药皮中黄酮、多酚提取工艺优化及其抗氧化活性

为研究山药皮黄酮、多酚的高效提取工艺及其粗提物的抗氧化能力,以山药皮为原料,采用正交法优化超声辅助乙醇提取山药皮中的黄酮、多酚工艺,并对粗提物进行抗氧化活性测定。结果表明：山药皮中黄酮、多酚提取工艺的最佳提取条件为超声时间30 min、乙醇浓度60%、液固比60∶1（mL/g）,在此条件下,黄酮得率为0.929%,多酚得率为0.519%。在一定浓度范围内,粗提物的抗氧化能力随着质量浓度的增加而增强,粗提物具有良好的羟自由基清除作用（IC50 值为0.083 mg/mL）,具有一定的DPPH 自由基清除作用（IC50 值为0.158 mg/mL）,当粗提物质量浓度为1.0 mg/mL 时,其羟自由基清除率、DPPH 自由基清除率、还原力和抗氧化能力分别为81.84%、79.95%、0.70 和0.68。     

紫苏叶黄酮、多酚提取工艺优化及不同品种抗氧化活性比较

紫苏(Perilla frutescens (L.) Britt.)是食药两用植物之一,本研究为比较不同品种紫苏叶(‘韩国绿色PF1’,‘中国PF2’,‘韩国紫色PF3’,‘韩国双色PF4’,‘中国双色PF5’)中黄酮和多酚提取量,并探讨其体外抗氧化活性,利用单因素实验和正交试验法优化紫苏叶黄酮和多酚提取工艺。结果表明：最佳工艺参数为乙醇浓度75%、料液比1:80 g/mL、提取时间2 h、提取温度70℃,此提取条件下,黄酮、多酚提取量最高,分别为(16.82±0.60)和(80.42±2.66) mg/g。不同品种紫苏叶中,PF3的多酚提取量最高(17.77±0.29) mg/g,PF5黄酮提取量最高(80.42±2.66) mg/g。抗氧化活性结果表明,不同品种紫苏叶均具有良好的抗氧化活性,其中PF5的ABTS⁺自由基清除率(IC50 150.31±2.46μg/mL)、DPPH自由基清除能力(IC50 88.04±3.61μg/mL)及总还原能力最强(P<0.05)。相关性分析表明,多酚提取量与ABTS⁺自由基清除率、总还原力呈显...     

酸木瓜总黄酮提取工艺的优化

以酸木瓜为原料,采用超声波乙醇辅助法对其果皮、果肉和籽中的总黄酮进行提取,探讨酸木瓜果皮、果肉和籽中总黄酮得率情况,选取总黄酮得率最高的部位进行正交试验,以得到酸木瓜中总黄酮最佳提取工艺条件。单因素试验结果表明:在酸木瓜果皮、果肉和籽中,随着乙醇体积分数的增大,总黄酮得率均逐渐增大,但当乙醇体积分数大于60%时总黄酮得率均下降;总黄酮得率随超声提取时间的增加先呈现上升趋势,当超声时间超过30min后总黄酮得率均下降;总黄酮得率均在料液比1∶25(g/mL)时达到最大;总黄酮得率均随超声功率的变化呈现先升后降的趋势,当超声功率达到198W时总黄酮得率最大。不同提取条件下酸木瓜果皮中的总黄酮得率明显高于果肉和籽,因此选择酸木瓜果皮进行正交试验。正交试验结果显示超声时间25min,超声功率231W,料液比1∶25(g/mL),乙醇体积分数60%是超声波乙醇辅助法提取酸木瓜果皮中总黄酮的最佳提取工艺条件,此条件下总黄酮得率为7.31%。     

马铃薯皮黄酮提取工艺优化及其抗氧化性研究

优化了马铃薯皮黄酮的微波辅助提取工艺并对其抗氧化活性进行了研究。在考察乙醇浓度、液固比、提取温度、微波功率、提取时间对马铃薯皮黄酮得率影响的基础上,进一步利用Box-Behnken响应面法对提取工艺进行优化。结果表明,马铃薯皮黄酮的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数70%,液固比20∶1mL/g,提取温度70℃,微波功率700 W,提取时间25 min,在此条件下马铃薯皮黄酮得率为(6.50±0.06)mg/g。通过测定马铃薯皮黄酮对DPPH·的清除率及对菜籽油过氧化值的影响研究其抗氧化活性。结果表明,马铃薯皮黄酮具有较好的DPPH·清除能力,IC_(50)值为(1.02±0.07)mg/mL;且其能较好地缓解菜籽油过氧化值的上升,当质量为油重的0.02%时,其作用效果已与相同浓度的VC相当。     

木瓜叶多酚的提取及抗氧化活性研究

以提取木瓜叶多酚并研究其抗氧化活性为目的。利用乙醇提取木瓜叶多酚,采用DPPH法、水杨酸法检测其对DPPH.和.OH的清除作用。结果表明,最佳提取条件为提取温度70℃、乙醇体积分数70%、提取时间2.5 h、料液比1∶15(m/V)。在该条件下木瓜叶多酚得率最高,达到18 mg/g。木瓜叶多酚清除DPPH.和.OH的半抑制质量浓度(EC50)分别为67μg/mL和0.44 mg/mL。结论为木瓜叶中含有丰富的多酚,并且其具有较强的抗氧化活性。     

板栗壳黄酮结构分析及其对胰脂肪酶活力的抑制作用

在分析板栗壳黄酮结构的基础上,研究其对胰脂肪酶的抑制作用及类型。采用醇提法提取板栗壳中的黄酮,并用AB-8大孔吸附树脂进行纯化,冻干后得到的黄酮含量为（107.50±1.00）mg/g,提取得率为（5.66±0.05）%。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱联用技术对板栗壳黄酮进行结构分析,鉴定出8 种黄酮类化合物。采用对硝基苯酚法测定胰脂肪酶活力,分别考察板栗壳黄酮对胰脂肪酶的抑制效果及不同反应条件下板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性的影响,结果表明,板栗壳黄酮对胰脂肪酶有较好的抑制作用,半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）为0.074 mg/mL,且使胰脂肪酶最适pH值向碱性偏移。通过Lineweaver-Burk双倒数作图法确定其抑制类型为非竞争性抑制,抑制常数Ki＝53.19 mg/mL。由此可见,板栗壳黄酮是一种效果良好的胰脂肪酶抑制剂。     

苹果果皮中类黄酮的超声波辅助提取及稳定性研究

应用超声波法提取苹果果皮中的类黄酮,得到类黄酮提取的最佳工艺条件,并对产品稳定性进行研究。结果表明:苹果果皮中类黄酮的最佳提取条件为温度60℃、乙醇体积分数60%、提取时间20min、料液比1:25(g/mL),此条件下提取率为27.56mg/g,超声波法提取苹果果皮中类黄酮重现性好,相对标准偏差0.55%;提取的类黄酮在pH6.0左右较稳定,温度超过40℃时稳定性较差,光照会使类黄酮稳定性降低;H2O2、Na2SO3和NaNO2使类黄酮吸光度明显下降,VC对类黄酮吸光度下降不明显。Mg2+、Ca2+使类黄酮提取液吸光度增大,Pb2+、Cu2+、Fe3+使其吸光度降低,Zn2+、Al3+、K+对其吸光度影响不大。苹果果皮类黄酮不耐高温、不耐酸碱,VC、Zn 2+、Al3+、K+对其稳定性的影响不明显,H 2O2、Na2SO 3、NaNO 2、Mg 2+、Ca2+、Pb 2+、Cu 2+、Fe3+对其稳定性影响明显。     

柑桔皮总黄酮提取工艺优化及其数学模型研究

为充分利用农业废弃物柑桔皮,本实验采用二次通用旋转组合设计研究了柑桔皮中总黄酮的超声波辅助提取工艺,并对建立的数学模型进行了规划求解及验证实验.结果表明:pH值对总黄酮得率有极显著影响,乙醇浓度、液料比以及时间同乙醇浓度之间的和时间同pH值之间的交互项对总黄酮得率有显著影响,其他因素对总黄酮得率无显著影响.经实验验证,当pH值为5.6、乙醇浓度为75%、液料比为26ml/g、超声时间为80 min时总黄酮得率最高,达3.314%±0.063% (n=3),与理论计算值3.348449%基本一致.回归模型可较好地预测柑桔皮中总黄酮的提取得率.     

赤霞珠葡萄梗黄酮、原花青素和多酚的提取工艺优化

研究赤霞珠葡萄梗中黄酮、原花青素和多酚的提取工艺。以葡萄梗中黄酮、原花青素和多酚含量的综合评分为评价指标,采用正交设计优化赤霞珠葡萄梗黄酮、原花青素和多酚超声辅助双水相提取的条件。结果表明:超声辅助双水相提取的最优工艺条件为:料液比为1:40(g/mL)、超声时间为50 min、乙醇质量分数为24%、硫酸铵质量分数为20%。在此提取条件下,放大8倍赤霞珠葡萄梗中黄酮、多酚和原花青素的含量分别为72.85、122.21、87.67 mg/g,相对标准偏差在3%以内,说明该工艺具有可行性。     

石榴皮中多酚的醇提取工艺优化

为确定最优的提取条件,以提高石榴多酚的得率,采用四因素二次回归正交旋转组合设计试验,研究了提取温度、提取时间、料液比和乙醇体积分数对石榴多酚得率的影响,建立了各因子与石榴多酚得率关系的数学回归模型;最后确定了最佳的提取条件为:提取温度为70℃,液料比25:1,提取时间1.5h,乙醇体积分数50%,石榴皮多酚得率为16.28%。     

雪莲果皮多酚提取工艺及其抗氧化、抑菌活性的研究

以雪莲果皮为试验材料,以多酚提取率为指标,在单因素试验的基础上,采用正交试验法对超声辅助提取雪莲果皮多酚工艺参数进行优化,通过扫描电镜分析不同提取方式对雪莲果皮粉末表面微观形态的影响和提取得率的关系,同时评价雪莲果皮多酚的抗氧化活性及抑菌活性。结果表明最佳提取条件为:料液比1:35(g/mL)、提取温度65 ℃、乙醇体积分数40%、提取时间55 min。在此优化条件下,雪莲果皮多酚的提取率为193.87 mg/g;扫描电镜分析显示物料的破碎程度为:超声波提取法>加热回流法>浸提法>原材料粉末;抗氧化试验结果表明雪莲果皮多酚3 mg/mL浓度下对DPPH·清除能力为70.23%,IC₅₀值为0.71 mg/mL;对ABTS⁺·清除能力为97.96%,IC₅₀值为0.68 mg/mL;5 mg/mL浓度下总抗氧化能力为46.28 μmol Trolox/mL;抑菌试验结果表明雪莲果多酚对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用,供试菌种的最小抑菌浓度(MIC)分别为2.5 mg/mL和0.625 mg/m...     

超声处理对石榴皮多酚提取效果的影响

石榴皮是一种易获得的、廉价的,但含有丰富多酚的废料。采用超声辅助提取法从石榴皮中提取多酚,优化工艺参数并利用高效液相色谱法(HPLC)测定石榴皮中多酚的成分和含量,同时研究了石榴皮表面在超声处理下的变化。研究结果表明,在超声条件下,用水作为溶剂有更高的多酚得率,比甲醇等有机溶剂提取效果更好。在优化条件,即液固比(mL∶g)为60∶1,超声功率为400 W和超声时间为25 min时,多酚的最佳得率为39.30 mg/g(以没食子酸为标准),高于传统溶剂提取法的得率(32.58 mg/g)。HPLC分析得到石榴皮多酚中安石榴苷含量最高,其次是石榴皮鞣素,并且超声处理能较大地强化提取效果。石榴皮表面显微观察证明,超声能够显著破坏石榴皮表面而影响植物组织完整性,使多酚更多地释放出来。