无冷冻防护剂保护时的心,肾组织快速冷冻研究

无冷冻防护剂保护时的心、肾组织快速冷冻研究＊＊本研究为国家自然基金资助项目内容之一，批准号：３９５７０３５４。杨勇骥郑尊邵晓良吴越夏愿耀夏金辉（第二军医大学生物物理教研室，上海２００４３３）超低温快速冷冻以极高的冷冻降温速率（理论上认为应大于１０００...     

一种简单的快速冷冻固定和冷冻置换制备生物样品的方法

一种简单的快速冷冻固定和冷冻置换制备生物样品的方法马淑芳，傅宏兰（北京大学生物系北京１００８７１）本文介绍一种简易的快速冷冻固定，冷冻置换制备生物样品的方法，简单易行，效果颇佳。与常规的化学固定方法制备的样品相比较，其组织的超微结构可以得到良好的固定...     

大鼠心肌组织的低温快速冷冻及冷冻置换研究

生物组织的快速冷冻及冷冻置换技术已被用于生物X射线能量色散谱分析的样品制备。快速冷冻能够较好地保持生物组织的结构形态,减少组织移位和组织内元素或离子的丢失、移位、重分布,使生物EDX定量微区分析结果更精确。本文主要探讨了心肌组织及一些细胞器在快速冷冻中的冷冻损伤机理,对心肌组织、细胞间隙、线粒体、细胞核和质膜的冷冻损伤作了较全面的探讨。     

肾组织的低温快速冷冻固定及冷冻置换研究

超低温快速冷冻固定以极高的冷冻速率对生物样品进行固定,可使生物组织结构、组织内可溶性离子及游离性物质得到保存,使被固定后的生物组织仍旧保持于最接近原自然状态。作者对肾组织的超低温快速冷冻固定及冷冻损伤进行了探讨。取雄性大鼠肾皮质用振动切片机切成150～200/μm厚的薄片,采用Reichert-Jung KF-80弹射式快速冷冻仪将切片快速插入经液氮冷冻至-175℃的冷冻剂F22中,再迅速转移到置换液丙酮中,并保持温度在-80℃(34小时);-60℃(48小时);-20℃(12小时)和-4℃(1小时),缓慢升至室温。常规包埋切片并观察。电镜下,从肾皮质表层到30μm深的范围内,组织超微结构保存良好,细胞核、核仁和微绒毛等结构清晰显     

用冷冻含水低温电子显微术研究脂质体结构

用冷冻含水低温电子显微术研究脂质体结构＊邢力＊李刚＠徐伟＊＃张兴＊（＊中国科学院北京电子显微镜实验室，＃中国科学院生物物理所，＠北京医科大学生物物理系）冷冻含水低温电子显微术是将生物样品经快速冷冻包埋在一很薄玻璃态冰中，随后在约１００Ｋ和低剂量的条件下用电...     

无冷冻防护剂保护的大鼠心肌组织超低温快速冷冻研究

作者采用无冷冻防护剂保护的超低温快速冷冻法，对心肌组织进行固定，得到了保存极佳的组织结构形态，可溶性离子如何，磷等也得到很好的保存，并与采用冷冻防护剂保护的心肌组织快速冷冻效果作了比较及探讨。     

冷冻治疗慢性肥厚性鼻炎的扫描电镜观察

冷冻治疗慢性肥厚性鼻炎的扫描电镜观察刘慧民李秀芬张亚坤（黑龙江省林业总医院，哈尔滨１５００４０）（黑龙江省电力医院病理科）（哈医大电镜室）利用液氮冷冻治疗慢性肥厚性鼻炎已日益受到国内外专家的重视。Ｏｓｅｎｂｅｒｇｅｒ［１，２］和Ｈｏｌｄｅｎ［３］曾报...     

高压冷冻及冷冻替代技术在不同生物样品超微结构中的应用

高压冷冻仪在固定样品时,高压和冷冻基本是同步发生的,使得生物样品在数毫秒的时间内被瞬时固定,保证其内部结构接近于生理状态,有效减少了化学固定法中的化学试剂对细胞结构的破坏,极大程度保存了细胞在近似自然状态下的超微结构.本文分别采用化学固定法(CF)和高压冷冻固定法(HPF)对小鼠的睾丸组织、Hela细胞和酵母进行了样品...     

冷冻电镜含水切片技术观察胰岛β细胞的三维超微结构

冷冻电镜含水切片技术(CEMOVIS)作为冷冻厚生物样品制备技术，对高压冷冻的样品直接进行冷冻切片，能够获得完全含水状态的生物样品的超微结构，更好地反映出细胞接近其生理条件的真实状态。本文应用冷冻含水切片技术结合冷冻电子断层扫描和三维重构技术观察到了小鼠胰岛β细胞内细胞器的高分辨超微结构。     

高压冷冻技术及其在植物细胞超微结构中的应用

冷冻固定技术可以将生物组织和细胞内所有结构和成分同时固定。因此避免了因化学渗透固定而引起的各种假象。通常,在常压下冷冻技术仅能使生物样品表面１０～３０μｍ厚度得以充分固定,而高压冷冻技术则能使样品有效固定厚度增加至６００μｍ。尽管植物组织细胞具有特殊的结构－厚壁和含大量水分的液泡,使冷冻固定较为困难,但利用高冷冻技术仍能使２００μｍ厚度的样品得到充分固定,而且能够捕获近似自然状态的细胞超微结构。本     

进行性肌营养不良症的冷冻蚀刻电镜观察

进行性肌营养不良症的冷冻蚀刻电镜观察吴翊钦，梁平，钟秀容，慕容慎行，姚宜卿，王柠（福建医学院电镜室，福州３５０００４）（福建医学院附属一院）Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症（ＤＭＤ）是一组由遗传因素所致的肌肉变性疾病。近年来人们对ＤＭＤ的病因学、生化酶...     

微波辐射后大鼠肺的冷冻蚀刻观察

微波辐射后大鼠肺的冷冻蚀刻观察＊＊本课题受８６３－４１０及军队九五指令课题资助张文军可金星索玉兰谢燕张广斌宁竹之（第三军医大学中心实验室，重庆６３００３８）（第三军医大学劳卫教研室，重庆６３００３８）高能微波辐射能引起小鼠腺垂体、睾丸、肾上腺皮质［１...     

应用高压冷冻-冷冻置换技术研究受Potyvirus侵染的寄主细胞超微结构

应用高压冷冻-冷冻置换技术（HPF-FS）制备了马铃薯Y病毒属的小西葫芦黄花叶病毒（ZYMV）和大豆花叶病毒（SMV）侵染寄主植物叶细胞的超薄切片样品,并与传统化学固定方法进行比较。透射电镜观察结果显示：病毒粒子和内含体的形态分布在两种方法处理的样品中无明显差异,但高压冷冻样品的细胞超微结构精细,细胞壁与细胞质之间边界清晰,质膜平滑而完整,细胞基质丰富;细胞核和叶绿体、线粒体等形态饱满,高尔基体潴泡结构及分泌小泡清晰,在ZYMV感染细胞的叶绿体中观察到囊泡结构。而化学处理的样品普遍存在细胞结构的收缩和变形,特别是质膜褶皱,与细胞壁分离,叶绿体呈梭形,片层结构发生改变,高尔基体潴泡结构及分泌小泡相当少见。实验结果有利于正确区别病毒所引起的细胞病理变化和化学处理而产生的人工假象。     

高压冷冻-冷冻替代技术在神经组织超微结构中的应用

采用高压冷冻-冷冻替代技术对小鼠和线虫这两种模式生物的神经组织进行了样品制备、超薄切片和电镜观察,并在取材方式上进行了摸索,旨在比较化学固定法(CF)、高压冷冻固定法(HPF)和化学-高压冷冻联合固定法(CF+ HPF)三种不同方式对神经组织超微结构的影响,促进高压冷冻-冷冻替代技术在神经生物学中的应用.透射电镜观察结果显示:与传统的化学固定相比,高压冷冻固定对神经组织样品具有较好的优势,能够减少化学处理所产生的人工假象;另一方面,对于不同动物的神经组织而言,所适用的固定方式也不相同,鼠脑适用于活检枪(biopsy gun)取样后直接进行HPF固定,所得结构比较完整,神经组织微观结构清晰.而在高压冷冻之前选用CF进行预固定,能加大样品结构保存的完整性,但在膜的细腻程度上不如直接进行高压冷冻制样的结果.线虫样品由于存在较厚的体壁保护,它更适于直接进行HPF处理,从而缩短了固定前的滞留时间,可有效保留腹部神经元超微结构.     

正常人周围神经冷冻复超微结构观察

本研究利用冷冻复型电镜技术对５例正常人周围神经进行了观察：（１）有髓 同心圆形式包裹轴索，后者位于中央呈圆柱样。（２）雪旺细胞核膜劈裂面不论ＰＦ面还是ＥＦ面膜蛋白颗粒（ＩＭＰ）均较丰富，核孔数量较多，说明核细胞代谢功能较旺盛；另外其胞膜表面ＩＭＰ呈簇状分布，推断在正常情况下该区域物质代谢较活跃或雪旺细胞具有分泌功能；再者，髓鞘板层与一般生物膜不同，其劈裂面不论是ＰＦ面还是ＥＦ面均罕见ＩＭＰ，推测此     

高压冷冻及冷冻替代样品制备方法在体扫描电镜中的应用

高压冷冻及冷冻替代技术是一种利用高压和低温对含水组织样品进行瞬间冷冻固定和低温脱水的电镜样品制备技术,它因可以保存更加真实的细胞超微结构而常应用于透射电镜观察和分析。本文利用模式动物小鼠为材料,将这种技术应用于体扫描电镜的样品制备,并与常规化学固定的样品制备进行比较。结果显示在小鼠心肌组织中,高压冷冻及冷冻替代技术可以有效避免常规制备样品中的细胞器膜结构皱缩、细胞质分布不均匀、细胞核膜收缩形成锯齿状、甚至局部断裂等现象,使细胞超微结构更接近其生活时的状态。     

液氮冷冻治疗常年性鼻炎疗效的电镜观察

液氮冷冻治疗常年性鼻炎疗效的电镜观察朱平，刘慧民，毕彦忠，吴振铎（哈尔滨医科大学电镜室，哈尔滨医科大学病理科，黑龙江省林业总医院）常年性鼻炎包括常年变应性鼻炎和常年非变应性鼻炎，是耳鼻喉科常见病、多发病。对其治疗方法很多，除对主要病因治疗外，尚无一种...     

Duchenne型肌营养不良红细胞冷冻断裂电镜观察

应用冷冻断裂电镜技术，对５例Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症（ＤＭＤ的血液标本（ＤＭＤ组）和３例正常标本（对照组）红细胞质膜的蛋白颗粒进行观察。结果表明，对照组和ＤＭＤ组的ＥＦ面膜蛋白颗粒比ＰＦ面少；ＤＭＤ组怀对照组比较，其ＥＦ面和ＰＦ面的膜蛋颗粒均明显减少，并具有显著的统计学意义。     

改良二甲基亚砜冷冻割断法的效果观察

二甲基亚砜冷冻割断技术是一种制作扫描电子显微镜样品，可观察组织细胞内部结构的方法。是利用一种特殊的自制液氮冷冻割断装置，把二甲基亚砜溶液滴成珠状，将固定好的样品放人液珠中，由于液氮的冷冻作用，使二甲基亚砜很快包裹着样品由液态变为固态，用器具将冰珠快速割断，以暴露出样品断面。     

急速冷冻冷冻置换方法保存的肾小球毛细血管袢的超微结构

目的：用急速冷冻－冷冻置换法与普通的9化学固定技术研究比较肾小球毛细血管袢在相同灌流压条件下的超微结构。方法：用150cmH2O压力灌流活体状态下大白鼠的肾脏,用急速冷冻－冷冻置换法及普通的化学固定法制作电镜超薄切片。结果：在相同的压力下用急速冷冻－冷冻置换法所观察到的肾小球毛细血管袢上皮细胞足突裂孔膜的宽度比普通的固定方法所观察到的窄,另外用急速冷冻－冷冻置换方法观察到的肾小球毛细血管袢的其它超微结构也与普通的化学固定方法所观察到的有所不同。结论：用急速冷冻－冷冻置换法所[观察到的超微结构比用普通的化学固定法观察到的超微结构更接近活体状态。