人参稀有皂苷C-K的分离与纯化

研究了硅胶柱层析法对酶反应产物 皂苷C K粗品进行的分离纯化。当流动相V(氯仿)∶V(甲醇)=9∶1时分离效果最好,可以得到纯度较高的产品。用核磁共振法对产品进行分析,确认产品为人参稀有皂苷C K,即20 O (β D 葡萄糖基) 达玛 24烯,3β,12β,20(S) 三醇。经高效液相色谱进行纯度检测,分离得到的人参皂苷C K的纯度为95%以上,纯品得率为33%,理论得率为60%以上。     

转化人参二醇类皂苷为C-K的特异人参皂苷糖苷酶的纯化及性质

研究了真菌sp.g848p发酵产生的把人参二醇类皂苷PPD转化为人参皂苷C-K的特异的人参皂苷糖苷酶,及该酶的分离提纯。该酶经DEAE-Cellulose离子交换柱分离、聚丙烯酰胺凝胶电泳提纯,得到纯酶,其酶的分子质量约为74 ku。这种特异的人参皂苷糖苷酶能水解人参二醇类皂PPD生成稀有人参皂苷C-K,该酶最适反应时间为24 h,最适反应温度为45℃,最适pH为5.0。     

转化人参二醇类皂苷为C-K的特异人参皂苷糖苷酶的纯化及性质

研究了真菌sp.g848p发酵产生的把人参二醇类皂苷PPD转化为人参皂苷C-K的特异的人参皂苷糖苷酶,及该酶的分离提纯。该酶经DEAE-Cellulose离子交换柱分离、聚丙烯酰胺凝胶电泳提纯,得到纯酶,其酶的分子质量约为74 ku。这种特异的人参皂苷糖苷酶能水解人参二醇类皂PPD生成稀有人参皂苷C-K,该酶最适反应时间为24 h,最适反应温度为45℃,最适pH为5.0。     

人参二醇类皂苷转化成C-K细菌的研究

为了得到把人参二醇类皂苷转化为C-K的特种人参皂苷糖苷酶,采用TLC、HPLC等酶活力检测方法对Arthrobacter sp.3,Rhodopseudomonas sp.18菌进行了菌种筛选.结果表明,该菌大豆汁培养基中25 ℃发酵主要产生将人参二醇类皂苷转化成Rg3的酶;35 ℃发酵主要产将人参二醇类皂苷转化成F2和C-K的酶.3号菌产酶发酵时间短,一般为2～4 d;18号菌发酵时间长,一般为4～8 d.     

人参二醇类皂苷转化成C-K细菌的研究

为了得到把人参二醇类皂苷转化为C-K的特种人参皂苷糖苷酶,采用TLC、HPLC等酶活力检测方法对Arthrobactersp.3,Rhodopseudomonassp.18菌进行了菌种筛选。结果表明,该菌大豆汁培养基中25℃发酵主要产生将人参二醇类皂苷转化成Rg3的酶;35℃发酵主要产将人参二醇类皂苷转化成F2和C-K的酶。3号菌产酶发酵时间短,一般为2~4 d;18号菌发酵时间长,一般为4~8 d。     

洗脱剂极性对硅胶柱分离人参皂苷C-K的影响

酶转化后的人参皂苷C-K含有杂质及其他少量皂苷,因此要得到纯度较高的人参皂苷C-K,要对其进行除杂与分离。以酶转化人参皂苷C-K为原料,采用石油醚除杂,除杂后利用硅胶柱层析进行分离得到人参皂苷C-K,并研究了洗脱剂极性对硅胶柱分离人参皂苷C-K的影响。石油醚除杂率为15%。采用3种不同极性洗脱剂分别对30 g人参皂苷C-K进行分离比较,发现V(氯仿)∶V(甲醇)=9.5∶0.5作为洗脱剂时,得到人参皂苷C-K 11.25 g,得率为37.5%,分离效果较好;V(氯仿)∶V(甲醇)=9.0∶1.0作为洗脱剂时,仅得到人参皂苷C-K 3.02 g,得率为10.07%,分离效果较差;采用V(氯仿)∶V(甲醇)=(9.5∶0.5)+[V(氯仿)∶V(甲醇)=(9.0∶1.0)]联合作为洗脱剂时,得到人参皂苷C-K 6.40 g,得率为21.33%,分离效果一般。V(氯仿)∶V(甲醇)=9.5∶0.5洗脱得到的产物经高效液相色谱检测,发现稀有人参皂苷C-K的纯度可达98%以上。     

白头翁皂苷酶解产物的分离纯化

白头翁皂苷酶解产物经硅胶柱梯度洗脱分离纯化。通过白头翁皂苷酶解产物的第28碳糖基水解反应、TLC和HPLC实验确定：酶解产物Ⅰ为白头翁皂苷Ⅳ，即3-O-α-L-阿拉伯糖-3β，23-二烃基-△^20(29)-羽扇豆烯-28-酸，其得率为4．08％；酶解产物Ⅱ为白头翁皂苷Ⅴ，即3-O-α-L-阿拉伯糖-3β，23-二烃基-△^20(29)-羽扇豆烯-28-O-糖基酯苷，其得率为44％；没有反应的底物为白头翁皂苷Ⅲ，即3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)-α-L-阿拉伯糖基]-3β，23-二烃基-△^20(29)-羽扇豆烯-28-O-[α-L-鼠李糖基(1→4)-β-D-葡萄糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖酯苷，其得率为0．5％，酶解产物Ⅲ结构有待进-步测定。HPLC(高效液相色谱)检测结果显示所得纯品纯度可达95％以上。     

人参茎叶中人参皂苷的提取、分离纯化及其药理作用的研究进展

人参茎叶为五加科植物人参的干燥茎叶,主要活性成分为人参皂苷,具有补气,生津,解暑,抗疲劳等功效.本文对人参茎叶中人参皂苷的提取方法、分离纯化和药理作用进行了综述,为研究人参茎叶皂苷的提取及应用提供了一定的理论依据.     

人参皂苷酶Ⅲ型转化人参皂苷Rc制备稀有皂苷C-Mc

利用基因构建克隆的E.coli C41菌产人参皂苷酶Ⅲ型,研究了酶转化人参皂苷Rc制备高活性稀有皂苷C-Mc的方法。结果发现,人参皂苷酶Ⅲ型先水解人参皂苷Rc的3-O-末端葡萄糖基生成C-Mc1,再水解C-Mc1的3-O-葡萄糖基生成C-Mc。人参皂苷酶Ⅲ型水解4.8g的人参皂苷Rc,得到2.8g产物,经HPLC检测,其纯度为90%。经核磁共振检测,产物结构为20-O-α-L-阿拉伯呋喃糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖基-20(S)-二醇苷元,即C-Mc。     

三七中人参皂苷Rh1的分离与纯化

为了得到纯净的、具有较高生理和药理活性的单体人参皂苷Rh1,从三七中提取总皂苷,并对三七总皂苷进行分离纯化获得人参皂苷Rh1单体.分别经过乙醇浸提、石油醚脱脂、水饱和正丁醇萃取、大孔吸附树脂脱糖脱色及硅胶层析,从三七总皂苷中分离得到人参皂苷Rh1.结果表明,1 000 g三七干燥根经醇提、脱脂、萃取和脱糖脱色可制得三七...     

人参皂甙组分的分离方法

人参的主要活性成分人参皂甙有人参二醇类皂甙、人参三醇类皂甙和齐墩果酸皂甙３种，其中药物活性较高的微量皂甙Ｒｇ３可由人参二醇类皂甙转化而来。为得到人参二醇类皂甙，用硅胶柱法成功地从人参总皂甙中分离出三醇类皂甙、二醇类皂甙和齐墩果酸皂甙。３种洗脱剂对二醇类皂甙（含齐墩果酸）的收率为２３．５％、３５．３％和２５．６％。混合二醇类皂甙经水解再硅胶柱分离的方法可得到混合皂甙质量的３０％Ｒｇ３，使制取大量的Ｒ     

人参皂甙Rg3的分离提纯

研究了人参皂甙Rh2生产过程中所生成的副产品Rg3的分离提纯。用硅胶柱层析法从人参皂甙混合物中分离出单体Rg3的得率为样品的 16 %。再用化学法对Rg3进行拆分。 2 0 (S) 和2 0 (R) Rg3异构体 ,通过乙酰化反应生成极性相差较大的异构体 ,经硅胶柱层析得到两种产物 ,分别脱乙酰化后得到 2 0 (S) Rg3和 2 0 (R) Rg3。 2 0 (R) Rg3收率为 5 5 %。     

人参皂甙Rg3的分离提纯

研究了人参皂甙Rh2生产过程中所生成的副产品Rg3的分离提纯。用硅胶柱层析法从人参皂甙混合中分离出单体Rg3的得率为样品的16%。再用化学法对Rg3进行拆分。20（S）-和20（R）-Rg3异构体，通过乙酰化反应生成极性相差较大的异构体，经硅胶柱层析得到两种产物，分别脱乙酰化后得到20（S）-Rg3和20（R）-Rg3。20（R）-Rg3收率为55%。     

黄酮类活性成分的分离提纯

研究了酶转化芦丁产物异槲皮甙的分离提纯。酶反应产物用硅胶柱层析法提取,可以得到高纯度的异槲皮甙。通过高效液相色谱检测纯度,结果表明异槲皮甙转化率为70%,纯度为90%以上。通过核磁共振测定,确定此酶反应产物是异槲皮甙。     

黄酮类活性成分的分离提纯

研究了酶转化芦丁产物异槲皮甙的分离提纯。酶反应产物用硅胶柱层析法提取，可以得到高纯度的异槲皮甙。通过高效液相色谱检测纯度，结果表明异槲皮甙转化率为70％，纯度为90％以上。通过核磁共振测定，确定此酶反应产物是异槲皮甙。     

绞股蓝总皂苷中单体皂苷的分离纯化

采用硅胶柱层析法分离绞股蓝总皂苷,以氯仿-甲醇混合液为流动相进行梯度洗脱,薄层层析法跟踪检测.5 000 g绞股蓝干草经乙醇提、石油醚脱脂、正丁醇萃取、AB-8大孔吸附树脂脱糖、D-296阴离子交换树脂脱色后得到总皂苷7.87 g.5 g绞股蓝总皂苷进行硅胶柱层析分离,在体积比为9.5:0.5和9:1的氯仿-甲醇洗脱液...     

地龙抗炎有效部位的分离筛选

报道了在生物活性试验指导下对地龙抗炎有效部位的分离纯化方法的实验研究。采用70%乙醇粗提取、大孔树脂吸附、硅胶柱层析依次对地龙分离,大孔树脂采用流动相V(乙醇)∶V(水)=6∶4时,硅胶柱层析当流动相V(氯仿)∶V(甲醇)=9∶1时,可得到较为纯净的地龙抗炎有效部位。根据红外光谱测定的结果,初步认定该有效部位属于具有苯环结构的化合物。其具体结构的鉴定有待于进一步研究。     

地龙抗炎有效部位的分离筛选

报道了在生物活性试验指导下对地龙抗炎有效部位的分离纯化方法的实验研究。采用70％乙醇粗提取、大孔树脂吸附、硅胶柱层析依次对地龙分离，大孔树脂采用流动相V(乙醇)：V，(水)=6：4时，硅胶柱层析当流动相V(氯仿)：V(甲醇)=9：1时，可得到较为纯净的地龙抗炎有效部位。根据红外光谱测定的结果，初步认定该有效部位属于具有苯环结构的化合物。其具体结构的鉴定有待于进一步研究。     

人参皂甙Rh2产品质量检验及含量测定方法

研究了酶转化法生产人参皂甙Rh2产品一般质量检验 ,确定了符合药典规定的产品质量标准。建立了高效液相色谱法测定人参皂甙Rh2含量的方法。通过对高效液相色谱系统适用性实验、稳定性实验、精密度实验、重现性实验、回收率实验的讨论 ,可以确定一个准确的色谱条件用来测定人参皂甙Rh2的含量。其测定条件为流动相甲醇∶乙腈∶水为 8∶8∶1,流速 1mL/min ,紫外检测波长2 0 3nm ,色谱柱ThemoHypersilODS2 (2 5 0mm× 4 .5mm ,5 μm) ,回收率≥ 99.74 % ,平均标准偏差(RSD) <1.83% ,达到了药典规定。在该色谱条件下 ,人参皂甙Rh2的保留时间 8～ 10min。在流动相比例 (甲醇∶乙腈∶水 )改变 ,其他条件不变的情况下测定了人参皂甙Rh2的R型和S型的含量比例为 6∶4 ,R型保留时间为 17min左右 ,S型保留时间为 16min左右 ,R型在S型后面出峰。